水体DNA提取试剂盒
基因组DNA提取试剂盒 说明书
基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒，，使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容，，若有任何疑问若有任何疑问，，欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司（（4006618810*************）进行咨询进行咨询，，您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站（（ ）了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。
一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠，用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。
我们根据磁珠的独特分离作用，提供了一个极其简便的操作程序：样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。
在最适的试剂及操作条件下，可获得高质量DNA。
该方法具有简便、快捷、高效等特点，整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。
品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇（DTT ） 10管，0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件：：本试剂盒所有试剂（除DTT 外）均可以室温保存,应避免阳光直射。
当室温低于15℃时，裂解液中可能有结晶析出，38℃水浴加热几分钟，恢复澄清后即可使用，提取效率不受影响。
DTT 需要于冰箱4℃保存。
本试剂盒有效期为12个月， 请于有效期内使用。
安全信息：试剂中含刺激性化合物，操作时应小心，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。
细菌基因组 DNA 提取试剂盒说明书
细菌基因组DNA 提取试剂盒说明书货号：D1600规格：50T/100T保存：室温(15℃-25℃)干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。
试剂盒内容：D1600-50T D1600-100TRNase A1m11m1×2蛋白酶K1ml 1m1×2溶液A10ml 20ml 溶液B10ml 20ml 漂洗液15m115ml×2洗脱液10m120m1吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介：本试剂盒采用可以特异性结合DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取细菌基因组DNA 。
离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效专一吸附DNA ，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
提取的基因组DNA 片段大，纯度高，质量稳定可靠。
使用本试剂盒提取的基因组DNA 可用于各种常规操作，包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。
操作步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。
所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、取细菌培养液1ml ，12000rpm 离心1min.，尽量吸除上清。
2、向菌体中加入200ul 溶液A ，振荡或用移液器吹打使菌体充分悬浮向悬浮液中加入20ul 的RNase A (10mg/ml)，充分颠倒混匀，室温放置15-30min 。
注意：如果是革兰氏阳性菌：可在第2步操作前用200ul 终浓度为20mg/ml 的溶菌酶，37℃处理30min 以上。
（溶菌酶的缓冲液用：20mM Tris,pH 8.0；2mM Na2-EDTA ；1.2%Triton X-100）3、向管中加入20ul 的蛋白酶K(10mg/ml)，充分混匀，55℃消化30-60min ，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止，此时可见菌液呈清亮粘稠状。
4、向管中加入200ul 溶液B ，充分颠倒混匀，如出现白色沉淀，可于75℃放置15-30min ，沉淀即会消失，不影响后续实验。
DNA提取、琼脂糖电泳试剂及配制方法
DNA提取所需试剂及配制方法1. TE（pH8.0）buffer（灭菌）10×TE Buffer 组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA（pH 7.4，7.6，8.0）配制量1L配制方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
1M Tris-HCl buffer 组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）配制量1L配制方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2. 10% （w/v）SDS溶液（灭菌）10％（W/V）SDS 组份浓度10％（W/V）SDS配制量100mL配制方法1.称量10g高纯度的SDS置于100～200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水，68℃加热溶解。
2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。
3. 将溶液定容至100mL后，室温保存。
3. Tris-饱和酚（pH8.0）溶液Tris- HCl平衡苯酚1. 使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。
但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。
同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。
一种水环境eDNA提取方法的建立
一种水环境eDNA提取方法的建立水环境DNA（environmental DNA，简称eDNA）提取方法是指从水样中提取出的DNA物质，通过分析这些DNA物质可以了解水体中的生物多样性、物种分布等信息。
由于水环境DNA提取方法的建立具有重要的科学研究和环境监测应用价值，下面将介绍一种水环境eDNA提取方法的建立。
我们需要收集水样。
在进行水环境eDNA提取前，需要选择合适的水样收集地点和时间。
一般来说，选择有生物多样性的水域作为样品收集点，例如湖泊、河流等。
还需要考虑到水样收集器具的清洁与干净，避免外来污染对样品的影响。
进行水样预处理。
在eDNA提取前，需要对水样进行预处理，以去除水样中的杂质和有机物。
常见的预处理方法包括过滤法和离心法。
过滤法是指将水样通过0.22微米或0.45微米的滤膜进行过滤，将水样中的悬浮微粒去除，保留DNA物质。
离心法是指将水样进行离心，去除颗粒物等杂质，保留上清液用于后续的DNA提取。
接下来，进行DNA提取。
针对水环境eDNA提取，可以采用多种方法，如化学提取法、磁珠法等。
化学提取法是最常用的一种方法。
其具体步骤如下：1. 取适量的水样上清液，加入DNA提取试剂盒中的提取液，混合均匀。
2. 经过一系列洗涤、酶解和沉淀等步骤，将DNA从水样中提取出来。
3. 通过离心或磁珠分离等方法，将提取的DNA分离出来。
4. 将提取到的DNA进行判读和保存，用于后续的分析和测序。
进行提取效果验证。
为了验证所建立的eDNA提取方法是否可靠和有效，需要进行提取效果的验证。
可以通过PCR扩增和测序等方法，检验所提取到的DNA是否具有目标基因序列，或者利用实时荧光定量PCR等方法，测定DNA的浓度和纯度。
建立一种水环境eDNA提取方法包括水样收集、预处理、DNA提取和提取效果验证等步骤。
依据此方法提取出的eDNA样本可以用于水体生物多样性、物种分布等方面的研究和监测，对于保护水环境和生物资源具有重要的意义。
dna提取试剂盒原理
dna提取试剂盒原理
DNA提取试剂盒的原理是利用化学方法和物理方法将细胞膜破坏、细胞蛋白质降解、DNA与其他细胞组分分离，从而获得纯净的DNA样品。
具体步骤如下：
1. 细胞破碎：将待提取DNA的样品加入溶解缓冲液中，通过机械破碎、超声处理或酶解等方法使细胞膜完全破裂，释放细胞内的DNA。
2. 蛋白质降解：加入蛋白酶K等蛋白酶，将细胞内的蛋白质降解为小分子物质，以便后续去除。
3. DNA与蛋白质的分离：加入乙酸酚-氯仿等有机试剂，通过离心将DNA和蛋白质、碎细胞残渣等分为两相，DNA富集于上层而蛋白质和细胞残渣富集于下层。
4. DNA析出：将上层液体转移至新离心管中，加入同等体积的冷乙醇或异丙醇，DNA会在其中沉淀出来。
5. DNA洗涤：用70%的乙醇洗涤DNA沉淀，以去除残留的盐类和杂质。
6. DNA溶解：用脱离蛋白质结构的缓冲液溶解DNA沉淀，得到所需的DNA提取物。
DNA提取试剂盒通过上述原理，能够高效、快速地提取出高
质量的DNA样品，适用于分子生物学、基因组学、遗传学、犯罪学等领域的研究和应用。
试剂盒DNA提取详细操作步骤
一、试剂盒打开后需要准备的工作1、ProteinaseK（蛋白酶K）的溶解①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管，每管100u l〜200ul③将分装好的ProteinaseK放入-20°C冰箱中保存，使用期限为12个月2、组织抑制剂（InhibitorRemovalbfer）的调配加入20ml无水乙醇（absoluteethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩3、洗液（washbuffer）的调配加入80ml无水乙醇（absoluteethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩二、组织DNA提取（试剂盒）1、组织样品处理与消化①将采集来的样品剪碎（WO.lcm）洗净保存液。
②加入组织破解液Tissue-lysis200ul蛋白酶K40ul然后放入55C水浴锅内3个小时使其充分消化。
2、DNA提取①在消化好的组织样品中加入结合液bindingbuffer200ul然后放入70°水浴锅中10分钟。
②再加异丙醇lOOul混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g—分钟。
③倒掉底液，加500ul组织抑制剂InhibitorRemoval然后离心倒掉底液④加洗液washingbuffer500ul离心（洗液加两次）⑤在70C预热ElutionBuffer，然后将洗好的柱体下部分丢掉，换新的离心管加入ElutionBuffer200ul溶解10分钟离心保留底液放-20C保存。
三、细胞DNA的提取（试剂盒）1、组织样品处理与消化①将带有培养基的样品用PBS清洗干净8000rpm/1min离心，倒掉上清②加PBS200ul振荡摇匀使之样品成为单个细胞的悬浊液③加200ulBindingBuffer，40ul蛋白酶K混合均匀放入70C水浴锅内消化10分钟。
2、DNA提取①加异丙醇lOOul混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g—分钟。
dna提取试剂盒原理
dna提取试剂盒原理DNA提取试剂盒是一种用于从生物样本中提取DNA的化学试剂盒，其原理是利用试剂盒中的各种试剂和材料，通过一系列化学反应和物理处理，将DNA从细胞中分离出来，从而实现DNA的提取和纯化。
首先，DNA提取试剂盒中通常包含有裂解液，用于破坏细胞膜和核膜，释放细胞内的DNA。
裂解液中的成分通常包括离子性洗涤剂和蛋白酶，能够有效地破坏细胞膜和核膜，使DNA得以释放。
接着，试剂盒中还包含有沉淀剂，用于沉淀DNA。
沉淀剂通常是乙醇或异丙醇，能够与DNA形成复合物，使DNA沉淀到溶液底部。
此外，试剂盒中还包含有洗涤缓冲液，用于去除沉淀物和其他杂质，最终得到纯净的DNA。
在实际操作中，使用DNA提取试剂盒进行DNA提取通常需要按照以下步骤进行，首先，将待提取的生物样本加入裂解液中，使细胞裂解并释放DNA。
接着，加入沉淀剂，使DNA沉淀到溶液底部。
然后，将上清液倒出，加入洗涤缓冲液进行洗涤，最终得到纯净的DNA。
DNA提取试剂盒的原理简单而有效，能够快速、高效地从各种生物样本中提取DNA。
它广泛应用于分子生物学、遗传学、法医学等领域，为科研和临床诊断提供了便利。
同时，随着技术的不断进步，现代的DNA提取试剂盒已经具有了更高的纯度和更快的操作速度，为科研工作者和临床医生提供了更好的工具和支持。
总的来说，DNA提取试剂盒的原理是基于化学和物理的方法，通过一系列的步骤将DNA从生物样本中提取出来。
它的应用范围广泛，操作简便，是现代生物学研究和临床诊断中不可或缺的工具之一。
随着科学技术的不断发展，相信DNA提取试剂盒会在未来发挥更加重要的作用，为人类健康和科学研究做出更大的贡献。
海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN37适用于快速提取各种海洋动物组织基因组DNA 试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次（DN3701）100次（DN3702）200次（DN3703）裂解液SL 室温11 ml 20 ml 40 ml 结合液CB 室温11 ml 20 ml 40 ml 抑制物去除液IR 室温25 ml 50 ml 100 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温15 ml 15 ml 15ml×2蛋白酶K粉（可选）20mg/ml-20℃20mg 2×20mg 4×20mg吸附柱AC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.为避免降低活性、方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1ml灭菌水溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。
也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。
用水洗脱DNA应该保存在－20℃。
DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
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Introduction
The E.Z.N.A.® Water DNA Kit allows rapid and reliable isolation of high- quality DNA from various micro organisms in water samples. The system combines the reversible nucleic acid-binding properties of HiBind® matrix with the speed and versatility of spin column technology to eliminate PCR inhibiting compounds from water sample. Purified DNA is suitable for PCR, restriction digestion, and hybridization techniques. There are no organic extractions thus reducing plastic waste and hands-on time to allow multiple samples to be processed in parallel.
Place the empty column back into the collection tube and spin at maximum speed ($14,000 x g) for 2 minutes to dry the column. Note: This step is critical to remove any trace of ethanol residue from DNA wash Buffer that might interfere downstream enzymatic applications.
Kit Contents
Product Number Purification times HiBind
®
D5525-00 5 Preps 5 10 2.7 g 1 mL 18 mL 6 mL 5 mL 5 mL 2 mL 1
D5525-01 50 Preps 50 100 27 g 10 mL 180 mL 60 mL 40 mL 30 mL 20 mL 1
D5525-02 200 Preps 200 400 120 g 40 mL 3 x 220 mL 220 mL 180 mL 100 mL 2 × 50 mL 1
DNA Columns
2 mL Collection Tubes Glass Beads HTR Reagent Buffer SLX
19.
E.Z.N.A.® Water DNA Kit Protocol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 Troubleshooting Guide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
Elution Buffer DNA Wash Buffer Instruction Booklet
21. 22.
Materials to be provided by user
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Microcentrifuge capable of at least 14,000 x g table top centrifuge capable of 4000 x g. adapter for 50 ml centrifuge tube. Nuclease-free 1.5 mL or 2 mL microfuge tubes Nuclease-free 50 ml centrifuge tube capable of 4000 x g. Water bath equilibrated to 65oC Absolute (96%-100%) ethanol RNase A stock solution at 25 mg/mL
No ethanol added to the lysate before loading to the column DNA wash Buffer prepared with lower percentage ethanol
Overview
If using the E.Z.N.A.® Water DNA Kit for the first time, please read this booklet to become familiar with the procedure. Water sample is first filtered using microporous filter. The filter is then put into a tube contains beads and buffer to homogenize and lysis the sample. Humic acid, proteins, polysaccharides, and other contaminants are subsequently precipitated after a heat-frozen step. Contaminants are further removed by a special HTR reagent treatment. Binding conditions are then adjusted and the sample is applied to an HiBind® DNA spin-column. Two rapid wash steps remove trace contaminants and pure DNA is eluted in water or low ionic strength buffer. Purified DNA can be directly used in downstream applications without the need for further purification.
Clogging column
If the above suggestions fail to resolve any problems you are having with the E.Z.N.A.® Water DNA Kit, please feel free to fax our technical specialists at: US customers: 800-832-8896 or 770-931-8400 All other customers: (770) 931-0230 Or direct your questions via E-mail to info@.
SP2 Buffer XP1 Buffer
20.
Place the HiBind® DNA column into a new 1.5 ml centrifuge tube. Apply 50-100:l of DNA Elution Buffer to the center of the membrane in the column. Incubate at 65°C for 3 minutes. Centrifuge at maximum speed for 1 minute to elute DNA. Store the elute DNA sample at -20°C.
Troubleshooting Guide
Problem A260/230 ratio is low Cause inefficient elimination of inhibitory compounds Suggestions Repeat the DNA isolation with a new sample, be sure to mix the sample with HTR Buffer throughly. Repeat the DNA isolation with a new sample. prepare DNA Wash Buffer with 96-100% ethanol Be sure to treat the sample with RNase A in step 9. Sample should be store at 4°C or -20°C Repeat the DNA isolation with a new sample, be sure to mix the sample throughly. Repeat the DNA isolation with a new sample Dilute Wash Buffer Concentrate by adding appropriate volume of absolute ethanol prior to use (page 3). Diluted the DNA elute used in the downstream application if possible. Use hot-start Taq polymerase mixture Check the A260/230 ration Diluted the elute to 1:50 if necessary
Ethanol residue in the elute Little or no supernatant after initial centrifuge step sample can not pass through the column Insufficient centrifugal force
Revised February 2008
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18.
பைடு நூலகம்