烟草遗传标记研究进展
烟草遗传转化实验报告

烟草遗传转化实验报告实验目的烟草是遗传转化的模式植物,已经建立了一套完善的转化再生体系。本实验以烟草为实验材料,了解根癌农杆菌介导法的基本原理和一般步骤, 掌握遗传转化的基本操作技术。实验要求:掌握根癌农杆菌侵染植物获取转基因材料的方法;理解农杆菌介导途径进行基因转化的机理:了解转基因植物筛选的方法。实验原理:根癌农杆菌是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌,根癌农杆菌中诱导植物产生肿瘤的质粒,简称为Ti质粒。野生型农杆菌的Ti质粒,含有两个与致瘤有关的区域: 一个是T-DNA区,含致瘤基因;另一个是毒性区,在T-DNA的切割、转移与整合过程中起作用。用于植物基因转化的农杆菌Ti质粒载体系统的构建,是将野生Ti质粒中的致瘤基因删除,并在T-DNA区域内插入适当的选择标记和多克隆位点。p BI121载体是常用的植物表达载体,载体的骨架是pUC18,以CaMV3SS启动子驱动的新霉素磷酸转移酶基因NPTII为卡那霉素(kan) 抗性选择标记基因,含有卡那霉素抗性基因作为筛选基因。β一葡萄糖苷酶gus基因作为报告基因,转化的获得的转基因细胞、组织或植株,具有抗卡那霉素的特性,经组织化学染色呈蓝色。实验器材摇床、超净工作台、小型离心机、冰箱、移液抢、镊子、手术刀、酒精灯、棉球、培养皿、三角瓶、滤纸、牛皮纸、牙签。实验材料植物材料:烟草无菌苗农杆菌与载体:农杆菌LBA4404 p BI121 YEB培养基:牛肉膏(5 g/L)、蛋白胨(5 g/L)、酵母提取物(1 g/L)、蔗糖(5 g/L)、MgSO4(0.5g/L)、pH 7.0烟草分化培养基: MS + 2mg/L 6-BA + 0.5mg/L IAA烟草生根培养基: MS + 0.5mg/L IAA卡那霉素(Kan) 母液: 50mg/ml, 过滤除菌,分装,-20°C保存。头孢霉素(cef) 母液: 300mg/ml, 过滤除菌,分装,-20"C 保存。利福平(rif): 50mg/ml,过滤除菌,分装,-20"C保存。。
农杆菌介导的烟草高效遗传转化体系研究

转化技术体系, 为分子生物学和植物基因工程的研 究提供较好的技术基础。
1 材料与方法 1. 1 实验材料 1. 1. 1 植物 材料 四 倍 体烟 草 ( Nicotiana tabacum ) 品系 NT12 的无 菌 试 管 苗, 以 MS 为 基 本 培 养 基[ 3] , 附加 3% 蔗糖, pH 5. 8, 于 24 e 、自然光下培
平均阳性 植株数 ( 株/ 块)
阳性植株 频率 ( %)
1. 5 cm @ 1. 5 cm
23
7
30. 4
1. 0 cm @ 1. 0 cm
20
11
55. 0
0. 5 cm @ 0. 5 cm
4
2
50. 0
2. 2 预培养对转化率的影响 实验结果表明, 无论是经过 3 d 预培养的烟草
叶盘, 还是 未经预培养而直接 侵染的叶盘, 都约在 1421 d 后从表面创伤处及边缘出现芽点, 并逐渐长 大成为有几片幼叶的小芽。二者的分化时间、再生 芽的频率没有明显差异。所以, 为了缩短转化时间, 烟草叶盘转化可省去预培养。 2. 3 侵染时间对转化率的影响
图 2 部分转基因植株 PCR 检测结果 M: DNAmarker,K- EcoT 14I digest( TakaRa) ;
烟草种质资源利用进展与展望

烟草种质资源利用进展与展望作者:刘国军来源:《现代园艺》2012年第24期摘要:烟草种质资源不仅是我国烟草事业发展的潜力,还是我国烟草事业发展的战略基础所在。
烟草遗传育种事业的物质基础为烟草种质资源,笔者从烟草种质资源的简要、征集贮藏保存、性状鉴定与评价、遗传多样性的研究、创新及应用等方面阐述了烟草种质资源研究情况,也对烟草种质资源从加强烟草资源研究提高育种效率、加强繁种更新技术与理论的更深层研究和加强烟草种质资源研究的条件设施建设方面进行了展望。
关键词:烟草;种质资源;研究进展烟草种质资源研究是培育烟草新品种基本保障条件,是我国烟草业健康发展的战略性物资。
我国烟草种质资源工作经历50 多年的努力,在烟草种质资源的收集、保存、整理、研究和利用等方面均取得显著成绩。
烟草种质资源是生物学研究的重要资料,也是人们用于发展农业和选育新品种的基本条件,更是我国烟草事业健康发展的物质基础[1]。
一般从所得的种质资源的质量、数量和对性状表现、遗传规律及生理生化研究的广度和深度[2],看作物育种成效如何。
1 烟草种质资源的简要烟草起源于南美,属于茄科烟属,双子叶植物纲,管花目。
当前已证实存在的烟属植物有66多种,分布范围很广泛,从北纬60°到南纬45°都有烟草的分布,亚洲占世界栽培面积的2/3,中国占世界栽培面积的1/3,西南地区占世界栽培面积的1/6[3]。
这66个种中,只有黄花烟草和普通烟草2个,是异源四倍体物种,并且也是野生烟草经历了长期自然进化产生。
2 烟草种质资源研究情况2.1 烟草种质资源的征集、贮藏保存建国以来,进行了3次烟草资源征集工作,并且取到了许多资源从而进行了编目,数据库因此也建立了。
烟草种质资源研究的第一步就是征集和贮藏保存,其工作的重点是对征集的烟草种质资源进行有效的评价与鉴定[4]。
当前我国拥有的已经达到4042份,世界烟草种质资源征集、保存量最多的国家,按种性与类型分为:黄花烟341份,烤烟1384份,香料烟85份,雪茄烟53份,晒烟2020份,白肋烟124份,野生烟35份[5]。
烟草抗青枯病育种研究进展

烟草抗青枯病育种研究进展
刘勇;范江;李永平
【期刊名称】《中国烟草学报》
【年(卷),期】2012(018)006
【摘要】概述了国内外抗青枯病烟草种质抗性遗传特性和抗性相关分子标记研究、分析了我国种质资源的抗性鉴定结果、比较了中国和美国抗青枯病品种的抗性以及亲本.TI448A是国内外少数抗青枯病种质资源之一,其抗性由多对加性基因控制,美
国烤烟品种的青枯病抗性大多来源于TI448A.烟草青枯病抗性容易受环境影响,且
与TI448A抗性相关的分子标记缺乏.因此,鉴定抗病种质和抗病育种,需要建立稳定可靠的抗性鉴定方法、进行多年多点的抗性鉴定.开发分子标记尤其需要采用永久
性遗传群体.提出了抗青枯病育种存在的问题,并讨论了解决办法.
【总页数】7页(P93-99)
【作者】刘勇;范江;李永平
【作者单位】云南省烟草农业科学研究院,玉溪653100;云南省烟草农业科学研究院,玉溪653100;云南省烟草农业科学研究院,玉溪653100
【正文语种】中文
【中图分类】S572.034
【相关文献】
1.番茄抗青枯病筛选方法及其在抗青枯病育种中的应用 [J], 王荣青;杨悦俭;周国治;阮美颖;姚祝平;叶青静
2.广东花生抗青枯病育种研究进展 [J], 黎穗临
3.抗青枯内生细菌的筛选及其对烟草青枯病的防治效果 [J], 姜乾坤;彭阁;王瑞;谭军;邸慧慧;向必坤;赵秀云;彭五星;董善余
4.我国花生抗青枯病育种研究进展 [J], 宋江春; 李拴柱; 王建玉; 张秀阁; 李峰
5.马铃薯抗青枯病育种研究进展 [J], 肖熙鸥;林文秋;陈卓;金辉;司怀军
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烟草基因组计划进展篇:3.烟草分子标记遗传连锁图构建和重要抗病基因定位

内外相关单位 , 开展 了烟草分子标记开发、 遗传连锁 图构建和抗病基因定位等研究工作 , 取得 了重要进展 。
1 构建 了第一张烤烟 S S R标记遗传连锁 图
个F 2 单株进行 S S R标记分析 ,经遗传作图,构建出含 8 4 3 个标记 、由 l 2 个连锁群组成的野生烟草遗传 图
谱 ,覆 盖全基 因组 长度 为 1 4 3 4 . 6 8 c M J 。
3 精 确 定 位 了抗 黑 胫 病 基 因 P h
以感 黑胫 病 品种红 花大 金元 、 抗 黑胫 病种 质 R BS T和 F 1 为材料 , 从 1 0 0 0 5对 烟草 S S R引 物筛选 出 6 0 3 对 多态 性引 物 ,经 B C1( 红花 大金 元/ R BS T / /  ̄花 大金元 )群体 2 1 3个单 株 的 S S R标 记分 析 ,获得 6 0 1 个
l 1 8
中国烟草科学
C h i n e s e T o b a c c 基 因组 计 划 进展 篇 :
3 . 烟草分子标记遗传连锁 图构建和重要抗病基 因定位
肖炳 光
( 云南 省烟草农业科学研究 院,昆 明 6 5 0 0 3 1 )
子标记遗传连锁图 , 覆盖全基 因组长度 为 2 6 0 2 . 6 6 c M。为确保黑胫病抗性鉴定 的准确性和可靠性 , 取B C 1
各单株叶片进行组织培养 , 利用株系抗性鉴定结果代替单株抗性鉴定结果。结合分子标记分析和抗性鉴定
数据 ,将抗黑胫病基因 P h 定位在标记 P T 5 2 6 3 4和 P T 5 2 8 0 0 之间约 l O . 6 6 c M 范围内【 9 】 。 在上述定位的基础上 ,将引物 P T 5 2 6 3 4和 P T 5 2 8 0 0的 P C R扩增产物在中国烟草基 因组数据库中进行 比对 ,利用相应 S c a f o l d的基 因组序列数据新开发了 1 0 3 对S S R引物。从中筛选 出 1 0 对多态性引物 ,经 2 1 3 个B C 1 单株的基因型分型分析 ,鉴定出与 目 标基因连锁最紧密的两侧各 2 个S S R标记 ,再进行 2 4 6 3 个B C 1 单株 的基 因型分型分析。结合 2 4 6 3 个B C 1 单株基因型数据和 1 2 7 3 个B C 1 单株抗性鉴定数据,将 抗 黑胫病基因 P h 精确定位在标记 T M1 0 4 0 1 和P T 5 2 6 3 4问的 0 . 1 9 1 c M 范围内 ,为定位克隆和分子标记辅
烟草亚细胞定位

烟草亚细胞定位亚细胞定位是现代生物学研究的重要领域之一。
它通过对细胞内各种分子的运动和分布进行观察和分析,揭示了细胞内分子交互作用的复杂性和多样性。
烟草作为一种常见的植物,也是亚细胞定位研究的重要对象之一。
本文将从烟草亚细胞结构、亚细胞定位技术以及烟草亚细胞定位的研究进展等方面进行探讨。
一、烟草亚细胞结构烟草细胞是一种典型的植物细胞,由细胞质、细胞核、质膜、细胞壁、线粒体、叶绿体、高尔基体、内质网、核糖体和微管等多个不同的结构组成。
其中,细胞核是细胞的重要组成部分,包含着遗传信息和调控机制。
质膜是细胞的外层结构,维持着细胞内外环境的稳定。
细胞壁是细胞的支撑结构,保护细胞不受外界环境的侵害。
线粒体是细胞内能量的主要来源,参与细胞的呼吸作用。
叶绿体是植物细胞的特征性结构,参与光合作用。
高尔基体和内质网是细胞内蛋白质合成和转运的重要场所。
核糖体是细胞内蛋白质合成的基本单位。
微管是细胞内的一种细胞骨架,参与细胞的形态维持和运动。
二、亚细胞定位技术亚细胞定位技术是研究细胞内分子运动和分布的重要手段。
目前常用的亚细胞定位技术主要包括荧光显微镜技术、电子显微镜技术、蛋白质标记技术和基因工程技术等。
其中,荧光显微镜技术是最常用的亚细胞定位技术之一。
它利用荧光染料或荧光蛋白对细胞内分子进行标记,通过荧光显微镜观察细胞内分子的运动和分布。
电子显微镜技术则可以观察到更高分辨率的细胞结构和分子分布。
蛋白质标记技术和基因工程技术则可以对分子进行精确的定位和操作,提高亚细胞定位的精度和可靠性。
三、烟草亚细胞定位研究进展烟草作为一种常见的植物,其亚细胞定位研究也有着广泛的应用和深入的研究。
近年来,烟草亚细胞定位研究主要集中在以下几个方面:1.烟草亚细胞蛋白质定位烟草中有大量的蛋白质参与细胞的生长和发育过程。
通过荧光蛋白标记技术和基因工程技术,可以对这些蛋白质进行定位和操作。
研究表明,烟草细胞质内的微管蛋白可以定位在微管上,参与细胞的形态维持和运动。
23份烟草种质遗传多样性的SSR和ISSR标记分析
tr n yiso e ht 3tbcogr pam r o re ol edvddit2gop H n ha anuna dNC2)a d2idp net e a s hw dta2 ac em l sucscudb iie no ru s( ogu dj ya n 8 al s o s e i n ne ed n t e C k r4 y 8( oe17,V l6o 10 .SR adIS re n yiC eue eecdvrt n yio bcogr l m rsucs p al r 4 ) S n Rm& r a s a b sdi gnt i s ya a s foac empa eore. G S k al sn n i ei l s t s
异 , D A水平 遗传 变 异 的直 接 反映 , 有 不受 生 是 N 具 育期 、 境 和基 因表 达 与否 的 限制 ,遍 及 整 个 基 因 环
作 简单 等 优 点 , 许 多作 物 研 究 中广 泛 使 用 在
21年 2 01 4卷 1期
Vo. 4 12 No 1 .
西
南
农
业
a fAn u r ce c s o twe t hn o r lo nc hua S in e n l
文 章 编 号 :0 1 4 2 ( 0 1 0 —0 1 0 10 — 8 9 2 1 ) 1 0 5— 5
NE Qog . e—in2 I in uU R nx g a ( . oac eerh C ne .G i o nvri ,G i o uyn 50 5 hn ;2 G i o e aoao fT bco Q at 1 T bcoR sac etr uz u U iesy uz u G iag5 02 ,C i h t h a . uz u K y Lbrtr o o ac uly h y i G i o uyn 5 0 5, hn ) uz uG i g50 2 C ia h a
利用基因组简约法开发烟草SNP标记及遗传作图
De v e l o pm e nt a nd Ge ne t i c M a ppi ng o f SNP M a r ke r s vi a Ge no me Com pl e x i t y
Lo ng . J i a ng Y u n n a n A c a d e my o f T o b a c c o Ag r i c u l t u r a l S c i e n c e s , Ku n mi n g 6 5 0 0 2 1 , C h i n a ; D e p a r t me n t o f Ag r o n o my , Z h e j i a n g Un i v e r s i t y , Ha n g z h o u 3 1 0 0 5 8
肖炳 光 , 邱 杰 曹培健 。 桂 毅 杰 卢秀萍 李 永平 樊龙 江 2
云南省 烟草农业 科学 研究 院,云南 昆明 6 5 0 0 2 1 ; 浙 江大学农 学 系, 浙 江杭州 3 1 0 0 5 8 ; 国家烟 草基 因研究 中心,河南郑 州 4 5 0 0 0 1
E — ma i l : x b z w @c h i n a j o u r n a 1 . n e t . c a
DoI :1 0 . 3 7 2 4 / S P . J . 1 0 0 6 . 2 01 4 . 0 0 3 9 7
利用基 因组简 约法开发烟草 S NP标记及 遗传作 图
Re duc t i o n i n To ba c c o
XI AO Bi n g . G u a n g ' ,QI U J i e ,C AO P e i — J i a n ,GUI Y i — J i e ,L U Xi u . P i n g ,L I Y o n g P i n g ,a n d F AN
遗传标记的应用和研究进展
遗传标记的应用和研究进展遗传标记(genetic markers)是在遗传研究中使用的一种重要工具,通过观察基因型或表型上的特定变异,可以帮助研究人员确定个体间的遗传关系、表达水平以及基因功能等方面的信息。
遗传标记的应用和研究进展为我们提供了一种深入了解基因遗传和形态特征形成的方式,并且对基因组学、进化生物学、人类疾病等领域的研究起到了重要的推动作用。
在基因组学研究中,遗传标记的应用主要包括基因定位、连锁群体分析和基因型鉴定等方面。
基因定位指的是确定一些基因在染色体上的位置,这对于研究基因与性状的关联、乃至筛选相关基因具有重要意义。
连锁群体分析则是通过观察各个遗传标记与性状之间的连锁关系,从而推断出基因座与性状间的关联性。
基因型鉴定是通过检测个体的基因型,确定其是否携带一些特定基因或突变。
这种标记应用主要是为了研究性状或疾病的遗传及诊断。
随着技术的发展和研究的深入,遗传标记的研究也取得了许多进展。
例如,最早使用的限制性片段长度多态性(RFLP)能够通过检测基因座上的DNA片段长度变异来鉴定基因型,但其繁琐的实验操作和较低的多态性限制了其在大规模研究中的应用。
随后,引入PCR技术,以及PCR-RFLP和SSR(Simple Sequence Repeat)等标记的使用,使得遗传标记的检测更加高效快捷。
近年来,单核苷酸多态性(SNP)成为了最常用的遗传标记,其具有高度多态性、稳定性和广泛分布等特点,为研究提供了更多的可能。
遗传标记的研究进展还涉及到了多个不同领域的研究。
在进化生物学领域,遗传标记的分析可以帮助研究人员推断不同物种之间的遗传关系,揭示物种演化的历史和进程。
例如,通过对DNA序列的比对和分析,可以构建物种间的系统发育树,推断物种之间的亲缘关系。
在人类遗传学中,遗传标记的应用能够帮助研究人员解决一些遗传性疾病的发病机制和遗传模式,为基因治疗和个体化医疗提供理论基础。
此外,遗传标记的研究也与农业、畜牧业、林业等领域紧密相关,可以用于品种鉴定、选育和遗传改良。
SSR和ISSR标记技术应用进展_蒋彩虹
中国烟草科学 2007,28(2):1-5 1 SSR和ISSR标记技术应用进展蒋彩虹,王元英*,孙玉合(中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101)摘要:介绍了SSR和ISSR标记的原理和特点,综述了这两种技术在种质遗传多样性、基因定位及分子标记辅助育种、遗传图构建及种子纯度和真伪鉴定等研究中的应用进展,并提出了在烟草遗传育种中应用的建议。
关键词:SSR;ISSR;分子标记;烟草中图分类号:S572.035 文献标识码:A 文章编号:1007-5119(2007)02-0001-05 Application Advance of Molecular Marker Techniques of SSR and ISSRJIANG Caihong, WANG Yuanying*, SUN Yuhe(Tobacco Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Qingdao 266101, China)Abstract:The principle and characteristics of the molecular marker techniques of SSR and ISSR were described. The advances in their application to various genetic and breeding studies, including genetic diversity analyses, fingering maps and purity control of cultivars, gene localization, and marker-assisted selection were reviewed. The potential application in tobacco was suggested. Keywords:SSR; ISSR; molecular marker; tobaccoDNA分子标记是DNA水平上的遗传多态性的直接反映,是继形态学标记、细胞学标记及生化标记之后,近年来广泛应用的一种新的遗传标记。
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在植物 分 类学 上 , 草 ( ct n a a u 属 茄 烟 Ni i atb c m) oa 科 ( oa a ee 烟 草属 ( ct n 。 草属 植物 大多 S ln ca ) Ni i a) 烟 oa 数 是 草本 , 少数 是 灌 木或 呈 乔木 状 , 年 生或 多 年 生 。 一 目前 已发 现 6 6个烟 属植 物种 , 中红花 烟 草和 黄 花烟 其 草 等 一些 有经 济价 值 的种 为人 们广 为栽培 [ 。我 国种 1 ] 植 的 烟 草大 部 分是 国外 引进 品种 , 种速 度落 后 于 其 育 它 作物 L 。 2 笔者 认为 , 草 的育 种一方 面 应结合 植 株 的 ] 烟
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CROP RESEARCH
烟草 遗 传 标记 研 究进 展
徐双 红 吴成 林 戴 林建。 钟 , , 一, 军。孙焕 良。潘 , , 著
( 南 中 烟 工 业有 限责 任公 司 , 沙 4 0 0 ; 1湖 长 1 07 2湖 南 农 业 大 学 农 学 院 , 长沙 4 0 2 ) 1 1 8 摘 要 : 传 标 记 主要 包 括 形 态 学 标 记 、 遗 细胞 学 标记 、 物 化 学 标 记 和 分 子 标 记 。 别 对这 4种 遗 传 标 记技 术 在烟 草 _ 生 分 l 卜的应
( i a To a c n n I d s r lCo p r t n, a g h Hu a 1 0 7 Ch n 1 Ch n b c o Hu a n u ti r o a i Ch n s a, n n 4 0 0 , i a; a o 2 C l g fAg o o o l e o r n my, n n Ag iu t r l e Hu a rc lu a i e s t Un v r iy。C a g h Hu a 1 1 8. i a h n s a. n n 4 0 2 Ch n ) Ab ta t s r c :Ge e i ma k r i l o t i o r f r n t r e s man y c n a n f u o ms:mo p o o ia r e s y o o ia r e s,b o h mia r e s c r h l g c lma k r ,c t l g c lma k r ic e c l ma k r a d mo e u a r e s I h s p p r t e a p ia i n f t e e f u e e i ma k r n o a c r u n l c l r ma k r . n t i a e h p l t s o h s o r g n t r e s i t b c o we e s mma ie . l c o c rz d F l e p e e t p o l ms a d s g e t n n t b c o g n t r e s t g i g we e p i t d o t Th a g n u d p o ie t e r s n r b e n u g s i s o o a c e e i ma k r a g n r on e u . o c e t g i g wo l r v d h mo te f c i e me h d n a sf rt e s u is o o a c r m h s e t fv r t d n i c to s fe t t o sa d me n o h t d e n t b c o f o t e a p c s o a i y i e t ia in.g n t e a k s i v e f e ei rltm hp c
关键词 : 烟草 ; 遗传标记 ; 态学标记 ; 形 细胞学 标记 ; 生物化学标 记; 子标记 分 中图分类号 : 52 0 2 ¥ 7 . 3 文献标识码 :A D :0 3 6 /. s . 0 15 8 . 0 1 0 . 6 OI1 . 9 9ii n 10 —2 0 2 1 .3 2 s 文章 编号 :1 0—2 0 2 1 ) 30 7 —5 0 15 8 (0 10 —2 20
i e t ia i n,c n t u to fg n tcl k g p,ma k ra ss a tb e d n . d nict f o o s r c i n o e e i i a e ma n r e s it n r e i g
Ke r s:To a c y wo d b c o;Ge e i ma k r ;M o p o o ia r e s n t res c r h l g c l ma k r ;Cy o o ia r e s t lg c lma k mia r e s lc l r ma k r res
Ad an es O e i a k v c n Gen tc M r erTag n n To c o gi g i ba c
X h a gh n WU C e gl 。DA i—a 。 Z ON u 。S N H a —a 。P N Z u U S u n —o g , h n — n , I nj n’ H G J n , U u n l n , A h i L i , i
用进 展进行 了综述 , 并对 当前烟草领域遗传标 记研究存 在的问题及对策进行 r分 析和 探讨。遗 传标 将 为烟 草晶种 鉴定 、
亲 缘 关 系 、 锁 图谱 构建 、 子标 记 辅 助 育 种 等 方 面 的 研 究 提 供 有 效 的 方 法 和 手 段 , 着广 阔的 前 景 。 连 分 有