血清载脂蛋白A1APOA1测定
大鼠载脂蛋白 A1(Apo-A1)酶联免疫分析试剂盒 说明书
大鼠载脂蛋白A1（Apo-A1）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：1.56μg/ml-100μg/ml最低检测限：0.39μg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠Apo-A1，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中Apo-A1含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述载脂蛋白A1（apo A1）是血浆高密度脂蛋白（HDL）中的主要多肽。
apo A1基因的结构和功能令人感兴趣是因为在HDL水平和冠心病间显示的负相关性。
267个氨基酸的前体最初经过细胞内与翻译同时进行的蛋白水解酶的切割成为前apoA-I。
前apoA-I从细胞中分泌，在胸导管淋巴中以apoA-I1亚型被分离。
apo A1存在于血浆，经历翻译后蛋白酶水解加工成熟为血浆apoA-I。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗Apo-A1抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗Apo-A1抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Apo-A1呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
2_型糖尿病患者实验室血清ApoA1
DOI：10.16658/ki.1672-4062.2023.06.0502型糖尿病患者实验室血清ApoA1/B、Hcy、脂蛋白a检验对微血管并发症的临床评估价值分析邹红霞山东省威海市中心医院检验科，山东威海264400[摘要]目的分析实验室载脂蛋白A1/载脂蛋白B比值（Apolipoprotein A1/Apolipoprotein B，ApoA1/B）、同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）、脂蛋白a［Lipoprotein（a），Lp（a）］检验对2型糖尿病患者微血管并发症的临床评估价值及风险相关性。
方法将2020年3月—2022年9月在山东省威海市中心医院复诊的2型糖尿病患者87例纳为研究对象，行临床对比研究，以患者微血管并发症检出情况分组，无微血管并发症组64例，合并微血管并发症者23例。
患者入院后均接受实验室ApoA1/B、Hcy、脂蛋白a检验。
比较实验室ApoA1/B、Hcy、脂蛋白a差异；分析血清ApoA1/B、Hcy、脂蛋白a与微血管并发症风险的相关性。
结果糖尿病患者BMI、病程，血Hcy及Lp（a）与微血管并发症发病风险呈正相关性，血ApoA1/B与微血管并发症发病风险呈负相关性（P< 0.05）。
结论实验室血清ApoA1/B、Hcy、脂蛋白a检验对2型糖尿病患者微血管并发症风险具备确切指向评估价值，且可通过指标数据水平变化对患者微血管病变进展予以基础评估，可结合患者病程、BMI完善患者微血管并发症风险评估作用。
[关键词] 2型糖尿病；ApoA1/B；Hcy；脂蛋白a；微血管并发症[中图分类号] R587.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（2023）03（b）-0050-04Clinical Evaluation of Laboratory Serum ApoA1/B, Hcy and Lipoprotein a for Microvascular Complications in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus ZOU HongxiaDepartment of Clinical Laboratory, Weihai Central Hospital of Shandong Province, Weihai, Shandong Province, 264400 China[Abstract] Objective To analyze the clinical evaluation value and risk correlation of laboratory apolipoprotein A1/ Apolipoprotein B ratio (ApoA1/B), homocysteine(Hcy) and lipoprotein a tests for microvascular complications in type 2 diabetes patients. Methods A total of 87 patients with type 2 diabetes revisited in Weihai Central Hospital of Shan⁃dong Province from March 2020 to September 2022 were included as the study subjects. A comparative clinical study was conducted. The patients were grouped according to the detection of microvascular complications, including 64 pa⁃tients without microvascular complications and 23 patients with microvascular complications. All patients underwent laboratory ApoA1/B, Hcy and lipoprotein a tests after admission. The differences of ApoA1/B, Hcy and lipoprotein a in the laboratory were compared. The correlation of serum ApoA1/B, Hcy and lipoprotein a with the risk of microvascu⁃lar complications was analyzed. Results Blood Hcy and Lp (a) were positively correlated with the risk of microvascular complications in diabetic patients, while ApoA1/B was negatively correlated with the risk of microvascular complica⁃tions (P<0.05). Conclusion Laboratory serum tests of ApoA1/B, Hcy, and lipoprotein a have definite pointing value in [作者简介]邹红霞（1972-），女，硕士，主任技师，研究方向为免疫和分子生物学。
载脂蛋白A1APOA1免疫透射比浊法作业指导书
载脂蛋白A1APOA1免疫透射比浊法作业指导书1、前言试验名称：载脂蛋白A1测定，英文名称：APOA1，方法：免疫透射比浊法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB450全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的APOA1浓度，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中APOA1的浓度。
载脂蛋白A1是一个抗动脉粥样硬化的指标，它与冠心病的危险因素负相关。
本实验在临床上常和载脂蛋白B、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三酯等同时测定，用于对受检者脂代谢状态和动脉粥样硬化发病风险的评价。
2、测定原理本方法基于样品中的人APOA1与特异抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm波长处测出该不溶性复合物的浊度，通过标准品建立的一个吸光度对APOA1的标准曲线测定出样品中的APOA1的浓度。
3、试剂试剂生产商：上海科华公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：3*35ml注册号：沪食药监械（准）字2011第2400011号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1聚乙二醇≤4%Tris/HCL缓冲液15mmol/l试剂2抗人APOA1抗体106mmol/l储存条件和有效期：试剂储存于2―8℃，开启和未开启试剂均可稳定致试剂盒标注的有效期。
注意：试剂用过后应加盖保存。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品。
用1ml蒸馏水复溶，放置30分钟后使用。
5、质控品：生产商：英国Randox公司。
剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。
保存条件：未溶解时2―8℃稳定至有效期，复溶后2―8℃稳定一周。
6、、样品要求：样品采集前病人宜清淡饮食，禁酒至少三天以上，空腹用肝素锂抗凝管或促凝管常规方法肘静脉采血，血标本4000转离心3分钟，分离血清或血浆样品，室温可稳定1周，2－8℃可稳定4周。
-20℃冷冻标本可稳定两个月。
血清脂蛋白a、载脂蛋白A1、B及血小板参数在冠心病患者中的检测价值观察
检测价值。方法：根据冠脉造影结果将我院收治的 98 例冠心病患者分为单支病变组（47 例）与多支病变组（51 例），另外选取
同期在我院进行健康体检的 52 例健康人群作为对照组。比较血清 Lp-a、ApoA1、ApoB 及血小板参数[血小板计数（PLT）、血
小板平均体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW） ]在各组中的变化情况，分析其血清水平与冠脉狭窄程度的相关性。结果：
黑龙江医学 第 45 卷 2021 年 第 11 期 HEILONGJIANG MEDICAL JOURNAL Vol.45 No.11 Jun.2021
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MPV、PDW） 在各组中的变化情况，分析其血清水平与冠 脉狭窄程度的相关性。 1.4 统计学方法
采用统计学软件 SPSS 19.0 进行数据分析，所有计量 资料以均数±标准差（x±s）表示，使用 t 检验；所有计数资料 以例数和百分比（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05 为差异有 统计学意义。
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黑龙江医学 第 45 卷 2021 年 第 11 期 HEILONGJIANG MEDICAL JOURNAL Vol.45 No.11 Jun.2021
血清脂蛋白 a、载脂蛋白 A1、B 及血小板参数在 冠心病患者中的检测价值观察
王萌
郑州市第二人民医院检验科，河南 郑州 450000
摘 要 目的：观察血清脂蛋白 a（Lp-a）、载脂蛋白 A1（ApoA1）、载脂蛋白 B（ApoB）及血小板参数在冠心病患者中的
本 文 中 Lp-a 在 冠 心 病 患 者 中 阳 性 预 测 值 为 98.9% ， PDW 在冠心病患者中阳性预测值为 97.9%，二者水平可为 冠心病诊断及预后提供一定的依据。本次研究结果显示， 患者 Lp-a、ApoB 水平与冠脉病变支数及狭窄程度呈正相 关；ApoA1 水平与冠脉病变支数及狭窄程度呈负相关。说 明血清 LP-a、ApoA1、ApoB 水平高低对临床诊断冠心病 病变程度具有十分重要的指导意义。此外，单支病变组、 多支病变组 PLT、MPV、PDW 水平高于对照组，且多支病 变组高于单支病变组。说明血小板参数参与冠心病患者病 变发展过程，且 PLT、MPV、PDW 浓度与冠心病病变程度 呈正相关。分析原因猜测可能由于新增的 PLT 具有大量的 蛋白质，可促进患者 MPV、PDW 水平的升高有关。
载脂蛋白A1(APOA1)测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求sainuopu
载脂蛋白A1（APOA1）测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中载脂蛋白A1的含量。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×20ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×15ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×10ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×15ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×8L，试剂2：1×2L；试剂1：2×40ml，试剂2：2×10ml。
校准品(选配，冻干品)：1×1ml，1×3ml。
质控品(选配，冻干品)：1×1ml，1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色澄清液体；试剂2浅黄至微红色液体。
校准品：冻干品，复溶后为淡黄色液体，有轻微浊度。
质控品：冻干品，复溶后为淡黄色液体，有轻微浊度。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。
2.4 分析灵敏度测定浓度为0.15g/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.05。
2.5 线性范围在（0.1，2.0）g/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.995。
在（1.2，2.0）g/L区间内线性相对偏差不大于±10%；（0.1，1.2]g/L区间内线性绝对偏差应不大于±0.12g/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。
2.9 质控品赋值有效性测定结果在靶值范围内。
载脂蛋白A1(APOA1) 免疫比浊法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理APO A-1与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。
通过测定标准品，建立一个吸光度对APO A-1浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APO A-1浓度。
2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司APOA1试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
载脂蛋白ApoA1和ApoB临床意义综述培训资料
载脂蛋白Ap o A1 和ApoB临床意义综述载脂蛋白ApoAl和ApoB临床意义综述近年来，因动脉粥样硬化(As)性心血管疾病的增多使人们日益关注载脂蛋白A、载脂蛋白B和脂蛋白(a)等CHD相关危险因子在临床中的检测。
目前已有大量临床研究明确指出载脂蛋白AI(ApoAI)，载脂蛋白B(ApoB)和脂蛋白(a)[Lp(a)]是当前临床试验室脂类检测项目中预测动脉粥样硬化(As)性心血管疾病最有价值的指标。
ApoAl、ApoB已用作监测药物或饮食治疗心血管疾病的疗效，并有助于某些异常脂蛋白血症的特异性诊断。
测定ApoAI/ApoB比值也可作为其他脂代谢紊乱疾病(如糖尿病、尿毒症、肾病综合征、痛风、激素代谢紊乱等)的辅助观察项目。
载脂蛋白的特性和生理功能：血浆脂蛋白的代谢受其所含载脂蛋白的调控。
脂蛋白代谢异常主要与其所含载脂蛋白的量和质的异常有关，故研究脂蛋白代谢已从脂质到脂蛋白，由脂蛋白向载脂蛋白方向发展。
载脂蛋白是非均一的蛋白质，是脂类与蛋白质的复合体。
迄今已发现20余种，主要有A、A1、B、C、E等。
它的生理功能是多方面的：(1)参与组织或细胞间脂类的运输和重分配；(2)维持脂蛋白颗粒的结构；(3)能与细胞膜上特异受体结合，影响脂类的摄取。
例如ApoB和ApoE可调节肝细胞和肝外细胞表面的ApoB，ApoE(LDL)受体同血浆LDL间的相互作用以及肝细胞ApoE受体同血浆HDLC间的相互作用；同时，这类受体反过来调节含ApoB和ApoE的血浆脂蛋白被细胞摄取的速度和数量以及它们在血浆中的浓度，从而调节胆固醇在细胞内的再分配(合成生物膜、类固醇激素和胆汁酸等)。
ApoAl的特征、分布、功能及临床意义：ApoA的两个主要成分是AI , All。
正常在人体血浆中的浓度AI约为0.8~1.2g/L, All为0.3~0.5g/L。
Al为单链多肽，由243个氨基酸残基组成，在肝及肠黏膜中合成，主要存在于高密度脂蛋白（HDL）中。
AU680 Apo A
血清或血浆中载脂蛋白A-I浓度(APO A-I)检测的操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：血清或血浆中载脂蛋白A-I浓度(APO A-I)检测2．检验方法名称：免疫比浊法二、方法学原理血清（浆）中的载脂蛋白A-Ⅰ与山羊抗人载脂蛋白A-Ⅰ抗体发生抗原抗体反应，产生混浊。
根据对浊度的测定，求出载脂蛋白A-Ⅰ浓度。
另，本法采用扣除标本空白的两点法。
载脂蛋白A-Ⅰ+ 山羊抗人载脂蛋白A-Ⅰ抗体抗原抗体沉降物测吸光度三、试剂品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂品牌：积水医疗医疗株式会社2．代号：APO A-I Auto·N[DAIICHI]3．包装规格：缓冲液①70mL×4；抗体液②80mL×24．内含物：缓冲液①：2-氨基-2-羟甲基-1，3-丙二醇缓冲液（pH7.2）100mmol/L聚乙二醇 4000 抗体液②：山羊抗人载脂蛋白A-Ⅰ抗体液 10U/mL5．试剂的储存与效期：2~10℃储存；自制造日起效期为18个月。
(开封后保存于2~10℃，其稳定性为30天)四、仪器品牌、型号仪器：贝克曼AU680全自动生化分析仪五、具体操作步骤（包括主要的仪器测定参数）5.1．试剂的配置：试剂①：缓冲液①直接使用。
试剂②：抗体液②直接使用。
5.2．操作方法（1）在将下面表格的参数输入后，自动分析仪的分析操作如下：37° 37°标本 + 试剂①测定试剂②测定计算浓度2.0µL 200µL 5分（吸光度I） 67µL 5分（吸光度II）吸光度I,II：800nm和600nm的吸光度差校准物：Apo Auto·N载脂蛋白复合校准品试剂空白：精制水或生理盐水（2）贝克曼AU680仪器的分析参数：5.3．检测范围：1~200mg/dL(日本单位);0.01~2g/L(SI)5.4．稀释：若被测物浓度超出线性检测范围，用生理盐水适当稀释后重测。
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血清载脂蛋白A1APOA1测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理
血清中的ApoA1与试剂中特异性的ApoA1抗体结合，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低与血清中ApoA1成正比。
通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中ApoA1的含量。
3标本：
3.1 病人准备:应禁食12小时抽血。
3.2 类型：血清
3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。
在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。
3.4 标本运输室温条件下运输。
3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。
4 实验材料
4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司APOA1测定试剂
盒（浙械注准20142400111）
4.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：
磷酸盐缓冲液
0.1mol/L
聚乙二醇（PEG）表面活性剂，稳定剂 40g/L
Triton X-100 0.1ml/L
试剂2（R2）：
羊抗人APOA-Ⅰ血清（效价大于1:16） 50～
60ml/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，
可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
缓冲液（R1）和抗体试剂
（R2）可避光密封保存可稳定一年。
打开后抗体试剂（R2）稳定2个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂
4.2 校准品：使用宁波美康生物科技有限公司提供的载脂蛋白A-Ⅰ/B标准品血清进行全点校准操作。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
8 计算方法
以APO-A1复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。
9 参考值范围
1.0～1.60g/L
我室的参考值:1.0-1.70 g/L
10 临床意义
载脂蛋白A1(ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要结构蛋白，它可以去除细胞中的胆固醇，因此具有预防动脉粥样硬化的作用。
流行病学研究表明以ApoA1表示的HDL水平与冠心病(CHD)的流行率呈负相关。
在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病危险时，除检测脂蛋白(a)与载脂蛋白B之外，同时检测载脂蛋白A1能对脂类失调提供更多的信息，也可替代高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测。
一些研究表明，当Apo B浓度上升(女性Apo B>1.50g/L，男性Apo B>1.55g/L)，而ApoA1浓度下降(女性Apo A1<1.20g/L，男性ApoA1<1.10g/L)，对于预测CHD危险非常有用。
11 操作性能
11.1 线性范围：0.30～2.6g/L(r2≥0.995)；
11.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3%，总精密度小于3%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
11.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对53个样品进行Apo A1检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.15x-0.077g/L；r=0.994。
11.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.002g/L。
12 超出范围结果处理
本法的检测范围为0.01～2.60g/L。
当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：1稀释后，重新测定，结果乘以2。
13 病危报警值的处理
无。
14 方法局限性
14.1 干扰物质：宁波美康公司的Apo A1试剂中抗体特异地只与人Apo A1发生免疫反应。
当样品中抗坏血酸浓度≤1704 μmol/L，胆红素浓度≤598μmol/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。
试剂与ApoA2和ApoB没有交叉反应。