血清载脂蛋白A1APOA1测定

血清载脂蛋白A1APOA1测定

1 检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理

血清中的ApoA1与试剂中特异性的ApoA1抗体结合，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低与血清中ApoA1成正比。通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中ApoA1的含量。

3标本：

3.1 病人准备:应禁食12小时抽血。

3.2 类型：血清

3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。

3.4 标本运输室温条件下运输。

3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。

4 实验材料

4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司APOA1测定试剂

盒（浙械注准20142400111）

4.1.1 试剂组成

试剂1（R1）：

磷酸盐缓冲液

0.1mol/L

聚乙二醇（PEG）表面活性剂，稳定剂 40g/L

Triton X-100 0.1ml/L

试剂2（R2）：

羊抗人APOA-Ⅰ血清（效价大于1:16） 50～

60ml/L

4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，

可稳定至失效期。试剂不可冰冻。缓冲液（R1）和抗体试剂

（R2）可避光密封保存可稳定一年。打开后抗体试剂（R2）稳定2个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂

4.2 校准品：使用宁波美康生物科技有限公司提供的载脂蛋白A-Ⅰ/B标准品血清进行全点校准操作。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤

6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法

以APO-A1复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。

9 参考值范围

1.0～1.60g/L

我室的参考值:1.0-1.70 g/L

10 临床意义

载脂蛋白A1(ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要结构蛋白，它可以去除细胞中的胆固醇，因此具有预防动脉粥样硬化的作用。流行病学研究表明以ApoA1表示的HDL水平与冠心病(CHD)的流行率呈负相关。在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病危险时，除检测脂蛋白(a)与载脂蛋白B之外，同时检测载脂蛋白A1能对脂类失调提供更多的信息，也可替代高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测。一些研究表明，当Apo B浓度上升(女性Apo B>1.50g/L，男性Apo B>1.55g/L)，而ApoA1浓度下降(女性Apo A1<1.20g/L，男性ApoA1<1.10g/L)，对于预测CHD危险非常有用。

11 操作性能

11.1 线性范围：0.30～2.6g/L(r2≥0.995)；

11.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

11.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对53个样品进行Apo A1检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.15x-0.077g/L；r=0.994。

11.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.002g/L。

12 超出范围结果处理

本法的检测范围为0.01～2.60g/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：1稀释后，重新测定，结果乘以2。

13 病危报警值的处理

无。

14 方法局限性

14.1 干扰物质：宁波美康公司的Apo A1试剂中抗体特异地只与人Apo A1发生免疫反应。当样品中抗坏血酸浓度≤1704 μmol/L，胆红素浓度≤598μmol/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。试剂与ApoA2和ApoB没有交叉反应。