S0121 总抗氧化能力检测试剂盒_ABTS快速法_
抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法是通过对样品中的抗氧化物质含量和抗氧化活性进行定量分析,评估其对自由基的清除能力和抗氧化能力。
随着抗氧化研究的不断深入,测定方法也逐渐完善。
以下是对常见的抗氧化物活性测定方法的总结。
1. ORAC法(氧化应激反应活性测定法):该方法通过测定样品清除自由基的能力来评估其抗氧化活性。
实验中,将样品与荧光试剂(如2,2'-azobis(2,4-dimethylvaleronitrile))共同作用,观察其清除自由基的能力,并通过建立标准曲线计算样品的ORAC值。
2.DPPH法(1,1-二苯基-2-苦味基-苦味酸磷):该方法是一种常用的快速测定抗氧化活性的方法。
实验中,将样品与DPPH稳定自由基共同作用,通过比色反应观察DPPH自由基被样品清除的程度,从而评估抗氧化活性。
3.ABTS法(2,2'-联氮双5-苯砜酸):该方法通过ABTS离子自由基的生成和清除反应来测定样品的抗氧化活性。
实验中,ABTS与过氧化氢反应生成ABTS离子自由基,通过观察样品对其的清除能力来评估抗氧化活性。
4.FRAP法(亚铁离子还原能力):该方法基于样品对人造抗坏血酸(Fe3+)的还原能力,通过测量还原后的Fe2+离子的生成量来评估抗氧化活性。
实验中,将样品与Fe3+离子反应生成Fe2+离子,通过比色反应来测定Fe2+的含量。
5. 碘标法(Iodine value):该方法用于测定油脂、脂肪等样品的抗氧化活性。
实验中,将已知量的碘与样品中的不饱和化合物反应,在光反应下观察反应终点的颜色变化,并根据标准曲线计算样品的抗氧化活性。
6. 硝酸盐法(Nitrite method):该方法用于测定样品中亚硝酸盐的含量,从而评估其抗氧化活性。
实验中,样品经过还原反应生成亚硝酸盐,然后与DANO(N-乙基-N-(2-苯基乙基)-对硝基苯胺)反应生成稳定的偶氮染料,通过比色测定反应终点的吸光度来计算样品中亚硝酸盐的含量。
总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)

总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)产品编号产品名称包装S0116 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) 100次产品简介:总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法),即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method,简称T-AOC Assay Kit,是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP)方法,可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。
在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧,同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。
活性氧产生后,可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤,诱发氧化应激(Oxidative stress),继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。
机体中存在多种抗氧化物,包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等,可以清除体内产生的各种活性氧,以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。
一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。
因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液,细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。
植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱,可以用于筛选强抗氧化能力的药物。
FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine (Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ,随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。
抗氧化剂总状态测定试剂盒(ABTS法)产品技术要求九强

抗氧化剂总状态测定试剂盒(ABTS法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆中总抗氧化能力。
1.1包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 组成成分组成成分见表2。
表2 组成成分2. 性能指标2.1 外观试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂2无色或浅黄色粉末状物质,复溶后为无色或浅黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂3为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;校准品为无色或浅黄色粉末状物质,复溶后为无色或浅黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;质控品为无色或浅黄色粉末状物质,复溶后为无色或浅黄色液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A600nm下测定空白吸光度应≤ 1.0000。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验:在[0.10,2.50] mmol/L区间内,相关系数r≥0.975,在[0.10,1.00] mmol/L区间内测定的偏差应不超过±0.10mmol/L,在(1.00,2.50] mmol/L区间内测定的偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为2.3mmol/L时,其吸光度变化在0.1000~0.6000之间。
2.6 线性区间在[0.10,2.50] mmol/L区间内,线性相关系数r≥0.990,在[0.10,1.00]mmol/L 区间内测定的线性偏差应不超过±0.1mmol/L,在(1.00,2.50] mmol/L区间内测定的线性偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的血清样本或质控品重复测定10次,其测定值的变异系数(CV%)应不大于10%。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差(R)应不大于10%。
2.8 瓶间差试剂2、校准品、质控品的瓶间差应≤10%。
抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结引言:抗氧化物活性测定在食品、医药、化妆品以及生命科学等领域具有重要应用。
目前,常用的抗氧化物活性测定方法主要包括化学法、生物法和物理法。
本文将对这几种方法进行总结。
一、化学法1.1.DPPH自由基法该方法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、通过DPPH自由基与抗氧化物发生反应,使DPPH自由基得以还原为无色溶液,测定溶液的吸光度来评估抗氧化活性。
1.2.ABTS自由基法该方法通过生成具有特定吸光度的ABTS自由基,评估抗氧化物对自由基的清除能力。
与DPPH自由基法相比,ABTS自由基法具有更高的灵敏度和稳定性。
1.3.羟自由基清除法该方法利用特定的化学反应,测定样品对羟自由基的清除能力,评估其抗氧化活性。
该方法适用于抗氧化物活性测定和体外抗氧化活性评价。
1.4.过氧化物清除法该方法测定样品对过氧化物的清除能力,通过测定生成的不稳定的自由基产物的分解速率,评估抗氧化活性。
该方法适用于测定生物样品的抗氧化活性。
二、生物法2.1.脂质过氧化抑制能力测定法该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力,评估其抗氧化活性。
常用的指标包括丙二醛生成量、硫代巴比妥酸反应物(TBA)生成量等。
2.2.DNA损伤保护能力测定法该方法通过测定样品对DNA损伤的保护能力,评估其抗氧化活性。
常用的指标包括DNA链断裂率、碱基损伤率等。
2.3.超氧化物歧化酶(SOD)活性测定法该方法测定样品中SOD的活性,评估其清除超氧自由基的能力。
常用的指标包括抑制率、相对酶活等。
2.4.过氧化氢酶(CAT)活性测定法该方法测定样品中CAT的活性,评估其清除过氧化氢的能力。
常用的指标包括催化剂浓度、酶单位等。
三、物理法3.1.相对电子自旋共振法该方法通过测定样品中的自由基产物的电子自旋共振信号的强度,评估抗氧化物的活性。
常用的指标包括g值、线宽等。
3.2.高温氧化法该方法利用样品在高温条件下的氧化反应,评估其抗氧化活性。
总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)

用途本试剂盒适用于检测血清(浆)、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。
检测范围及灵敏度检测范围:0.047-1.50 mmol/L灵敏度:0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统,一类是酶抗氧化系统,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px);另一类是非酶抗氧化系统,包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。
抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。
检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+,在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制,在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。
Trolox是一种维生素E的类似物,具有和维生素E相近的抗氧化能力,用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。
例如,Trolox的总抗氧化能力为1,相同浓度情况下,其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。
本试剂盒测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用BCA法(货号:E-BC-K318-M)。
提供试剂和物品注:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同批次试剂盒中的试剂不能混用。
Focus on your research Service for life science 耗材:枪头(1000 μL ,200 μL ,10 μL )。
仪器:酶标仪(405-425 nm )、微量移液器(1000 μL ,200 μL ,100 μL ,10 μL )。
所需自备物品配制试剂之前,请穿戴好防护装备。
试剂盒中部分试剂含有危险性物质。
禁止食入,吸入,直接接触眼睛、皮肤和衣物。
使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。
安全提示试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl )、PBS (0.01 M,pH 7.4)、80%乙醇。
实验关键点ABTS工作液配制完成后,室温避光保存,在30 min内使用完毕。
天然产物抗氧化活性的筛选方法及应用

天然产物抗氧化活性的筛选方法及应用
一、筛选方法
1、DPPH自由基清除试验:DPPH自由基清除试验是用来检
测天然产物的抗氧化活性的一种常用方法,它可以测量天然产物抗氧化活性的强弱。
该方法的原理是利用天然产物中的抗氧化剂将DPPH自由基进行清除,从而检测天然产物的抗氧化
活性。
2、FRAP试验:FRAP试验也是一种检测天然产物抗氧化活性的常用方法,它可以测量天然产物抗氧化活性的强弱。
该方法的原理是利用天然产物中的抗氧化剂将Fe3+还原为Fe2+,从
而检测天然产物的抗氧化活性。
3、ABTS自由基清除试验:ABTS自由基清除试验也是一种
检测天然产物抗氧化活性的常用方法,它可以测量天然产物抗氧化活性的强弱。
该方法的原理是利用天然产物中的抗氧化剂将ABTS自由基进行清除,从而检测天然产物的抗氧化活性。
二、应用
1、食品抗氧化剂:天然产物的抗氧化活性可以用来制备食品
抗氧化剂,以延缓食品的氧化变质,延长食品的保质期。
2、医药抗氧化剂:天然产物的抗氧化活性可以用来制备医药
抗氧化剂,以防止药物氧化变质,延长药物的保质期。
3、保健品抗氧化剂:天然产物的抗氧化活性可以用来制备保
健品抗氧化剂,以防止保健品氧化变质,延长保健品的保质期。
总SOD活性检测试剂盒(WST法)[整理版]
![总SOD活性检测试剂盒(WST法)[整理版]](https://img.taocdn.com/s3/m/9d3db592b8d528ea81c758f5f61fb7360b4c2bdd.png)
总SOD活性检测试剂盒(WST法)产品编号产品名称包装S0102 总SOD活性检测试剂盒(WST法) 100次产品简介:¾碧云天的总SOD活性检测试剂盒(WST法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-1)是一种基于WST-1的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。
¾超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
¾目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。
但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
¾本试剂盒采用了目前测定SOD方法中最先进的WST-1法。
WST-1即2-(4-Iodophenyl)- 3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt。
参考下图,WST-1可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所抑制。
通过对WST-1产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。
基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-1的SOD酶活力检测原理图。
XO:xanthine oxidase。
¾WST-1本身吸光度很低,且反应产物是稳定的水溶性产物,提高了SOD检测的灵敏度和特异性,适合高通量筛选研究。
植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与,使染料ABTS 氧化,在抗氧化剂的存在下,通过分光光度仪,观察其峰值下降的变化,来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力,即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。
产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定。
技术背景超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡,甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。
在生物系统内,通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等,大分子,例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasmin;CER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子,例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素(bilirubin)等,产生抗氧化能力,即捕获自由基的能力,达到消除或降低ROS的损害。
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细胞或组织裂解液等,例如某裂解液样品的蛋白浓度为0.15mg/ml,测定获得的抑制率和0.3mM Trolox相同,则该裂
解液样品的总抗氧化能力为0.3mM/0.15mg/ml,即为2mmol/g。对于植物或中草药抽提物,例如某样品的浓度为
0.1mg/ml,测定获得的抑制率和0.5mM Trolox相同,则该样品的总抗氧化能力为0.5mM/0.1mg/ml,即为5mmol/g。对
1/1000 过氧化氢溶液
8微升
40微升
80微升
160微升
ABTS工作微升
3400微升
注意:ABTS工作液配制后,室温避光保存,宜在30分钟内使用完毕。
2. 待测样品的准备:
(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品的准备:
血清、血浆、唾液或尿液样品每个样品需要10微升,都可以直接用于测定。血清、血浆、唾液或尿液样品都可以使
用新鲜样品进行测定,也可以-80℃冻存后再进行测定。-80℃冻存的样品至少在一个月内所测定获得的数据没有显
著变化。注意:血浆制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用EDTA抗凝。根据文献报道,人血清或血浆中
的总抗氧化能力为0.5-2mM,人唾液中的总抗氧化能力为0.3-1mM,人尿液中的总抗氧化能力为0.2-3mM。
Antioxidant ABTS·+ ——————> ABTS
¾ 本试剂盒方便快捷,加入待测样品后6分钟即可进行吸光度测定,通常10-20个样品可以在十多分钟内检测完毕。 ¾ 本试剂盒可以检测100个样品。
包装清单:
产品编号 S0121-1 S0121-2 S0121-3 S0121-4 S0121-5
¾ 植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱,可以用 于筛选强抗氧化能力的药物。
¾ ABTS法测定总抗氧化能力的原理是,ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的ABTS·+,在抗氧化物存在时ABTS·+的产 生会被抑制,在414nm或734nm测定ABTS·+的吸光度即可测定并计算出样品的总抗氧化能力。Trolox是一种维生素E的类 似物,具有和维生素E相近的抗氧化能力,用作其它抗氧化物总抗氧化能力的参考。例如,Trolox的总抗氧化能力为1, 相同浓度情况下,其它物质的抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相比的倍数来表示。
¾ 活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。在细胞或组织的正常生理代谢过程 中会产生活性氧,同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产 生后,可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤,诱发氧化应激(Oxidative stress),继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬 化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。
4. 总抗氧化能力的测定:
(1) 96孔板的每个检测孔中加入20微升过氧化物酶工作液。
(2) 空白对照孔中加入10微升蒸馏水或PBS等适当溶液;标准曲线检测孔内加入10微升各种浓度的Trolox标准溶液;样品
检测孔内加入10微升各种样品。轻轻混匀。
(3) 每个孔内加入170微升ABTS工作液,轻轻混匀。
于纯的化合物例如维生素C、GSH等,例如使用1mM某样品检测时的抑制率相当于1.5mM Trolox时,该样品的抗氧
化能力为1.5mM,再如使用0.5mM某样品检测时的抑制率相当于0.8mM Trolox时,该样品的抗氧化能力为1.6mM。
Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC)来表示。对于混合物例如血浆、血清、唾液或尿液等的抗氧化能力,可以直
接用Trolox的摩尔浓度来表示,例如某样品测定获得的抑制率和0.6mM的Trolox相同,则该样品的总抗氧化能力为
0.6mM;再如某样品稀释5倍后测定获得的抑制率和0.5mM的Trolox相同,则该样品的总抗氧化能力为2.5mM。对于
冲液中,混匀后即可配制成200微升过氧化物酶工作液。过氧化物酶工作液宜新鲜配制使用。
(3) 参考下表,根据待测定样品的数量(含标准曲线)配制适量的ABTS工作液:
1个检测
5个检测
10个检测
20个检测
检测缓冲液
152微升
760微升
1520微升
3040微升
ABTS溶液
10微升
50微升
100微升
200微升
每毫克或每克蛋白重量中的总抗氧化能力,表示单位为mmol/mg或mmol/g。
(3) 其它样品的准备:
植物或中草药抽提液都可以直接用于检测。需注意样品本身的颜色不会干扰检测。植物或中草药抽提液的抗氧化能
力可以表示为每毫克或每克抽提物干重中的总抗氧化能力,表示单位为mmol/mg或mmol/g。各种抗氧化物测定其抗
OD值相同,则其相对总抗氧化能力为5。根据文献报道和实际测定结果,维生素C的抗氧化能力为1.0,维生素E的抗
氧化能力为1.0,GSH的抗氧化能力为1.3,Uric acid的抗氧化能力为1.0,β-Carotene的抗氧化能力为2.6,Lycopene的
抗氧化能力为3.1,Quercetin的抗氧化能力为3.0,鲜橙汁的总抗氧化能力为2.2。
产品编号 S0121
总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS快速法)
产品名称 总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS快速法)
包装 100次
产品简介:
¾ 总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS快速法),即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with a Rapid ABTS method,简称T-AOC Assay Kit,是一种采用2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid (ABTS)作为显色剂,可以对血浆、血清、唾液、 尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行快 速检测的试剂盒。
(4) 室温孵育6分钟后测定A414。如果测定A414有困难,也可以在405-425nm范围内进行测定。
(5) 根据标准曲线计算出样品的总抗氧化能力。如果样品测定出来的吸光度在标准曲线范围以外,需把样品适当稀释或
浓缩后再进行测定。
(6) 总抗氧化能力的表示方式:在采用Trolox作为标准品进行总抗氧化能力检测时,样品的抗氧化能力可以用Trolox-
抗氧化物,4℃ 约12000g离心5分钟,取上清用于后续测定。以上所有操作均需在4℃或冰上操作。制备好的细胞或
组织样品的上清如果不立即用于测定,可以在-80℃冻存。-80℃冻存的样品至少在一个月内所测定获得的数据没有
显著变化。细胞或组织样品在测定总抗氧化能力时需同时测定蛋白浓度,最后测定获得的总抗氧化能力通常表示为
使用说明: 1. 过氧化氢溶液和过氧化物酶的稀释,以及ABTS工作液的配制:
(1) 用双蒸水把过氧化氢溶液稀释1000倍。例如取10微升过氧化氢溶解,加入到9.99ml双蒸水中,混匀即为1/1000 过氧 化氢溶液。
(2) 根据待测样品的数量,取适量过氧化物酶用检测缓冲液稀释10倍。例如取20微升过氧化物酶,加入到180微升检测缓
(2) 细胞或组织样品的准备:
对于细胞样品,收集约100万个细胞(不必精确计数,直接刮下,不宜使用胰酶和EDTA消化),放置在200微升冰冷的
PBS或HBSS溶液中,匀浆或超声以充分破碎细胞并释放其中的抗氧化物,4℃ 约12000g离心5分钟,取上清用于后续
测定。对于组织样品,每20mg组织加入100微升冰冷的PBS或HBSS溶液,匀浆或超声以充分破碎组织并释放其中的
氧化能力时,通常配制成0.15-1.5mM,然后进行测定。抗氧化物的浓度可以以摩尔浓度表示时,测定获得的总抗氧
化能力可以用相对总抗氧化能力进行表示,例如0.5mM的某抗氧化物其测定获得的OD值和1mM的Trolox测定获得的
OD值相同,则其相对总抗氧化能力为2,再如0.2mM的某抗氧化物其测定获得的OD值和1mM的Trolox测定获得的
—
产品名称 检测缓冲液 ABTS溶液 过氧化氢溶液
过氧化物酶
Trolox溶液 (10mM) 说明书
包装 20ml 1ml 0.5ml 0.2ml 0.1ml 1份
保存条件:
-20℃保存,一年有效。其中S0121-2 ABTS溶液和S0121-5 Trolox溶液 (10mM)需避光保存。
注意事项:
¾ 样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质,也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。 ¾ 测定时需可以测定A414的酶标仪一台(测405-425nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。 ¾ ABTS对人体有刺激性,请注意适当防护。 ¾ 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 标准曲线测定的准备:
用蒸馏水或样品配制溶液稀释标准品。对于血清、血浆、唾液或尿液样品直接用蒸馏水或PBS稀释标准品,对于细胞或组
织样品,用用于细胞或组织匀浆的溶液稀释标准品,其它样品则用样品配制溶液对标准品进行稀释。把10mM Trolox标准
溶液稀释成0.15、0.3、0.6、0.9、1.2和1.5mM。