小鼠总抗氧化能力的测定
抗氧化能力指数测定原理及应用
抗氧化能力指数测定原理及应用随着人们健康意识的提高，抗氧化能力成为的焦点。
抗氧化能力是指机体在面对氧化应激时，消除和降低氧化压力的能力。
为了更好地了解机体的抗氧化能力，抗氧化能力指数的测定变得越来越重要。
本文将详细介绍抗氧化能力指数测定的原理、方法及应用。
抗氧化能力指数测定主要基于氧化还原反应的原理，通过测定样品对自由基的清除能力来评价其抗氧化能力。
一般情况下，测定的指标包括总抗氧化能力、还原力、氧自由基清除能力等。
总抗氧化能力：总抗氧化能力是指机体对氧化应激的综合防御能力，包括酶类和非酶类抗氧化物质。
测定总抗氧化能力的方法主要是基于比色或荧光法，通过检测样品对自由基的清除率来计算总抗氧化能力。
还原力：还原力是指样品对氧化剂的还原能力，通过测定样品在特定条件下的还原能力，可以评估其抗氧化能力。
常用的测定方法包括邻苯三酚自氧化法和铁离子还原法。
氧自由基清除能力：氧自由基是导致氧化应激的主要因素之一，通过测定样品对氧自由基的清除能力，可以了解其抗氧化能力。
常用的测定方法包括电子自旋共振法和化学发光法。
抗氧化能力指数测定在多个领域均有应用，如生物学、医学、营养学等。
以下是几个具体应用的例子。
生物学：在生物学领域，抗氧化能力指数测定被广泛应用于研究物种演化、生物衰老、药物筛选等方面。
通过测定不同物种或不同组织的抗氧化能力，有助于深入了解生物体的抗氧化机制和衰老过程。
医学：在医学领域，抗氧化能力指数测定可以帮助医生评估患者的抗氧化状态，预测其对疾病的易感性。
例如，某些疾病如癌症、糖尿病等与机体的抗氧化能力密切相关，通过测定患者的抗氧化能力，可以为疾病的预防和治疗提供参考。
营养学：在营养学领域，抗氧化能力指数测定可以评价食品的营养价值。
机体的抗氧化系统需要多种营养素的支持，如维生素C、维生素E、硒等。
通过测定食品中的抗氧化物质含量，可以为膳食营养推荐提供依据。
抗氧化能力指数测定对于评价机体的抗氧化状态具有重要意义，它不仅有助于了解个体的健康状况，还可为疾病的预防和治疗提供指导。
外湿对正常小鼠过氧化与抗氧化影响的实验研究_赵丽
第11卷 第4期 2009 年 4 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 11No. 4Apr . ，2009目前，关于湿邪致病机理的一些研究表明[1]：湿证可导致机体免疫调节功能紊乱、营养吸收障碍以及能量代谢不足等。
1 材料与方法1.1实验动物与分组 实验选用昆明系健康雄性小白鼠40只，将其随机编号称重，分为两组，即正常对照组（A组）20只，外湿组（B组）20只。
正常对照组不施加任何处理因素。
造模第10天，将A组、B组小鼠全部处死，取全肝。
1.2实验各组的制作 动物实验室通风、采光条件良好。
实验动物分组后，单笼饲养，自由取食水，同等条件下饲养3天，从第4天起施加处理因素。
造模阶段时处长夏季节，外湿造模持续共10天，具体方法如下：A组不施加任何处理因素。
B组置温度为18~25℃，相对湿度RH>90%的造模箱中，造模箱由3mm厚的有机玻璃制成，体积为0.5m×0.3m×0.3m，箱上开有通气孔，箱内放温湿度计，箱底为钢丝网架，网架下设有水槽。
1.3脂质过氧化物和相关抗氧化酶的测定 丙二醛(malondialdehyde,MDA) 据Ohkawa H法[2]。
共轭双烯(Conjugated dienes,CD) 据Pryor WA and Castle L法[3]。
过氧化氢酶(Catalase,Cat) 据Sinha AK法[4]。
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD) 据Makarevich OP and Gdikovl PP法[5]。
过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px) 据Austin L法[6]。
1.4数据统计方法 应用Excel97软件进行数据分析，并用华西医科大学医学软件包PEMS进一步复核。
2 结果与分析2.1外湿造模阶段小鼠一般状态的观察 第1天，实验各组小鼠较以前无明显改变；第2天，B组有5只小鼠出现眯眼现象，但可经轻度刺激后迅速恢复，大便无特殊改变，呈扁椭圆形，颜色偏黑；第4天，B 组在钳捉状态下机警度下降，有3只小鼠出现懒动，扎堆现象，经震荡刺激后可恢复，食量减少，大便无明显改变；第6天，B组小鼠均出现懒动，扎堆现象，经震荡刺激后有7只小鼠无反应，背毛散乱无光泽，有2只小鼠出现肢伸不收现象；第8天，B组在原有症状基础上出现了稀便，颜色较黑；第10天，B组小鼠出现了肛周秽浊现象。
小鼠实验方案
酵母提取物对小鼠肝损伤保护作用试验方案酵母提取物抗氧化能力的测定概述：自由基是指是机体代谢的正常产物，在体内有很强的氧化反应能力，可以在细胞代谢的过程中不断地产生。
大量的研究结果证明，自由基是衰老的决定因素。
在生命活动过程中产生的各种自由基中轻自由基的作用最强，进攻性也最强，几乎可以和所有的生物分子、有机物或无机物发生不同类型的化学反应。
超氧阴离子不仅自身具有毒性，而且可以通过其他反应产生更多的氧自由基，进一步对生物体产生损伤作用。
试验拟采用DPPH自由基体系、超氧阴离子(O2-)自由基体系、羟自由基(HO-)体系以及还原力测定体系评价酵母提取物的抗氧化活性。
试验方法1）DPPH 自由基清除试验DPPH储备液配制：精密称取19.7 mg DPPH溶解于25 mL甲醇中，再吸取2.5 mL溶液，以甲醇补足体积至25 mL，得到200 µM DPPH母液，暗处保存备用。
药品及对照品储备液配制：酵母提取物采用甲醇溶解，得到终浓度为1 mM的母液。
再将母液加甲醇稀释至一定浓度梯度，加3 mL于比色管中（对照组加入3 mL甲醇或水），再加入1 mL DPPH母液，剧烈震荡后，与暗处保存30 min，以甲醇做空白，测其517 nm吸光值。
以Vc作为阳性对照，各组反应平行测定三次，DPPH自由基清除率按照下面公式计算：×100DPPH自由基清除率（%）=A0−A1A0式中A0代表对照组的吸光值；A1代表加药组的吸光值。
2）超氧阴离子(O2-)自由基清除试验采用NADH-PMS方法评估酵母提取物对超氧阴离子自由基的清除能力。
试管中依次加入1 mL NBT (81µM)溶液，1 mL NADH (468µM )溶液，1 mL不同浓度的待测溶液，0.4 mL PMS (88µM)溶液，充分混匀，静置5 min，在560 nm处测其吸光值。
用水代替待测溶液做阴性对照，水代替PMS做本底组对照，Vc做阳性对照。
恩施硒茶-锌对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用实验论文
恩施硒茶\锌对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的实验研究【摘要】目的：观察恩施硒茶、锌对d-半乳糖到衰老小大鼠抗氧作用。
方法：将昆明种小鼠随机分为正常对照组（nc）、衰老缺锌组（azd）、衰老缺锌硒茶组（azdset）、、衰老补锌硒茶组（azsset），测定各组缺锌和补锌对小鼠血清、肝脏、脑组织锌含量的影响及硒茶、锌对血清中mda、t-aoc、sod及全血中gsh-px的影响。
结果：衰老模型组与正常对照组比较，血清、肝、脑组织mda含量均显著高于正常对照组（p<0.05）。
结论：恩施硒茶、锌具有明显的抗氧化作用。
【关键词】硒茶锌；d-半乳糖；抗氧化the anti- oxidative activities of selenium and zinc mice induced with d-galactosexu jian-an(medical school of hubei institute for nationalities，enshi 445000，china)【abstract】objective: to observe selenium tea, enshi and zinc on d-galactose to the antioxidant effect of aging small rats. methods: the mice were randomly divided into control group (nc), the aging of zinc deficiency group (azd), selenium deficiency of aging tea group (azdset),, old zinc selenium tea group (azsset), lack of determination in each group zincand zinc supplementation on serum, liver and brain of zinc and selenium content of tea and zinc in serum mda, t-aoc, sod and gsh-px in blood influence. results: the aging model group compared with the control group, serum, liver and brain mda levels were significantly higher than the control group (p <0.05). conclusion: tea enshi selenium, zinc has a significant antioxidant effect.【key words】selenium tea; zinc; d-galactose;anti-oxidative恩施硒茶富含微量元素硒，是抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)的重要成份，对体内自由基及过氧化脂质清除起重要作用。
抗氧化活性研究方法
抗氧化活性研究方法引言：氧化反应是指分子或原子失去电子，而还原反应是指分子或原子获得电子。
由于氧化反应产生的自由基具有高度活性，能够对细胞结构和功能造成损害，导致多种疾病的发生。
因此，研究抗氧化活性及其机制对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。
本文将介绍几种常用的抗氧化活性研究方法。
一、DPPH自由基清除能力测定法DPPH自由基清除能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
DPPH（2,2-二苯基-1-苦味肼）是一种紫色自由基，其颜色随着氧化程度的增加而减弱。
在该方法中，将待测样品与DPPH溶液混合，通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够清除DPPH自由基，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降。
二、还原能力测定法还原能力测定法是通过测定待测样品对还原剂的还原能力来评估其抗氧化活性。
常用的还原剂包括铁离子、铜离子等。
在该方法中，将待测样品与还原剂混合，通过测定混合液的吸光度变化或还原剂浓度的变化来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够还原还原剂，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降或还原剂浓度的降低。
三、氧化脂质抑制能力测定法氧化脂质抑制能力测定法是通过测定待测样品对氧化脂质的抑制能力来评估其抗氧化活性。
常用的氧化脂质包括脂肪酸、脂肪油等。
在该方法中，将待测样品与氧化脂质混合，通过测定混合液中脂质的氧化程度来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够有效抑制氧化脂质的形成。
四、超氧阴离子清除能力测定法超氧阴离子是一种常见的自由基，具有较高的活性。
超氧阴离子清除能力测定法是通过测定待测样品对超氧阴离子的清除能力来评估其抗氧化活性。
常用的超氧阴离子产生体系包括NBT（硝基蓝盐）-NADH（尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸）体系、XTT（二苯基四唑盐）体系等。
在该方法中，将待测样品与超氧阴离子产生体系混合，通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。
抗氧化活性强的样品能够有效清除超氧阴离子，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降。
小鼠肾脏中抗氧化酶的表达
小鼠肾脏中抗氧化酶的表达肾脏是人体内一种非常重要的器官，其主要功能为排泄体内废物和调节体内电解质的平衡。
与此同时，肾脏也是人体内一个重要的抗氧化系统。
抗氧化剂是一种与自由基相互作用的物质，可以减少由于自由基过量引起的细胞损伤和氧化应激。
小鼠肾脏中的抗氧化酶也是这种抗氧化系统的一部分。
本文将简要介绍小鼠肾脏中的抗氧化酶的表达情况。
小鼠肾脏中的抗氧化酶种类小鼠肾脏中主要存在三种抗氧化酶，分别是超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）。
其中，SOD的主要作用是将细胞内的超氧自由基转化为较为稳定的分子氧和过氧化氢；CAT能够将细胞内的过氧化氢转化为氧和水；GPx主要作用是将细胞中的有机过氧化物转化为各种醇和水。
小鼠肾脏中的SOD表达情况小鼠肾脏中存在三种不同的SOD，分别是Cu/ZnSOD、MnSOD和EcSOD。
其中Cu/ZnSOD主要存在于细胞质和细胞外基质中；MnSOD存在于线粒体中；EcSOD则存在于细胞外基质中。
研究显示，小鼠肾脏中SOD的表达与细胞坏死和肾脏疾病有关。
具体来说，SOD的表达水平也与年龄、性别等因素有关。
小鼠肾脏中的CAT表达情况小鼠肾脏中CAT的表达量较低，但也具有一定的重要性。
一些研究显示小鼠肾脏CAT的表达与肾脏疾病、肾损伤等相关。
小鼠肾脏中的GPx表达情况小鼠肾脏中GPx的主要类型是GPx1、GPx3和GPx4。
研究显示小鼠肾脏之间的GPx的表达量差异较大，不同类型的GPx对于小鼠的生长发育、肾功能、细胞周期等都具有一定的影响。
小鼠肾脏中抗氧化酶对于肾脏疾病的影响抗氧化酶对于小鼠肾脏疾病的产生具有一定的影响。
研究表明，在肾脏疾病的过程中，氧化应激的程度会不断增高，导致小鼠肾脏中抗氧化酶的表达水平不断增加。
同时，抗氧化酶的表达也会对小鼠肾脏疾病的治疗产生影响。
结论综上所述，小鼠肾脏中抗氧化酶的种类较多，包括了SOD、CAT和GPx等多种类型。
抗氧化功能评价方法
附件1：抗氧化功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2 脂质氧化产物：丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素（8-Isoprostane）1.1.3 蛋白质氧化产物：蛋白质羰基1.1.4 抗氧化酶：超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶1.1.5 抗氧化物质：还原性谷胱甘肽1.2 人体试食试验1.2.1 脂质氧化产物：丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素（8-Isoprostane）1.2.2 超氧化物歧化酶1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶2 试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
2.2 脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8-表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定，动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。
2.3 氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
2.4 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验：脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性，可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。
3.2 人体试食试验：脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性，且对机体健康无影响，可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法Method for the Assessment of Antioxidative Function1 动物实验1.1 实验动物选用10月龄以上老龄大鼠或8月龄以上老龄小鼠，也可用氧化损伤模型鼠。
单一性别，小鼠每组10－15只，大鼠8－12只。
1.2 剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个溶剂对照组，以人体推荐量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中的一个剂量组，另设两个剂量组，高剂量一般不超过30倍，必要时设阳性对照组、空白对照组。
皮肤内抗氧化实验报告
皮肤内抗氧化实验报告实验目的：本实验旨在研究不同抗氧化物对皮肤内抗氧化能力的影响，并评估其对皮肤健康的潜在益处。
实验材料：1. 10只实验动物（例如小鼠）；2. 不同抗氧化物溶液，如维生素C、维生素E、多酚等；3. 生理盐水或其他溶剂，用于对照组；4. 测量抗氧化能力的相关试剂和仪器。
实验步骤：1. 将实验动物随机分为不同组别，每组尽量保持相似的体重和性别分布。
2. 对照组用生理盐水或其他溶剂按体重进行适量给药，其他组分别给予不同抗氧化物溶液。
3. 按照给药时间和剂量进行连续给药，确保每只实验动物获得相同剂量的抗氧化物。
4. 给药期间，定期观察实验动物的一般健康状况，记录体重变化，并注意可能的副作用。
5. 在给药结束后，使用相关的试剂和仪器，评估各组动物皮肤内抗氧化能力的变化。
可以使用抗氧化酶活性测定试剂盒、ROS（活性氧物种）产生测定试剂盒等进行检测。
6. 根据实验结果，进行统计学分析并得出结论。
实验结果：1. 记录各组实验动物的一般健康状况、体重变化和可能的副作用。
2. 测定各组动物皮肤内抗氧化能力的变化，并进行统计学分析。
实验结论：1. 根据实验结果，评估不同抗氧化物对皮肤内抗氧化能力的影响。
2. 探讨可能的机制和潜在的皮肤健康益处。
3. 提出进一步研究的建议，例如探索适宜剂量和给药时机，并进行长期观察等。
注意事项：1. 实验过程中应遵守实验室安全规范，确保操作安全。
2. 实验数据的收集和处理应严谨，保证实验结果的可靠性和准确性。
3. 与其他研究结果进行比较和讨论时应注意适当引用相关文献。
参考文献：(根据实际引用的文献进行添加)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
小鼠总抗氧化能力的测定
刘小美宋菊敏
（2006-10-24）
一、原理
机体中有许多抗氧化物质，能使Fe3＋还原成Fe2＋，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。
二、目的
1．掌握总抗氧化能力的测定方法。
2．观察血虚小鼠模型总抗氧化能力的变化。
3．观察中药对血虚小鼠模型总抗氧化能力的影响。
三、材料和方法
1．试剂：总抗氧化能力测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）
2．材料：EF管（1.5ml）120支，一次性试管（10ml）60支，移液器（P20ul、P100ul 、P1000ul）各2把及配套枪头各200支，玻璃比色皿（3ml，1cm光径）4只，温浴箱，分光光度计，漩涡混匀器1台，普通离心机大管、小管各1台，试剂瓶（125ml）1个，烧杯（150ml）2个，吸管（10ml）2支，吸球1支，量筒（200ml）1个，标签纸2张。
3．测定方法
（1）样本处理：取全血3500转/分离心15分钟得血清待测。
（2）试剂盒组成及配制：（50T）
试剂一：液体60ml×2瓶，40C保存。
试剂二：粉剂×2支，用时每支加双蒸水至120ml，室温保存。
试剂三：黄色贮备液10ml×1瓶，避光冷藏保存。
贮备液得稀释液60ml×1瓶。
试剂三应用液的配制：临用前取贮备液以稀释液稀释，比例为1：19。
需多少配制多少。
试剂四：溶液24ml×1瓶
试剂五：溶液24ml×1瓶，室温保存（天冷时会凝固，每次测试前适当加温以加速溶解，直至透明方可使用）。
——测组织中总抗氧化能力时用到，测血清时不用。
处测各管吸光度。
（370C时，每分钟每毫升血清使反应体系的吸光度（OD）值每增加0.01时，为一个总抗氧化能力单位）。
4）计算：
总抗氧化能力（单位/毫升血清）＝（测定管OD-对照管OD）÷0.01÷30×19
四、注意事项
1．室温放置10分钟后必须立即测定吸光度，否则吸光度会增加。
2．实验试剂用量较少，所以加量一定要仔细、准确。
3．每次加样后都必须在漩涡器上充分混匀。
4．难吸难打的试剂必须做到慢吸慢打。
五．思考题
1．小鼠血虚模型总抗氧化能力会出现什么样的变化？为什么会出现这样的变化？
2．怎样用本实验的结果解释模型动物的某些主要症状？
1。