凝血酶(Thrombin)使用说明
凝血酶时间测定
凝血酶时间测定
凝血酶时间（thrombin time，TT）测定主要用于纤溶治疗的监测；过筛检测纤维蛋白原缺陷、循环中有肝素、类肝素的存在等。
（一）检验原理
凝血酶法：在血浆中加入标准化的凝血酶溶液后，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，血浆凝固所需的时间即为凝血酶时间。
（二）检验方法学
1.试剂
凝血酶溶液用生理盐水调节至使正常血浆的凝固时间在16～18秒为宜。
2.标本采集
受检全血与0.109mol/L枸橼酸钠溶液或0.1mol/L草酸钠溶液作9∶1抗凝，充分混匀，1500r/min离心10分钟，以此制备乏血小板血浆。
3.标本检验
取玻璃小试管1支，加入受检血浆0.1ml，置37℃水浴中，再加入凝血酶溶液0.1ml，立即启动秒表，轻轻摇动试
管，记录血浆凝固时间，重复上述检测，取平均值。
（三）方法学评价
离心时间及特殊的标本类型均会对检测构成影响（详见凝血酶原时间测定）。
（四）质量保证
1.正常对照
每次使用的凝血酶试剂的活性不尽相同，故应以正常人混合血浆作正常对照。
2.检验温度
水浴温度应恒定在36～38℃，温度过高或过低均可使凝血酶时间延长。
3.检验周期
应在采血后4小时内完成检测，否则可使凝血酶时间假性延长。
（五）参考范围
16～18秒。
（六）临床意义
TT延长指超过正常对照3秒以上，主要见于肝素或类肝素物质增多，系统性红斑狼疮、肝脏疾病、肾脏疾病、低（无）
纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症及F（g）DP增多如DIC、原发性纤溶等。
凝血酶
凝血酶凝血酶科技名词定义中文名称：凝血酶英文名称：thrombin定义：编号：EC3.4.21.5。
在凝血过程中催化血纤蛋白原水解的酶，切去血纤蛋白原中肽A和B，成为血纤维单体。
其溶解度大大降低，能自发相互缔合形成不溶性的血纤维。
所属学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；酶（二级学科）本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布凝血酶，一种由凝血酶前体(血浆中的必要成分)形成的蛋白质水解酶,催化纤维蛋白元变成纤维蛋白而促使血液凝固。
用于毛细血管出血的局部止血以及外科手术后组织愈合。
【通用名】凝血酶 【药理毒理】 促使纤维蛋白原转化为纤维蛋白,应用于创口，使血液凝固而止血。
【适应症】 用于手术中不易结扎的小血管止血、消化道出血及外伤出血等。
【类别】局部止血药。
【制剂/规格】凝血酶无菌冻干粉末（1）200单位（2）500单位（3）1000单位（4）2000单位（5）5000单位（6）10000单位。
【贮藏】 密封，在4℃～10℃保存。
【生产企业】珠海经济特区生物化学制药厂、武汉海特生物制药股份有限公司、上海莱士血制品有限公司、华兰生物工程股份有限公司、长春海王生物制药有限责任公司、无锡凯夫制药有限公司、三九集团昆明白马制药有限公司、重庆希力药业有限公司、潜江市瑞康制药有限公司、江西赣南制药厂、山东日照海峰制药有限公司、海口圣宝生物制品有限公司、广西华兴生物制品有限公司、常州生物化学制药厂、四川省广元制药厂、甘肃诚信生化制药有限责任公司、南京比尔乐生化制药有限公司、南京生物化学制药厂、无锡市生物化学制药厂、杭康海洋生物药业股份有限公司、安徽省桑尼生物药业有限公司、济南军区生物制品药物研究所、武汉生物化学制药厂、丽珠集团苏州新宝制药厂、天津市川页生化制品有限公司、天津市金圆药品制造公司、黑龙江迪龙制药有限公司、上海复旦张江生物医药有限公司、上海生物化学制药厂、长春高斯达生化药业股份有限公司、大连白玉山制药厂、北京市第一生物化学制药厂、长春东方精优药业有限公司 【包装】管制抗生素瓶包装。
血凝酶说明书
血凝酶说明书
【别名】立止血(Reptilase)
【药理作用】
具有类凝血酶样作用及类凝血酶样作用，在钙离子的存在下，能活化凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ，并*** 血小板聚集；其类凝血激酶作用在血小板因子Ⅲ的存在下，可使凝血酶原变成凝血酶，也可使因子Ⅴ活化，并影响因子Ⅹ，因而本品具有凝血和止血双重作用，能缩短出血时间，减少出血量
【适应症】
用于治疗和防止原因的出血，如手术后出血，胃、肠、肾内脏出血，各种肿瘤出血，药物引起的出血，新生儿出血等。
【用量用法】
急性出血时，可静注，2KU/次（KU：克氏单位，1KU=150mg 蛇凝血素酶），5-10分钟生效，持续24小时。
非急性出血或预防出血时，可肌内或皮下注射，1-2KU/次，20-30分钟生效，持续48小时，用药次视情况而定，1日总量不超过8KU。
【注意事项】
1.不良反应发生率低，偶有过敏反应，可常规处理，给予抗组胺药或糖皮质激素及对症治疗。
2.在原发性纤溶亢进情况下，宜与抗纤溶酶药物合用。
治疗新生儿出血宜与维生素K合用。
3.动脉及静脉出血时，仍需进行手术处理，使用本品可减少出血量。
4.有血栓或栓塞病史者，孕妇禁用，DIC导致的出血禁用本品。
【规格】冻干粉针剂：1KU。
小鼠(Mouse)凝血酶受体(thrombin receptor,TR)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠（Mouse）凝血酶受体（TR/PAR-1）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被多聚ADP核糖聚合酶1（TR/PAR-1）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的多聚ADP核糖聚合酶1（TR/PAR-1）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、50、100、200、400、800μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
凝血因子名词解释
凝血因子名词解释凝血因子是指参与血液凝固过程的一组蛋白质，它们相互作用，在受伤时帮助止血。
凝血因子的功能是在伤口部位形成凝块，防止过多的出血。
以下是对一些常见凝血因子的详细解释：1. 纤维蛋白原（Fibrinogen）：纤维蛋白原是血浆中含量最高的凝血因子之一，它在凝血过程中转变为纤维素，形成凝块结构，起到止血的作用。
2. 凝血酶原（Prothrombin）：凝血酶原是另一种重要的凝血因子，它可以转化为凝血酶，是凝血反应的关键酶。
凝血酶能够将纤维蛋白原转化为纤维蛋白，进一步促进血液凝固。
3. 凝血酶（Thrombin）：凝血酶是由凝血酶原转化而来的酶，它是凝血过程中最重要的酶。
凝血酶具有多种功能，包括将纤维蛋白原转化为可溶性的纤维蛋白，促进血小板聚集，以及激活其他凝血因子。
4. 血浆前凝血酶原激活物（Factor XII）：血浆前凝血酶原激活物是凝血过程中的一个重要因子，它在受伤时会被活化，并开始启动凝血反应。
血浆前凝血酶原激活物的主要作用是激活其他凝血因子，引发凝血级联反应。
5. 血浆凝血因子VIII（Factor VIII）和IX（Factor IX）：血浆凝血因子VIII和IX是凝血过程中的另外两个关键因子。
这两个因子相互作用，形成一个复合物，然后被血浆凝血酶激活，最终促进纤维蛋白原的转化。
6. 血浆凝血因子V（Factor V）和X（Factor X）：血浆凝血因子V和X是参与凝血过程中的另外两个重要因子。
血浆凝血因子V能够与血浆凝血因子X相互作用，促进凝血反应的进行。
7. 血浆凝血因子ⅩⅢ（Factor XIII）：血浆凝血因子ⅩⅢ是凝血过程中的最后一个凝血因子。
它参与着纤维蛋白的交联，使血块更加稳定，从而更好地修复伤口。
凝血因子的正常运作对于维持人体的正常止血功能至关重要，任何凝血因子的缺陷或异常都可能导致出血或凝血异常的发生。
因此，对凝血因子的研究不仅有助于理解止血机制，还有助于治疗凝血相关疾病，以及指导临床上的血液凝固检测和诊断。
凝血酶(Thrombin)使用说明
凝血酶（Thrombin）使用说明货号：T8021规格：10000U保存：2-8℃保存，有效期3年。
溶解方法：可用生理盐水（0.9%NaCl溶液）配制，储存液参考浓度为1000U/ml，-20℃保存可稳定6个月。
为避免反复冻融，可分装冻存。
产品应用：一、凝血实验凝血酶（Thrombin）来源于牛血浆，分子量37KD，是由两条肽链（31KD和6KD）通过二硫键组成的。
凝血酶是凝血酶原（凝血因子Ⅱ）激活后形成的蛋白质水解酶，其催化纤维蛋白原（fibrinogen）水解掉A肽和B肽，由此形成纤维蛋白单体，单体进一步聚合，在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。
凝血酶酶活：固体活力：50-200单位/mg solid；比活力：比活力大于2000单位/mg protein；酶活检测方法：以纤维蛋白原为底物，按2010版药典凝血酶冻干粉检测。
产品稳定性好：冻干产品在室温条件下考察12个月，酶活力未见显著变化，冷藏条件下保存36个月，酶活力未见显著变化。
二、标签切割由于凝血酶具有切割序列专一性强，水解效率高的特点，它也被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶，凝血酶最佳切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸，一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和M-Y-P-R-G-N。
在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。
其他识别位点是X2-R[K]-X1',这里X2或者X1'是甘氨酸，例如A-R-G和G-K-A，这里切割发生在第二个残基后。
在凝血酶切割位点和N末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切，通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割，而且也可以避免可能发生的错误切割。
凝血酶使用说明书
切割级凝血酶
Thrombin from bovine plasma
产品描述：
凝血酶最适切割位点：A-B-Pro-Arg-▼-X-Y （其中，A和B为疏水氨基酸，X和Y为非酸性氨基酸），常见的识别序列为：1. Leu-Val-Pro-Arg-▼-Gly-Ser。
2. Gly-Arg-▼-Gly。
别名：凝血酵素；Factor IIa
性状：为白色冻干块状物或粉末
pH值：取本品加水制成100单位/ml的溶液，测定pH值应为5.0~6.0。
比活力：本品的比活力不得低于2000单位/mgpr。
12.5%浓度的分离胶，考马斯亮蓝染色。
供试品溶液制备：取本品加水制成每1ml中约含400NIH的溶液，取0.1ml加供试品溶液0.1ml，摇匀，临用前水浴3min~5min，上样量5ul。
分子量：37KD
等电点：7.02
活力范围：pH 5~10,最适pH 8.3
储存：10℃以下，密闭保存。
使用说明：
1、溶于水，配成的100u/ml储存液，根据使用量分配于不同的小管中，冻存于−20℃保存。
2、凝血酶对不同的融合蛋白切割效率是不一样的，首先要进行小量切割试验。
比如固定融合蛋白10ug，加不同量的凝血酶（如0.1U, 0.2U, 0.5U, 1U等), 在不同的温度(如4度, 16度, 室温或37度等)下进行试验。
摸好最佳条件后再进行扩大酶切实验。
沈阳拜英生物技术有限公司
沈阳市沈北新区京沈北街50号。
血凝酶简介
血凝酶简介目录•1拼音•2英文参考•3血凝酶说明书o 3.1药品名称o 3.2英文名称o 3.3血凝酶的别名o 3.4分类o 3.5剂型o 3.6血凝酶的药理作用o 3.7血凝酶的药代动力学o 3.8血凝酶的适应证o 3.9血凝酶的禁忌证o 3.10注意事项o 3.11血凝酶的不良反应o 3.12血凝酶的用法用量o 3.13血凝酶与其它药物的相互作用1拼音xuè níng méi2英文参考HemocoagulaseHx[湘雅医学专业词典]3血凝酶说明书3.1药品名称血凝酶3.2英文名称Hemocoagulase3.3血凝酶的别名巴曲亭；蝮蛇血凝酶；立血止；立止拉血；立止血；凝血酵素；蛇毒促凝血酶；蛇毒凝血酶；蛇凝血素酶；蛇毒血凝酶；Botropase；Heamocogulase Agkistrodon；Hemocoagulasum；Reptilase3.4分类血液系统药物 > 促凝血药3.5剂型冻干粉针剂：1KU。
3.6血凝酶的药理作用蛇毒血凝蛇毒血凝酶是从巴西矛头蝮蛇（Brothrops atrox）的毒液中分离、精制而得的一种酶类止血剂，不含神经毒素及其他毒素。
血凝酶具有类凝血酶样作用，能促进血管破损部位的血小板聚集，并释放一系列凝血因子及血小板因子3（PF3），使凝血因子Ⅰ降解生成纤维蛋白Ⅰ单体，进而交联聚合成难溶性纤维蛋白，促使出血部位的血栓形成和止血。
血凝酶在完整无损的血管内无促进血小板聚集的作用，也不激活血管内凝血因子ⅩⅢ，因此，它促进的由纤维蛋白Ⅰ单体形成的复合物，易在体内被降解而不致引起弥散性血管内凝血（DIC）。
3.7血凝酶的药代动力学血凝酶可口服、局部应用，静脉注射、肌内注射、皮下及腹腔给药也可吸收。
静脉注射后5～10min起效，止血效应持续24h；肌内或皮下注射后20min起效，药效持续48h。
进入体内的酶被逐步代谢，降解产物随尿排出体外。
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凝血酶（Thrombin）使用说明
货号：T8021
规格：10000U
保存：2-8℃保存，有效期3年。
溶解方法：
可用生理盐水（0.9%NaCl溶液）配制，储存液参考浓度为1000U/ml，-20℃保存可稳定6个月。
为避免反复冻融，可分装冻存。
产品应用：
一、凝血实验
凝血酶（Thrombin）来源于牛血浆，分子量37KD，是由两条肽链（31KD和6KD）通过二硫键组成的。
凝血酶是凝血酶原（凝血因子Ⅱ）激活后形成的蛋白质水解酶，其催化纤维蛋白原（fibrinogen）水解掉A肽和B肽，由此形成纤维蛋白单体，单体进一步聚合，在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。
凝血酶酶活：固体活力：50-200单位/mg solid；比活力：比活力大于2000单位/mg protein；
酶活检测方法：以纤维蛋白原为底物，按2010版药典凝血酶冻干粉检测。
产品稳定性好：冻干产品在室温条件下考察12个月，酶活力未见显著变化，冷藏条件下保存36个月，酶活力未见显著变化。
二、标签切割
由于凝血酶具有切割序列专一性强，水解效率高的特点，它也被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。
凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶，凝血酶最佳切割位点是
X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸，一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和M-Y-P-R-G-N。
在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。
其他识别位点是X2-R[K]-X1',这里X2或者X1'是甘氨酸，例如A-R-G和G-K-A，这里切割发生在第二个残基后。
在凝血酶切割位点和N末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切，通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割，而且也可以避免可能发生的错误切割。
作为切割标签的蛋白酶具有以下特点：
1.纯度高：SDS-PAGE检测图谱无杂蛋白条带；
2.不含有其他蛋白酶活性；
3.酶切活性高，能够有效切质量比为1:1000的蛋白。
切割可在20℃到37℃之间
切割0.3到16小时。
4.有效的酶切缓冲液是20mM Tris-HCl缓冲液,含150mM氯化钠，pH8.0。
5.凝血酶可从切割产物中用p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者苯甲脒琼脂糖移去。
酶切条件：
凝血酶酶切条件举例：20mM Tris-HCl缓冲液，含150mM NaCl，pH8.0体系中：
融合蛋白总量100µg
凝血酶用量0.2-0.3U
温度20℃-37℃
酶切时间0.3h-16h
根据底物蛋白酶切位点的差异，可以适当调整凝血酶的工作浓度与酶切时间，以便达到较好的酶切效果。