组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药细胞株中的表达
组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药细胞株中的表达（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的:研究组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在培美曲塞诱导的胰腺癌耐药细胞株Puta8988中的基因和蛋白表达水平，以明确HIST1H2AC和HIST1H2BC基因与胰腺癌耐药的关系。
方法:以两种剂量的培美曲塞诱导胰腺癌细胞株Puta8988，使其形成两个等级的获得性耐药细胞株Puta8988+、Puta8988++。
采用qRT PCR和Western blotting方法分别检测HIST1H2AC和HIST1H2BC在耐药细胞株及其亲本(对照)中的基因和蛋白表达水平。
结果:qRT PCR检测结果显示，组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药株Puta8988+和Puta8988++中的表达水平显著上调(P0.05);Western blotting检测结果显示，组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在胰腺癌耐药株Puta8988+和Puta8988++中的蛋白表达水平也显著上调(P0.05)。
结论：胰腺癌细胞株经培美曲塞诱导后，其组蛋白HIST1H2AC 和HIST1H2BC在基因和蛋白表达水平上均出现上调，提示HIST1H2AC 和HIST1H2BC基因可能与耐药有关。
【关键词】 HIST1H2AC; HIST1H2BC; 胰腺癌; Puta8988; 培美曲塞;表达[Abstract] Objective: To investigate the expression of HIST1H2AC and HIST1H2BC genes in pancreatic cancer cell line Puta8988 treated with pemetrexed, and to verify the relationship between the genes and pemetrexed resistance. Methods: Pancreatic cancer cell line Puta8988 was treated with two doses of pemetrexed to get Puta8988+ and Puta8988++ with pemetrexed resistance, and the expression levels of HIST1H2AC and HIST1H2BC and their genes in Puta8988, Puta8988+ and Puta8988++ were detected by qRT PCR and Western blotting respectively. Results: Results detected by qRT PCR showed that expression levels of HIST1H2AC and HIST1H2BC genes were significantly up regulated in Puta8988+ and Puta8988++(P0.05). Results detected by Western blotting showed that expression levels of HIST1H2AC and HIST1H2BC were also significantly up regulated in those cell lines with pemetrexed resistance(P0.05). Conclusion: Expressions of HIST1H2AC and HIST1H2BC and their genes in pancreatic cancer cell line Puta8988 treated with pemetrexed are significantly up regulated, which implies that these genes possibly plays a role in pemetrexed resistance of pancreatic cancer cell lines.[Key words] HIST1H2AC; HIST1H2BC; pancreatic cancer; Puta8988; pemetrexed; expression胰腺癌起病隐匿，手术切除率低，对传统放化疗不敏感，死亡发病比达98%，5年生存率6%[1-2]，是威胁人类健康的“隐秘杀手”。
近年来的研究表明，辅助化疗有比传统化疗更好的疗效，已被认为是与手术治疗同样重要的治疗方法。
与此同时，多种针对胰腺癌的靶向药物也在不断被发现。
然而，耐药现象的存在仍然是导致辅助化疗效果欠佳或失败的主要原因。
揭示胰腺癌化疗的耐药机制，建立更有效的化疗方法已成为国内外研究的重点[3];而从分子生物学的层面来研究和寻找耐药基因，然后给予必要的干预，以提高辅助化疗疗效的研究已成为当前最为关注的热点[4]。
已有的研究表明，胰腺癌耐药性与MDR1(multidrug resistance1)、MRP(multidrug resistance associated protein gene)、LRP(lung resis 2 tance protein)、Bcl2(B cell lym phoma/leuke2)以及P53等基因有关，而这些基因的一个共同特点是与其他癌症的耐药性也有关[5]。
这就提示我们可以借鉴其他癌症发现的耐药基因研究胰腺癌的耐药机制。
有报道指出，组蛋白HIST1H2AC(Histone 1,H2ac)和HIST1H2BC(Histone 1,H2bc)基因与乳腺癌耐药性密切相关[6]。
然而，它们是否在胰腺癌耐药细胞株中表达至今很少有报道。
本实验针对胰腺癌耐药细胞株中HIST1H2AC和HIST1H2BC在基因和蛋白水平上的表达情况开展研究，以探讨它们与胰腺癌耐药的关系及其可能的分子机制，为研发对抗和逆转耐药的新方法提供新的靶点。
1 材料与方法1.1 材料人胰腺癌细胞株：采用由东南大学中心实验室保存的人胰腺癌细胞株Puta8988。
主要试剂：DMEM高糖培养基、胰蛋白酶为美国GIBCO 公司产品，胎牛血清为杭州四季青公司产品，TRIZOL细胞裂解液为美国Invitrogen公司产品，培美曲塞(pemetrexed)为法国礼来公司产品，HIST1H2AC单克隆抗体和HIST1H2BC多克隆抗体为美国Abnova 公司产品，二抗(羊抗小鼠 IgG HRP)为南京凯基生物公司，PDVF膜为美国PALL公司产品，PCR引物由南京凯基生物公司合成。
主要仪器：北京泰克生物技术有限公司Realtime PCR Master Mix(SYBR Green)，日本Nikon公司倒置相差显微镜，美国BECKMAN公司高速冷冻离心机，美国Bio Rad公司电泳仪等。
1.2 方法1.2.1 细胞培养胰腺癌细胞株Puta8988，以1/2 IC50浓度的培美曲塞作耐药诱导，形成耐药细胞株Puta8988+。
将培美曲塞浓度增加1倍再次作耐药诱导，形成耐药细胞株Puta8988++。
Puta8988+、Puta8988++培养在含10%胎牛血清的DMEM培养基中，37 ℃、5%CO2条件下培养，隔天换液，细胞长满单层后用2.5 g·L-1胰蛋白酶消化传代。
1.2.2 实时荧光逆转录聚合酶链反应(qRT PCR) 细胞总RNA提取按照Trizol试剂盒说明进行。
逆转录合成cDNA的反应总体积为20 μl，RT的反应条件是：37 ℃温育30 min后，升温至65 ℃加热5 min，然后4 ℃冷却5 min，瞬时离心。
先在37 ℃保温1 h，然后70 ℃保温15 min。
反应产物行下一步扩增或-20 ℃保存。
根据Gene Bank中HIST1H2AC、HIST1H2BC的cDNA序列用Primer 5.0设计特异性扩增引物，见表1。
采用25 μl总反应体系：2×RTmix 12.5 μl;模板(cDNA稀释10倍) 1 μl;引物5 pmol·μl-1 mix 1 μl;双蒸水10.5 μl扩增条件：95 ℃ 5 min，94 ℃ 15 s、表1 PCR所用的引物序列及扩增产物大小60 ℃ 30 s，45个循环。
一个样本做3个复孔，在96孔板中上样定量检测。
1.2.3 Western blotting 分别从培养好的细胞株提取细胞总蛋白进行定量，细胞总蛋白量为70 μg，将3组细胞的蛋白质常规PAGE 凝胶电泳并转移至PVDF膜，用5%脱脂奶粉封闭液中室温封闭1 h后加入封闭液和一抗HIST1H2AC抗体(1∶500)，HIST1H2BC抗体(1∶500)。
在4 ℃下摇床摇荡孵育过夜。
PBST漂洗滤膜4次，每次10 min。
将膜与HRP结合的二抗(辣根过氧化酶标记抗体, 二抗用封闭液稀释1∶5 000)室温下摇荡孵育1 h，然后用PBST充分洗膜，漂洗4次，每次10 min。
暗室中迅速将膜蛋白贴在X线胶片上曝光，直至出现最佳条带。
1.3 统计学处理实验数据以±s表示，采用Prism软件包分析，组间比较用t检验，P0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 qRT PCR检测HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在不同耐药处理胰腺癌细胞株中的表达水平以目标基因拷贝数与βactin拷贝数之比乘以100为HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在不同耐药处理胰腺癌细胞株Puta8988中的相对表达水平，实时荧光PCR检测结果(图1)表明，1/2 IC50浓度培美曲塞诱导的耐药细胞株Puta8988+，其HIST1H2AC基因的相对表达水平调高，由其亲本Puta8988(对照)的0.340±0.070提高到1.577±0.276，上升幅度达 4.64倍。
如果培美曲塞的浓度加倍，Puta8988++中HIST1H2AC基因的相对表达水平进一步提高，达2.000±0.185，是对照的 5.88倍，各处理间的差异均达到显著水平(P0.05)。
HIST1H2BC基因在上述耐药细胞株及其亲本中的表达水平也有同样的趋势，但就其相对表达量而言，要比HIST1H2AC的低，在Puta8988、Puta8988+、Puta8988++中分別为0.027±0.003、0.153±0.023和0.623±0.048，在Puta8988+、Puta8988++中HIST1H2BC 的mRNA相对表达水平分别比对照(Puta8988)调高5.67倍和23.07倍，各处理间的差异也达到了显著水平(P0.05)。
【国家自然科学基金】_胰腺癌细胞株_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140730
科研热词 胰腺肿瘤 胰腺癌 细胞增殖 基因治疗 转移 胰腺癌细胞株 模型 基因表达 rna干扰 钾通道 连环蛋白p120 辅助 转染 血管形成 血管内皮生长因子 获得性耐药 腺病毒 脱噬作用 胰腺腺管内上皮瘤 胆道肿瘤 肿瘤特异性启动子 肿瘤干细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肿瘤侵润 肿瘤 肝癌模型 细胞系 细胞凋亡 红色荧光蛋白 糖蛋白类 神经 甲基化 生长抑素受体 激活剂/低等电点iap结合蛋白 树突状细胞 标记物 抑癌基因 慢病毒载体 微重力 多药耐药基因1 培美曲塞 吉西他滨 化学疗法 动物 内皮抑素类 仓鼠 丝氨酸内肽酶类 x-连锁凋亡抑制蛋白 survivin smad4基因 sirna干扰 sirna
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38
科研热词 胰腺肿瘤 胰腺癌 鉴定 逆转录聚合酶链式反应 药物筛选试验 胶原微滴肿瘤药敏检测 胰腺癌细胞株patu8988 胰腺干细胞 肿瘤转移 肿瘤干细胞 肿瘤,实验性 肝脏 细胞株,肿瘤 细胞增殖 组织 真核表达 真核延伸因子1a2,人类 球形体,细胞 标志物 抗药性,肿瘤 慢病毒属 干细胞 小鼠,裸 基因转染 基因,cdc 分离 出核 克隆 人胰腺癌细胞系 western blot src rna,小分子干扰 mapk hpac cdc25b基因 bxpc-3 brcal braf
2011年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
HDAC2 siRNA转染人胰腺癌细胞对Bax和Bcl-2基因表达的影响
照组 、 Ｎ ｅ ｇ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｓ ｉ Ｒ ＮＡ 组 、 ＨＤ ＡＣ ２ Ｓ ｉ ＲＮ Ａ 组， 合成 针对 ＨＤ ＡＣ ２基 因的 ｓ ｉ Ｒ ＮＡ， 利 用 阳离子脂 质 体 （ Ｌ ｉ ｐ ｏ ｆ ｅ ｃ ｔ ａ ｍｉ ｎ ｅ
２ ０ ０ ０ ） 将 ＨＤＡ Ｃ ２ ｓ ｉ ＲＮＡ瞬时转染人胰腺癌细胞 Ｐ ａ Ｔ ｕ ８ ９ ８ ８ ， 应用免疫 印迹法 （ Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ） 检测 Ｂ ａ ｘ和 Ｂ ｃ ｌ － ２的表 达 。 结果 ： 与对照组和 Ｎｅ ｇ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｓ ｉ Ｒ ＮＡ组对 比 ， ＨＤ ＡＣ ２ ｓ ｉ Ｒ ＮＡ组 的 Ｂ ａ ｘ 蛋 白表 达增 加（ Ｐ＜Ｏ ． ０ １ ） ， Ｂ ｃ ｌ － ２蛋 白的表达降低
Ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｓ ｉ ＲＮＡ－ ｍｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ＨＤＡＣ２ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｅｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ａｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ － ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ Ｇｅ ｎ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｂａ ｘ ａ ｎ ｄ Ｂｃ ｌ － ２ ｉ ｎ Ｈｕ ｍａ ｎ Ｐ ａ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｃ Ｃａ ｎ ｃ ｅ ｒ Ｃｅ ｌ Ｉ ｓ Ｐ ａ Ｔｕ ８ ９ ８ ８
（ Ｐ＜ Ｏ ． ０ １ ） 。 结论 ： 采用 ｓ ｉ Ｒ ＮＡ 干 扰 沉 默 人 胰 腺 癌 细胞 ＨＤ Ａ Ｃ ２基 因 ， 可增加 Ｂ ａ ｘ的表 达 ， 抑制 Ｂ ｃ ｌ － ２的 表 达 。 关键词 胰腺癌 组 蛋 白去 乙酰 化 酶 ２ 小 ＲＮＡ 干 扰 细胞凋亡 Ｂ ａ ｘ基 因 Ｂ ｃ ｌ － ２ 基 因 中图 分 类 号 ： Ｒ ７ ３ ５ ． ９ 文献标识码 ： Ａ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ９ ３ ８ １ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ １ — ７ ５ ８ ５ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ６ ． ０ ０ ８
胰腺特异性表达Hes1基因的构建及体外表达
胰腺特异性表达Hes1基因的构建及体外表达魏静;杨希祥;石宁宁;宋小凤;冯冲;潘登科;臧荣鑫【期刊名称】《西北民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(036)002【摘要】为了探究胰腺的发育机制,以及制备胰腺缺陷型的小型猪模型,构建了特异性表达载体,开展了相关载体构建及体外验证研究.本研究以小鼠PDX1启动子为特异性启动元件,构建胰腺特异性启动小鼠Hes1基因的表达载体PDX1-Hes1,载体转染MIN-6胰岛β细胞、猪耳成纤维细胞及猪肾细胞,培养48 h后,通过qRT-PCR、Western Blot检测.结果显示:Hes1在MIN-6胰岛β细胞中的RNA水平和蛋白水平均高效表达,而在非胰腺细胞猪耳成纤维细胞及猪肾细胞中均不表达.试验表明:胰岛特异性表达载体PDX1-Hes1的成功获得,为构建相关基因在胰腺中特异性表达的载体提供参考,为后续制备胰腺缺陷型的小型猪提供了条件.【总页数】5页(P16-20)【作者】魏静;杨希祥;石宁宁;宋小凤;冯冲;潘登科;臧荣鑫【作者单位】西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.人内皮细胞特异性分子-1表达载体的构建、体外表达及初步纯化 [J], 张素梅;王雪;胡若磊;朱华庆;熊江霞;周青;桂淑玉;汪渊2.猪胰岛素启动子序列分析及调控基因在胰腺组织特异性表达验证 [J], 胡炳俊;王超群;阮进学;辛磊磊;牟玉莲;杨述林;李奎3.奶牛溶菌酶基因(Lyz)乳腺特异性表达质粒构建与鉴定 [J], ZHANG Zhipeng;JIANG Jingyi;XIA Hailei;JI Dejun;LI Mingxun;YANG Zhangping4.人AFP启动子操控的跨膜型抗CD3单链抗体构建及其在AFP阳性肝癌细胞中特异性表达 [J], 祁麟; 熊梦裳; 林芳珍; 卢杨; 熊冬生; 张砚君; 范冬梅; 张晴5.EBV特异性CTL相关TCR Vα-pIRES-TCR Vβ重组质粒的构建及体外表达 [J], 吴秀丽;李扬秋;朱康儿;杨力建;陈少华;Piotr Grabarczyk;GrzegorzK.Przybylski;Christian A.Schmidt因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基因组的监视器：组蛋白H2AX
基因组的监视器：组蛋白H2AX于琳;孙青;石彦明【期刊名称】《中国肿瘤生物治疗杂志》【年(卷),期】2006(13)2【摘要】组蛋白H2A变体H2AX在离其肽链C端4个氨基酸处存在一个高度保守的丝氨酸残基(Ser-139),DNA双链断裂(DSB)一经产生,该残基便能迅速被磷酸化,形成γ-H2AX。
γ-H2AX识别抗体是探测DSB存在的金标准；H2AX在细胞周期关卡中起重要作用,H2AX(?)细胞不能正确停止在G2期并进入有丝分裂期；H2AX的丧失不影响V(D)J重排,但有效的类型转换重组需要H2AX；H2AX还在细胞分裂中起重要作用。
总之,H2AX是基因组的监视器,DNA损伤一旦发生,H2AX 的磷酸化即会被启动,然后招募更多的修复因子共同修复DNA损伤；H2AX在抑制基因组不稳定和癌症放疗疗效预测方面具有一定的作用。
【总页数】3页(P156-158)【关键词】H2AX;DNA双链断裂;DNA修复;基因组不稳定;放射治疗【作者】于琳;孙青;石彦明【作者单位】泰山医学院研究生部;山东省千佛山医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R730.4【相关文献】1.DNA修复蛋白磷酸化组蛋白H2AX在胃癌中的表达及其意义 [J], 杨小丽;吕文鑫;窦东伟;李萍;吴华2.基于流式细胞术的组蛋白γ-H2AX磷酸化检测方法的建立 [J], 黄鹏程;周长慧;李申宁;常艳3.利用原代肝细胞模型检测细胞内磷酸化组蛋白H2AX表达筛选遗传毒物的方法验证 [J], 孟涛;苗盼盼;纪玉青;牛勇;宾萍;戴宇飞;郑玉新4.组蛋白H2AX研究进展及其与肿瘤的关系 [J], 张艳君;李炳杰5.组蛋白H2AX与肿瘤关系研究进展 [J], 应小平;吴肖晓;方艳;王小平;郭兰生;赵延红;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
组蛋白修饰与癌症表观遗传学
组蛋白修饰与癌症表观遗传学组蛋白修饰是指对组蛋白分子进行修饰，从而影响基因的表达和细胞功能的一种生物学过程。
这一过程的发现和研究为了解人类疾病的发生和发展提供了重要线索。
尤其是在癌症表观遗传学中，组蛋白修饰被认为是一个重要的关键点。
人类胚胎发育和细胞分化的调控与组蛋白修饰息息相关，基因转录调节、DNA修复、染色体结构和维持等生命活动都与组蛋白修饰密切相关。
组蛋白是一种非常基础的蛋白质，与 DNA 紧密结合，构筑出染色体结构，从而对蛋白质和基因的调控起到重要作用。
组蛋白通过化学修饰，包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化等，可以影响其在染色质上的结构和特异性，从而影响基因的转录、复制和修复。
癌症细胞的产生与组蛋白修饰有密切关系。
癌症细胞的基因转录调节异常，导致了一系列基因的过度表达或者抑制，从而造成了细胞生长、增殖和转移的异常变化。
组蛋白修饰通过影响基因转录的起始和终止，可以影响基因表达量和选择性，从而影响细胞周期和增殖。
例如，在许多癌症中，包括肝癌、结直肠癌和乳腺癌等，都发现了一些与乙酰化或甲基化相关的不正常基因表达。
这些基因的异常表达被认为是肿瘤细胞在癌症发生和发展过程中的一个关键因素。
组蛋白修饰与癌症治疗密切相关。
许多癌症治疗方法都需要涉及到组蛋白修饰的机制。
例如，组蛋白去乙酰化剂是常用的癌症治疗药物之一，用于控制肿瘤细胞的增殖和转移。
组蛋白去乙酰化剂可以通过调节基因转录，促进癌细胞向正常细胞分化，从而达到治疗癌症的效果。
另一方面，针对组蛋白修饰机制的药物还可以在某些癌症领域进行个体化治疗。
例如，临床上某些对组蛋白去乙酰化剂不敏感的肿瘤，可能更加敏感于其它组蛋白修饰药物的干预，从而实现癌症治疗的个体化。
结语：总之，组蛋白修饰在癌症表观遗传学中是一个非常重要的领域。
通过审视组蛋白修饰机制在癌症进程中扮演的重要作用，我们可以更好地了解肿瘤发生和进展的机制，研究和设计治疗药物，从而实现癌症的精准治疗。
组蛋白去乙酰化酶1 siRNA对HeLa细胞生长和凋亡的影响
组蛋白去乙酰化酶1 siRNA对HeLa细胞生长和凋亡的影响李娜;于世英【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(039)001【摘要】目的研究组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases-1,HDAC-1)siRNA对宫颈癌HeLa细胞HDAC-1蛋白表达、细胞生长和凋亡的影响.方法HDAC-1 siRNA沉默HDAC-1蛋白;Western blot技术检测HDAC-1蛋白;MTT 法和克隆形成实验检测细胞生长抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 HDAC-1 siRNA转染48 h可明显下调HeLa细胞HDAC-1蛋白表达;下调HDAC-1 表达明显降低HeLa细胞克隆形成率,抑制细胞增殖;下调HDAC-1诱导HeLa细胞凋亡.结论 HDAC-1 siRNA可能通过诱导凋亡抑制HeLa细胞生长.【总页数】4页(P47-49,58)【作者】李娜;于世英【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.组蛋白去乙酰化酶1 siRNA对人宫颈癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响 [J], 邢静;吴维光;闫红亮;王筝;孙兆翎;唐雅娟2.RUNX2在宫颈鳞癌组织中的表达及其siRNA对Hela229细胞RUNX2表达及细胞增殖与凋亡的影响 [J], 张威;郭文涛;曾宪旭;班振英3.Rab1A siRNA对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制 [J], 段钊;公丕军;杜娟;付丽丽4.siRNA抑制X连锁凋亡抑制蛋白基因对人HeLa细胞凋亡及周期的影响 [J], 唐薇薇;郑洪;厉国慧;王琳琳5.miRNA-21siRNA对宫颈癌Hela细胞周期及细胞凋亡的影响 [J], 徐文莉;廖长征;罗艺;林燕华;张洪德因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药细胞株中的表达
组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药细胞株中的表达（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的:研究组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在培美曲塞诱导的胰腺癌耐药细胞株Puta8988中的基因和蛋白表达水平，以明确HIST1H2AC和HIST1H2BC基因与胰腺癌耐药的关系。
方法:以两种剂量的培美曲塞诱导胰腺癌细胞株Puta8988，使其形成两个等级的获得性耐药细胞株Puta8988+、Puta8988++。
采用qRT PCR和Western blotting方法分别检测HIST1H2AC和HIST1H2BC在耐药细胞株及其亲本(对照)中的基因和蛋白表达水平。
结果:qRT PCR检测结果显示，组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC基因在胰腺癌耐药株Puta8988+和Puta8988++中的表达水平显著上调(P0.05);Western blotting检测结果显示，组蛋白HIST1H2AC和HIST1H2BC在胰腺癌耐药株Puta8988+和Puta8988++中的蛋白表达水平也显著上调(P0.05)。
结论：胰腺癌细胞株经培美曲塞诱导后，其组蛋白HIST1H2AC 和HIST1H2BC在基因和蛋白表达水平上均出现上调，提示HIST1H2AC 和HIST1H2BC基因可能与耐药有关。
【关键词】 HIST1H2AC; HIST1H2BC; 胰腺癌; Puta8988; 培美曲塞;表达[Abstract] Objective: To investigate the expression of HIST1H2AC and HIST1H2BC genes in pancreatic cancer cell line Puta8988 treated with pemetrexed, and to verify the relationship between the genes and pemetrexed resistance. Methods: Pancreatic cancer cell line Puta8988 was treated with two doses of pemetrexed to get Puta8988+ and Puta8988++ with pemetrexed resistance, and the expression levels of HIST1H2AC and HIST1H2BC and their genes in Puta8988, Puta8988+ and Puta8988++ were detected by qRT PCR and Western blotting respectively. Results: Results detected by qRT PCR showed that expression levels of HIST1H2AC and HIST1H2BC genes were significantly up regulated in Puta8988+ and Puta8988++(P0.05). Results detected by Western blotting showed that expression levels of HIST1H2AC and HIST1H2BC were also significantly up regulated in those cell lines with pemetrexed resistance(P0.05). Conclusion: Expressions of HIST1H2AC and HIST1H2BC and their genes in pancreatic cancer cell line Puta8988 treated with pemetrexed are significantly up regulated, which implies that these genes possibly plays a role in pemetrexed resistance of pancreatic cancer cell lines.[Key words] HIST1H2AC; HIST1H2BC; pancreatic cancer; Puta8988; pemetrexed; expression胰腺癌起病隐匿，手术切除率低，对传统放化疗不敏感，死亡发病比达98%，5年生存率6%[1-2]，是威胁人类健康的“隐秘杀手”。
胰腺癌患者血清外泌体酪氨酸蛋白激酶受体EphA2蛋白表达变化及其意义
胰腺癌患者血清外泌体酪氨酸蛋白激酶受体EphA2蛋白表达变化及其意义魏倩，李泽，冯红蕾天津医科大学肿瘤医院/国家肿瘤临床医学研究中心/天津市肿瘤防治重点实验室/天津市恶性肿瘤临床医学研究中心，天津300060摘要：目的观察胰腺癌患者血清外泌体酪氨酸蛋白激酶受体EphA2蛋白表达变化，并探讨其临床意义。
方法选取胰腺癌患者105例（胰腺癌组）、同期体检健康者70例（健康组），采用酶联免疫法检测两组血清外泌体EphA2蛋白。
以胰腺癌患者血清外泌体EphA2蛋白表达水平中位数为临界值，将105例胰腺癌患者分为EphA2蛋白高表达者、EphA2蛋白低表达者，分析血清外泌体EphA2蛋白表达水平与胰腺癌患者临床病理参数的关系。
以胰腺癌患者血清外泌体EphA2蛋白表达水平中位数为临界值，将随访资料完整的胰腺癌患者分为EphA2蛋白高表达组、EphA2蛋白低表达组，采用Kaplan-Meier生存分析法分析血清外泌体EphA2蛋白表达水平与胰腺癌患者预后的关系。
结果胰腺癌组、健康组血清外泌体EphA2蛋白表达水平分别为（1956±216）ng/L、（474±51）ng/L，两组相比，P<0.05。
血清外泌体EphA2蛋白表达水平与胰腺癌TNM分期、淋巴结转移有关（P均<0.05），与患者的性别、年龄、吸烟史、酗酒史无关（P均>0.05）。
EphA2蛋白高表达组3年生存率为14.9%，EphA2蛋白低表达组3年生存率为37.7%，两组相比，P<0.05。
结论胰腺癌患者血清外泌体EphA2蛋白表达水平升高，与胰腺癌TNM分期、淋巴结转移有关；血清外泌体EphA2蛋白高表达的胰腺癌患者3年生存率低于低表达者。
关键词：酪氨酸蛋白激酶受体EphA2；外泌体；胰腺肿瘤；胰腺癌doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2021.09.008中图分类号：R735.9文献标志码：A文章编号：1002-266X（2021）09-0031-04Expression changes of Exo-EphA2in pancreatic cancer and its clinic significanceWEI Qian，LI Ze，FENG HongleiTianjin Medical University Cancer Institute and Hospital，Tianjin300060，ChinaAbstract：Objective To observe the expression changes of serum exosomal erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2（Exo-EphA2）in the pancreatic cancer（PC）patients and to explore its clinic significance.Methods The levels of serum Exo-EphA2in105pancreatic cancer patients and70healthy controls were assessed by ELISA.By taking the median level of serum Exo-EphA2protein expression in PC patients as the critical value，we divided105PC patients into the high Exo-EphA2expression group and low Exo-EphA2expression group.The relationship between serum Exo-EphA2levels and clinicpathological characteristics was analyzed.Base on the median level of serum Exo-EphA2protein expression in PC patients，100PC patients with complete clinical data were divided into the high Exo-EphA2expression group and low Exo-EphA2expression group.Kaplan-Meier test was used to analyze the relationship between serum Exo-EphA2and patients’prognosis.Results The levels of serum Exo-EphA2in PC and healthy controls were（1956±216）and（474±51）ng/L，respectively；serum Exo-EphA2level was significantly higher in PC patients than in healthy controls （P<0.05）.The expression level of serum Exo-EphA2was related to TNM stage and lymph node metastasis（both P<0.05），but not to gender，age，smoking or drinking（all P>0.05）.The3-year survival rate was14.9%in the high Exo-EphA2expression group and37.7%in the low Exo-EphA2expression group，with statistically significant difference（P<0.05）.Conclusion The expression of serum Exo-EphA2increases significantly in the PC patients，which is relatedwith TNM stage and lymph node metastasis；the3-year survival rate of patients with high expression of Exo-EphA2is lower than that of patients with low expression of Exo-EphA2.Key words：erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2；exosomes；pancreatic neoplasms；pancreatic carcinoma基金项目：国家自然科学基金资助项目（81702996）。
组蛋白H2A衍生抗菌肽的重组表达及活性分析
组蛋白H2A衍生抗菌肽的重组表达及活性分析【摘要】：目前,由于食品生产、农业生产和医药卫生等领域中抗生素的广泛使用,造成病原菌耐药性的提高以及抗生素残留等诸多危及人类健康的问题。
因此,目前人们急需寻找一种高效、广谱、安全的新型抗菌剂替代传统抗生素。
由于抗菌肽独特的抗菌机制,不易使病原菌产生耐药性,具有广谱的抗菌活性等优点,它在治疗学领域,畜牧业,食品防腐剂等己被用来作为新一代的抗微生物剂。
已报道的抗菌肽超过2000种,这些抗菌肽携带净正电荷并且大多数倾向于形成两亲的α-螺旋结构。
组蛋白衍生的抗菌肽(histone-derivedantimicrobialpeptides,)是组蛋白在某种机制作用下被降解、修饰和分泌出的一种小分子多肽。
基于HDAPs具有体外抗菌活性,本研究在对四膜虫及人类组蛋白H2A分析的基础上,通过基因工程技术,构建四膜虫及人类组蛋白H2A 衍生的抗菌肽的高效融合表达载体,在大肠杆菌表达系统成功实现四膜虫组蛋白H2A衍生抗菌肽(Tetrahymenathermophilahistone-derivedantimicrobialpeptides,ThAP)和人类蛋白H2A衍生抗菌肽(Humanhistone-derivedantimicrobialpeptides,HhAP)的重组表达,对重组蛋白的抑菌活性进行研究,实验结果如下：(1)ThAP和HhAP基因的设计合成根据四膜虫及人类组蛋白H2A序列,设计H2A衍生的HDAPs:ThAP和HhAP肽序列,利用大肠杆菌偏爱密码子表,合成在大肠杆菌中高效表达的组蛋白衍生物抗菌肽基因片段ThAP和HhAP,并构建于克隆载体pUC57上(2)ThAP和HhAP生物信息学分析通过抗菌肽数据库网站及SOPMA程序在线分析了ThAP和HhAP氨基酸残基的分子量大小、净电荷数、两亲性、等电点、二级结构及三级结构等,预测结果显示：ThAP和HhAP蛋白质分子量分别为2.15KD.2.22KD:ThAP主要由α螺旋结构组成,占57.89%,HhAP主要由α螺旋(43%)和无规卷曲结构(38%)组成。
组蛋白修饰在胰腺癌预后和疗效预测中的作用
年 获 国 家杰 出青 年科 学基 金 。 为 国 家基 金委 重 大项 目及 杰 出青年 科 学基金 评 审 专 家、 现 多家 国际肿 瘤专 业
期刊 审稿 专 家、 国 Ｃ ｎ ｅ ｅｅｒｈＵ 基 金评 审 专 家。 英 ａ ｃｒＲ ｓａｃ Ｋ
［ 关键词 ］ 胰腺肿瘤 ； 免疫组化 ； 组蛋 白修饰 ； 预后 ［ 中图分类号 ］ Ｒ ３ ． ７ ５９ 【 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ １７ — １４ ２ １ ）３ ０ ３ — ３ ６ １５ ４ （０ ０ ０ — １６ ０
ａｅｏａ ｉ ｍ ： Ｒ ｓｌ ｒ Ｔ Ｇ ９０ ［ ］ ｄｎｃｒ ｎ ａ ｃｏ ｅｕ ｓ ｆ ｍ Ｒ Ｏ ７４ Ｊ ． ｔ ｏ
Ｊ Ｃ ｉ Ｏ ｃｌ ０ ０ ２ （ ） ３ ８ １６ ． ｌ ｎ ｏ，２ １ ， ８ ８ ：１５ — ３ ５ ｎ
２ 证 据 水 平
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委 员会 （ ｓ ｏ） 行委 员、 国抗癌 协会肿 瘤 生物治疗委 员会委 员。 ｃｃ 执 中
毕锋 教授 １８ 毕 业 于第一 军 医大 学 ， ９４年 然后 在 第四 军 医大 学获
医学硕 士和博 士学位 并 留校 工作 ， ９ ８ ２ ０ 年在 美 国田纳 西大 学 医 １９— ０ １
Ｈ ｉｔ ｎｅ Ｍ ｏｄ ｆｃ ｔｏ Ｐａｔｅ ｎｓ ａｓ Ｐｒ ｎｏ ｉ ｄ ｅ ｃｉ ｅ ｓｏ ｉ ａ ｎ ｉ ｉ ｔ ｒ ｏｇ ｓｓ ａｎ Ｐｒ ｄｉ ｔｖ
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评价者 ： 毕 锋
文献 合 成 者 ： 陈 济
（ 川大 学华 西 医院肿 瘤 中心化 疗科 ，成都 ６ ０ ４ ） 四 １ ０ １