霍乱弧菌

霍乱弧菌的致病性
(1)致病物质
侵袭力：以鞭毛运动为主(动力)、菌毛的定植作用、粘液素酶。

霍乱肠毒素：本质是蛋白质，不耐热;对蛋白酶敏感而对胰蛋白酶抵抗。

该毒素属外毒素，具有很强的抗原性。

(2)所致疾病：
烈性肠道传染病即霍乱，为我国的法定传染病(甲类)，表现为剧烈的上吐下泻，导致严重的脱水、酸中毒、痉挛、尿闭、休克和死亡。

(3)传播途径：
污染的水源或饮食物经口传染。

患者出现上吐下泻，泻出物呈“米泔水样”，并含大量弧菌，此为本病典型的特征。

(4)免疫性：
患过霍乱的人可获得牢固的免疫力，再感染者少见。

病后小肠内可出现分泌型IgA。

霍乱弧菌的标本采集
标本采集：
1)标本以粪便为主，亦可采取呕吐物和尸体肠内容物作检材。

2)尽量在用药前采集。

3)专人专送。

4)标本应及时接种适宜培养基。

不可及时接种时，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。

常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文-腊二氏保存液和卡-布运送培养基等。

霍乱弧菌的检验方法
1)直接镜检：
动力观察：采取病人“米泔水样”大便或呕吐物制成悬滴片，观察细菌动力，可见流星或穿梭状动力的细菌。

制动试验：取病人“米泔水样”大便标本或6小时蛋白胨水增菌液中发现运动活泼的弧菌，可再做一张涂片，加一滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清(效价1：64)，用暗视野镜观察，3分钟内最初活泼的弧菌被凝集，运动被抑制，即为阳性，则可鉴定。

涂片染色：取标本涂片2张，干燥后用乙醇固定，分别用革兰染色及1：10稀释复红染色，镜检有无革兰氏阴性，并成鱼群状排列的弧菌。

2)细菌分离培养
①直接分离培养：急性期患者米泔水样粪便标本，除增菌外可同时将标本分离培养，常可获得阳性结果。

分离用的培养基有强、弱2种选择培养基。

弱选择培养基如碱性琼脂和碱性胆盐琼脂，抑制能力弱，粪便中某些杂菌仍可生长。

强选择性培养基常用的有庆大霉素琼脂等。

现多采用碱性蛋白胨水增菌，再用强选择培养基进行分离。

②增菌后分离培养：来自带菌者或恢复期患者的标本，因含菌量少必须先增菌后分离。

可将标本接种于碱性蛋白胨水内，置35℃增菌6-8小时后分离培养，必要时可做二次增菌后再进行分离培养。

3)鉴定：
根据霍乱弧菌在各种选择培养基上的特点，挑选可疑菌落进行鉴定。

鉴定以血清学(玻片凝集)为主，结合形态学、生化反应作出判断。

必要时作其他试验以便与其他细菌进行鉴别。

①玻片凝集试验：从分离培养基上挑取可疑菌落于霍乱弧菌多价诊断血清(效价
1:32-1:64)作玻片凝集试验。

立即出现凝集者为阳性，同时设生理盐水和阳性细菌株对照。

②形态学检查：取纯培养物涂片革兰氏染色，观察菌体形态及染色性。

用悬滴法或半固体穿刺法检测动力。

③生化反应：霍乱弧菌氧化酶试验、吲哚试验、粘丝试验和霍乱红试验均阳性。