百日咳诊断标准及防治原则
百日咳的症状及防治PPT课件
通过多种渠道和方式加强百日咳防治知识的 宣传和教育，提高公众的认知度和自我防护 能力。
THANKS
对于可能出现的并发症，如肺炎、 脑病等，采取相应的治疗措施。
中医辨证论治原则
辨病与辨证相结合
根据百日咳的临床表现，结合中 医理论进行辨证施治。
分期治疗
根据病程的不同阶段，采取不同 的治疗方法，如初咳期以宣肺止 咳为主，痉咳期以清热化痰、解
痉止咳为主。
顾护正气
在治疗过程中，注意保护患者的 正气，避免过度使用寒凉药物损
注意事项
接种前应确保儿童身体健康，无发热、感冒等症状。接种后应留观30分钟，观察 是否出现不良反应。如出现高热、过敏等严重反应，应及时就医。
健康教育内容普及
传播途径
向公众普及百日咳的传播途径，如咳嗽、打喷嚏等方式将病菌传播 给周围人群。
症状识别
教育公众识别百日咳的典型症状，如阵发性、痉挛性咳嗽、鸡鸣样 吸气吼声等，以便及时发现并治疗。
其他并发症
百日咳患者还可能出现心 血管系统、消化系统等多 系统并发症，需要密切监 测和及时治疗。
03 治疗方法及药物选择
西医治疗方案介绍
抗生素治疗
使用针对百日咳鲍特菌敏感的抗 生素，如红霉素、阿奇霉素等，
以减轻症状并缩短病程。
对症治疗
针对咳嗽、咳痰等症状，使用止咳 、祛痰等药物进行对症治疗。
并发症处理
辅助治疗方法推荐
雾化吸入
通过雾化吸入方式给予患者药物，可直接作用于呼吸道黏膜，提 高药物疗效。
食疗调理
根据患者的体质和病情，选择适合的食疗方案进行调理，如食用 具有润肺止咳功效的食物等。
推拿按摩
通过推拿按摩手法刺激患者的穴位和经络，以缓解咳嗽症状并促 进康复。
百日咳诊断治疗指南
百日咳诊断治疗指南【诊断要点】1. 流行病学资料，全年可发生，以春夏季节多见。
要注意该处有无百日咳流行，是否有百日咳接触史，是否接种过百日咳菌苗。
2. 临床表现：潜伏期：7～14日。
起病初有发热、咳嗽、流涕，2～3日后，低热及上呼吸道症状消失，但出现咳嗽加重，很快进入痉咳期。
典型的症状是连续、短促的咳嗽十几声至数十声，常咳至面红耳赤，涕泪交流，静脉怒张，身体倦缩。
由于连续的咳嗽、肺回气迫切，不得不长吸一口气，空气通过痉挛的声门而发出高音调的鸡鸣声。
由于痉咳，可影响呕吐中枢而产生呕吐。
由于痉咳，可引起上腔静脉压力增加而产生眼脸浮肿，结膜出血和鼻粘膜出血，痉咳期在发病第六周为高峰期，轻者每昼夜发作5～6次，重者可达数十次，甚至引起阵发性窒息或抽搐。
无并发症者，经过2～3周，症状逐渐减退，痊愈后一年内，由于大脑的回忆反应，患感冒也可以出现痉咳。
并发症：（１）支气管炎及肺炎；（２）百日咳性脑病，由于细菌毒素以及痉咳所致脑缺氧，水肿和出血，病者可表现为昏迷、惊厥，甚者可危及生命，脑病的后遗症有癫痫、智力减退。
3.实验室诊断采用咳喋法或咽拭子培养，早期90%患者可培养到百日咳杆菌。
采用酶联免疫吸附法检测特异性IgM抗体，有助于早期诊断。
【鉴别诊断】早期应与感冒相鉴别，某些病毒（腺病毒、呼吸道合胞病毒）、支原体感染，可引起毛细支气管炎，可表现为痉咳，临床上称之为“百日咳综合征”应加以鉴别。
白血病的细胞浸润引起的痉咳、也应注意排除。
【治疗原则】1.保持安静及足够睡眠，痉咳者可用镇静剂如安定等。
2.应用支气管解痉剂，氨茶碱或非那根等。
3.抗生素的选择，红霉素或氯霉素有效，在早期（卡他期），抗生素治疗可缩短病程，在痉咳期治疗，对病程无影响。
合并症发生时，要注意更换有效的抗生素。
【预防】1.免疫接种百-白-破疫苗。
2.对易感者，接触患者后可口服红霉素或肌注百日咳高价免疫球蛋白1.25～2.5ml，连续三日。
百日咳的诊断提示及治疗措施
百日咳的诊断提示及治疗措施百日咳(PertUSSiS)是由百日咳杆菌所致的急性呼吸道传染病。
临床上以阵发性痉挛性咳嗽及咳嗽终止时伴有鸡鸣样吸气吼声为特征。
病程可迁延2~3个月以上。
【诊断提示】1.流行病学病前1~2周有患者接触史,无菌苗接种史。
2.临床表现潜伏期2~21d,平均7~10d,典型临床经过分为3期。
(1)前驱期(卡他期)：患儿出现咳嗽、流涕、低度或中度发热，似上呼吸道感染，3~4d后热退，上感症状消失，但咳嗽进行性加重，尤以夜晚为甚，此期传染性最强，持续7~10d o(2)痉咳期(症状期)：在原有单声咳嗽基础上，演变为阵发性一连串痉挛性咳嗽，终末伴一口深长吸气，而发出高音调的鸡鸣样吼声为止，多伴有黏痰咳出或胃内容物吐出而告终。
反复发作，呈昼轻夜重。
新生儿及婴幼儿常缺乏典型的痉咳时鸡鸣样吼声，易发生窒息死亡。
此期持续2~6周或更长。
曾接种百日咳疫苗者无典型痉咳。
(3)恢复期：阵咳逐渐减轻至完全消失，如无并发症，本期为2~3周，若并发支气管肺炎或脑病等，可迁延数周。
3,并发症百日咳危及患儿生命的原因，包括支气管肺炎、肺不张、肺气肿、皮下气肿、百日咳脑病等。
4.实验室检查白细胞总数及淋巴细胞显著增高。
细菌培养目前常用鼻咽拭子培养法，培养越早阳性率越高。
荧光抗体检查，鼻咽拭子涂片后可直接荧光抗体染色法检查，具有阳性率高、特异性强和诊断快速等优点。
【防治措施】1一般治疗按呼吸道传染病隔离，保持呼吸道通畅，窒息者应立即进行吸痰及人工呼吸、吸氧等。
抽搐时给予苯巴比妥，每次3~5mg∕kg,肌内注射或地西泮每次0.25~O.5mg∕kg,静脉滴注，可用氯苯那敏和赛庚哽等抗过敏药物。
5.抗菌治疗首选红霉素30〜50mg∕(kg∙d),分3〜4次口服或1〜2次/d静滴，连用10~14d o氯霉素30-50mg/(kg∙d),分3〜4次口服，或1〜2次/d静滴，连用7-10d o氨芾西林、复方磺胺甲嗯嗖亦可选用。
百日咳诊断标准
百日咳诊断标准
根据世界卫生组织的标准，百日咳的诊断需满足以下条件：
1. 急性咳嗽阶段：患者存在阵发性剧烈咳嗽，每次咳嗽的次数多于3次，可能伴随“砰”的一声响声，出现面部或颈部充血，热感等。
2. 咳嗽持续期：咳嗽症状需要持续至少2周以上。
3. 百日咳传染阶段：患者在咳嗽阶段前2个星期内及咳嗽阶段的前3周内，喉拭子培养出百日咳杆菌阳性，或胸片显示典型改变或血清学检查IgG抗体滴度升高4倍以上，并且排除了其他有类似咳嗽症状的疾病，如流感、支气管炎、肺结核等。
4. 缺乏疫苗接种记录：在有可能感染百日咳的地区或年龄，如果患者没有接种过百日咳疫苗，可以根据症状和病史进行百日咳的临床诊断。
需要注意的是，由于临床表现与其他呼吸道感染和疾病非常相似，因此确诊百日咳需要通过严密的实验室检查。
中国儿童百日咳诊断及治疗建议
01 流 行 病 学 02 病 原 学 03 临 床 表 现 04 诊 断 标 准 05 治 疗
目 录
01 流行病学
流行病学
．传染源
家庭内成人患者和潜在感染者是儿童百日咳的 主要传染源。
．易感人群
人是百日咳鲍特菌的唯一感染宿主，任何年龄 都可以罹患百日咳，人群普遍易感。
06 治疗
治疗
抗菌治疗：百日咳的抗菌治疗首选大环内酯类抗生素，如红霉素、阿奇霉素、罗红霉素或克拉霉素 等，疗效与用药早晚有关，卡他期应用抗生素可以减轻甚至不发生痉咳，进入痉咳期后应用，则不 能缩短百日咳的临床过程，但可以缩短排菌期及预防继发感染。 红霉素30～50 mg／(kg·d)，每天3次，静脉滴注或口服，7—14 d为1个疗程；阿奇霉素5～10 mg／ (kg·d)，1次顿服，总量30 m∥kg，3—5 d为1个疗程；罗红霉素5～10 mg／(kg·d)，分两次口服，7～ 10 d为1个疗程；克拉霉素15 mg／(kg·d)，分两次口服，7 d为1个疗程。绝大多数患儿治疗1个疗程 即可。 除新生儿外均推荐红霉素，其他大环内酯类抗生素可根据依从性和耐受性酌情选用；新生儿由于使 用红霉素有肥厚性幽门狭窄的风险，故不推荐使用，可使用阿奇霉素，需注意阿奇霉素可能导致致 命心律不齐的风险。 近年国内有报道百日咳鲍特菌耐红霉素比例较高，临床使用红霉素静脉滴注近1个疗程症状仍无改 善时，可考虑复方新诺明(SMz—TMP)50 mg／(kg·d)，分两次口服，疗程3～5 d。因SMz—TMP可与胆 红素竞争在血浆蛋白上的结合部位，增加新生儿胆红素脑病发生的危险性，因此该类药物在2个月 以下婴儿的应用属禁忌，此外使用前还需除外葡萄糖-6．磷酸脱氢酶(G击一PD)缺乏症。
百日咳的定义、症状及预防措施
孩子咳嗽老不好？百白破疫苗可有效预防“百日咳”百日咳定义：百日咳，是由百日咳鲍特菌感染引起的急性呼吸道传染病。
本病病程较长，未经治疗，咳嗽症状可持续2~3个月，故名“百日咳”。
症状：潜伏期：2~11天，平均7~10天，无任何不适症状。
卡他期：从起病至阵发性痉咳开始，持续7~10天，病情逐渐加重，表现为低热、咳嗽、乏力、打喷嚏、流涕等。
痉咳期：病期2~6周或更长，此期已不发热，表现为咳嗽、鸡鸣样声音、呕吐、喉痒、胸闷、球结膜下出血或鼻出血。
恢复期：持续约2~3周除咳嗽外其余症状已消退，阵发性咳嗽逐渐消失。
可能引发的并发症：支气管肺炎、窒息、肺不张、肺气肿、皮下气肿、百日咳脑病。
传染源：患者、带菌者是主要传染源。
从潜伏期开始至发病后6周均有传染性，尤以潜伏期末到病后卡他期2~3周内传染性最强。
由于接种疫苗后产生的免疫力衰减和百日咳鲍特菌变异，全球很多疫苗覆盖率较高的国家出现了“百日咳再现”，发病年龄高峰从婴幼儿转移至青少年及成年人，青少年及成年人成为婴儿百日咳的主要传染源。
传播途径：百日咳杆菌，经呼吸道飞沫传播感染人。
注意当儿童出现发热、咳嗽等症状时，应及时就医！预防百日咳的疫苗通常预防百日咳的疫苗接种3~5年后保护性抗体水平下降，12年后抗体几乎消失。
若有流行时易感人群仍需加强接种。
DTaP三联疫苗（百白破疫苗）——免费目前我国使用的免疫规划疫苗是白喉类毒素、无细胞百日咳菌苗、破伤风类毒素（DTaP）三联疫苗。
可预防百日咳、白喉、破伤风等疾病。
接种时间为3、4、5月龄和18月龄时各接种1剂次。
DTaP-Hib四联疫苗（无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗）——自费由百日咳抗原、白喉类毒素、破伤风类毒素和b型流感嗜血杆菌（hib）抗原经过灭活、纯化后联合在一起制成的联合疫苗。
可预防百日咳、白喉、破伤风、以及b型流感嗜血杆菌引起的侵袭性感染（如肺炎、脑膜炎、骨髓炎等）。
全程接种共4剂，在3、4、5月龄和18月龄时各接种1剂次。
儿童百日咳的诊断与治疗PPT课件
疫苗预防
自广泛实施百日咳菌苗 免疫接种后，该病的发
生率已经大为减少。
临床表现及分型
01
02
03
初期症状
病初很像感冒，非典型病 例可能无症状、或者仅有 轻微咳嗽、有点低热。
典型症状
阵发性、痉挛性咳嗽，咳 嗽时面红耳赤，咳嗽末伴 有鸡鸣样吸气吼声，咳嗽 常日轻夜重。
分型
根据临床表现和病程，百 日咳可分为卡他期、痉咳 期和恢复期。
提供富含蛋白质、维生素等营养物质的食物，促进儿童身体恢复。
注意事项
避免剧烈运动和过度劳累，以免加重病情。
心理干预和家庭支持
1 2
心理干预
对儿童进行心理疏导，减轻其因长期咳嗽产生的 焦虑、抑郁等情绪。
家庭支持
鼓励家长积极参与儿童的康复过程，给予儿童关 爱和支持。
3
社会资源
利用相关社会资源，为家长提供必要的帮助和指 导。
病程与预后
病程
百日咳的病程可长达2～3月，但不一定是一百天，一般4—6 周。
预后
大多数患者经过积极治疗后预后良好，但部分重症患者可能 并发肺炎、脑病等严重并发症，甚至危及生命。因此，早期 发现、早期诊断、早期治疗对改善预后具有重要意义。
02 诊断标准与鉴别 诊断
诊断标准及依据
临床表现
阵发性、痉挛性咳嗽，咳 嗽末伴有特殊的吸气吼声 ，病程持续数周至数月。
联合疫苗
除了单独的百日咳疫苗外，还有联合疫苗可供选择，如百白破疫苗（百日咳、白 喉、破伤风联合疫苗）和五联疫苗（百日咳、白喉、破伤风、脊髓灰质炎、流感 嗜血杆菌联合疫苗）等。
预防措施和建议
保持室内空气流通
经常开窗换气，保持室内空气新鲜，有助于减少空气中的病原体 。
百日咳的诊断和治疗指南
支气管炎
支气管炎的咳嗽症状通常 较轻，但持续时间较长， 同时伴有其他症状如发热 、胸痛等。
哮喘
哮喘的咳嗽通常在夜间或 清晨发作，与百咳的咳 嗽特点不同。诊断流程
初步诊断
根据患者的咳嗽特点和其他症状 进行初步诊断。
实验室诊断
采集患者的标本进行细菌培养和血 清学检测，以确定诊断。
确诊
如果细菌培养阳性或血清学检测显 示近期感染过百日咳细菌，则可确 诊为百日咳。
在痉咳期，使用镇咳药、祛痰药等缓解咳嗽症状 ，保持呼吸道通畅。
恢复期治疗
在恢复期，以支持治疗为主，加强营养支持，促 进康复。
治疗流程
急性期治疗
在患者发病初期，使用抗生素 等药物抑制病原繁殖，减轻咳 嗽等症状。
恢复期治疗
在恢复期，以支持治疗为主， 加强营养支持，促进康复。
入院评估
对疑似百日咳患者进行入院评 估，确诊后制定治疗方案。
总结词
成人百日咳症状与儿童相似，但相对较轻，病程也较短。
详细描述
成人百日咳症状与儿童相似，但相对较轻，病程也较短，一 般1-2个月左右。成人患者常有吸烟史或者免疫力低下，需要 及时诊断和治疗，以避免病情加重。治疗以抗生素治疗为主 ，同时对症治疗以缓解症状。
病例三：重症百日咳的诊治
总结词
重症百日咳病情严重，需要及时抢救和治疗。
。
THANKS.
百日咳的诊断
02
诊断方法
01
02
03
临床症状
观察患者的咳嗽特点、程 度和持续时间，结合其他 症状如发热、乏力、胸闷 等。
细菌培养
采集患者的痰液或鼻咽拭 子进行细菌培养，以检测 百日咳细菌的存在。
血清学检测
检测患者血清中的百日咳 抗体，以确定是否感染过 百日咳细菌。
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百日咳诊断标准及处理原则GB 15998—1995前言百日咳是百日咳杆菌引起的呼吸道传染病，传染性强，在婴幼儿中有很高的病死率。
临床表现以阵发性痉挛性咳嗽和痉咳终止时出现鸡鸣样吸气吼声为特征，多见于儿童，病程可达2～3个月。
本标准在制定过程中，参考了1989年卫生部制定的《中华人民共和国传染病防治法》及《中华人民共和国传染病防治法实施办法》中的诊断标准，尽量结合我国百日咳的流行病学，临床实践与各地情况，以便易于实施和应用。
本标准附录A是标准的附录；本标准附录B是提示的附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出。
本标准起草单位：中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所、北京市地坛医院、首都儿科研究所。
本标准主要起草人：张荣珍、杨立信、王树山。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负责解释。
1 范围本标准规定了百日咳的诊断标准和处理原则。
本标准适用于各级、各类医疗、卫生、保健机构和人员对百日咳病人的诊断、报告和处理。
2 诊断原则应根据流行病学资料及临床表现做出临床诊断，确诊需要百日咳杆菌培养阳性或者检测抗百日咳菌特异性抗体。
3 诊断标准3.1 流行病学史三周内接触过百日咳病人，或该地区有百日咳流行。
3.2 临床表现3.2.1 流行季节有阵发性痉挛性咳嗽者。
3.2.2 咳嗽后伴有呕吐，严重者有结膜下出血或舌系带溃疡者。
3.2.3 新生儿或婴幼儿有原因不明的阵发性青紫或窒息者，多无典型痉咳。
3.2.4 持续咳嗽两周以上，能排除其他原因者。
3.3 实验室诊断3.3.1 白细胞总数显著升高，淋巴细胞占50％以上。
3.3.2 从病人的痰或咽喉部分泌物分离到百日咳杆菌，见附录A。
3.3.3 恢复期血清凝集抗体比急性期抗体呈四倍以上升高，见附录B。
3.4 病例分类3.4.1 疑似病例具备3.2.1，3.2.2，3.2.3，3.2.4四项中任何一项，或同时伴有3.1项者。
3.4.2 临床诊断病例疑似病例加3.3.1。
3.4.3 确诊病例疑似病例加3.3.2或3.3.3。
4 处理原则4.1 对病人的隔离自发病后隔离40d，或至痉挛性咳嗽出现后隔离30d。
接触者观察21d。
4.2 对病人的治疗尽早给予抗生素治疗及对症治疗，防治并发症。
4.3 发生暴发流行的应急措施4.3.1 对未接种百日咳菌苗的易感儿童应急接种百白破三联混合制剂。
4.3.2 与百日咳患者有密切接触史的易感儿可用药物预防。
4.4 百日咳的免疫预防百日咳是一种可以用菌苗预防的传染病，对易感儿童实行百白破三联混合制剂接种，是预防本病的重要措施。
国内外的研究表明，百日咳菌苗的预防效果是肯定的。
按我国现行的免疫程序，儿童出生后第3个月开始初免，全程免疫3针，保护率可达90％以上，第二年再加强一针。
附录A(标准的附录)百日咳病原学诊断方法A1 病原体分离从病人鼻咽部采集标本或咳碟法分离病原体。
A1.1 标本的采集A1.1.1 咳碟法用咳碟法采集样品时，应在病人咳嗽时，将包－姜(Bordet－Gengou)二氏培养平板打开放在病人口前10cm处，使病人对准平板表面咳嗽数次，直接收集病人咳出的飞沫。
然后盖好平皿盖送检。
平皿暴露时间以15s为宜。
A1.1.2 鼻咽试子由于百日咳多发于儿童，所以采样时，病儿的头部斜依于母亲的胸怀，母亲以双手固定病儿的头部，医师以右手执棉拭子，左手按病人的头顶部，使顶端稍向下弯的棉拭子自前鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。
待棉拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，将棉拭子稍留片刻，以待反射性咳嗽，然后轻轻旋转一周，缓缓取出棉拭子。
A1.2 接种和菌种检定A1.2.1 菌型百日咳杆菌应为革兰氏阴性呈卵圆形短小杆菌，菌体长0.5～1.0μm。
A1.2.2 菌落百日咳杆菌接种于包－姜二氏培养基37℃培养3～4d后其菌落呈圆形、灰白色，表面光滑，中央突起，边缘整齐，具有珍珠般的光泽，菌落周围有弥散性溶血环。
A1.2.3 生化及抗原特性百日咳杆菌生化反应极不活跃，不发酵任何碳水化合物，不液化明胶，不产生硫化氢，不形成吲哚，不还原硝酸盐，不利用枸橼酸盐，氧化酶阴性，70％以上菌株触酶阳性。
不产生尿素酶和苯丙氨酸脱氨酶。
百日咳杆菌新分离菌株有荚膜，毒力强，菌落光滑，称为I相菌。
百日咳杆菌有6种凝集因子，1、2、3因子是主要的，籍此又可将I相菌分为三种血清型：1.2，1.3，1.2.3。
血清型具相对稳定性，但可发生变异。
血清型不仅在自然感染，在人工传代培养过程中也可发生变异。
A2 皮肤坏死试验A2.1 每次试验最少用健康家兔或豚鼠2只，每只家兔或豚鼠可同时试验数个菌株。
A2.2 将培养40～48h第三代或第四代20％羊血包－姜二氏培养基上的菌苔，混悬于缓冲盐水或生理盐水中。
A2.3 将菌液用灭菌脱脂棉过滤，测定浓度。
A2.4 用生理盐水将菌液稀释成4×10(上标始)8(上标终)/mL及2×10(上标始)8(上标终)/mL 二个浓度。
A2.5 试验前一天将健康家兔或豚鼠先行脱毛。
A2.6 注射前用75％酒精消毒，再用小试管蘸色素印在脊柱两侧、每只家兔可试验4个菌株。
A2.7 每个圈内皮内注射0.1mL，拔针时要在皮内稍稍扭转以免菌液流出。
A2.8 注射完毕要做好记录。
A2.9 注射后48～72h观察坏死情况，并量坏死的大小。
如两只家兔有一只注射4×10(上标始)8(上标终)个菌，注射部位出现坏死即为阳性。
A3 免疫荧光法检测百日咳杆菌(直接法)A3.1 原理将已知百日咳抗血清用化学方法结合荧光色素制成荧光抗体，以此来浸染固定在玻片上的未知细菌，若为相应细菌，则两者结合面留在玻片上，不被缓冲液所冲掉。
在荧光显微镜下有荧光出现。
A3.2 材料A3.2.1 荧光抗体用前按说明书要求以pH7.3磷酸盐缓冲盐水进行稀释，4℃冰箱保存备用。
A3.2.2 pH7.3磷酸盐缓冲盐水氯化钠8.5g磷酸氢二钠1.07g磷酸二氢钠0.39g蒸馏水1000mLA3.2.3 荧光显微镜A3.2.4 其他材料0.8～1.2mm厚载玻片。
0.17mm厚的盖玻片。
甘油缓冲液(90mL分析纯甘油加10mL pH8.2磷酸盐缓冲液)，镜油可用液体石蜡代替。
A3.3 方法A3.3.1 用接种环将待检标本涂布于玻片上，大小约1cm(上标始)2(上标终)，火焰固定，用蜡笔将标本圈起。
A3.3.2 将稀释的荧光抗体加在标本上，置湿盒，放37℃温箱30min。
A3.3.3 取出玻片，用滴管吸取3～5mL磷酸盐缓冲盐水将标本上荧光抗体冲洗，再依次浸入盛有磷酸盐缓冲液三个缸中浸泡，每缸3～5min，并不时振荡。
A3.3.4 干燥、封载、镜检。
A3.3.5 为使结果正确，还需作以下对照：a)标本阴性对照：标本不加荧光抗体只加磷酸盐缓冲盐水。
b)阳性对照：荧光抗体加在已知阳性菌株标本上。
c)封闭试验：将标本先加未标记的同样抗血清作用30min，充分洗涤后再加标记抗体染色，若是阳性标本，应无特异荧光。
d)标本加正常未免疫的标记抗体，结果应无特异荧光。
A3.4 结果判定A3.4.1 荧光的强度和形态学的特征＋＋＋＋：菌体显著膨大，黑心清楚，荧光明亮。
＋＋＋：菌体膨大，黑心清楚，荧光明亮。
＋＋：菌体稍膨大，形态清晰，有黑心，荧光较弱。
＋：菌体不膨大，形态不清楚，荧光微弱。
－：细菌无荧光。
A3.4.2 判定标准阳性：细菌荧光在“＋＋”以上，在片上可看到分散或成堆出现形态典型的细菌。
阳性对照“＋＋～＋＋＋”，阴性对照为阴性。
附录B(提示的附录)百日咳血清学诊断方法B1 百日咳试管凝集试验(半量法)B1.1 原理细菌、红血球及其他颗粒性抗原，加入含有特异性抗体的血清，在有适当的电解质存在时，经一定时间作用后，可出现肉眼可见的凝集团块，利用这种现象进行已知抗原定量测定相应抗体或已知抗体测定抗原等方法就是定量凝集试验。
B1.2 材料B1.2.1 百日咳I相标准血清效价为1∶12800。
B1.2.2 百日咳菌液菌液的凝集效价应达到I相标准血清的效价的一半以上。
菌液浓度定为2×10(上标始)9(上标终)/mL。
B1.2.3 0.85％生理盐水B1.2.4 待检血清患者耳血或静脉血，分离出血清后进行测定。
B1.2.5 凝集管及试管架B1.2.6 刻度吸管(1mL、5mL、10mL)B1.3 试验方法取待检血清0.1mL＋0.4mL生理盐水，稀释成5倍，然后依次倍比稀释即为1∶10，1∶20，1∶40，1∶80，1∶160等，每管0.25mL。
并加入2×10(上标始)9(上标终)/mL浓度的百日咳菌液，每管0.25mL。
充分摇匀置35℃过夜，次日取出后，室温放置1h观察结果。
每次试验时要设阴性对照管，即百日咳菌液加生理盐水，设阳性对照管，用一排试管，采用百日咳I相标准血清，按已知效价进行稀释，然后每管加入百日咳菌液和试验组相同条件观察结果。
B1.4 结果判定＋：管内液体混浊，少量凝集块沉于管底。
＋＋：管内液体半澄清，部分凝块沉于管底。
＋＋＋：管内液体不完全澄清，凝集块全部沉于管底。
＋＋＋＋：管内液体完全澄清，凝集块全部沉于管底。
若恢复期抗体滴度比急性期增高4倍以上对确诊病例很有意义。
B2 微量凝集试验(血凝板法)B2.1 材料B2.1.1 百日咳I相标准血清效价1∶12800。
B2.1.2 待检菌液菌液效价应达到I相标准血清效价之半，菌液浓度为3×10(上标始)8(上标终)～4×10(上标始)8(上标终)/mL。
B2.1.3 稀释液0.85％生理盐水。
B2.1.4 U型孔血凝板8排×12孔。
B2.1.5 可调微量移液器B2.1.6 多孔道加样器B2.1.7 35℃～37℃恒温箱B2.1.8 冰箱B2.1.9 微型振荡器B2.1.10 带盖搪瓷盘B2.2 试验方法B2.2.1 取标准血清0.1mL加入9.9mL生理盐水，稀释成100倍。
B2.2.2 在U型孔血凝板上，第1孔不加盐水，第2孔至第10孔分别加入0.025mL盐水，第12孔也加入0.025mL盐水作为阴性对照孔。
B2.2.3 用微量加样器向第1孔及第2孔各加0.025mL 100倍稀释的标准血清。
B2.2.4 用多孔道加样器从第2孔开始倍比稀释至第10孔。
B2.2.5 将稀释好的血清每孔加入每毫升含3×10(上标始)8(上标终)～4×10(上标始)8(上标终)菌体的菌液0.025mL。
B2.2.6 用微量振荡器振荡3～5min。
B2.2.7 将血凝板放入下面垫有纱布的带盖搪瓷盘内，再放置于35℃培养箱内过夜。
B2.2.8 次日取出血凝板室温放置片刻后，将血凝板放在日光灯上面观察结果。