兽用疫苗保护剂和佐剂
04第四章 灭活剂、保护剂和免疫佐剂(兽医生物制品学)
温度越高，灭活越快，灭活作用随温度上升而加速。在低温时，温 度每上升10C，细菌死亡率可成倍增加。每升高10C，金属盐类的灭菌 作用增加2-5倍，石炭酸的杀菌作用增加5-8倍。但是，如果温度超过 40C 或更高，对微生物的抗原性将有不利影响。
(五)pH
在微酸性时灭活速度慢，抗原性保持较好，在碱性时灭活速度快，但 抗原性易受破坏。灭活初期损失较快，以后逐渐减慢，尤其甲醛溶液浓度 高时，在碱性溶液中抗原性损失更大。
附：
用乙烯亚胺衍生物对病毒进行灭活，当灭活结束时，应中止灭活并 除去其残存物，以免继续作用而损害疫苗的免疫原性。采用的方法是： 在乙烯亚胺衍生物灭活的病毒液中加入过量的硫代硫酸钠或亚硫酸钠， 不论是0.05%AEI或0.02%BEI，病毒液中硫代硫酸钠最终浓度均为2%， 以中断灭活剂灭活作用。
此外，-丙内脂（-propiolactone）也是一种良好的病毒灭活剂， 它是一种不稳定的液体，于37C 2h后能自行水解为无毒物质。
注意：这里指的是甲醛的浓度，并非福尔马林的浓度！
(二) 苯酚
酚类是以羟基取代苯环上的氢而形成一类化合物。苯酚(phenolum)， 又称石炭酸(acidum carbolicum)，为具有特殊气味的无色结晶，易潮解， 溶于水及有机溶剂，见光则颜色变深，置于空气中易被氧化，颜色也变深， 所以应避光保存。
三、影响灭活作用的因素
(一) 灭活剂的特异性
某些灭活剂只对一部分微生物有明显的灭活作用，而对另一些微生物 则效力很差。如酚类能抑制和杀灭大部分细菌的繁殖体，5%石炭酸溶液 于数小时内能杀死细菌的芽胞。阳离子表面活性剂抗菌谱广，效力快，对 组织无刺激性，能杀死多种革兰氏阳性菌和阴性菌，但对绿脓杆菌和细菌 芽胞作用弱。
兽用疫苗保护剂和佐剂
兽医生物制品常用的保护剂
1．5%蔗糖（乳糖）脱脂乳保护剂
蔗糖（或乳糖） 5g，加脱脂乳至 100ml，充分溶解后，110~116℃高压灭菌 30~40 min。
2．明胶蔗糖保护剂
明胶 2%~3%（g/m1）、蔗糖5%（g/m1）、硫脲 1%~2%（g/m1）。先 将 12%~18%明胶液、 30%蔗糖液和 6%~12%硫脲液加热溶解， 116℃高压 灭菌30~40min；
1. 营养液： • 可修复因冻干而受损的细胞，使冻干制品含有一定量水分；
• 可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状，
增加溶解度 2. 赋形剂： • 防止低分子物质的碳化和氧化，保护活性物质不受加热影响 • 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，增加溶解度 3. 抗氧化剂： • 抑制冻干制品中的酶作用，增加生物活性物质在冻干后贮存
7．脂质分子类佐剂：脂多糖、Vit A和Vit E等脂溶性维生素
8．其他：霍乱毒素（CT）、百日咳毒素（PT）和破伤风类 毒素（TT）等；脂磷壁酸（LTA）；维生素B12等。
氢氧化铝胶 (铝胶）
合成方法:
（1）用铝粉加烧碱合成法
2Al(OH)3+12H2O+3H2SO4→Al2(SO4)3· 18H2O
兽用疫苗冻干保护剂 和佐剂
冻干保护剂（稳定剂）
保护剂：又称稳定剂（stabilizer） ，是指一类能防止生 物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。（指对疫 苗生产、血清制备等） 保护剂用途（不同用途加不同保护剂, 主要针对活的微生 物或细胞） ① 菌种或毒种保存：常用甘油作保护剂 ② 细胞株保存：常用二甲基亚砜(DMSO) DMSO:二甲基亚砜，一种细胞的保护剂 ③ 疫苗冷冻真空干燥制备时：加脱脂乳（或二甲基亚 砜）和蔗糖等（不同国家有不同配方） ④ 干扰素类生物活性物质的保存：加葡聚糖
生物制品的灭活剂、佐剂及保护剂
第四章兽医生物制品的灭活剂、佐剂及保护剂【知识目标】·熟悉兽医生物制品生产中常用的灭活剂、佐剂及保护剂；·理解灭活剂、佐剂及保护剂在兽医生物制品生产中的作用；·掌握·灭活剂、佐刺、保护剂的概念；·影响灭活剂作用的因素；·影响保护剂效能的因素。
·了解·佐剂的基本要求及类型；·保护剂的组成、效能。
【能力目标】·能进行白油佐剂的乳化。
第一节灭活与灭活剂为了提高兽医生物制品的安全性、防止散毒，许多疫苗通常通过灭活制成无毒力和无感染性的制品，灭活乃是兽医生物制品中的一项基本技术。
一、灭活及灭活剂的概念灭活(inanimation)，是指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力及致病性，但尽可能不影响其免疫原性，用以制备灭活疫苗。
广义的灭活尚包含灭能(inactivation)，即使一些活性物质(微生物及其代谢产物、激素、酶、血清因子和抗体等)丧失活力的过程。
各种灭活疫苗、诊断抗原等的制造过程均属于灭活；血清经56℃加热30min处理，使补体丧失活性、破坏某些抑制因子的过程，以及破伤风毒素经甲醛处理后即失去致病性成为类毒素的过程均为灭能。
用来灭活的药物称为灭活剂，又称化学灭活剂。
化学灭活是制备灭活苗最重要的手段。
二、灭活的类型按其灭活作用的性质可将灭活分为物理灭活和化学灭活两类，尤以化学灭活法效果确实、方法简便而最为常用。
但不同的微生物、活性物物质采取灭活方法、灭活剂也不尽相同，因此，选择合适的灭活剂和灭活方法对研制灭活兽医生物制品十分重要。
(一)物理灭活一般常用热灭活、超声波灭活、紫外线灭活和γ射线灭活等方法杀死微生物或消除其毒性。
热灭活最早由Smith等研制猪霍乱灭活菌苗时提出，后来发现热灭括容易发生菌体蛋白质变性。
过去用加热灭活方法者较多。
该法简单易行，但加热杀死微生物的方法比较粗糙，容易造成菌体蛋白质变性，凶而免疫原性受到明显影响。
兽用疫苗保护剂与佐剂(57页)
• 50＜：运动粘度71112 / 3左右 *紫外吸收八25()-35()＜(). 1 %，紫外消光系数＜12X108； •单环芳烃 与双环芳烃含量低干0.5%，无多环芳烃； •小鼠腹腔注射0+51111或家免皮下注射2.01111^油，观察60山 表现正
常。
乳剂配方与乳化方法
(1) 剂在水屮法： 将乳化剂直接溶于水中，在激烈搅拌下将油加入，可直接生 成0州乳剂。若欲
得从/0型，可继续加入油，直到发生变型。该 法通常用匀浆器或胶体磨，高速搅
拌而得到较好的乳ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ。
(2) 剂在油屮法：
将乳化剂溶于油相，将油相直接加入水相屮得如水相 直接加入油相，得到〜
/0型，如欲得0/〜，继续加入至变型。该 法制成的乳剂，一般均匀颗粒直径在 0.5^0!左右，比较稳定。
蔗糖76.626、磷酸二氢钾0.528,磷酸氢二钾1.648、谷氨酸钠0.»相、牛血 淸白蛋 白10心 加去离子水至1000111],混合溶解，过滤除菌、
免度佐剎
一、佐剂概念与作用机理
1.佐剂（新概念）：凡是可以增强抗原特异性免疫应答的物 质称为佐剂。
佐剂（旧概念）：当一种物质先于抗原或与抗原混合或同 时注射于动物 体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗 原的特异性免疫应答，发挥 其辅佐作用的物质.
施汽吹沸熟化10111«»调节卩14 6.9土
6万皁升沸水屮，搅拌均 匀;倒入
0.1，继续熟化3111111»稳定卩?1
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6.9 十 0+1
〜后，加温 水，边加边搅拌约垔
总踅为 357；升：用前加水稀杼
至 100万品扑，温度约为80°0, 盛
2024年兽医疫苗佐剂市场分析现状
2024年兽医疫苗佐剂市场分析现状1. 引言兽医疫苗佐剂是一种用于增强动物对疫苗免疫效果的辅助药物。
随着养殖业和宠物市场的快速发展，兽医疫苗佐剂的需求也在不断增加。
本文将对兽医疫苗佐剂市场的现状进行分析，并对未来发展趋势进行展望。
2. 市场规模兽医疫苗佐剂市场在过去几年里取得了显著的增长。
据市场研究公司的数据显示，2019年全球兽医疫苗佐剂市场规模达到XX亿美元。
预计到2025年，这一数字将增长至XX亿美元，年复合增长率为X%。
3. 市场驱动因素兽医疫苗佐剂市场的增长受到以下几个因素的驱动：3.1 养殖业的发展近年来，全球养殖业持续增长，特别是禽类和畜牧业。
为了保证动物的生长和健康，农民越来越重视疫苗接种，从而带动了兽医疫苗佐剂市场的需求增长。
3.2 宠物市场的 booming随着人们生活水平的提高，养宠物的人群也越来越多。
饲养宠物需要提供宠物疫苗保护其健康，而兽医疫苗佐剂则能有效增强疫苗的免疫效果。
宠物市场的不断扩大对兽医疫苗佐剂的需求起到了推动作用。
3.3 新疫情的爆发近年来，一些新的疫情不断出现，对动物健康造成了威胁。
兽医疫苗佐剂的应用能够提高动物对疫苗的免疫效果，帮助抵御新疫情的侵袭。
4. 市场竞争格局兽医疫苗佐剂市场竞争激烈，主要厂商包括：XX公司、XX公司和XX公司。
这些公司通过不断推出新产品和提高产品质量来吸引客户。
此外，一些新兴企业也加入了市场，通过技术创新来获取市场份额。
5. 市场地区分布兽医疫苗佐剂市场的地区分布较为均衡，主要市场包括北美、欧洲、亚洲和南美等地。
其中，亚洲地区的市场增长最为迅速，预计在未来几年将成为兽医疫苗佐剂市场的新的增长引擎。
6. 市场挑战与机遇兽医疫苗佐剂市场面临一些挑战，如价格竞争、监管限制等。
然而，随着科技进步和人们对动物健康需求的不断增长，市场仍然充满了机遇。
未来，兽医疫苗佐剂市场将主要依靠创新技术和产品差异化来保持竞争优势。
7. 结论兽医疫苗佐剂市场在养殖业和宠物市场的推动下得到了快速发展。
新型兽用疫苗佐剂的研发
新型兽用疫苗佐剂的研发兽用疫苗佐剂的研发旨在提高兽用疫苗的免疫效果，降低动物接种疫苗后的不良反应，并增强疫苗对疾病的保护效果。
疫苗佐剂通常是指一种或几种辅助物质，它们与疫苗混合使用，可以提高疫苗的稳定性、免疫原性和免疫效果。
通过研发兽用疫苗佐剂，可以提高兽用疫苗的安全性和有效性，有效预防和控制动物疾病，保障畜禽养殖业的健康发展。
在兽用疫苗佐剂的研发过程中，需要进行多方面的工作。
需要对疫苗佐剂的功能、作用机制和应用范围进行深入研究，了解其在兽用疫苗中的作用和影响。
需要对潜在的疫苗佐剂原料进行筛选和评估，选择具有良好免疫增强效果和安全性的佐剂原料。
还需要对疫苗佐剂的配方、制备工艺和质量控制等进行系统研究，确保疫苗佐剂的稳定性和可靠性。
需要进行动物实验和临床试验，评估疫苗佐剂的免疫增强效果和安全性，为其进一步应用提供科学依据。
近年来，随着生物技术和制药技术的不断发展，兽用疫苗佐剂的研发取得了一些进展。
目前，已经有一些新型兽用疫苗佐剂得到了应用，取得了良好的免疫效果。
一些微生物多糖、抗原递呈细胞激活剂和免疫调节剂等新型佐剂，能够有效提高兽用疫苗的免疫效果，增强对疾病的保护效果。
一些纳米技术和生物技术手段被应用到兽用疫苗佐剂的研发中，为提高疫苗的稳定性和免疫性能提供了新的途径。
虽然兽用疫苗佐剂的研发取得了一些进展，但在我国仍存在一些问题和挑战。
目前我国在兽用疫苗佐剂研发方面的投入和支持还不足，导致其研发进展相对缓慢。
对于一些新型疫苗佐剂，其安全性和免疫效果还需要进一步评估和验证。
我国在兽用疫苗佐剂研发方面的技术水平和研究人才储备相对薄弱，需要进一步加强科研机构和高校间的合作交流，加大技术创新和人才培养力度。
为了加快我国兽用疫苗佐剂的研发和应用，需要采取一系列措施。
应加大对兽用疫苗佐剂研发的资金投入和政策支持，鼓励企业和科研机构增加研发投入。
应建立健全疫苗佐剂的评价体系，加强对佐剂原料和配方的管理和监督，确保其安全性和有效性。
新型兽用疫苗佐剂的研发
新型兽用疫苗佐剂的研发随着社会经济的发展，人们对于动物健康和兽医保健的关注度越来越高。
兽用疫苗作为预防和控制动物疾病最有效的手段之一，其研发和应用也受到了广泛的关注。
而疫苗佐剂作为疫苗中不可或缺的一部分，其研发和应用更是不可忽视的重要环节。
本文将从新型兽用疫苗佐剂的研发角度进行探讨，为兽用疫苗技术的发展提供一些思路和建议。
一、兽用疫苗佐剂的作用和意义疫苗佐剂是指在疫苗中起到增强免疫效果的物质，其作用是提高疫苗的免疫原性、免疫强度和免疫持久性。
通过疫苗佐剂的配合，可以增加疫苗的有效性，降低疫苗的剂量和次数，提高疫苗的接种效果，并且可以减少免疫耐受性和不良反应，提高免疫效果的持续时间。
疫苗佐剂在兽用疫苗中的应用具有重要的意义。
二、现有兽用疫苗佐剂的局限性目前，兽用疫苗佐剂的种类较为单一，主要包括脂多糖类、矿物油类和乳化剂等。
这些佐剂能够提高疫苗的免疫效果，但也存在着一些局限性。
比如脂多糖类佐剂容易引起动物免疫耐受性，矿物油类佐剂容易引起不良反应，乳化剂在提高疫苗效果的同时也可能影响疫苗的安全性。
需要不断地研发新型的兽用疫苗佐剂，以满足兽医保健的需求。
三、新型兽用疫苗佐剂的研发方向1. 生物佐剂的研发生物佐剂是指以微生物、酵母、藻类等天然生物质作为载体，辅助疫苗成分，增强疫苗的免疫原性和免疫效果的一种佐剂。
目前已有一些研究表明，利用生物佐剂可以提高疫苗的免疫效果，降低疫苗的不良反应，延长疫苗的免疫持续时间，因此生物佐剂的研发具有重要的意义和广阔的前景。
2. 纳米佐剂的研发纳米佐剂是指将纳米材料作为疫苗的佐剂，提高疫苗的稳定性、生物利用度和免疫效果的一种佐剂。
目前纳米技术在药物传递、肿瘤治疗等领域有着广泛的应用，因此纳米佐剂在兽用疫苗中应用也具有广阔的前景。
1. 多学科交叉研究新型兽用疫苗佐剂的研发需要集生物工程、药物制剂、免疫学、生物化学等多学科知识为一体，因此需要加强不同学科之间的交流与合作，共同研究解决兽用疫苗佐剂研发中的关键技术难题。
第三章 灭活剂 保护剂 与免疫佐剂
真菌以及革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌对各类灭活剂的敏
感性并不完全相同；细菌的繁殖体及其芽孢对化学药物的 抵抗力不同；生长期和静止期的细菌对灭活剂的敏感程度 也有一定差别。此外，细菌的浓度也会影响灭活的效果。
灭活剂浓度：以甲醛为例，甲醛浓度越高，灭活脱毒越
快，但抗原损失量亦较大。有时可以将甲醛溶液分数次加 入，加量由小至大，PH值由低到高，温度由室温开始， 逐步提高到允许的最高温度，这样对于保护抗原的免疫原 性有一定好处。
灭活温度：通常情况下，灭活作用随温度上升而加速。
但如果温度超过40℃或更高，对微生物的抗原性将有不利 影响。
灭活时间：灭活时间与灭活剂浓度和作用温度密切相关。
赋形剂：主要起骨架作用，防止低分子物质的碳化和氧
化，保护活性物质不受加热的影响，使冻干制品形成多孔 性、疏松的海绵状结构，从而使溶解度增加，如蔗糖、山 梨醇、乳糖、PVP(聚乙烯吡咯啶酮）葡萄糖等。常为高 分子物质。
抗氧化剂：可抑制冻干制品中的酶作用，增加生物活性
物质在冻干后储存期间的稳定性，如维生素C、维生素E 和硫代硫酸钠等。
2、非渗透剂，如聚乙烯吡咯啶酮和蛋白质等，能防止细 胞等生物活性物质由外向内渗透溶质。
非渗透性保护剂按相对分子质量大小可分为：
高分子物质和低分子物质
按化学性质，可分为：
复合物、糖类、盐类、醇类、酸类和聚合物
一、冻干保护剂的组成与作用
营养液：可使因冻干而受损伤的细胞修复，对水分子其
缓解作用，并能使冻干生物制品仍含有一定量的水分；还 可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状， 增加溶解度，如脱脂乳、蛋白胨、氨基酸和糖类等，常为 低分子有机物。
一般随着灭活剂浓度及作用温度升高，灭火时间则缩短。 在生物制品生产中，应以保证制品安全和效力，采用低灭 活剂剂量、低作用温度和短时间处理为最佳。
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保护剂（protector）的分类
分类： •（根据其作用机理） ——渗透剂：如二甲基亚砜（DMSO）、甘油和蔗糖等 ——非渗透剂：如聚乙烯吡咯啶酮(PVP)和蛋白质等 •（根据其分子量大小）
——高分子物质、低分子物质。
•（按其化学性质） ——复合物、糖类、盐类、醇类、酸类和聚合物
一些常用的冷冻干燥保护剂
油乳剂检验
（1）粘度测定：流出法、Saybolt粘度计法。
吸管内口直径为1.2mm，室温下吸满lml乳剂，垂直放出0.4ml所 需时间作为粘度单位。
以 2-6 S为合格，不得多于10-15 S。 （2）乳剂稳定性测定： ① 加速老化法：疫苗于37℃贮存10-30d不破乳。
阳离子类乳化剂：氯化苯甲烃铵、溴化十六烷三甲基
• 非离子型：月桂酸聚甘油脂、山梨醇脂和单油酸脂、 司本-80、吐温-80
白油佐剂
国内外常用白油：Drakocel-6VR、Marcol-52和Lipolul-4 7号或10号白油 质量标准: • 无色无味
• 50℃运动粘度7m2／s左右
• 紫外吸收A250-350＜0.1％，紫外消光系数＜12×108； • 单环芳烃与双环芳烃含量低于0.5％，无多环芳烃； • 小鼠腹腔注射0.5ml或家免皮下注射2.0ml白油，观察60d， 表现正常。
４、保护剂酸碱度（PH值）：主要对M的影响。
三、常用的冻干保护剂（稳定剂） 明确不同种类微生物需要添加不同保护剂 （一）细菌的保护剂 ① 需氧或兼氧厌氧菌：５％蔗糖脱脂乳或５％蔗糖、 1.5％明胶； ② 厌氧性细菌：含1.5％谷氨酸钠的１％乳糖或10％脱 脂乳或7.5％葡糖血清。 注：脱脂乳：20％脱脂奶粉溶于水配制而成。 （二）病毒的保护剂 ① 5%蔗糖 脱脂乳； ② 马立克814活细胞疫苗:保存液氮.稳定剂为10%二 甲基亚砜和50%犊牛血清的199液。 注意: 微生物保护剂缓冲液的组成比例，不同厂家有 不同的配方。
作用机理
① 抗原递呈（antigen presentation） ② 抗原寻的（antigen targeting）
③ 免疫调节（immune modulation）
①抗原递呈： 指抗原分子递呈给T细胞的方法。佐剂与疫苗联合使用，有
助于抗原性物质在胞内被加工，被MHC分子特异性的结合、保护、运输并递 呈给效应细胞。
②抗原寻的（antigen targeting） 指抗原传递给免疫系统中适当效应细胞的效率。包括 吸引巨噬细胞到达组织部位、活化吞噬细胞、促进抗原 与细胞受体的结合等有重要作用。
③免疫调节（immune modulation） 是指任何可以修饰的免疫效应细
胞对抗原或表位进行加工的机制。通过这种机制，可以改变特异性免疫应答 的本质或强度。T细胞有Th1和Th2两个亚类。同一抗原和不同佐剂一起使用 能够引起不同的免疫反应。因此，通过筛选特定的佐剂，可以达到诱导正确 的免疫应答的目的。
1. 营养液： • 可修复因冻干而受损的细胞，使冻干制品含有一定量水分；
• 可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状，
增加溶解度 2. 赋形剂： • 防止低分子物质的碳化和氧化，保护活性物质不受加热影响 • 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，增加溶解度 3. 抗氧化剂： • 抑制冻干制品中的酶作用，增加生物活性物质在冻干后贮存
分类 保 护 剂
复合物
糖类 盐类
脱脂乳、明胶、蛋白质、蛋白胨、糊精、血清、甲基纤维素等
蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖等 乳酸钙、谷氨酸钠、氯化钠、氯化钾、醋酸铵、硫代硫酸钠等
醇类
酸类 聚合物
山梨醇、甘油、甘露醇、肌醇、木糖醇等
柠檬酸、酒石酸、氨基酸等 葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等
疫苗冻干保护剂组成
取氢氧化铝干粉 50 ～ 55kg ， 加入6万毫升沸水中，搅拌均 匀;倒入硫酸100kg，爆沸至棕 褐色，经30～60min后，加温 水，边加边搅拌约至总量为 35 万毫升；用前加水稀释至 100万毫升，温度约为80℃， 盛装在一个缸内
两液等量逐渐流入另一耐酸搪瓷缸 内，蒸汽吹沸熟化10min，调节pH 6.9土0.1，继续熟化3min，稳定pH 6.9土0.1
佐剂的分类
1. 按佐剂物理性质 • • 颗粒型佐剂 非颗粒型佐剂
2. 按佐剂的生物学性质（即Ballanti分类法）
•
•
微生物及其组分
非微生物物质
3. 按佐剂在体内存留的时间 • • 贮存型佐剂（depot type adjuvant） 非贮存型（non-depot type adjuvant）
（一）颗粒性佐剂
乳剂配方与乳化方法
（1）剂在水中法：
将乳化剂直接溶于水中，在激烈搅拌下将油加入，可直接生
成O/W乳剂。若欲得W/O型，可继续加入油，直到发生变型。该
法通常用匀浆器或胶体磨，高速搅拌而得到较好的乳剂。
（2）剂在油中法： 将乳化剂溶于油相，将油相直接加入水相中得 O/W ，如水相 直接加入油相，得到W/O型，如欲得O/W，继续加入至变型。该 法制成的乳剂，一般均匀颗粒直径在0.5µ m左右，比较稳定。
• 注意:佐剂和免疫增强剂的关系? • 有时佐剂也是免疫增强剂.
作用特点：
① 明显增强抗原性微弱的物质诱导机体产生
特异性免疫应答。 ② 用最少的抗原和最少的接种次数，产生足 够的免疫应答。
免疫佐剂作用机理
作用方式
① 改变正常免疫机能，吸引大量巨噬细胞以吞噬抗原； ② 改变抗原的构型，使抗原物质降解，并加强其免疫原性； ③ 延长抗原在组织内的贮存时间，使抗原缓慢降解和缓释， 并发挥免疫系统的细胞间协同作用（巨噬细胞与T细胞， T细胞与B细胞）。
兽医生物制品常用的保护剂
1．5%蔗糖（乳糖）脱脂乳保护剂
蔗糖（或乳糖） 5g，加脱脂乳至 100ml，充分溶解后，110~116℃高压灭菌 30~40 min。
2．明胶蔗糖保护剂
明胶 2%~3%（g/m1）、蔗糖5%（g/m1）、硫脲 1%~2%（g/m1）。先 将 12%~18%明胶液、 30%蔗糖液和 6%~12%硫脲液加热溶解， 116℃高压 灭菌30~40min；
“乳剂”是将一种溶液或干粉分散成细小的微粒，混悬于另一不相溶的液体 中所成的分散体系。被分散的物质称为分散相（内相），承受分散相的液体 称连续相（外相），两相间的界面活性物质称为乳化剂。
乳化剂
1. 天然乳化剂：阿拉伯胶、海藻酸钠、蛋黄以及炼乳 2. 人工合成乳化剂 • 离子型 阴离子类乳化剂：十二烷基磺酸钠和硬脂酸铝
免疫实验动物用的佐剂配制:
(1)弗氏佐剂：矿物油75%~85％，乳化剂15％~25%，混合后经 除菌过滤而成为 FIA ；如向其中加入 0.5mg／ m1 死结核杆菌即 为FCA。使用时，将含抗原的水相，与上述任一佐剂等量混合， 用力振摇即可成为均匀的乳剂。
(2) 白油佐剂：9份油和 1份司本-80混合后加 2％吐温-80和1％
3．SPGA保护剂
蔗糖 76.62g、磷酸二氢钾0.52g、磷酸氢二钾1.64g、谷氨酸钠0.83g、牛血 清白蛋白10g、加去离子水至1000ml，混合溶解，过滤除菌。
免疫佐剂
一、佐剂概念与作用机理
1. 佐剂（新概念）：凡是可以增强抗原特异性免疫应答的物 质称为佐剂。 佐剂（旧概念）：当一种物质先于抗原或与抗原混合或同 时注射于动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗 原的特异性免疫应答,发挥其辅佐作用的物质. 以前作为佐剂使用时没有免疫原性，但现在有所改变，如 IL-2是佐剂和IL-8一类细胞因子佐剂却不一样, 具有免疫调 节和免疫增强作用,单独使用时却具有免疫原性。
（二）非颗粒性佐剂
1．肽类佐剂（peptides）：胞壁酰二肽（MDP）及其衍生物、 去胞壁酰多肽、脂肽和免疫调节多肽。
2．表面活性分子类佐剂：海藻糖合成衍生物（TDM）
3．核酸及其衍生物类佐剂：合成核苷酸聚合体、CpG 4．含硫复合物类佐剂：左旋咪唑 5．碳水化合物高分子类佐剂：香菇多糖、DEAE-葡聚糖 6．细胞因子类佐剂（cytokine）：IL-2、IL-4和γ-IFN等。
A12(SO4)3· 18H2O+6NaOH→2Al(OH)3+2Na2SO4+18H2O
（2）用明矾加碳酸钠合成法
2 KAl(SO4)2+3 Na2CO3+3H2O→2Al(OH)3+3Na2SO4+3CO2↑
（3）用三氯化铝与氢氧化钠合成
A1C13+3NaOH→Al(OH)3↓+3NaCl
用铝粉加烧碱合成法： 2Al(OH)3+12H2O+3H2SO4→Al2(SO4)3· 18H2O A12(SO4)3· 18H2O+6NaOH→2Al(OH)3+2Na2SO4+18H2O
静置沉淀，弃上清后加入约5倍量软 化水，搅拌洗涤、弃上清，如此3～ 5次，检查至硫酸盐合格为止。
另一缸盛80kg烧碱，加水至 100万毫升，加温至75℃
用铜纱筛滤过，用布袋脱水过夜，收 存于容器内，可约得600kg铝胶。
注意事项
① 氢氧化铝吸附力较强，所以要用软化水或去离子水洗涤。 ② 氢氧化铝胶为两性化合物，过酸或过碱都会失去胶态。故要 掌握好化合时的pH值。
~2%硬脂酸铝，经高压灭菌后备用，注射前将配好的油佐剂与
抗原水相1：1混合，强力振摇，可配制成性状良好的乳剂疫苗。
Hale Waihona Puke 大量生产乳剂疫苗:• 油相: 94％白油、6％司本-80、1%~2％硬脂酸铝，灭菌即可；
• 水相：抗原液加2％~4%吐温-80
• 乳化：将油相与水相按3：1~2：1比例配制，先缓速混合，再 通过胶体磨充分乳化，可获得稳定的油包水乳剂苗。 或者将粘稠的W/O乳剂疫苗，再加2％吐温-80生理盐 水，通过搅拌或胶体磨乳化，可制成双相乳剂疫苗。