天狼星红染色

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天狼猩红染色实验报告

天狼猩红染色实验报告

天狼猩红染色实验报告
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称厂家型号
脱水机武汉俊杰电子有限公司JJ-12J
包埋机武汉俊杰电子有限公司JB-P5
病理切片机上海徕卡仪器有限公司RM2016
冻台武汉俊杰电子有限公司JB-L5
组织摊片机浙江省金华市科迪仪器设备有限公司KD-P
烤箱天津市莱玻瑞仪器设备有限公司GFL-230
载玻片及盖玻片江苏世泰实验器材有限公司10127105P-G
正置光学显微镜日本尼康NIKON ECLIPSE E100成像系统日本尼康NIKON DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称厂家货号
无水乙醇国药集团化学试剂有限公司100092683
二甲苯国药集团化学试剂有限公司10023418
天狼猩红染液四川赛因斯特生物科技有限公司
中性树胶国药集团化学试剂有限公司10004160
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无
水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

2、天狼猩红染色:切片入天狼猩红染液中染色8-10min,两缸或三缸无水乙醇脱水;
3、脱水封片:切片放入再放入干净的二甲苯透明5min,中性树胶封片。

4、显微镜镜检,图像采集分析。

三、结果判读:
光学显微镜下胶原纤维红色,背景黄色;偏振光下,Ⅰ型胶原呈橘黄色或亮红色的粗纤维,Ⅲ型胶原呈绿色的细纤维。

四、注意事项:
1、无水乙醇脱水时应控制程度,片子不能残留多余的染液,也不能影响黄色的背景。

天狼星红染色

天狼星红染色

染色结果: 普通光学显微镜
胶原纤维 细胞核
红色 蓝色
偏振光显微镜 Ⅰ型胶原纤维 Ⅲ型胶原纤维
强橙黄色或亮红色 绿色
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-3-
天狼星红染色试剂盒
货号:BB-44333
试剂盒储存条件:
2-8℃密封避光保存。
开盖后组份按要求条件保存。
试剂盒组成:
产品组成 规格
组份 A:天狼星红染色液 组份 B:Mayer 苏木素染色液
使用说明书
V1.7.X
BB-4101-1 100 ml 50 ml 50 ml 1
组份编号
4重要事项 ※ ※ ※
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使用限制: 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
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胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维,广泛分布于各 种脏器,其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维;Ⅱ型胶 原纤维主要是软骨胶原;Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道;Ⅳ型胶原纤维 主要在基膜中。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸 附牢固。偏振光镜检查,胶原纤维有正的单轴双折射光的属性,与天狼星红复合染色液结合 后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。

天狼星红染色原理

天狼星红染色原理

天狼星红染色原理天狼星红是一种常用的组织染色剂,它在生物学和医学领域有着广泛的应用。

天狼星红染色原理是指天狼星红在染色过程中的作用机制和原理。

下面我们将详细介绍天狼星红染色原理的相关知识。

首先,天狼星红是一种亲水性染料,它能够与细胞内的蛋白质结合形成稳定的复合物。

在染色过程中,天狼星红以阳离子形式存在,它能够与细胞内的阴离子基团结合,从而在细胞内形成可见的染色效果。

这种染色效果能够帮助科研人员观察细胞的形态、结构和功能,为细胞学和组织学研究提供了重要的技术手段。

其次,天狼星红染色原理还涉及到染色剂与细胞结构的亲和性。

天狼星红能够与细胞内的特定结构发生亲和作用,如细胞核、细胞质、细胞器等,从而在染色过程中呈现出不同的染色效果。

这种亲和作用是天狼星红染色原理的重要组成部分,也是其在细胞学和组织学研究中得以广泛应用的重要原因之一。

另外,天狼星红染色原理还与染色剂的渗透性和选择性有关。

天狼星红能够通过细胞膜进入细胞内部,与细胞内的特定结构结合并发生染色反应。

这种渗透性和选择性使得天狼星红在染色过程中能够准确地染色目标结构,为科研人员提供了清晰的观察和分析样本的机会。

总的来说,天狼星红染色原理是一个复杂而又精密的过程,它涉及到染色剂的化学特性、细胞结构的生物学特性以及染色过程的物理化学变化等多个方面的知识。

了解天狼星红染色原理不仅有助于科研人员正确地选择和运用染色剂,还能够帮助他们更好地理解细胞和组织的结构与功能,为生物学和医学研究提供更加准确和可靠的数据支持。

总之,天狼星红染色原理是细胞学和组织学研究中的重要内容,它的深入理解和准确把握对于科研工作具有重要的意义。

希望通过本文的介绍,能够使读者对天狼星红染色原理有一个更加清晰和全面的认识,为相关研究工作提供一定的帮助和指导。

天狼星红染色原理

天狼星红染色原理

天狼星红染色原理
原理利用胶原分子与强酸性染料天狼星红结合一起后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。

胶原纤维(collagenousfiber)在三种纤维中数量最多,新鲜时呈白色,有光泽,故又名白纤维。

在HE染色切片中呈嗜酸性,粗细不等,直径0.5~10um,呈波浪形,有分支并交织呈网,胶原纤维的生化成分为I型胶原蛋白。

胶原蛋白(collagen)由纤维细胞分泌,于细胞外聚合成胶原原纤维,经少量黏合成胶原纤维。

胶原纤维是三种纤维中分布最广泛的一种纤维,广泛分布于各脏器内,它在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。

胶原纤维在上述的两种方法中着染不同的颜色,如V.G着染红色,Masson氏着染蓝色或绿色。

这主要取决于染料对组织的渗透、吸附、沉淀和反应,而染料分子量的大小是关键,分子量小的分子移动迅速,行动快,对组织的渗透性较强,能穿透较为致密的组织。

分子量大的染料分子移动较迟缓,渗透力较弱,可作用于组织强求构较疏松的组织,染色时间可适当延长。

在相关的染料中,分子量从小到大依次排列是:苦味酸(黄色):229.11;桔黄G(黄色):452;丽春红(红色):480.42;酸性品红(红色):585.53;苯胺蓝(蓝色):737.72;亮绿(绿色):792.72;甲基蓝(蓝色)>99。

染色是一个较为复杂的化学反应和物理作用的双重过程,在应用这些方法时,根据不同情况,选择不同的方法,认真地操作,方能获得最佳的效果。

天狼猩红染色

天狼猩红染色

已知胶原有四型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)区分并定量这四种胶原纤维,对于研究病变的发生机理和演变过程有一定的意义。

利用胶原蛋白聚合及其缠绕螺旋排列不同的特点,使用天狼星红苦味酸染色法,在偏振光显微镜下,可以根据双折光性和着色的不同,分别显示出四型胶原纤维。

[组织固定与切片]
4%甲醛液固定组织,石蜡切片。

[试剂配制]
(1)天狼星红-饱和苦味酸液:%天狼星红10ml,苦味酸饱和水溶液90ml。

(2)天青石蓝液:天青石蓝,铁明矾,蒸馏水250ml。

溶解煮沸,冷却后过滤,加入甘油30ml,然后再加入浓硫酸(注意硫酸一定要后加入)。

[操作步骤]
(1)石蜡切片厚4~6μm,脱蜡至水。

(2)入天青石蓝液5~10min。

(3)蒸馏水冲洗3次。

(4)天狼星红饱和苦味酸液15~30min;(可用Harris苏木素液淡染细胞核)。

(5)直接用无水乙醇分化与脱水。

(6)二甲苯透明、光学树胶封固。

[染色结果]
普通光镜观察:胶原纤维呈红色,细胞核呈绿色,其他成分呈黄色。

偏振光显微镜下观察:
Ⅰ型胶原纤维:红色或黄色,排列紧密,具强双折光性。

Ⅱ型胶原纤维:多种色彩,疏松网状、弱双折光性。

Ⅲ型胶原纤维:绿色、细纤维、弱双折光性。

Ⅳ型胶原纤维:淡黄色、弱双折光性(基膜成分)。

[注意事项]
为保持色彩鲜艳,应在染色后及时观察并照相。

常用特殊染色结果速记

常用特殊染色结果速记

常用特殊染色结果速记注:为了方便广大病理技术人员熟悉和掌握常用病理技术特殊染色的结果,现将作者摘录整理的“常用特殊染色结果速记”呈现给大家,以便使用者在日常工作和学习中记忆。

内容不一定全面,如有错误请以人民卫生出版社出版的《2016年全国卫生技术资格考试指导-病理学技术》一书为准。

结缔组织染色:1.Mallory三色染色结果:胶原和网状纤维蓝色,软骨、黏液、淀粉样变物资呈淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色,髓鞘和红细胞橘红色。

2.Masson三色染色结果:胶原纤维绿色,肌纤维红色,红细胞橘红色。

胶原纤维染色:1.Van Gieson(V G)苦味酸-酸性品红染色结果:胶原纤维鲜红色,肌纤维、细胞质和红细胞黄色,细胞核蓝褐色。

2.天狼星红苦味酸染色结果:胶原纤维红色,细胞核绿色,其他黄色。

网状纤维染色:1.Gordon-Sweets银氨染色结果:网状纤维黑色,细胞核红色(核固红复染),胶原纤维黄棕色,细胞质淡红(红液复染)。

弹性纤维染色:1.弹性、胶原纤维的双重组合染色法:弹性纤维蓝绿色,胶原纤维红色,背景淡黄色。

2.Gomori醛品红染色法:弹性纤维呈紫红色,背景橘红色。

横纹肌组织染色:1.Mallory磷坞酸苏木素(PTAH)染色结果:细胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌均为蓝色;胶原纤维、网状纤维软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色;粗弹性纤维有时为微紫色;有缺氧早期病变的心肌为紫蓝色或棕黄色。

早期心肌病变组织染色:1.Nagar-Olsen染色结果:缺氧心肌、红细胞红色,正常心肌黄色或黄棕色,细胞核蓝色。

2.Poley显示缺氧心肌染色结果:缺氧心肌红色,细胞核紫色,其他组织呈绿色。

糖类染色:1.过碘酸-Schiff(PAS)染色结果:糖原红色,细胞核蓝色。

黏液物质染色:1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫AB/PAS染色结果:中性黏液物资红色,酸性黏液物资蓝色,混合性黏液物资紫红色。

骨骼肌纤维化 检测指标

骨骼肌纤维化检测指标
骨骼肌纤维化是指骨骼肌组织中胶原纤维过度沉积,导致骨骼肌结构和功能的异常。

以下是一些常用的检测骨骼肌纤维化的指标:
1. 胶原蛋白含量测定:通过组织切片染色或生化分析方法,可以
测定骨骼肌组织中胶原蛋白的含量。

胶原蛋白是纤维化的主要成分之一,其含量的增加可以反映纤维化的程度。

2. 天狼星红染色:天狼星红染色是一种常用的组织病理学染色方法,用于检测骨骼肌组织中的胶原纤维。

胶原纤维在天狼星红染色下呈现红色,通过对染色切片的观察和分析,可以评估纤维化的程度和分布。

3. 转化生长因子-β(TGF-β):TGF-β是一种促进纤维化的细
胞因子。

通过检测骨骼肌组织或血液中TGF-β的水平,可以间接反映纤维化的活性。

4. 金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP):TIMP 是一种抑制金属蛋白
酶活性的蛋白质,金属蛋白酶参与胶原蛋白的降解。

因此,检测TIMP 的水平可以反映纤维化过程中胶原蛋白降解的平衡状态。

5. 磁共振成像(MRI):MRI 可以提供骨骼肌的形态和结构信息。

一些MRI 技术,如T1 加权成像和弥散张量成像,可以用于检测骨骼肌纤维化的程度和分布。

天狼猩红饱和苦味酸染色在大鼠胰腺纤维化评价中的应用

维普资讯
实用 医学 杂志 2 0 年 第 2 卷第 1 期 08 4 6
天 狼 猩 红饱 和苦 味酸 染 色 在 大 鼠胰腺 纤 维 化 评 价 中的应 用
崔叶青

Hale Waihona Puke 张 小丽 李非 要 目的 : 用苦 味 酸 天 狼 猩 红 一 振 光 法 评 价 长 期 高脂 饮 食 导 致 的 胰 腺 纤 维 化 。 方 法 : 立 l 应 偏 建 8周 高 脂
饮食 大鼠模 型 , E染 色观察胰腺形 态变化 , H 苦味酸 天狼猩 红一 偏振光 法对胰腺 纤维化特 点进行评价 。结果 : 长期 高 脂饮食 可以导致大 鼠胰腺 纤维化 改变 . 对苦味 酸天狼猩红 染色结果进行 图像 分析显示胶原 纤维含 量较对照组 明显 增加( P<00 ) 偏光镜下观察示 以 I、 .1 , Ⅲ胶原 为主要成 分。结论 : 苦味 酸天狼猩红一 偏振光 法是评价 胰腺纤维化胶 原沉积的有效方法 。
e au td u i gp c o i u — oa z t n meh d Re u t C r n cHF si d c d t e f r t h n e i e p n r a . i u v l ae sn ir sr s p l r ai t o . s ls i i o h o i D n u e h b o i c a g t a c e s S r s i c n h i
r d san n e e ld t e c l g n c n e tw ssg i c n y i ce s d i h r u t Ds a o a e t h t n te e ti i gr v ae h o l e o tn a in f a t ra e t eg o p wi HF , sc mp r d wi t a a i l n n h h i h

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核图表E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction:心肌梗塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法(参照上图) 红色:胶原纤维绿色:细胞核黄色:其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色(光学显微镜, ×200)2.Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质(黏多糖)染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法(1956)红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×:2.爱先蓝(PH2.5)法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝(PH2.5)染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝(PH1.0)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。

胶原纤维的天狼猩红染色法与Vangieson染色法的比较

维普资讯
1 8・ 2
SC A O R A FA A O I HO N J U N L O N T MY V L 1 O.2 0 2 O . 0 N 20
2 结 果
肝 A组 肝 B组 肝 C组 组 织块 可连续切 片 ,镜 下 细胞无 收缩 ,肝索和 肝血窦分 布清 晰可 见 ,肝 小 叶 间无 裂 隙 。 与 A组无 明显 区别 。 可连续 切片 ,镜下 组织结 构完 整 ,细 胞 收缩小 ,无裂 隙 。
126 酸酒精分色,水洗。 ..
127 分 别人下 液 3 ,2 .. 0’ h
天狼猩红染色法 : 01 . %天狼 猩红 1c 苦 昧酸饱 和液 9 c 0c+ 0c
B Vageo . ni n染色法 : s
苦昧酸饱和液 10c+ %酸性复红 75 e 0c 2 .c +冰
醋 酸 04 一n 3c .1 7 c
社 .9 8,2 19 2—2 . 3
[ 北 京 : 人 民卫 生 出版 杜 M]
18 90
[ ]杜卓 民、实用组织学技术 [ 第 二 版 .北 京 :人 民卫 生 出 版 2 M]
胶 原 纤 维 的天 狼 猩 红染 色法 与 V ni o 染 色法 的 比较 ag sn e
谢 美容 王 玮
12 1 取材 :含胶原纤维多的组织。 ..
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四川解 剖 学杂 志 20 0 2年 第 1 卷 第 2 期 O
122 固定 1%福尔马林或 B u 液。 .. 0 oi n 123 常规脱水、包埋、切片 。 ..
124 切片常规脱蜡人水、双蒸水洗。 .. 125 切片入 H ne 铁苏木素 5 ,自 .. asn ’ 来水洗 1 ’ 0。
胶 原纤 维上 色 ,且 色 彩 呈 品 红 色 ,不 够 鲜 艳 ,无 法 将 胶原 纤维 的偏 振 光性 质 显 示 出来 ,而 天狼 猩 红 对 胶原 纤维 染色效 果较 好 ,它既有 V ni o ag sn染色法 的 e
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苦味酸天狼猩红染色:
取出培养箱内的CFs培养板,取出爬片,标记

PBS洗,5 min×3次

4%多聚甲醛固定15 min

PBS洗,5 min×3次

天青石蓝液染5-10分钟

PBS洗5min× 3次

苦味酸天狼星红液染15-30分钟

PBS洗5min× 3次

苏木精复染5-10min

90%乙醇、95%乙醇、100%乙醇脱水

二甲苯透明,中性塑胶封固

倒置显微镜下观察结果并照相保存

染色结果I型胶原呈亮红色或黄色,III型胶原位于I型胶原的周边呈绿色
[试剂配制]
(1)天狼星红饱和苦昧酸液:0.5%天狼星红10ml,苦味酸饱和液90ml。

(2)天青石蓝液:天青石蓝B1.25g,铁明矾1.25g,蒸馏水250ml。

溶解煮沸、待冷却过滤。

加入甘油30ml,然后再加入浓盐酸0.5ml。

[注]:偏光显微镜观察胶原纤维。

l型胶原纤维:紧密排列,显示很强的双折光性,呈黄色或红色的纤维。

II型胶原纤维:显示弱的双折光,呈多种色彩的疏松网状分布。

III型胶原纤维:显示弱的双折光,呈绿色的细纤维。

lv型胶原纤维:显示弱的双折光的基膜,呈淡黄色。

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