细胞工程作业
一轮复习 苏教版 细胞工程 作业

课时分层作业(三十八)细胞工程1.(2021·南通、扬州、泰州等七市二模)细胞工程技术在制药、医疗、动物繁殖、植物育种等领域广泛应用。
下列相关叙述错误的是()A.利用植物体细胞杂交技术获得的“番茄—马铃薯”具有两种植物的全部优良性状B.利用体外受精等技术可以实现优质奶牛种群的快速扩大,提高经济效益C.利用杂交瘤细胞培养技术可以大量生产单克隆抗体,为癌症治疗等提供药物D.利用自体细胞诱导干细胞技术培育造血干细胞,可避免免疫排斥A[植物体细胞杂交,就是将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术,理论上新的植物体具有两种植物的全部优良性状,但实际上并没有像科学家想象的那样具有两种植物的全部优良性状,A错误;通过体外受精可以获得比正常受精更多的受精卵,从而可以实现优质奶牛种群的快速扩大,提高经济效益,B正确;由于单克隆抗体具有特异性,与治癌药物结合后可以将药物精准运到癌变部位,或直接攻击癌细胞,以达到治疗目的,C正确;机体对细胞、器官等都会发生免疫排斥反应,因此利用自体细胞诱导干细胞技术培育造血干细胞,可避免免疫排斥,D正确。
]2.SOD是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶,它能催化超氧阴离子自由基形成H2O2,增强植物的抗逆性。
下图为培育能够产生SOD农作物新品种的一种方式,有关叙述正确的是()A.①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞B.②、③分别表示脱分化、再分化过程,无需严格的无菌操作C.该育种方式利用了细胞工程和基因工程,能体现细胞的全能性D.利用植物组织培养生产SOD时,需要将外植体培养到胚状体C[①过程中最常用的方法是采用农杆菌转化法将SOD基因导入植物细胞,A错误;②、③分别表示脱分化、再分化过程,均需要在严格的无菌条件下完成,B错误;该育种方式利用了细胞工程和基因工程,从植物细胞培育成植物个体,能体现细胞的全能性,C正确;利用植物组织培养生产SOD时,只需要将外植体培养到愈伤组织即可,D错误。
细胞工程作业

动物细胞工程的应用及展望10092144 金璎细胞工程是生物工程主要组成之一,出现于20世纪70年代末至80年代初,是在细胞水平上改变细胞的遗传特性或通过大规模细胞培养以获得人们所需物质的技术过程。
细胞融合技术作为细胞工程的核心基础技术之一,已在农业、医药、环保等领域取得了开创性的研究成果,而且应用领域不断扩大。
本人将从近些年来动物细胞在动物生物技术中的应用、在生物制药中的应用以及在细胞融合技术方面的应用进行阐述,同时对动物细胞工程未来的发展做出展望。
1.动物细胞工程在动物生物技术中的应用1.1 产生单克隆抗体和细胞因子1.1.1 诊断各类病原体用单克隆抗体可以检测出多种病毒中非常细微的株间差异。
尤其在鉴别菌种及亚型、病毒的变异株以及寄生虫不同生活周期的抗原性等方面更有独特优势。
这些都是传统血清法或动物免疫法所不能做到的,而且诊断异常准确,误诊率大大降低。
单克隆抗体具有高度的特异性和灵敏性,可将抗原抗体反应的特异性大大提高,减少了可能的交叉反应,使试验结果可信度更大。
单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量控制,利于标准化和规范化1.1.2 肿瘤的检测与治疗近年来,应用单克隆抗体可以检查出某些还尚无临床变现的极小肿瘤病灶,这为有效的治疗提供方便。
例如,人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(hAPE1)是一种肿瘤相关抗原,其单克隆抗体纸杯可能作为某些肿瘤早期诊断敏感而特异的指标,并为开展多重免疫学实验及研究提供必要的物质基础。
在肿瘤治疗上,肿瘤的生物免疫治疗已向针对某种肿瘤的特异性McAb转变。
以McAb为导向的导弹可直射癌细胞靶,选择性杀伤癌细胞而对正常组织细胞损伤极小。
根据“导弹”的不同分为免疫化学疗法、免疫毒素疗法和免疫放射疗法。
1.1.3 单克隆抗体作为导向药物的载体单克隆抗体最大的应用前景是有可能最为导向药物的载体。
导向药物是指以具有导向能力的物质为载体的药物,在下一世纪导向药物将会普遍取代目前的常规药物,特别是抗癌药物。
细胞工程作业题

细胞工程作业题判断题1.细胞与组织培养技术是细胞工程最基本技术。
(√)2.细胞融合又称细胞杂交,是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。
(√)3.Van Beneden和Strassbruger分别于1876年和1884年在动物和植物中观察到了受精和精卵融合现象。
(×)Van Beneden和Strassburger分别于1883和1886年在动物和植物细胞中发现减数分裂。
Hhertwig和Strassbruger分别于1876年和1884年在动物和植物中观察到了受精和精卵融合现象4.预防细胞污染是细胞培养成功与否的关键。
(√)5.抽滤式滤器压力比较恒定,滤过效果比加压滤过好,蛋白质不易变性。
(×)加压式滤器压力比较恒定,滤过效果比抽滤滤过好,蛋白质不易变性。
6.0.22μm滤膜可去除支原体,过滤除菌最保险。
(×)0.1μm滤膜可去除支原体,过滤除菌最保险。
一般为0.22μm滤膜除菌效果较保险。
7.四级生物安全是生物安全实验室等级最高的实验室。
( √ )8.酸性活体染料只用于体外活体染色,体内活细胞难以着色。
(×)酸性活体染料只用于体内活体染色,体外活细胞难以着色9.培养细胞一旦发生污染多数将能够挽救。
( × )无法挽救10.反复使用抗生素使微生物产生耐药性,但对细胞本身无影响。
( × )对细胞本身有一定影响判断题1.由细胞接触而抑制细胞运动的现象称为接触抑制。
(√)2.原代培养细胞与体内原组织相似性很小。
(×)相似性大3. Hanks液缓冲能力较强,利用空气平衡。
(×)Hanks液缓冲能力较弱,需利用空气平衡4.合成培养基是十分完全的培养基。
(×)尚未成为十分完全5.原代培养是建立各种细胞系的第一步。
(×)原代培养是建立细胞系第一步6.组织块法不适合于组织量少的原代培养。
( × )特别适合7.动物细胞培养工艺的选择首先考虑的是该产品所涉及的生物反应器系统。
细胞工程作业

我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养,最终发育成完整的新植株。
下图是细胞培养形成兰花植株示意图,请根据图回答:注:胚状体即等同于植物种子的胚的结构。
(1)过程④由愈伤组织形成胚状体要经过和过程。
(2)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入____________ ____ 。
提供必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证 ______________。
(3)一个兰花茎尖在一年之内可以生产出400万株兰花苗,与有性生殖相比,利用植物组织培养快速繁殖植物的优势主要体现在和。
(4)过程③是④是,如果取的是兰花根尖细胞则试管植物叶片是色,原因是。
我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养,最终发育成完整的新植株。
下图是细胞培养形成兰花植株示意图,请根据图回答:注:胚状体即等同于植物种子的胚的结构。
(1)过程④由愈伤组织形成胚状体要经过和过程。
(2)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入____________ ____ 。
提供必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证 ______________。
(3)一个兰花茎尖在一年之内可以生产出400万株兰花苗,与有性生殖相比,利用植物组织培养快速繁殖植物的优势主要体现在和。
(4)过程③是④是,如果取的是兰花根尖细胞则试管植物叶片是色,原因是。
下图为细胞融合的简略过程图,请回答:(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已经用处理,除去了;A、B到细胞C的过程中,常用的物理方法是,融合完成的标志是。
(2)若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用_________技术把D细胞培养成植株。
(3)若A、B是动物细胞,一般取自__________________,然后用使其分散开来。
A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞的手段是,所形成的D称为。
高中生物专题2细胞工程课后作业新人教版选修3

高中生物专题2细胞工程课后作业新人教版选修3(时间:60分钟,分值:100分)一、选择题(每小题2.5分,共50分)1.下列关于细胞工程的叙述,不正确的是( )A.细胞融合技术、细胞培养技术属于细胞工程涉及的技术范围B.动物可通过细胞融合技术培育出新品种C.植物细胞工程采用的各项技术手段的理论基础是细胞的全能性D.植物组织培养是将植物细胞置于包含植物生长和发育所需的全部营养成分的固体培养基上进行培养的技术解析:A项中各项工程学手段是动物细胞工程中常用的技术手段;植物细胞工程的理论基础是细胞的全能性;植物组织培养需要离体培养,此时植物细胞不能自养,需要在固体培养基上培养,且培养基中含有植物生长和发育所需的各种营养成分;综上所述,A、C、D三项正确。
同种动物可通过细胞融合技术得到融合细胞,但此类细胞的全能性仍被抑制,不能发育成新个体。
答案:B2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中,经孕育培育成新个体D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体解析:利用体细胞核移植克隆动物技术可以用来保护濒危物种。
答案:C3.在培育甘薯脱毒健康种苗的过程中不涉及细胞的( )A.有丝分裂B.细胞分化C.减数分裂D.植物细胞全能性解析:甘薯感染病毒后要进行脱毒处理才能恢复其优良特性,获得高产。
脱毒的技术是微型繁殖技术,即利用无毒的茎尖等进行植物组织培养,组织培养的原理是细胞的全能性,细胞要通过脱分化和再分化过程,分裂方式是有丝分裂。
答案:C4.在植物细胞工程中,不同植物的原生质体融合成一个新的原生质体时,需要诱导产生新的细胞壁,参与这一过程的细胞器是( )A.叶绿体、高尔基体B.线粒体、高尔基体C.叶绿体、线粒体D.线粒体、内质网解析:题干所述的生理过程所需能量由线粒体提供,细胞壁的形成与高尔基体有关。
细胞工程作业

细胞工程作业第一篇:细胞工程作业1.简述细胞工程的定义与特点。
2.举一个其它学科技术的例子,说明它如何推动了细胞工程学科的发展。
3.举一例详细说明生命科学理论是如何指导细胞工程技术建立的。
4.举一例说明细胞工程技术又是如何刺激推动生命科学理论体系完善和发展的。
5.简述无菌技术在细胞培养中的重要性。
6.举一例说明MTT法测细胞活力的应用。
7.如何区别正常细胞与凋亡细胞?8.分析讨论细胞培养时选择不同操作方式的依据?9.查阅文献通过一个例子说明培养条件优化、代谢调控在细胞培养生产代谢产物中的作用。
10.请分析激素在植物再生过程中的作用。
11.请分析比较组织培养、胚胎培养两条途径人工繁殖植物的优缺点。
12.胚胎工程动物培育的关键技术环节有哪些?如何控制成功率?13.核移植克隆动物与体外受精动物相比有怎样的优点与缺点?14.如何看待试管婴儿和体细胞克隆带来的伦理学问题?15.分析讨论细胞重组在细胞功能研究与应用方面的价值。
16.举一例说明细胞融合在遗传育种中的应用。
17.对比分析几种细胞工程育种获得性状改良物种方法的优缺点。
18.举例说明说明多倍体育种的具体应用。
19.举例说明单倍体在优良品种选育中的应用。
20.从培养基、培养方法、培养设备上比较分析植物细胞培养与微生物细胞培养的异同。
21.请分析限制植物细胞培养大规模生产有价值次级代谢产物的影响因素。
22.查阅文献,通过一个例子详细说明通过植物细胞或组织培养生产次级代谢产物的应用。
23.举一例说明微藻大规模培养的工艺技术及应用。
24.分析讨论微藻大规模培养及产品开发的限制性因素。
25.微载体与生物反应器结合在实现动物细胞大规模培养方面有怎样的优势?26.分析讨论动物细胞生物制药的优点与存在问题。
27.举例说明动物细胞培养在生物制药中的应用。
28.动植物转基因方法与微生物转基因有什么不同?29.举一例说明利用动物细胞表达制备药用蛋白的工艺技术。
30.举一例说明利用转基因动植物生物反应器表达药用蛋白的具体应用。
细胞工程作业

高三(7)班生物作业植物细胞工程1.基因型为AaBb水稻(含24条染色体)花药经过无菌操作接入试管后, 在一定条件下形成试管苗, 问:(1)愈伤组织是花粉细胞不停分裂后形成不规则细胞团, 愈伤组织形成过程中, 必需从培养基中取得_____________等营养物质。
(2)要促进花粉细胞分裂生长, 培养基中应有_____________和________________两类激素。
(3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根, 再由芽发育成叶和茎。
这一过程必需给予光照, 其原因是_____________能利用光能制造有机物, 供试管苗生长发育。
(4)试管苗细胞核中含_________条脱氧核糖核苷酸链。
(5)培育成试管苗可能出现基因型有_____________。
(6)试管苗根细胞没有叶绿素, 而叶叶肉细胞含有叶绿素, 这是结果。
2.下图是植物体细胞杂交示意图, 请据此回复:(1)图中完成植物体细胞融合过程是(填编号)_________________, 在此过程中, 应用酶工程产品是_________过程。
(2)图中④过程是_________, ⑤过程是_________, ④⑤过程合称_________。
(3)图中①过程用到酶是_________, 作用结果是形成_________。
之所以要用它们是要除去_______________, 除去原因是_______________________________。
(4)在②过程中, 可用化学诱导剂是_________, 可用物理方法是_________。
若在容器中放置若干ab结构, 诱导完成且假设全部细胞都发生了融合, 然后经③过程, 形成d细胞类型有_________种(这里仅考虑2个原生质体相互融合), 从中选出_________进行培养。
(5)c细胞状态是____________________________。
(6)e称为_________, f称为_________, 该植株含有_________。
细胞工程作业

绪论1、细胞工程是一个什么样的学科?它的主要学科背景是什么?细胞工程定义是应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上,遵循细胞的遗传和生理活动规律,有目的地制造细胞产品的一门生物技术。
细胞工程的理论基础——细胞全能性其主要涉及的技术包括:细胞融合,细胞移植,染色体技术和细胞培养技术等总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。
当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。
通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株,并可以产生新的物种或品系。
2、细胞工程在现代生物技术中处于何种地位?细胞工程是作为廿一世纪的支柱产业的生物技术产业中的重中之重,截止20世纪末,全世界生物技术产品销售额已达1000亿美元。
生物技术产业作为一种新兴的高科技高附加值产业,越来越体现出其魅力所在,并逐渐占据现今社会经济的制高点,并进而成为廿一世纪的技术核心。
1996年度诺贝尔奖获得者美国化学家罗伯特.柯尔说:“本世纪是物理学和化学的世纪,下个世纪显然是生物学的世纪。
”3、细胞工程的主要研究内容和研究技术有哪些?其主要研究内容是应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法,按照人们的需要和设计,在细胞水平上的遗传操作,重组细胞的结构和内含物,以改变生物的结构和功能,研究技术有细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等技术。
5、追踪细胞工程研究与应用的最新进展,并预测其发展趋势?自1904年Hanning成功培养离体胚以来,伴随着相关理论与技术的飞速发展,植物细胞工程也取得了巨大的成就。
现在,我们已经可以利用细胞融合及DNA重组等现代生物技术从细胞和分子水平改良现有品种甚至于组建新品种。
1983年转基因植物问世,并于1986年起被批准进入田间试验,美国APHIS到97年1月31日已批准多达两千五百八十四例田间试验。
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细胞工程作业1.细胞死亡有几种形式?各有何特点?有细胞坏死、细胞凋亡。
细胞坏死特点:膜通透性增加,细胞外形发生不规则变化,内质网扩张,核染色质不规则地位移,线粒体及核肿胀,溶酶体破坏,细胞膜破裂,胞浆外溢,从而诱发炎症反应。
细胞凋亡特点:细胞骨架扰乱、粘附力下降。
细胞核和细胞质浓缩。
180-200bp及其倍数的DNA ladder。
胞质出芽,形成膜包围的凋亡小体。
细胞内含物不外泄,无炎症反应。
凋亡细胞可被周围细胞识别并吸收。
2.生物的生殖方式有几种?无性生殖、有性生殖和无融合生殖。
3.细胞分化的基本特征是什么?细胞质和细胞核是如何影响细胞分化的?特点:正常情况下,细胞分化是稳定、不可逆的。
一旦细胞受到某种刺激发生变化,开始向某一方向分化后,即使引起变化的刺激不再存在,分化仍能进行,并可通过细胞分裂不断继续下去。
①细胞核中的遗传物质是在分化时进行基因的选择性表达②细胞质为细胞核的分化提供稳定的环境和能量③具体地说遗传和个体发育中,细胞质调节着核和基因的作用。
受精卵内细胞质的分布是均一的,受精卵经过卵裂,分成许多细胞,这些细胞中含有的细胞质内容是不同的(色素、卵黄粒和线粒体等),以后基因在不同的细胞质中作用下,表现出不同的效应,这就造成细胞和组织的分化。
4.试述动植物两性配子发生过程,二者有何异同?植物配子形成过程:从体细胞中分化形成生殖细胞、减数分裂产生雌雄配子、雌雄配子受精结合形成合子、合子经过一系列细胞分裂和分化成为种子。
动物配子形成过程:增殖期、生长期、成熟期。
5.简述动植物胚胎发育过程。
植物胚胎发育:原胚阶段、胚的分化与成熟。
动物胚胎发育:桑椹胚、囊胚→原肠胚(双胚层或三胚层)→器官原基→个体6.何谓周期细胞、终端分化细胞和G0期细胞?周期细胞:有的细胞未经分化,仍保留着分裂的能力,这种细胞就是周期细胞他们存在着分裂的周期。
终端分化细胞:是不分裂细胞,即细胞永久的失去了分裂能力,而分化为具有一定形态结构及生理功能的组织细胞。
休眠细胞暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进入细胞周期称G0期细胞7.何谓端粒?它与细胞的寿命有何关系?端粒是线状染色体末端的DNA重复序列。
细胞分裂次数越多,其端粒磨损越多,寿命越短。
第三章1、谈谈你对生长培养基和维持培养基中各种组成成分及其在动物细胞培养中所起作用的认识?无机营养成分无机营养元素供应不足时,组织培养材料就会出现一定的缺素症。
有机营养成分提供促进培养细胞生长和分化所必需的有机碳、氮等营养物质。
生长调节物质是促进培养植物生长良好的主要调控因素。
2、谈谈你对血清在动物细胞培养中所起作用的认识?培养基中的血清含量是否越多越好?目前尚不充分了解。
血清中含有多种细胞生长和增殖所必不可少的激素、生长因子以及贴壁和铺展因子,其作用:血清和蛋白水解产物为培养细胞提供氮源。
具有促进细胞生长的能力。
具有促进细胞在培养基质上附着和铺开的能力。
抑制蛋白质水解酶活性的能力。
不是越多越好,对细胞培养存在不良影响。
3、如何判断无血清培养基是否适合动物细胞的生长和增殖?a、细胞至少要在该培养基上经过连续三代测试,使细胞内原先贮存的生长因子已经用完,此后,若细胞还能生长,则说明培养基是适合细胞生长的。
b、原先是异源群体(heterogeneous population)的细胞系,经过在成分明确的培养基中适应选择后,细胞类型可能会变得较为单一。
c、一般来说,转化程度较高的细胞更容易在成分明确的培养基中生长4、动植物细胞培养基的组成和配制方法各是怎样的?有何异同点?母液的配制和培养基的配制1.培养基母液的配制母液的配制是按药品的种类和性质分别配制,单独保存或几种混合4~5ºC保存。
配制好的母液种类一般有:大量元素、微量元素、钙盐、铁盐、有机营养和单独保存的各种生长调节类物质。
需加入过滤灭菌的药品,在高压灭菌后,培养基凝固前加入,并轻摇使混匀。
培养基终体积定容时,可以利用台秤通过重量进行培养基终体积的确定5、植物体外培养所需要的生长调节类物质有哪些?它们的作用是什么?组织培养中生长素的作用:促进细胞伸长生长和细胞分裂,诱导愈伤组织形成,促进生根,诱导不定芽的分化(与细胞分裂素配合),诱导侧芽的萌发与生长,胚状体的产生等细胞分裂素的作用:促进细胞分裂,诱导愈伤组织或器官分化不定芽,抑制顶端优势而促进茎的增值,抑制离体组织或器官衰老。
赤霉素类:促进诱导形成的不定芽正常发育成小植株。
脱落酸:抑制蛋白质合成,抵消和抑制生长素、细胞分裂素和赤霉素发挥作用,诱导休眠,促进衰老和脱落,抑制气孔开放,减少蒸腾作用,对一些培养物芽的形成有促进作用。
乙烯:促熟作用,促进脱落和衰老,促进胶、漆、松脂等次生物质的排泌,促进菠萝开花,增加黄瓜等雌花数量。
6、何谓培养基、生长培养基、维持培养基、合成培养基、天然培养基、无血清培养基?培养基是离体培养组织或细胞赖以生存的营养基质,是为离体培养材料提供的近似生物体内生存的营养环境。
生长培养基是指用来培养细胞使其快速生长增值的培养基。
维持培养基是指只能用来维持培养细胞的存活,但不能促使细胞生长和增值的培养基。
合成培养基是指按照体内细胞所需营养的种类和数量配成的成分明确的培养基。
天然培养基包括各种动物的体液,组织提取液,水解乳蛋白无血清培养基是指培养基中没有血清,而是各种因子来代替血清。
1、试述动物细胞原代和传代培养方法。
组织块培养法消化培养法2、如果你在动物细胞原代培养中,遇到细胞不迁移或迁移生长缓慢的情况,你将采取哪些措施来解决?3、试述动物细胞固定化培养的原理和方法。
4、你认为胚胎干细胞培养与其它细胞培养相比,难点在哪里?5、体外培养动物细胞的形状主要有哪几种类型?你如何理解细胞形状的可塑性?体外培养的动物细胞,按照其生长方式可以分为:1.贴壁生长型细胞(贴壁型细胞)2.悬浮生长型细胞(悬浮型细胞按照贴壁型细胞的体外培养时的形态,主要分为四大类:成纤维细胞型细胞上皮型细胞游走型细胞多形型细胞6、体外培养动物细胞的生长曲线有何特点?细胞系的演化过程是怎样的?如何理解体外培养细胞的去分化现象?7、对体外培养细胞进行常规检查主要有哪几方面内容?如何判断和排除微生物污染、病毒污染、化学污染和交叉污染?体外培养细胞的常规性检查的目的是:考察三个问题污染与否?pH环境是否适宜?细胞的生长状态如何?1.微生物污染监测细菌感染时,有的引起培养液混浊,镜下可见大量细菌,有的培养液明显改变如怀疑污染,必要时可向肉汤或琼脂培养基里滴少量培养物,置37℃温箱培养数日,观察有无菌落形成,以验证是否污染。
2.培养液观察在正常情况下,培养液呈桃红色,用一般恒温箱培养时,随细胞生长时间延长,二氧化碳(CO2)积累增多,在超出缓冲范围后,营养液酸化变黄,此时如不调节pH,对细胞会发生不利影响,严重时细胞脱落死亡。
营养液碱化变红除因瓶口不严二氧化碳(CO2)溢出外,也可能由于培养瓶和瓶塞刷洗不洁,残留碱性物质所致。
更换营养液的时间,可依营养物的消耗而定,细胞生长旺盛时2-3d换一次,生长缓慢时3-4d亦可。
3.细胞形态观察生长状态良好的细胞在一般显微镜下观察时透明度大,轮廓不清,只有用相差显微镜,才能看清细胞的细微形态。
细胞机能不良时轮廓增强,胞质中常出现空泡、脂滴和其它颗粒状物,细胞之间空隙加大,细胞形态常变得不规则和失去原有特点,如上皮细胞会变成纤维细胞等4.细胞计数5. 细胞活性检测可用对色素的吸附性来判断细胞的死活。
用活细胞占计数细胞中的百分比表示其活力8、为什么要对细胞系进行特性鉴定?鉴定方法有哪些?9、为什么要对培养细胞进行冻存?试述非玻璃化冻存和玻璃化冻存细胞的原理和方法。
10、体外培养细胞的细胞分裂是否同步?如何得到同步化的细胞?11、器官培养与细胞培养相比有何不同?成体器官培养和胚胎器官培养有何不同?器官培养有哪些方法?器官培养在生物学和医学上有哪些应用?1、何谓细胞融合、细胞杂交、同核体、异核体、种内杂交细胞、种间杂交细胞、胞质体、核体、微细胞、重组细胞?细胞融合(cell fusion)系指用人工方法把两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。
细胞杂交(cell hybridization)特指用人工方法把不同类型的两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。
同核体(homokaryon):由同一亲本细胞融合而来。
异核体(heterokaryon):由不同亲本细胞融合而来。
微细胞:外包少量胞质和胞膜的细胞。
种间杂交细胞(interspecific hybrid cell):亲本细胞来源于不同的种,即两个亲本细胞至少基因型是不同的。
种内杂交细胞(intraspecific hybrid cell),亲本细胞来源于同一个种,即两个亲本细胞至少细胞类型是不同的。
核体(karyoplast)又叫小型细胞(minicell),主要由细胞核组成,外面包围着少量细胞质和细胞膜.胞质体(cytoplast)又叫无核细胞(anucleate cell),由完整细胞的绝大部分细胞质组成,外面包有细胞膜。
2、试述生物体内和体外存在哪些自发的细胞融合现象?人工诱导细胞融合有哪些诱导方法?(一)受精(二)体内细胞的自发融合肌管(myotube)形成破骨细胞(osteoclast)形成巨细胞(giant cell)形成胚胎着床肿瘤细胞融合(三)体外细胞的自发融合1、小鼠和鸡成肌细胞的融合2、肿瘤细胞的融合(一)病毒诱导细胞融合(二)化学方法诱导细胞融合(三)物理方法诱导细胞融合3、试述如何采用细胞融合方法制备和鉴定黑白相间嵌合体小鼠?制备:分别将黑色和白色小鼠的8-细胞胚胎从母体内取出,除去透明带,将二者并合,再放回养母子宫内,最终产出黑白相间的嵌合体小鼠。
4、试述细胞融合的原理以及杂交细胞的筛选方法。
细胞在诱融剂或正弦电场作用下凝集,彼此靠近。
两个相邻细胞之间的质膜相互融合,随后两个亲本细胞质膜上的受体、糖蛋白、糖脂等质膜成分也在融合后的质膜上重新分布。
细胞质发生融合。
细胞核融合,形成单核融合细胞。
非选择性筛选和选择性筛选两种。
5、试述杂交细胞染色体丢失的机制和特点。
无论种内杂交细胞还是种间杂交细胞都会发生染色体丢失现象。
一般来说,种内杂交细胞远比种间杂交细胞的染色体稳定性大。
亲本细胞一方或双方都是永生性细胞系的时候才会丢失。
种间杂交细胞的染色体丢失是很普遍的现象。
6、试述杂交瘤技术生产单克隆抗体的原理和技术过程。
原理:B淋巴细胞分泌抗体的功能。
骨髓瘤细胞的永生性。
(一) 融合亲本细胞的准备1、致敏B淋巴细胞的准备2、骨髓瘤细胞的准备(二)细胞融合将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞按比例混合(5:1),PEG (1000~4000)诱导细胞融合。
(三)杂交瘤细胞的筛选 HAT培养液筛选(四) 能稳定分泌特异性单抗的杂交瘤细胞的筛选(五)杂交瘤细胞的克隆化培养(六)单克隆抗体的生产和纯化1、胚胎移植的生理学基础是什么?(1)同种动物的供,受体的生殖器官的生理变化是相同的,为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。