白色念珠菌
白色念珠菌环境检测标准
白色念珠菌环境检测标准白色念珠菌是一种常见的真菌病原体，常见于空气、土壤、水源及其他环境中。
白色念珠菌有时会引起医疗机构感染病例，特别是在有免疫抑制患者的病房内。
因此，白色念珠菌的环境检测对于保护患者和工作人员的健康非常重要。
在进行白色念珠菌的环境检测时，需要遵守一定的标准和程序。
以下是白色念珠菌环境检测标准的相关内容。
一、检测标准1. 室内空气中白色念珠菌的检测标准：空气中白色念珠菌的浓度不得超过1CFU/m3。
二、采样时间1. 室内的检测：在具有代表性和稳定状态的环境中进行采样和检测。
采样应在人员和空气活动最少的时间进行，最好是在清晨或已经停止工作时间进行采样，采样时间长短应根据实际环境来确定。
2. 室外的检测：随机选择不同的时间段采样是最好的方法，以获得有代表性的数据。
一般来说，最好选择早晨和傍晚两个时段进行采样。
采样时间长短应根据实际环境来确定。
三、采样点1. 室内的检测：应选择代表性、容易受到环境影响和可能污染的区域进行采样，例如：空调通风口、水管、地毯、墙壁、天花板角落等。
2. 室外的检测：应选择代表性且有可能污染的区域进行采样，例如：道路、空气跑道、垃圾堆放场、建筑物附近等。
四、采样方法1. 室内的检测：（1）空气中白色念珠菌的采样方法：空气中白色念珠菌的采样应采用空气采样器进行，采样器应根据实验室标准操作，在环境内风速1m/s，采样时间30min。
（2）表面白色念珠菌的采样方法：应使用消毒过的无菌棉签涂取表面样品，面积应大于25cm2，然后用空气管吸取样品，直接送到实验室进行检测。
五、环境检测的质量控制要求1. 空气采样器应每隔两周进行一次校准，确保采样器的准确性和稳定性。
2. 实验室应按照标准操作规程操作，以确保分析过程的准确性和可重复性。
3. 实验室应参加外部质量控制方案，例如质控实验和环境标准样品等，以确保实验室分析的质量和可靠性。
4. 应定期维护和检查检测设备以确保设备性能的稳定性和精度。
白色念珠菌
2019/1/30
11
鉴定依据
1、菌落特征 2、显色培养基反应 3、厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成 典型的厚膜孢子 4、芽管形成 有孢子长出短小芽管 5、生化试验 6、注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别。
12
2019/1/30
检查步骤
增菌 分离培养 初步判断 芽管试验 结果判断
21
念珠菌显色培养基(CHROMagar)
2019/1/30
蛋白胨 10.2g 琼脂 15g 氯霉素 0.5g 灭菌水 1000ml 色素 22.0g 除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解， 调节pH 值至6.3±0.2。滤过，加入琼脂， 加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解，倾注 22 平皿。
白色念珠菌
简介
1
白色念珠菌的典型特征 显微镜下特征 白色念珠菌菌落形态 鉴定依据 检查步骤 白色念珠菌与酵母菌的鉴别
2
白色念珠菌的典型特征
白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形，直径 为3~6µm，革兰染色为阳性，但菌体着色 不均匀，以出牙方式繁殖，在适宜的培养 基上出芽生孢子及假菌丝生长，在假菌丝 间其末端形成厚膜孢子。 白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解 NGL，使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下 显色。
17
2019/1/30
结果判断
供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一 次检出结果为准，不再复试。
2019/1/30
18
沙氏葡萄糖液体培养基
用途：用于药品抑菌剂效力检测中细菌检 测、真菌的培养 葡萄糖 40g 水 1000ml 蛋白胨 10g 除葡萄糖外。取上述成分，混合，微温溶 解，滤过。加入葡萄糖，溶解，分装，灭 菌。
白色念珠菌
简介
a
1
• 白色念珠菌的典型特征 • 显微镜下特征 • 白色念珠菌菌落形态 • 鉴定依据 • 检查步骤 • 白色念珠菌与酵母菌的鉴别
a
2
白色念珠菌的典型特征
• 白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形，直径为3~6µm，革兰 染色为阳性，但菌体着色不均匀，以出牙方式繁殖，在适 宜的培养基上出芽生孢子及假菌丝生长，在假菌丝间其末 端形成厚膜孢子。
• 原理： • 蛋白胨提供氮源，维生素，生长因子；葡萄糖提供碳源；琼脂
是凝固剂。
a
21
念珠菌显色培养基(CHROMagar)
• 蛋白胨 10.2g • 琼脂 15g • 氯霉素 0.5g • 灭菌水 1000ml • 色素 22.0g • 除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH 值至
6.3±0.2。滤过，加入琼脂，加热煮沸,不断搅拌至琼脂完 全溶解，倾注平皿。
2020/6/3
a
25
酵母菌在显色培养基上的颜色和 菌落形态
2020/6/3
a
26
常见念珠菌及酵母菌生化试验结 果
2020/6/3
a
27
a
28
2020/6/3
a
17
结果判断
• 供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准， 不再复试。
2020/6/3
a
18
沙氏葡萄糖液体培养基
• 用途：用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测、真菌的培养 • 葡萄糖 40g • 水 1000ml • 蛋白胨 10g • 除葡萄糖外。取上述成分，混合，微温溶解，滤过。加入
钟,混匀，用纱布滤过,补足原水量。取琼脂，水500ml, 混 合，加热溶解。将以上两种溶液混合，摇匀，分装，灭菌。
白色念珠菌病PPT课件
1
白色念珠菌病是由白色 念珠菌感染引起的禽类上消 化道的一种真菌病，其特征 是上消化道黏膜出现白色假 膜和溃疡。
2
【流行特点】
3
白色念珠菌病可感染鸡、火鸡、 鸽、鸭等禽类，幼禽多发，发病率 和死亡率在鸽和火鸡均很高，成年 禽也可发病。本病四季均有发生， 炎热多雨季节尤甚，病禽和带菌禽 是主要传染源，主要经污染饲料和 饮水感染。圈舍卫生条件差，通风 不良，饲料单一，长期使用抗菌素 等是本病的诱因 。
19
【防治要点】
参见曲霉菌病
20
4
【临床特征】
5
白色念珠菌病禽表现为生长不良，
羽毛松乱，精神沉郁，食欲废绝
6
排出混有大量尿酸盐的绿色稀便 7
【大体病变】
8
病变主要出现在口腔
内有白色坏死物
9
或口腔内有痂皮和白色易剥离的坏死物10
食道和嗉囊黏膜有干酪样假膜（幼鸽） 11
食道和嗉囊黏膜有干酪样假膜（幼鸽1）2
严重时可导致嗉囊 穿孔，造成局部皮下和皮肤坏 13
有嗉
Hale Waihona Puke 白囔色黏霉膜
菌明
性显
病增
灶厚
（，
肉表
鸡面
）
14
嗉囔黏膜增厚，有白色霉菌性病灶（鸡） 15
嗉囊黏膜表面有假膜性坏死物（鸡） 16
嗉囔黏膜上有黄白色
假膜性坏死，易于剥离（鸡）
17
食道和嗉囊黏膜表面有圆形溃疡灶18
物胃严 ，内重 肌有者 胃白， 内色腺 容干胃 物酪黏 变样膜 绿坏和 （死肌 鸽
白色念珠菌和抑菌效力检查方法专家讲座
白色念珠菌和抑菌效力检查方法专家讲座
第15页
4、1、2、3类供试品1g或1ml接种菌量为 105～106cfuห้องสมุดไป่ตู้4类供试品中1g或1ml接 种菌量为106～108cfu，接种菌液体积不 得超出供试品体积0．5%～1% ，充分 混合，使供试品中试验菌均匀分布。
5、将接种供试品在试验期间置20～25℃， 避光贮存，贮存温度改变应尽可能控制在 最小范围，并预防被污染。
白色念珠菌和抑菌效力检查方法专家讲座
第6页
培养基
1、胰酪胨大豆肉汤培养基 2、胰酪胨大豆肉汤培养基 3、 沙氏葡萄糖肉汤培养基
白色念珠菌和抑菌效力检查方法专家讲座
第7页
培养基适用性检验 菌种
铜绿假单胞菌pseudomonasaeruginosa） 金黄色葡萄球菌（staphycococcus） 白色念球菌（Candida albicans）] 黑曲霉（Aspergillus niger） 大肠埃希菌（Escherichia Coli） 菌液制备同控制菌培养基适用性检验
依据产品类型，在要求接种时间，分别从上述 每个容器中取供试ml(g)，用pH7.0无菌氯化钠 -蛋白胨缓冲液稀释成1：10、1：102、1： 103等稀释级。
白色念珠菌和抑菌效力检查方法专家讲座
第18页
结果判断
1、抑菌剂效力依据各间隔时间测定菌数1.0 lg值相对于初始值（0时菌数1.0 lg值）降低 程度进行评价（见表），试验结果按有效数 字修约规则进舍，保留一位小数点。结果符 合表，要求可判断该产品抑菌效力符合要求。
白色念珠菌和抑菌效力检查方法专家讲座
第9页
结果判定
被检培养基菌落数与对照培养基菌落 数相比大于70%，菌落形态大小应与 对照培养基上菌落一致。判该培养基 适用性检验符合要求。
白色念珠菌和新型隐球菌病
Thank You ! 不尽之处，恳请指正！
谢谢！
增生性念珠菌病等。鹅口疮最为常见，
2021/1/12
6
新型隐球菌病
潜伏期为数周至数年不等。
3.3中枢神经系统新型隐球菌病
以新型隐球繭脑膜炎最常见。患者起病缓
慢，病初症状不明显，常有头痛，可位于前
额、双侧颞部、枕后或眼眶后，多为胀痛或
钝痛，呈间歇性。伴低热或不发热。
3.4肺新型隐球菌病
新型隐球菌主要通过肺进入人体，但是，
2021/1/12
5
3.临床表现
白色念珠菌
3.1皮肤念珠菌病
念珠菌感染皮肤皱褶处，如腋窝、腹股沟
下、会阴部、肛门周围，自觉瘙痒，表现为
界限淸晰的皮肤红斑及糜烂，周围敗在丘疹
、水疱和脓疱，呈卫星状分布。
3.2黏膜念珠菌病
口腔念珠菌病为最常见的浅表性念珠菌病。
包括急性假膜性念珠菌病（鹅口疮）、念珠
菌性口角炎、急慢性萎缩性念珠菌病、慢性
少数形成厚膜孢子及真菌丝。在血琼脂及沙 氏琼脂上生长良好，适宜温度25-37度。
新型隐球菌病病原体：是由新型隐球菌引起 的 一种深部真菌病，可累及脑膜、肺、皮肤
、骨骼系统和血液等器官和部位。新型隐球 菌是隐球菌属的一个种，在免疫功能低下的 患者中也可引起隐球菌病。
2021/1/12
3
2.流行病学
2.1 传染源 白色念珠菌：念珠菌病患者、带荫者以及被念珠 菌污染的食物、水等均为传染源。 新型隐球菌病：从鸽粪、水果和土壤中可分离出 新型隐球菌，也可从健康人的皮肤、黏脱和粪便 屮分离出来。 2.2 传播途径 白色念珠菌：（1）内源性 （2）外源性（主要通 过直接接触感染） 新型隐球菌病：主要通过呼吸道
白色念珠菌
念珠菌显色培养基(CHROMagar)
念珠菌显色培养基根据酶底物法，白色念 珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL， 使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。
1%吐温80-玉米琼脂培养基
• 黄色玉米粉 40g • 琼脂 10～15g • 聚山梨酯80 10ml • 水 1000ml • 取玉米粉、吐温80 及蒸馏水500ml, 混合，65℃加热30 分
2020/3/2
酵母菌在显色培养基上的颜色和 菌落形态
2020/3/2
常见念珠菌及酵母菌生化试验结 果
细菌名称
白色念珠 菌
热带念球 菌
啤酒酵母 菌
酿酒酵母 菌
蔗糖试验 + + +
生化试验
葡萄糖发酵
麦芽糖发酵
+
+
+
+
+
-
+
-
尿素酶分解 -
2020/3/2
钟,混匀，用纱布滤过,补足原水量。取琼脂，水500ml, 混 合，加热溶解。将以上两种溶液混合，摇匀，分装，灭菌。
2020/3/2
白色念珠菌与酵母菌的鉴别
• 1、酵母菌在显色培养基上不显色，为乳白色。 • 2、酵母菌无假菌丝和厚膜孢子 • 3、酵母菌可发酵蔗糖不能发酵麦芽糖。 • 以上实验结果和特征可与念珠菌进行鉴别。
葡萄糖，溶解，分装，灭菌。
2020/3/2
沙氏葡萄糖琼脂培养基
• 用途：用于真菌的分离培养 • 葡萄糖 40g • 琼脂 15～18g • 蛋白胨 10g • 水 1000ml • 除琼脂和葡萄糖外。混合，微温溶解，滤过。加入琼脂和
葡萄糖，溶解，分装，灭菌。
2020/3/2
白色念珠菌的研究进展(3)
白色念珠菌的研究进展摘要随着医疗技术的快速发展，白色念珠菌作为重要的条件致病菌，其感染问题日益受到临床关注。
本文综述了近年来白色念珠菌在生物学特性、致病机制、耐药机制以及诊断与治疗等方面的研究进展。
通过深入探讨，旨在为临床防治白色念珠菌感染提供新的理论支撑和实践指导。
关键词：白色念珠菌；生物学特性；致病机制；耐药机制；诊断；治疗白色念珠菌是一种常见的条件致病菌，广泛存在于人类皮肤和黏膜上。
在人体免疫力下降或菌群平衡失调时，白色念珠菌可大量繁殖并引起各种感染，如口腔念珠菌病、念珠菌性阴道炎、念珠菌性皮炎等。
此外，在医院环境中，白色念珠菌也是引起院内感染的重要病原体之一。
因此，对白色念珠菌的研究具有重要的临床意义。
白色念珠菌的致病能力与其独特的生物学特性密切相关。
它可以在多种环境下生长繁殖，具有较强的环境适应能力。
同时，白色念珠菌还具有复杂的致病机制，包括粘附、侵袭、菌丝形成和生物被膜形成等多个环节。
这些机制使得白色念珠菌能够在宿主细胞内寄生、繁殖，并引起严重的感染。
近年来，随着医疗技术的进步和抗生素的广泛使用，白色念珠菌的耐药性逐渐增强，给临床治疗带来了极大的挑战。
因此，深入研究白色念珠菌的耐药机制、寻找新的治疗靶点和药物已成为当前研究的热点。
本文旨在全面梳理近年来白色念珠菌的研究进展，包括其生物学特性、致病机制、耐药机制以及诊断与治疗等方面的内容，以期为临床防治提供新的思路和方法。
在研究方法上，本文采用文献综述的方法，广泛收集国内外相关领域的学术文献，进行系统的分析和总结。
1 白色念珠菌的生物学特性研究进展1.1 细胞壁结构与功能白色念珠菌的细胞壁是其重要的保护屏障，对其生长、繁殖和致病性具有重要作用。
近年来，研究人员通过分子生物学和遗传学技术，对白色念珠菌细胞壁的结构和功能进行了深入研究。
发现细胞壁中的多糖、蛋白质和脂质等成分与白色念珠菌的致病性和耐药性密切相关。
1.2 代谢途径与适应性白色念珠菌具有较强的代谢能力和适应性，可以在不同的环境下生长繁殖。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA目录1.用途2. 诊断意义3. 赛润ELISA classic - 检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质，试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1 注意事项7.2 样品准备和储存7.3 试剂盒反应试剂的准备7.4 检测程序概要7.5 检测过程8. 检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2 检验有效性标准8.3 计算赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA（定量）8.4 检测结果分析9.性能特性9.1 重复性9.2 敏感性和特异性10.警告10.1警告和安全措施10.2废料处理11.参考文献V9.03/06-1赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA试剂盒用于人抗体(IgG/IgM/IgA)的酶联免疫检测- 体外诊断用-IgG试剂盒(定量) 编号: ESR117GIgM试剂盒(定量) 编号: ESR117MIgA试剂盒(定量) 编号: ESR117A检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操作1.用途赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA试剂盒主要用于定性和/或定量检测人血清或血浆中抗白色念珠菌的抗体。
由于细胞质和数量减少的细胞壁成份组成的复合抗原的存在，使得能够在浅表性和侵入性霉菌病感染的不同时期，进行抗念珠菌属抗体的检测，。
2.诊断依据白色念珠菌是属于类酵母真菌科的、普遍存在的一种酵母菌。
表1：具有医学相关性的真菌除了引起浅表性感染的酵母型之外，而所谓的假菌丝体是类酵母真菌的另一种形态学表现。
芽管和假菌丝体的产生主要发生在侵入性感染的病人体内。
念珠菌属酵母菌能够产生和分泌多种酶，使兼性病原体微生物能够穿透血管和粘膜屏障。
念珠菌属各种病菌一般是通过污物的污染进行传播的，主要的入口是鼻咽通道，但脂肪酸、酸性pH值和敌对性菌群等也会引起皮肤表面抑制真菌感染的功能障碍，从而导致浅表性的念珠菌病。
病菌感染粘膜后，侵入性的霉菌病会从胃肠道向外传播。
类酵母真菌对不同上皮粘膜的附着是通过粘附蛋白和外部细胞膜细微结构的差异来实现的，下面流程图描述了重度感染病人体内引起感染传播扩散的（假设性）过程：图1：念珠菌的感染过程念珠菌属的细菌不属于健康人群生理活动的微生物菌群，但可以观察到它对人类宿主的普遍感染。
念珠菌病根据下面的主要特征可分为两大类：表2：念珠菌感染的特征念珠菌属感染的血清学诊断是很困难的，一方面酶母菌短时间的定植会引起免疫反应，另一方面在免疫抑制病人体内，系统性的念珠菌性霉菌病可能只会引起低活性的免疫应答。
对于这些病人血清学检测的必要性，要做明确的解释。
此外系统性的念珠菌感染没有典型的临床症状。
目前不同试验系统对念珠菌抗体的检测结果还不具有可比性及可转换性，抗体检测的特异性明显取决于所采用的试验系统（ELISA或HAT）或抗原制备过程，用HAT试验检测IgM抗体高于IgG，因为IgM具有更强的凝集能力。
HAT主要用于检测抗类酵母真菌细胞壁抗原的抗体，从而进行血清学解释，而对于更复杂的情况仅提供了鉴别诊断的机会。
抗体滴度的变化可以用ELISA试验来检测，而HAT无法检测，因此两种检测方法应该联合使用，尤其是针对IgM抗体活性降低而同时IgG抗体增加的情况。
目前还没有哪一种检测技术能够在念珠菌感染的血清学诊断单独使用，对于高危人群的监测和治疗控制最好是几种血清学检测方法联合使用。
3.赛润ELISA classic - 检验原理用抗原包被微量板孔，制成固相载体。
加患者血清到板孔中，其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合，形成免疫复合物。
除去多余物质后，加入碱性磷酸酶标记的IgG、IgA和IgM抗体，使之与上述免疫复合物反应。
洗板，除去多余的结合物，加入底物（对硝基苯磷酸盐）。
该反应产生有颜色产物，颜色强度与特异性抗体含量成正比。
4.试剂盒的组成5.其它检测所需物质- 普通实验室所需的仪器装置- IgM检测: 赛润类风湿因子Rf -吸附剂（产品编号Z100/5ml和Z200/20ml）- 分光光度计，波长405纳米，建议参考波长范围620纳米- 690纳米（例如650纳米）- 37℃温箱- 湿盒- 蒸馏水。
6.储存及稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1注意事项只有全部使用赛润ELISA classic试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他制造商的产品。
尤其是标准血清，对照血清以及酶标记物，必须使用试剂盒配备的，不要使用其它批号产品。
稀释缓冲液，洗液，终止液和底物溶液可用于所有赛润ELISA classic试剂盒。
ELISA classic试剂盒内所有试剂均必须正确地存放。
应在未开封的情况下，保存于2-8℃，并在有效期（见标签说明）内使用。
详细的稳定性和储存资料在“6. 储存及稳定性”内将加以详述。
每一种试剂都是经过校准以保证最佳的检测结果。
这些试剂如果未经规定被稀释或改动都会导致检测的敏感度的降低。
在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
应按照规定刻度截断微孔条。
如果铝袋破损或者开启装有干燥剂的铝袋后而未以夹子封紧的，则不要继续使用。
开始试验前，将所有试剂置于室温。
从试剂管中吸取试剂的时候，应注意使用无菌技术以防污染。
为避免假阳性结果，吸加酶结合物时，吸嘴应确保不接触或喷洒于小孔的外面，注意不要盖错瓶盖或管盖。
试验结果的可重复性依赖于充分混合试剂。
使用前振荡装有对照血清的小管和所有稀释过的溶液（例如使用混合器）。
小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。
请注意在吸取标本 / 对照血清，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
只有严格遵守赛润ELISA classic试剂的试验说明才会得到最佳的检测结果。
如果实验中未严格遵守控制质量控制认证文件上的有效性特异准则，则试验结果无效。
洗涤不充分将影响试验结果：应该小心进行洗涤。
洗涤步骤应遵守相关洗涤器（平底孔，孔直径7毫米，深10.9毫米）指导手册进行。
重要的是所有的孔内均应加入相同体积的洗涤缓冲液。
洗涤结束时，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打，以确保所有孔内均无洗涤缓冲液。
避免产生泡沫！如果使用自动洗板机，注意正确操作。
7.2 样本准备储存虽然，在检验中不会产生副影响，但为避免干扰结果，应保留使用高血脂的、溶血的或污染的血清。
样品不应加热灭活。
7.2.1样品稀释开始试验前，患者的待测样品必须以稀释缓冲液稀释如下（V1+V2）：赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgA稀释后及加入微孔板前，样品必须充分混合。
赛润ELISA classic白色念珠菌IgM类风湿因子干扰类风湿因子抗体是IgM的自体抗体，可与IgM免疫复合物结合。
非特异性IgM 抗体（风湿因子）的存在将导致IgM检测的假阳性结果。
另外，也存在弱结合的病原体特异性IgM抗体被强结合的IgG抗体取代的可能性。
在这种情况下，IgM的检测将得到假阴性的结果。
因此，在进行IgM检测前应用类风湿因子吸附剂对血清作预处理。
（赛润类风湿因子吸附剂，产品编号Z100 (5ml/25样品)及Z200（20ml/100样品））。
首先应该使用稀释缓冲液(V2)对类风湿因子吸附剂(V1)进行如下稀释：然后将患者的待测样品(V1)在此Rf-稀释缓冲液(V3)中进行稀释：7.2.2样品储存密封的患者样品可在冰箱中2-8℃保存7天。
≤ -20℃可保存更久。
避免样品反复冻融。
已稀释的样品可在2-8℃保存一星期。
7.3试剂盒反应试剂的准备7.3.1微孔条微孔条置于一框架内，并与干燥剂一同封于铝袋之中。
应将不需要的微孔条取下并重新放入铝袋。
将袋口折叠2-3次，并以夹子夹紧，确保铝袋的密封性。
7.3.2对照血清/ 标准血清对照和标准血清稀释，可直接使用。
对于每次试验和每批检测体系，无论使用的微量板数目的多少，均应包括阴性阳性对照孔。
界定对照应作双份。
如果定量试验，标准血清也应作双份。
不要用Rf-吸附剂处理对照血清！7.3.3抗人IgG, IgA或IgM抗体，用AP标记（即用）禁止将不同试剂盒的酶标抗体混合使用。
同一试剂盒才能达到最佳检测效果。
7.3.4洗液以1：30稀释浓缩洗涤缓冲液（V1）至体积V2。
例如：7.3.5样品的稀释缓冲液（即用）7.3.6底物（即用）试验时戴手套以避免污染。
必须以无菌针头吸取底物溶液。
7.3.7 终止液（即用）7.4检测程序概要白色念珠菌IgG / IgM/ IgA定量进行IgM检测时先吸除RF 因子样品稀释液（患者样本）IgM:1+100IgG/IgA:1000↓将稀释的样本，和立即可用的对照血清 / 标准血清，加到微量孔内（100微升）↓↓洗涤↓加入已稀释的酶标记抗体溶液（100微升）洗涤↓加入底物溶液（100微升）↓↓加入终止液（100微升）7.5检测过程7.5.1将检测所需数目的微孔条放到微孔板框上并准备好一张标签。
7.5.2在微量孔内分别加入100微升的已稀释样本对照血清。
留一个孔为底物空白使用，例如：7.5.3将样品于湿盒内37℃（± 1℃）孵育60分钟（± 5分钟）。
7.5.4 孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔（使用自动洗板机或手工洗板）：- 吸去或甩去洗液- 每孔内加入300微升洗液- 吸去或甩去洗液- 重复洗涤过程3次（共4次！）- 将微孔板翻转过来在纸巾上拍打，使微孔中不再含有液体7.5.5 加入酶标记抗体。
于相应孔内（底物空白除外）加入100微升IgG / IgM / IgA酶标记抗体7.5.6湿盒内37℃（± 1℃）孵育30分钟（± 1分钟）*。
7.5.7孵育后，以洗液清洗板孔（洗涤见上）7.5.8加入底物于每孔内加入100微升底物溶液（包括底物空白孔）7.5.9 湿盒内37℃（± 1℃）孵育30分钟（± 1分钟）*。
*注意：在特殊的工作环境下有必要对孵育时间进行调整。
7.5.10终止反应每孔内加入100微升终止液，轻微振荡微孔板以混合溶液。
7.5.11读取消光度以底物空白为空白对照液，60分钟内读取405纳米的OD值，建议参考波长范围为620纳米-690纳米（例如650纳米）。
8．检测结果评估赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA（定量）8.1 4PL单点定量法用赛润ELISA classic试剂检测，抗体浓度可通过逻辑对数模型（4PL, 4个参数）来计算，该模型对浓度曲线有很精确的适用性。