薄层色谱法分离菠菜叶色素
菠菜中色素的提取分离和鉴定(有机化学实验)

菠菜中的色素提取、分离及鉴定一、实验目的1.进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用2.了解菠菜中主要色素的基本性质,通过菠菜色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法及原理3.掌握用紫外光谱和荧光光谱鉴别菠菜中色素的原理及方法二、菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分,如叶绿素(绿色)、胡萝卜素(橙黄色)和叶黄素(黄色)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C 55 H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素 b(C 55H 7O 6N 4Mg),结构见图1。
二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但分子中大的烷基结构使它易溶于丙酮,乙醇,乙醚,石油醚等有机溶剂。
胡萝卜素( C 40H 56 )是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体,即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素,其中β - 异构体含量最多,也最重要。
在生物体内,β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。
目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素 A 使用,也可作为食品工业中的色素。
叶黄素( C40H56O2 )是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与β - 胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。
N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3C OCO 2CH 3CH 2CH 2OOCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a 和叶绿素b 的结构(叶绿素a :R=CH 3, 叶绿素b :R=CHO )H 3C CH 3RCH 3H 3CH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素和叶黄素的结构(β-胡萝卜素:R =H , 叶黄素: R = OH ) 菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)

从菠菜中提取叶绿素实验报告(3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告(精选3篇)从菠菜中提取叶绿素实验报告篇1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg };胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯,有三种异构体;叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时,从上到下颜色依次为:黄绿色,蓝绿色,黄色和橙色。
【实验仪器】研钵,色谱柱,丙酮,乙醇,乙醚,中性氧化铝,菠菜叶,烧杯,漏斗,玻璃棒,滤纸,剪刀,脱脂棉,纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶,用剪刀剪碎,放入研钵中研磨,研磨时放入少量碳酸钙,防止研磨过猛破坏叶绿素结构,研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中,加入30mL配好的乙醇乙醚溶液,盖上表面皿,防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间,填充色谱柱,在最下面垫入脱脂棉,再盖上一个小滤纸片,装入氧化铝至4/5处,再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中,转入分液漏斗,加入10mL水洗涤,除去水层(下层),再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中,加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器,收拾实验室,打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显,但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候,我觉得不应该用纱布挤干,因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了,导致后来的实验现象没有很明显,经过对比,没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发,所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显,因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的,15分钟足矣。
菠菜叶中叶绿素的提取和分离

实验 菠菜叶中叶绿素的提取和分离一 实验目的1.掌握从菠菜叶中提取叶绿素的方法;2.了解薄层层析的原理,掌握薄层层析的一般操作和定性鉴定方法二 实验原理1.叶绿素提取高等植物体的叶绿体色素有叶绿素和类胡萝卜素两类,主要包括叶绿素a (C 55H 72O 5N 4Mg)、叶绿素b(C 55H 70O 6N 4Mg)、β—胡萝卜素(C 40H 56)和叶黄素(C 40H 56O 2)等4种。
叶绿素a 和叶绿素b 为吡咯衍生物与金属镁的配合物,胡萝卜素是一种橙色天然色素,属于四萜类,为一长链共轭多烯,有α、β、γ三种异构体,其中,β异构体含量最多。
叶黄素为一种黄色色素,与叶绿素同存在于植物体中,是胡萝卜素的羟基衍生物,较易溶于乙醇,在乙醚中溶解度较小。
根据它们的化学特性,可将它们从植物叶片中提取出来,并通过萃取、沉淀和色谱方法将它们分离开来。
RR=H ; 叶黄素 R= OH2.薄层色谱 薄层层析是快速分离和定性分析微量物质的一种极为重要的实验技术,具有设备简单、操作方便而快速的特点。
它是将固定相支持物均匀地铺在玻片上制成薄层板,将样品溶液点加在起点处,置于层析容器中用合适的溶剂展开而达到分离的目的。
用此法分离时几乎不受温度的影响,可采用腐蚀性显色剂,而且可在高温下显色,特别适用于挥发性小或在较高温度下易发生反应的物质,同时也常用来跟踪有机反应或监测有机反应完成的程度。
薄层层析按分离机制不同可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析等,最常用的为吸附薄层层析,在此主要讨论。
吸附层析中样品在薄层板上经过连续、反复的被吸附刑吸附及展开剂解吸附过程,由于不同的物质被吸附剂吸附的能力及被展开剂解吸附的能力不同,放在薄层上以不同速度移动而得以分离。
通常用比移值(Rf)表示物质移动的相对距离:的距离展开剂前沿至原点中心点中心的距离色斑最高浓度中心至原 f RRf值计算示意图1.起点线; 2. 展开剂前沿a.色斑最高浓度中心至原点中心的距离b. 展开剂前沿至原点中心的距离MgNCH2CH3NCH3HHNRCH3NCH3OCOOCH3OOCH3CH3CH3CH3R=CH3; 叶绿素a;R=CHO;叶绿素b;叶绿素:吡咯衍生物和镁的配合物,是植物进行光合作用必需的催化剂,易溶于石油醚等非极性溶剂中。
菠菜中提取叶绿素

实验菠菜色素的提取和色素分离(extraction of pigments from spinach and chromagraphic isolation【实验目的】(1) 通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法; (2) 通过薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理; (3) 从菠菜中提取出叶绿素、胡萝卜素、叶黄素等色素并加以分离。
【实验原理】色谱法利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(即分配)的不同,或其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组分分开。
薄层色谱法是其中一种微量快速的分析分离方法。
它具有灵敏、快速准确等优点。
薄层色谱属于固-液吸附层析的类型。
通常是把吸附剂放在玻璃板上成为一个薄层,作为固定相,以有机溶剂作为流动相。
实验时,把要分离的混合物滴在薄层板的一端,用适当的溶剂展开。
当溶 剂流经吸附剂时,由于各物质被吸附的强弱不同,就以不同的速率随着溶剂移动。
展开一定时间后, 让溶剂停止流动,混合物中各组分就停留在薄层板上显示出一个个色斑的色谱图。
若各组分无色, 可喷洒一定的显色剂使之显色(如图)。
混合物中各物质在薄板上随溶剂移动的相对距离称为比移值(Rf 值)。
溶质的最高浓度中心至原点中心的距离溶剂前沿至原点中心的 距离如下图中:(a )原板 (b )已展开层析板 图薄层色谱装置图图薄层色谱效果图在一定条件下,各物质具有一定的 R f 值。
不同物质在相同条件下,具有不同的 R f 值。
因此,可利用R f 值对物质进行定性鉴定。
但物质的R f 值常因吸附剂的种类和活性、薄层的厚度、展开剂及温 度等的不同而异。
所以在鉴定样品时,常用已知成分作对照试验,在同一个薄层板上进行层析,然 后通过Rf 值的比较,对物质作定性鉴定。
根据斑点的面积大小和颜色的深浅的标准物的对照下还可、卄 “一曰.进行定量。
化合物的吸附性与其极性成正比,化合物分子中含有极性较大的基团时吸附性也较强。
菠菜中色素的提取分离和鉴定(有机化学实验)

菠菜中的色素提取、分离及鉴定一、实验目的1.进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用2.了解菠菜中主要色素的基本性质,通过菠菜色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法及原理3.掌握用紫外光谱和荧光光谱鉴别菠菜中色素的原理及方法二、菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分,如叶绿素(绿色)、胡萝卜素(橙黄色)和叶黄素(黄色)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C 55 H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素 b(C 55H 7O 6N 4Mg),结构见图1。
二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但分子中大的烷基结构使它易溶于丙酮,乙醇,乙醚,石油醚等有机溶剂。
胡萝卜素( C 40H 56 )是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体,即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素,其中β - 异构体含量最多,也最重要。
在生物体内,β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。
目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素 A 使用,也可作为食品工业中的色素。
叶黄素( C40H56O2 )是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与β - 胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。
N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3C OCO 2CH 3CH 2CH 2OOCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a 和叶绿素b 的结构(叶绿素a :R=CH 3, 叶绿素b :R=CHO )H 3C CH 3RCH 3H 3CRH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素和叶黄素的结构(β-胡萝卜素:R =H , 叶黄素: R = OH ) 菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
菠菜色素的提取和分离实验报告

菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言:菠菜是一种常见的食材,它不仅味道鲜美,而且富含多种营养物质。
其中,菠菜叶中的色素成分具有重要的生物学和营养学意义。
本实验旨在通过提取和分离菠菜叶中的色素,探究其组成和结构。
一、实验材料与方法:1. 实验材料:菠菜叶、无水乙醇、正己烷、醋酸乙酯、石油醚、氯仿、硅胶薄层色谱板。
2. 实验步骤:(1)菠菜叶的提取:将菠菜叶洗净并切碎,加入适量的无水乙醇中,浸泡30分钟,使色素充分溶解。
然后用滤纸过滤,收集菠菜叶提取液。
(2)色素的分离:将菠菜叶提取液与正己烷进行液液分配,重复3次,使色素分配到正己烷层中。
然后将正己烷层收集,蒸发溶剂,得到色素提取物。
(3)色素的纯化:将色素提取物溶解于醋酸乙酯中,进行液液分配,重复3次,使色素分配到醋酸乙酯层中。
然后将醋酸乙酯层收集,蒸发溶剂,得到纯化后的色素。
(4)色素的分离:将纯化后的色素溶解于石油醚中,进行液液分配,重复3次,使色素分配到石油醚层中。
然后将石油醚层收集,蒸发溶剂,得到分离后的色素。
(5)色素的鉴定:将分离后的色素溶解于氯仿中,进行薄层色谱分析。
将硅胶薄层色谱板浸泡于氯仿中,然后将色素溶液滴于色谱板上,放入色谱槽中,进行上升式开发。
开发完毕后,用紫外灯照射,观察色谱板上的色素带。
二、实验结果与分析:经过提取、分离和纯化,成功地从菠菜叶中提取到了色素。
通过薄层色谱分析,我们观察到了色谱板上的色素带,根据色素带的位置和颜色,可以初步判断菠菜叶中含有叶绿素、类胡萝卜素等多种色素成分。
三、实验总结与思考:通过本次实验,我们成功地提取和分离了菠菜叶中的色素。
然而,我们只能初步判断色素成分的种类,对于具体的结构和含量还需要进一步的分析和研究。
此外,本实验采用的是传统的提取和分离方法,还可以尝试其他更先进的技术,如高效液相色谱等,以提高分离效果和准确性。
结语:菠菜色素的提取和分离实验为我们了解菠菜叶中的色素成分提供了基础。
菠菜色素的提取和分离
实验名称:菠菜色素的提取和分离一、实验目的1、通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法;2、通过柱色谱和薄层色谱分离操作,加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
二、实验原理绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg),其差别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶绿素b。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体,即 -胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素,其中β-胡萝卜素含量最多,也最重要。
在生物体内,β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A。
目前β-胡萝卜素已可进行工业生产,可作为维生素A使用,也可作为食品工业中的色素。
叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比,叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
NN N N H 3C CHCH 2R CH 2CH 3CH 3H 3C O CO 2CH 3CH 2CH 2O O CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3MgH 3C CH 3R CH 3H 3CR H 3C CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素(R = H ) 叶黄素(R =OH )H 3C CH 3CH 3CH 2OHCH 3CH 3维生素A 三、 操作步骤1、菠菜色素的提取取2g 新鲜菠菜叶,与10mL 甲醇拌匀研磨5分钟,弃去滤液。
残渣用10mL 的石油醚-甲醇(3:2)混合液进行提取,共提取两次。
合并液用水洗后弃去甲醇层,石油醚层进行干燥、浓缩。
薄层色谱法分离菠菜叶色素
2012/11/27
一、实验目的
1.掌握薄层色谱法的原理、操作方法; 2.利用薄层色谱法对菠菜叶色素进行分离。
Hale Waihona Puke 二、实验原理 薄层色谱法 薄层色谱法是一种微量、快速和简单的色谱方法, 它不仅是一种定性定量分析的重要手段,还是一种 有效的分离提纯方法,在有机化学、生物化学和制 备分离领域具有广泛应用。 特点:设备简单,操作方便迅速,分离效率高,有 较高的灵敏度和灵活性,既适合分离微量样品,又 适合于大型制备色谱。
四、仪器与试剂
活化硅胶板、层析缸、玻璃棒、研钵; 95%乙醇、石油醚(60~90 ℃)、丙酮、菠菜叶。
直立式层析缸示意图
五、实验步骤
1. 硅胶板的活化 于烘箱中105~110℃活化0.5h。 2. 菠菜叶绿素的提取 将1~2片新鲜菠菜叶剪碎放于研钵中研磨,然后加入20ml石油 醚—乙醇(1:1)混合溶液继续研磨3min,用吸管将萃取液转 移至分液漏斗中,用等体积的水洗涤两次,将上层有机相转移 至干燥的小锥形瓶中,用无水硫酸镁干燥。 3.分离与鉴定 在经活化的硅胶板一端约1cm 处,用铅笔轻轻划上起始线,用 管口平整的毛细管吸取提取液点样,斑点直径约为2至3mm。 在层析缸中加入约深0.5cm的展开剂(丙酮:石油醚=1:2),将 点好样的硅胶板放入其中进行展开,当展开剂前沿爬至上端约 1cm处时,取出硅胶板并立即用铅笔记下溶剂前沿位置,晾干 后计算各斑点的Rf值。
五、实验步骤
4. 菠菜叶色素的分离
从上至下依次为:β-胡萝卜素、去镁叶绿素a、叶绿
六、注意事项
1. 菠菜叶不可研得太烂而成糊状,否则会造成分离困 难; 2. 用水洗涤萃取液时,不要剧烈振荡,否则容易乳化; 3. 于层析缸中加入展开剂后可摇动几下,令其蒸汽达 到饱和; 4. 点样时不要点破硅胶层表面,点样完毕后应先令溶 剂挥发后再进行展开。
薄层色谱法分离菠菜叶色素实验装置
薄层色谱法分离菠菜叶色素实验装置
薄层色谱法是一种常用来分离和分析复杂混合物的技术,可以用来分离菠菜叶中的色素。
以下是一种常用的薄层色谱法分离菠菜叶色素的实验装置:
1. 薄层色谱板(通常使用硅胶薄层或者铝箔质地的薄层板):薄层板是实验的基础,色素在薄层板上进行分离。
2. 试样溶剂:用于溶解菠菜叶中的色素,常用的溶剂有甲醇、乙醇、丙酮等。
3. 试样滴管:用于将试样溶液滴在薄层板上。
4. 开发槽:一般为玻璃槽,用于放置薄层板并将溶剂浸泡薄层板。
5. 开发溶剂:可以是单一溶剂或者混合溶剂,用于在薄层板上进行开发。
6. 紫外可见光谱仪(或者紫外灯):用于检测薄层板上分离出的色素,判断各色素的迁移距离。
实验步骤:
1. 将菠菜叶切碎,并用试样溶剂将其浸泡一段时间,使得色素溶解。
2. 用试样滴管将溶解后的菠菜叶样品滴在薄层板的起点位置。
3. 将薄层板放入开发槽,并加入开发溶剂至适当高度,使其浸泡薄层板。
4. 当溶剂前进至一定距离后,取出薄层板,用紫外可见光谱仪(或紫外灯)观察色素的迁移距离。
5. 根据色素的迁移情况,可以判断出菠菜叶中的不同色素成分。
这是一种简单的薄层色谱法实验装置和步骤,当然还存在其他不同的方法和装置,根据实际需要选择合适的方法进行分析。
菠菜色素实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除菠菜色素实验报告篇一:菠菜中色素的提取预习实验报告实验名称:菠菜中的色素提取一:实验目的:了解薄层色谱在有机物分离中的应用,掌握薄层色的基本原理;加强有机物分离提纯技术的训练。
二:实验基本原理:菠菜的叶片中含有叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。
叶绿素是绿色植物的主要色素,分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。
高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b共存,叶绿素a为一蓝黑色固体粉末,在乙醇溶液中为蓝绿色,并有深红色荧光。
而叶绿素b为暗绿色固体粉末,其乙醇溶液为黄绿色,并有红色荧光。
叶绿素不溶于水,易溶于有机溶剂,常可用极性有机溶剂,例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等。
从植物匀浆中提取它。
叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中,与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起,分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。
胡萝卜素是一种橙色的天然色素,属于四萜类,为一长链共轭多烯。
有α、β、γ三种异构体,其中β异构体最多。
叶黄素是一种黄色色素,与叶绿素同存在与植物体内,是胡萝卜素的羟基衍生物,较易溶于乙醇,在石油醚中溶解度较小。
根据它们的化学特性,可将它们从植物叶片中提取出来,并通过萃取、沉淀和色谱方法将它们分离出来。
色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组份分开。
薄层层析是一种微量、快速和简便的色谱方法。
由于各种化合物的极性不同,吸附能力不相同,在展开剂上移动,进行不同程度的解析,根据原点至斑点中心及展开剂前沿的距离,计算比移值。
化合物的吸附能力与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强。
在给定的条件下(吸附剂、展开剂、板层厚度等),化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf值鉴别化合物。
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五、实验步骤
1. 硅胶板的活化 于烘箱中105~110℃活化0.5h。 2. 菠菜叶绿素的提取 将1~2片新鲜菠菜叶剪碎放于研钵中研磨,然后加入20ml石油
醚—乙醇(1:1)混合溶液继续研磨3min,用吸管将萃取液转 移至分液漏斗中,用等体积的水洗涤两次,将上层有机相转移 至干燥的小锥形瓶中,用无水硫酸镁干燥。 3.分离与鉴定 在经活化的硅胶板一端约1cm 处,用铅笔轻轻划上起始线,用 管口平整的毛细管吸取提取液点样,斑点直径约为2至3mm。 在层析缸中加入约深0.5cm的展开剂(丙酮:石油醚=1:2),将 点好样的硅胶板放入其中进行展开,当展开剂前沿爬至上端约 1cm处时,取出硅胶板并立即用铅笔记下溶剂前沿位置,晾干 后计算各斑点的Rf值。
二、实验原理
R甲 = a/c R乙 = b/c Rf值测量方法
三、操作方法
1. 吸附剂的选择和薄层板的制备 2. 薄层板的活化 硅胶板,105~110℃烘箱中活化0.5h。 3. 点样 在距薄层板一端约1cm处用铅笔画起始线;配置样品溶液;毛
细管点样,斑点直径不要太大。 4. 展开 展开剂的选择原则: I. 展开剂的极性应该对分离的物质有一 定的解吸能力,但不
能太大,比被分离物质的极性略小; II. 展开剂对被分离的物质有一定的溶解度。 常用混合溶剂:石油醚—乙醚、石油醚—乙酸乙酯、环己烷—
乙酸乙酯等。 5. 显色 紫外灯显色、碘薰显色、显色剂显色。
四、仪器与试剂
活化硅胶板、层析缸、玻璃棒、研钵; 95%乙醇、石油醚(60~90 ℃)、丙酮、菠菜叶。
五、实验步骤
4. 菠菜叶色素的分离
从上至下依次为:β-胡萝卜素、去镁叶绿素a、叶绿
六、注意事项
1. 菠菜叶不可研得太烂而成糊状,否则会造成分离困 难; 2. 用水洗涤萃取液时,不要剧烈振荡,否则容易乳化; 3. 于层析缸中加入展开剂后可摇动几下,令其蒸汽达 到饱和; 4. 点样时不要点破硅胶层表面,点样完毕后应先令溶 剂挥发后再进行展开。
七、思考题
1.怎样选择合适的展开剂?展开剂极性太大或是太 小会有什么影响?
2.为什么样品斑点直径约为2~3mm? 3.展开剂的高度超过点样线,对薄层色谱有什么影
响? 4Байду номын сангаас为什么极性大的组分要用极性较大的溶剂洗脱?
二、实验原理
色谱有三种形式:吸附色谱、分配色谱和离子交换 色谱。应用较为广泛的是吸附薄层色谱,即固液吸 附薄层色谱,其原理是化合物在吸附剂和展开剂之 间进行反复的吸附和解吸附,吸附能力较弱的溶质 首先被展开剂解吸下来,随展开剂向前移动较快, 而吸附能力较强的溶质解析较慢,随展开剂移动较 慢,从而达到分离的目的。
薄层色谱法分离菠菜叶色素
2012/11/27
一、实验目的
1.掌握薄层色谱法的原理、操作方法; 2.利用薄层色谱法对菠菜叶色素进行分离。
二、实验原理
薄层色谱法 薄层色谱法是一种微量、快速和简单的色谱方法,
它不仅是一种定性定量分析的重要手段,还是一种 有效的分离提纯方法,在有机化学、生物化学和制 备分离领域具有广泛应用。 特点:设备简单,操作方便迅速,分离效率高,有 较高的灵敏度和灵活性,既适合分离微量样品,又 适合于大型制备色谱。