蒽酮法测定苹果中可溶性糖含量实验
苹果、梨以及香蕉中所含可溶性糖和蛋白质的比较测定和探讨
苹果、梨以及香蕉中所含可溶性糖和蛋白质的比较测定和探讨姓名：赵云霞同组者：辛芝红指导教师：郝雪峰（太原师范学院生物系112班学号2011131229）摘要本文用考马斯亮蓝法、蒽酮法分别对苹果、梨和香蕉提取液中蛋白质含量、可溶性糖含量进了测定。
结果表明：等质量的香蕉、苹果、梨中，香蕉含糖量最高，苹果次之、梨最低；香蕉含蛋白质量最高、其次为梨、苹果最少。
Abstract this paper by Coomassie brilliant blue,anthrone colorimetry respectively on apple, pear and bananaextracts.Protein content, soluble sugar content in the determination of. The results show that: the quality of banana,apple, pear, banana and sugar content of apples, pears was the second highest, lowest; Banana containing proteinIs the highest, followed by the least, apple pear 关键词苹果、梨、香蕉、可溶性蛋白质、可溶性糖Key words apple, pear, banana, soluble protein, soluble sugar 引言苹果和梨、香蕉是我们生活中最常见也是最多糖是单糖缩合的多聚物。
水果多糖作为天然植物多糖中的一类，虽然早就引起了人们的注意，但早期的研究主要是为了搞清其作为结构物质在水果质构方面的作用及在水果贮藏与加工过程中的变化与控制，以改善和保持水果及其加工制品的感官品质。
近年来随着天然活性多糖研究的深入，对水果多糖的研究重点也逐步转向了以开发利用为目的的水果多糖的提取分离、结构、化学和生物活性及应用研究，已有人对苹果果肉中多糖蛋白质进行过测定（刘杰超，焦中高2009），但还没有人对三叶草体内多糖做过相关的研究，也未对其叶和茎中所含多糖进行过对比。
可溶性糖含量的测定蒽酮法心得体会
可溶性糖含量的测定蒽酮法心得体会在进行可溶性糖含量测定时，蒽酮法是一种常用的分析方法。
通过该方法，我们可以准确地测定样品中的可溶性糖含量。
进行样品的制备非常重要。
我们需要将样品完全溶解在适当的溶剂中，以确保蒽酮法能够准确地测定可溶性糖的含量。
避免在样品制备过程中引入任何可能干扰测定结果的物质。
蒽酮法的操作相对简单，但仍需要严格控制实验条件。
在进行分析时，我们应遵循标准操作程序，确保测定结果的准确性和可重复性。
此外，正确选择蒽酮试剂的浓度和使用适当的仪器设备也是关键。
在进行测定过程中，注意对实验环境的控制也是十分重要的。
避免有害物质的污染以及其他外界因素对实验结果的干扰，可以提高测定结果的可靠性。
对于蒽酮法测定结果的解读，我们需要结合样品的特性和实际需求进行分析。
根据测定结果，我们可以评估样品的可溶性糖含量，并据此进行后续的数据处理和实验设计。
通过蒽酮法测定可溶性糖含量是一项重要的实验技术。
在实验过程中，我们应严格控制实验条件、合理选择试剂和仪器，并对实验结果进行准确解读。
这将有助于我们更好地理解样品中的可溶性糖含量，并为后续研究提供有价值的参考数据。
蒽酮比色定糖法测定可溶性糖含量
蒽酮比色定糖法测定可溶性糖含量实验目的1.了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理2.学习求标准曲线方程—最小二乘法3. 掌握分光光度计的使用实验原理蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，蒽酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。
蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。
当存在含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。
上述特定的糖类物质，反应较稳定。
反应式：该法特点：灵敏度高，测定量少，快速方便。
实验步骤1．求标准曲线方程取6只试管，按下表配制（移取）葡萄糖（G）标准溶液，沸腾7分钟取出，用自来水冷至室温，用721分光光度计比色，波长620nm，1＃管作为参比(保留)，求标准曲线方程。
（G浓度为200μg／mL，蒽酮试剂：2克蒽酮／每升85%H2SO4）2. 样品含糖量的测定（1）取菜叶（包菜和白菜两个样）准确称取1.00克剪碎研细后，放入大试管，加入25mL蒸馏水，煮沸10分钟，通过漏斗滤入250mL容量瓶中（可以抽滤），并用煮沸蒸馏水提取两次，滤液并入容量瓶中，滤纸上的残渣用水冲两次，冷却定容至刻度。
（2）吸取0.5mL 滤液于编号的三只试管中，以蒸馏水补足1.00mL；另吸取1.00mL滤液于另编号的三只试管中，加蒽酮试剂5.0mL（于冷水浴中操作），摇匀后于沸水浴中煮沸7分钟，取出冷却至室温，以求标准曲线的1＃管作为参比，用721分光光度计在620nm处测吸光度或透过率。
最小二乘法求标准曲线方程的公式：X：G 的浓度（μg／mL）Y：吸光度A＝－�ST本实验要求相关系数r≥0.99。
实验十蒽酮比色法测定植物组织中总糖和可溶性糖的含量
实验十蒽酮比色法测定植物组织中总糖和可溶性糖的含量一、实验目的掌握蒽酮法测定总糖和可溶性糖含量的原理和方法。
二、实验原理蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。
酸可使糖类（如已糖基，戊醛糖及已糖醛酸）脱水生成糠醛，生成的糠醛或烃甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在620nm处有最大光吸收值。
在10~100ug范围内其他颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。
当存在含有较多色氨酸蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。
而对于上述特定的糖类物质，反映较稳定。
多糖和寡糖可用酸水解成单塘和蒽酮试剂反应，因此利用蒽酮法可测组织中总糖和可溶性糖。
这一种方法具有很高的灵敏度，糖含量在30ug左右时就能进行测定，所以可作为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器，试剂和材料1．仪器（1）分光光度计；（6）漏斗，漏斗架个6个（2）电子天平；（7）容量瓶：50ml2个；（3）三角瓶：50ml2个（8）移液管；（4）刻度具塞试管；10ml13支；（9）水浴锅。
（5）试管架，试管夹各2个；2．试剂（1）葡萄糖标准液：100ug/ml；（2）浓硫酸；（3）蒽酮试剂：0.2g蒽酮，溶于100ml浓流酸中，现当日配制使用。
3．材料小麦幼苗分蕖节或其植物的幼嫩组织（大白菜心）。
四、操作步骤1．葡萄糖标准曲线的制作取7支试管，按下表配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液；管号1234567葡萄糖标准液/mL00.10.20.30.40.50.6蒸馏水/mL 1.00.90.80.70.60.70.8葡萄糖含量/ug0102030405060在每支试管中，加入蒽酮试剂4.0ml，迅速浸入冰水浴中冷却。
各加完后一起浸入沸水浴中，管口加盖玻璃球，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸10min取出，用流水冷却，室温放置10min，在620nm波长下比色。
以标准葡萄糖含量（ug）做横坐标，以吸光值作纵坐标，做出标准曲线。
[整理版]苹果中糖含量测定
![[整理版]苹果中糖含量测定](https://img.taocdn.com/s3/m/cc90c15dc950ad02de80d4d8d15abe23482f0318.png)
苹果中糖含量测定（蒽铜比色法）2010/10/8一、基本原理蒽铜可以和游离的己糖或多糖中的己糖基、戊醛糖及己糖醛起反应，反应后溶液城蓝绿色，在波长为260nm处测定其吸光度，此时吸收值最大。
二、试剂和溶液分析中，除非另有说明，限用分析纯试剂、蒸馏水或相同纯度的水。
1）蒽铜试剂（C14H10O）：取2g蒽铜溶于100ml 80%的H2SO4溶液中。
2）葡萄糖溶液（C6H12O6）：标准葡萄糖溶液 0.1mg/ml。
标准葡萄糖溶液的配置：称取葡萄糖100mg，溶于950ml蒸馏水中，用硫酸或氢氧化钠溶液调节溶液的PH=7，定量移入1000ml容量瓶中，稀释至刻度，混匀。
此溶液1ml，含葡萄糖0.1mg。
三、仪器：1）恒温水浴锅。
2）分光光度计。
四、分析步骤：（1）标准曲线的绘制：1）标准比色溶液的配置：适用于3cm光径长度比色皿的光度测量。
按表所示量，将葡萄糖标准溶液（0.1mg/ml）注入6个大试管中，每个试管按表分别加入蒸馏水（ml）和蒽酮试剂（ml），摇匀，把试管放在试管架上，浸入沸水浴中准确煮沸10min，不时摇动，然后取出，用自来水冷却至室温，放置10min。
表一：葡萄糖标准溶液中葡萄糖的含量试剂管号0 1 2 3 4 5标准葡萄糖溶液/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5蒸馏水/ml 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5蒽酮试剂/ml 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.02）吸光度测定：在30min内，以葡萄糖吸光度为零的溶液作为参比溶液，在波长620nm处，用分光光度计测定标准比色溶液的吸光度。
3）标准曲线的绘制：以5ml标准比色溶液中所含葡萄糖的毫克数为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，用Excel作图。
表二：6组浓度测得吸光度值管号 0 1 2 3 4 5葡萄糖标准溶液体积/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5葡萄糖的对应量/mg 0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05吸光度值 0 0.035 0.087 0.110 0.165 0.222表三：标准曲线图（A=εbc）（2）测定：1）①试样及试液准备：称取33.23g苹果，用榨汁机搅碎，置于1000ml烧杯中，加水冲干净榨汁机内壁，最后定容至1000ml，然后用真空抽滤装置过滤。
蒽酮比色法测定可溶性糖
实验三蒽酮比色法测定可溶性糖
一、原理：糖在浓硫酸作用下可经脱水反应生成糖醛，并能进一步与蒽酮反应生成蓝绿色的糖醛衍生物，在一定浓度范围内，其颜色深浅与浓度大小成正比。
二、材料与仪器
植物叶片、分光光度计、水浴锅、漏斗、容量瓶、烧杯
三、步骤
1、取植物叶片0.15g，放入刻度试管中，加蒸馏水10ml。
2、将试管置于沸水中加热提取30min。
3、将提取液过滤，定容于25ml容量瓶。
4、取0.5ml提取液，依次加入1.5ml蒸馏水、0.5ml蒽酮乙酸乙酯溶液和5ml硫酸。
5、沸水浴保温1min。
6、630nm波长下，测定溶液吸光度值。
四、结果计算
可溶性糖含量（mg/g）=217.37X−3.0742∗25
w∗1000∗0.5。
蒽酮法测定可溶性糖方法[仅供参考]
![蒽酮法测定可溶性糖方法[仅供参考]](https://img.taocdn.com/s3/m/d594d35c7375a417876f8f16.png)
蒽酮法测定可溶性糖方法（一) 实验原理糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区吸收峰为630 nm，故在此波长下进行比色。
（二）材料、仪器设备及设计1 材料12种源砂生槐叶片，2种处理，4个重复，共96个样。
2 仪器设备分光光度计，恒温水浴锅，20 ml刻度试管，5 ml和1 ml刻度吸管，5 ml和1 ml的移液枪，记号笔，吸水纸适量。
3 试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1 g，溶于50 ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）100 ug/L蔗糖溶液：1%蔗糖标准液：精确称取蔗糖1.000 g，加入少量水溶解，移入100 ml容量瓶，加0.5 ml 浓硫酸，定容至刻度线。
100 ug/L蔗糖溶液的配制：用移液枪精确吸取1%蔗糖标准液1 ml，加入到100 ml容量瓶，加蒸馏水定容。
（3）浓硫酸（比重1.84）（三）实验步骤1．标准曲线的制作：按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入0.5 ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5 ml 浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管准确保温1 min取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630 nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
管号试剂0 1，2 3,4 5,6 7,8 9,10100µg.1-1蔗糖0 0.2 0.4 0.6 0.8 1/ml水/ml 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 蔗糖量/µg 0 20 40 60 80 1002．取样取不同种源砂生槐幼苗，用蒸馏水冲洗干净，随后用吸水纸吸干水分。
将叶片切下，用锡箔纸包住，放入液氮中冷冻。
取完后将样品放入-80℃冰箱中保存。
设计性实验报告植物可溶性蛋白质和糖含量的测定
设计性实验报告题目植物可溶性蛋白质和糖含量的测定课程名称：基础生物化学实验实验学期：2011至2012学年第一学期植物组织中可溶性蛋白质和糖含量的测定摘要本文以生菜、苹果为材料，采用考马斯亮蓝法（蛋白质）、蒽酮法（糖）、分光光度计法进行了可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定。
结果表明：生菜的蛋白质含量为5.88（mg/g），糖含量为0.0739g/100g；苹果中蛋白质含量为0.2926（mg/g），糖含量为0.2126g/100g。
即说明：生菜中蛋白质含量高于苹果，但苹果中的糖含量更高。
关键词可溶性蛋白、可溶性糖，考马斯亮蓝G-250染色法，蒽酮法，含量测定1、材料与方法1.1 蛋白质含量测定标准蛋白质溶液、考马斯亮蓝试剂、生菜、苹果分光光度计、离心机、研钵、烧杯、电子秤、移液管、试管等1.2 糖含量测定200ug/ml标准葡萄糖、蒽酮试剂、浓硫酸、生菜、苹果试管、水浴锅、分光光度计、研钵、电子秤、移液管、量筒、试管架2、实验步骤蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250染色法）2.1标准曲线的绘制取六只试管，按下表加入试剂，摇匀，向个管加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，并放置5min左右，以0号试管为空白对照，在595nm下比色测定吸光度。
以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2.2样品测定2.2.1样品提取分别秤取生菜、苹果鲜样 0.25～0.5g，用5ml蒸馏水或缓冲液研磨成匀浆后，3000r/min离心10min，上清液备用。
2.2.2 吸取样品提取液1.0ml（蛋白质含量适当稀释），放入试管中，加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置2min后在595nm下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。
糖含量测定2.3.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。
在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。