林木遗传学实验指导

合集下载

林木遗传育种学教学方法与手段

林木遗传育种学教学方法与手段

林木遗传育种学教学方法
林木遗传育种学教学总体上分理论与实践两大部分,具体说,理论教学中以老师讲课、学生阅读文献、做练习题、写小论文,以及课堂交流为主。

实践教学中形式多样,有设计性的实验,如染色体观察和核型分析、植物DNA的提取和鉴定等,也有综合性实验,如植物组织培养、植物基因转化技术,还有到校外教学基地实习,让学生实践杂交技术和优树选择等。

林木遗传育种学实验可分为二类:设计性实验,由学生根据理论知识设计相关实验,写出方案,待老师审阅批准后,统一安排时间实施,学生对实验结果作出分析并完成报告;综合性实验,老师给出初步方案并负责答疑和指导仪器使用,整个实验过程完全由学生完成,要求完成1份综合实验报告。

通过几年的实践,不仅锻炼了学生的论文能力,也大大激发了他们的创新思维。

另外,3天的实习也主要采用类似综合性实验的方式进行,着重要发挥学生的主观能动性。

林木遗传育种学教学手段
林木遗传学的内容多涉及生物微观结构,抽象难懂,课堂以多媒体教学为主,采用图片丰富的幻灯和示意性的动画,并结合实验和观看录像,安排学生读书报告;林木育种学部分,课堂主要讲解引种、选择育种、杂交育种和分子育种的主要理论和程序,实习期间安排学生进行选优和杂交实践,分子育种主要通过实验进行。

近年来,已自制教学课件,并收集了相关的教学影像资料。

课件包括全部教学内容,配有大量彩图、表格等,通过2年教学,收效良好。

另外,影像资料的观看使学生更直观地理解一些抽象的内容,对拓展学生视野也起到重要作用。

林木遗传测定

林木遗传测定

实习一林木遗传测定一、目的与意义实习目的:了解、掌握林木遗传测定的技术与方法。

当开展林木种源试验,子代测定等有关田问试验时,我们采用多种试验设计,如:随机完全区组、拉丁方等设计,目的在于估计试验误差(增进试验精度,分析参试材料遗传的差异性,为进一步选种提供有关信息。

这类设计主要在于控制环境的干扰和影响,因此,一般称为环境设计(environment designs)。

当要了解树木的遗传方差、配合力、遗传力和选择响应等遗传参数(genetics parameter)时,必须依赖于亲属的关系,如亲代一子代以及其后代的关系等才能获得。

这些亲属与后裔之间的关系必须依靠某些交配系统才能得到,这个交配系统一般称为交配设计(mat,ing designs),或简称为遗传设计(genet,ics designs)。

遗传测定(genetics test,)实际上是遗传设计+环境设计工作,目的是通过试验,对选择的育种材料的遗传性进行可靠的评价。

遗传测定过去常称为表型测定(phenotype test.),即对选育出来的表现型材料,如无性系、半同胞或全胞家系、杂交后代等,进行田间对比试验,或根据相关性状进行间接选择,统称为表现型的遗传测定。

它是树木遗传改良中的一个重要工作,像一条主线,贯穿林木育种的全过程。

如种源选择、林分选择、家系选择、无性系选择等,任何一个环节也离不开遗传测定。

遗传测定不仅应用在选择育种上,而且在杂交育种、诱变育种或者弓1种试验上也是不可缺少的重要环节。

可以认为,遗传测定是林木遗传改良的核心工作。

在目前林木育种工作中,处理的育种材料多数属于未经遗传鉴定的表现型。

表现型是林木遗传性与环境条件相互作用的结果,优良的表现型并不等于它的遗传性优良,只有经过遗传测定,认定优良的经济性状受遗传控制,从属于优良的遗传性,才能作为原种,进人到更高一级的育种阶段。

例如笔者参加的“福建省杉木子代测定协作组”对全省1974.以来选择的400余棵杉木“初选优树”进行子代测定,12年结果表明:275株的优树后代大于对照商品种,占68%;其中明显优于对照,选择为“精英树”的有50株,仅占12.5%。

《林木遗传育种学》实验教学大纲

《林木遗传育种学》实验教学大纲

《林木遗传育种学》实验教学大纲学时:16学分:0.5修读专业:林学一、实验课程的目的和要求通过实验课的教学,力求使学生能够对林木育种学的基本理论和概念有更加深刻的认识,在实验过程中培养学生观察问题、分析问题和运用遗传学的基本理论解决林木育种实际问题的能力。

二、实验项目林木遗传育种实验的操作对象是树木等植物材料,这些植物材料生长发育具有一定的规律性且受自然环境因素影响大。

为此,根据学校实验条件,设计了如下实验。

而在具体安排实验时,可根据课程进展以及实验材料准备情况,选择其中的4-6个实验单独开设,也可以选择有联系的几个实实验一植物有丝分裂的观察实验目的:学习植物组织及细胞的固定、解离和压片方法,借以观察植物有丝分裂的过程和染色体的动态变化。

实验内容:利用林木或其它植物种子进行培养,取根的尖端、茎的生长点、芽及其它含有分生组织的器官进行固定、解离和压片,再通过显微镜观察有丝分裂的过程及染色体的动态变化。

实验二植物减数分裂的观察实验目的:通过花粉母细胞减数分裂的观察,认识植物减数分裂过程中各个时期染色体的行为变化及子细胞染色体数目与母细胞染色体数目的差异;掌握植物细胞减数分裂玻片标本的制备方法。

实验内容:植株开花前剪取花朵进行固定,制片,观察植物减数分裂过程中各个时期染色体的行为变化及子细胞染色体数目与母细胞染色体数目的差异。

实验三植物染色体组型分析实验目的:了解染色体组型分析的原理及各项参数意义,学习和掌握染色体组型分析的方法。

实验内容:利用植物有丝分裂中期的染色体图片进行分析,测量染色体长、短臂长度及染色体绝对长度,计算相对长度、臂比值,并划分类型。

根据染色体核型分析各种参数进行配对,排列,粘贴,最后用坐标纸绘模式图。

实验四植物染色体分带技术实验目的:掌握植物染色体分带技术。

实验内容:首先利用植物种子进行培养、制片;然后进行显带处理;最后对处理后的染色体带型进行分析。

实验五分离规律、自由组合规律的验证实验目的:利用玉米一对相对性状、两对相对性状的杂交遗传实验结果,观察分析杂种后代的性状表现,从而加深对分离规律、自由组合规律的认识;掌握遗传学实验结果记录及统计处理方法。

《林木遗传育种学》综合性实验指导书

《林木遗传育种学》综合性实验指导书

《林木遗传育种学》综合性实验指导书实验名称:种质资源调查实验项目性质:综合性所涉及的课程及知识点:种质资源调查的意义、方法.分类、种质资源的收集、种质资源的保存、研究和利用等。

计划学时:4(时间不足,由学生利用课余时间完成)一、实验目的:熟练掌握种质资源调查的意义、方法.分类、种质资源的收集、种质资源的保存、研究和利用。

二、实验内容:1、种质资源调查、分类、研究。

2、种质资源调查状况、利用、及分析评价。

3、本地种质资源保存方式、发展趋势预测。

三、实验仪器设备和材料清单:皮尺(2)、测高器(1)、直径卷尺(2)、生长锥(1)、直尺(1)、,放大镜(1),精密不锈钢尺(1)、指南针(1)、游标卡尺(1)、高枝剪、(1)钢卷尺(1)、海拔表(1)、林业调查测量用表(1)、讲义夹记录本(1)塑料标签牌(2)、种子袋(5)。

注:以上以组为单位另外还应该配备共用仪器设备恒温培养箱,烘箱,冰箱,精密天平,GPS(2)、数码照相机(2)计算器(2)、温度计,剪刀、镊子解剖针等。

四、实验要求:以实习小组为单位进行外业工作,内业工作各自独立完成(利用课余时间)。

1,每人提交一份种质资源的专题报告并进行交流。

2.以实习小组为单位完成一份本地种质资源名录及检索表。

五、实验步骤及结果测试:(一)实验步骤:1、查阅有关本地的文献资料,2、制定调查方案、路线、仪器设备准备。

3、按照种质资源调查要求进行外业调查、拍照、记载、采集材料。

4、材料整理、分类、测定、研究、分析评价。

5、种质资源保存。

(二)结果测试:外业现场进行抽查;内业要求写出实验报告。

六、考核形式:内、外业成绩各占50%。

七、实验报告要求:6、1,每人提交一份种质资源的专题报告并进行交流。

2.以实习小组为单位完成一份本地种质资源名录及检索表、及照片材料。

林木遗传育种学实习报告

林木遗传育种学实习报告

林木遗传育种学——实习报告姓名:陈莉学号: 090101202组别: 01组指导老师:李火根实习一、马尾松优树选择实习目的:通过该项实习,使大家了解并掌握林木优树选择的整个过程,包括 优树选择的制定、外业实地选优,内业资料整理、优树结果的利用等环节。

实习工具:测高器、胸径尺、50米皮尺 实习过程:采用对比树法(三株大树法)。

以候选树为中心,在立地条件相对一致的15米半径范围内(包括30—40株以上),选取仅次于优树候选树的3—5株优势木作对比树。

按优树生长量标准逐项实测,比较鉴定。

候选树达到优树标准可入选,并填好优树登记表。

实习数据:优树登记表(对比树法)优树编号: 4号 选优日期: 2011年11月04日 一、母树所在地点:1、江苏 省 句容 县 下蜀 镇 下蜀 (林场),小地名 武岐山2、海拔 160 米,坡位 上坡 ,坡向 阳坡 ,坡度 2.5°3、土壤种类 黄土 ,土层厚度 20cm ,质地 较细二、林分状况:1、起源 次生林 ,组分 马尾松阔叶林,林龄 30年,郁闭度 37%2、林分健康状况 健康 ,结实状况 不太多三、优树特征 1、生长量 胸径(cm ) 树高(m ) 形数 单株材积 对比结果 优树37.4 15.5 4.9 0.85 优树大于对比树 胸径 23 % 树高 42 % 材积 47 %1 26.2 9.4 4.15 0.25 2 33.0 9.8 4.25 0.423 32.013.54.650.45平均 30.410.94.350.372、树冠冠幅:南北9.0m ,东西8.0m ,平均8.5m ,冠型:南北较长,南面较背面枝干生长好,3、树干通直度0.2 ,圆满度 5 ,自然整枝能力较好,4、分枝特性树干中部分枝粗粗壮,5、树皮特征树皮厚度大于5cm ,树皮指数,6、结实状况良好,7、生长势和健康状况生长势良好,生长力旺盛;健康状况良好,8、木材及其他特性木材材质较好。

林木育种学遗传力的估算实验报告

林木育种学遗传力的估算实验报告

遗传力的估算实验报告一、实验目的通过调查和资料分析,明确遗传力在育种中的意义,学习遗传力的估算方法和利用遗传力计算遗传增益。

二、实验原理遗传力指的是亲本传递某一性状的能力,是当前育种领域中广为应用的一个统计学估值,有广义遗传力和狭义遗传力之分,前者指遗传方差占表型方差的比值;后者指遗传方差中加性方差占表型方差的比例。

狭义遗传力的估算中排除了显性偏差,上位性效应和环境的影响,所得结果较广义遗传力更为可靠。

在子代的表现型方差中究竟有多少成分是受亲本基因型决定的,这是育种实践中值得注意的问题,故遗传力的研究,不仅在理论上有意义,而且为在杂种后代中进行有效的选择,提供了可以参考的依据。

三、内容与实践材料1.利用无性系估算广义遗传力材料:乔松X白松自由授粉子代无性系测定林2.利用半同胞子代估算遗传力材料:长白落叶松自由授粉子代测定林3.由亲-子关系估算狭义遗传力材料:云杉林分及其自由授粉的半同胞家系子代测定林四、遗传力的估算方法及步骤1.乔木X白松(自由授粉)的无性系8个。

每个无性系随机选5个接穗,接在白松上,嫁无性系号 7.172 7 1.025 2.136 0.068 误差 15.352 32 0.480 总计22.52439表格 2 乔松*白松无性系树高多重比较表无性系号树高(米) 显著性 7 2.900 a 3 3.000 a 6 3.200 a 5 3.400 ab 2 3.600 ab 8 3.600 ab 4 3.900 ab 14.2400b计算遗传力将无性系间方差、无性系内方差代入随机模型得:480.02=e σ (1)025.1522=+c e σσ (2)将(1)代入(2)得到,109.02=c σ结论:本次无性系比较试验,估算乔松X 白松自由授粉子代无性系树高单株遗传力为:18.5% 2.今有长白落叶松自由授粉F=5,r=6,小区内栽植5株,取其七年生树高平均值,求其树高遗传力?如从五个家系中选择一个最优家系造林后的遗传增益?表格 3 长白落叶松无性系杂交方差分析表源 III 型 平方和 df 均方 F Sig. 校正模型 5.258a9 0.584 3.150 0.016 截距 122.655 1 122.655 661.360 0.000 家系 1.922 4 0.481 2.592 0.068 区组 3.336 5 0.667 3.597 0.018 误差 3.709 20 0.185 总计 131.622 30 校正的总计8.96729计算遗传力将无性系间方差、无性系内方差代入随机模型得:185.02=e σ (1)667.0522=+c e σσ (2)将(1)代入(2)得到,0964.02=c σ结论:本次无性系比较试验,估算乔松X 白松自由授粉子代无性系树高单株遗传力为:34.3% 3.现有一片5年生的云杉林分,随机选择10株,即自由授粉半同胞后代。

林木育种学实验报告

林木育种学实验报告

林木育种学实验报告一、实验目的通过本实验,旨在了解林木育种学的基本概念、方法和技术,掌握常用的育种技术,培养良好的实验操作技能,并加强对林木育种学的理论知识的理解与运用。

二、实验原理林木育种学是研究如何选择和培育具有优良遗传性状的林木的科学,主要有两种常用的育种方法:选择育种和杂交育种。

选择育种是指通过选择具有优良性状的个体作为父本和母本,再通过交配、选择和繁殖的方法,逐步筛选出优良品种的一种方法。

这种方法通常用于有效传递只有一个基因或少数几个基因控制的性状。

杂交育种是指通过不同个体间进行人工授粉,使基因进行交流、重组,从而培育出具有良好性状的新品种。

这种方法通常用于有效传递多个基因控制的复杂性状。

三、实验器材和药品器材:生物安全柜、移液器、试管架、离心机、PCR仪等。

试剂:DNA提取试剂盒、引物、dNTP、聚合酶等。

四、实验步骤1. DNA提取从林木样本中提取DNA,以获取遗传信息。

采用DNA提取试剂盒的方法,按照说明书进行操作。

将提取得到的DNA样品保存至低温冰箱备用。

2. 引物设计根据所选育种目标,设计合适的引物,用于检测目标基因是否存在。

3. PCR扩增按照PCR实验的标准操作步骤,进行反应体系的配制,并设置PCR程序。

将提取得到的DNA样品与引物进行反应,扩增所需的目标基因。

4. 聚丙烯酰胺凝胶电泳将PCR扩增产物与DNA标记物一同加入琼脂糖凝胶槽中,进行电泳。

通过电泳,根据扩增产物的迁移情况判断目标基因是否存在。

5. 分析结果观察琼脂糖凝胶电泳图像,根据PCR扩增产物的大小和目标基因的迁移位置,判断样本是否具备所需基因。

五、实验结果通过实验,我们获得了琼脂糖凝胶电泳的结果图像,根据扩增产物的大小和目标基因的迁移位置,判断样本是否具备所需基因。

通过对多份样本的分析,我们得到了相应的育种数据,确定了适合育种的优良个体。

六、实验总结本实验通过对林木育种学的实验操作,详细了解了选择育种和杂交育种的基本原理和方法。

林木遗传育种实验报告

林木遗传育种实验报告

林木遗传育种实验报告探索林木遗传育种的方法,以提高树木的生长速度和木材质量。

实验设计:1. 选择具有不同生长速度和木材质量的林木品种,作为实验对象。

2. 将不同品种的树苗分为几组,每组10棵,分别为处理组和对照组。

3. 处理组树苗按照一定比例施用植物生长调节剂。

4. 对照组树苗仅接受基本的生长条件,不进行额外处理。

5. 在实验开始时,测量每棵树苗的高度、直径和叶绿素含量,并记录。

6. 在实验期间,每月对树苗进行浇水、施肥和杂草清除等常规管理措施。

7. 每三个月测量一次树苗的高度、直径和叶绿素含量,并与初始数值进行比较。

8. 实验持续一年。

实验结果:1. 处理组树苗的生长速度显著高于对照组树苗,且差异逐渐增大。

2. 处理组树苗的直径增长速度也明显高于对照组树苗。

3. 处理组树苗的叶绿素含量较对照组树苗高。

4. 处理组树苗的根系发达,树冠状况良好。

实验分析:1. 植物生长调节剂的使用对林木的生长速度和木材质量具有显著影响。

2. 植物生长调节剂能够促进树木的细胞分裂和生长,从而加快生长速度。

3. 植物生长调节剂还能够增强林木的光合作用,提高叶绿素合成和光能利用效率。

4. 处理组树苗的根系发达,有利于吸收土壤中的养分和水分,促进生长。

实验结论:通过使用植物生长调节剂,能够显著提高林木的生长速度和木材质量。

植物生长调节剂促进了树木的细胞分裂和生长,增强了光合作用和光能利用效率。

此外,处理组树苗的根系发达,有利于吸收土壤中的养分和水分,进一步促进了生长。

基于这些实验结果,我们可以给林木育种工作提供了新的思路和方法,有望推动林木遗传育种的发展。

实验展望:1. 进一步研究植物生长调节剂对不同林木品种的适应性和效果。

2. 探索不同植物生长调节剂的配比和用量对林木生长的影响。

3. 结合分子生物学和遗传学方法,研究林木的遗传育种机制,以实现定向育种。

4. 继续观察和研究处理组树苗的生长情况,关注其长期效果和木材质量。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

林木遗传学实验指导实验一植物细胞的有丝分裂实验二植物细胞的减数分裂实验三染色体组型分析实验四基因分离实验一植物细胞的有丝分裂一、实验目的观察树木、花卉细胞有丝分裂各时期染色体的变化和特征,掌握根尖压片技术。

二、实验原理有丝分裂是植物细胞数目增加的主要方式,常见于根尖、茎尖分生区的细胞,细胞经有丝分裂正确地把染色体分配给子细胞,形成两个染色体数目、内容一致的子细胞。

有丝分裂是一个连续过程,根据染色体的形态特征可人为地将分裂期分为前期、中期、后期、末期等四个时期。

三、实验材料发芽的杉木种子根尖;洋葱的幼根。

四、实验用具及药品显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、刀片、镊子、吸水纸、小烧杯、大培养皿、冰箱、恒温水浴锅、量筒、天平。

醋酸、铁矾、苏木精、8-羟基喹啉、秋水仙素、二甲苯、盐酸、叔丁醇、无水乙醇、95%乙醇。

五、实验步骤1.取材⑴杉木种子根尖将杉木种子在自来水中浸泡24h,然后置培养皿中,在25℃下发芽,5~7天后胚根长达10~15㎜时将发芽种子取出。

⑵洋葱根尖培养将洋葱的鳞茎放在盛清水的培养皿内,在室温(20~25℃)下培养使其发根,待根长约10~15㎜时将根取出备用。

2.预处理为了阻止纺缍体的活动,获得更多的中期分裂相,同时使染色体相对缩短,便于染色体分散和计数,可对根尖进行预处理。

可用于预处理的化学药物有生物碱、苷类、酚类及其他物质,常用药物的浓度及处理时间如下:(1)秋水仙碱:浓度为0. 04%~0.2%,处理2~5 h;(2)a-溴代萘:饱和水溶液处理0.5~4 h;(3)对二氯苯:饱和水溶液处理2~4 h;(4)8-羟基喹啉:浓度为0. 002M,处理2~4 h;上述各处理在室温下进行,若低温处理则用蒸馏水在1~4℃下处理24 h。

3.固定经过预处理的材料冲洗干净后,用卡诺氏固定液固定12~24 h,目的是将细胞迅速杀死,使染色体保持固定的形态。

经固定的材料若不立即使用,可换到70%酒精中置于4℃下保存。

卡诺氏固定液的配制:冰醋酸:纯酒精=1:3(体积比)。

4.水解固定好的材料换入蒸馏水中洗净,然后放入1N盐酸溶液中,在60℃下解离5~20min,以便胞间层的果胶类物质解体,使细胞易于分散,便于压片,同时还可使染色体获得一个较为透明的背景。

材料经解离后用蒸馏水洗涤数次,将材料中的酸洗净,以便染色。

1N盐酸溶液的配制:取8.25ml浓盐酸(比重1:19),加蒸馏水至1000ml摇匀即可。

5.染色(铁矾—苏木精法) 苏木精是从墨西哥的一种木本豆科植物洋苏木的心材中提取的一种天然染料,是一种核染色剂,其本身对组织和细胞的亲和力不强,不能直接染色,而必须依靠硫酸铁铵和硫酸铝铵等盐类作媒染剂才能对细胞染色。

由于苏木精适用范围广,染色效果好,且颜色的保存性也较好,故在植物制片技术中被广泛采用。

媒染剂的配制:将铁矾(硫酸铁铵)配成2~4%的水溶液,该溶液较易氧化变质,最好是现配现用;置冰箱中可延缓其氧化,能保存2个月。

染色剂的配制:一般用0.5%的苏木精水溶液,配制时先将苏木精结晶体溶于少量的95%酒精中,完全溶解后再加入蒸馏水,不加瓶塞,而用纱布包扎瓶口,使瓶内外空气能流通。

将其静置一处使其缓慢氧化,室温下半个月至一个月可“成熟”,过滤后使用。

采用下列方法之一可加速染色剂的“成熟”:(1)在100ml新配制的苏木精溶液中加入3~5ml过氧化氢;(2)用煮沸的蒸馏水配制;(3)将新配好的苏木精溶液倾入一个较大的培养皿中,并在2m处用300~500瓦的水银弧光灯照射,同时不断搅拌染色液,约45min即可“成熟”。

染色程序:材料从固定液经50%酒精转入水中→用吸水纸将洗净的材料吸干→在2~4%的铁矾水溶液中媒染2~4 h,如加温(30~40℃)媒染,则可缩短至0.5~1 h→换水洗涤4~5次,每次约5min,务必将残留的铁矾充分冼净→用0.5%苏木精水溶液染色2~4 h或更长时间,染色时如发现染色液混浊,则表示铁矾未洗净,需重新换入水中洗涤后再染色→自来水洗5~10 min→用45%的醋酸分色和软化至合适。

常用的染色法还有醋酸洋红染色法,孚尔根染色法等,其详细操作步骤请参阅有关参考书。

6.压片取一染色适宜的根尖置于洁净的载玻片上,用刀片切除根冠和分生区以上的部分,留下的分生区约1~2mm,加一滴45%的醋酸,用镊子将根尖压碎,加盖玻片,再用带橡皮头的铅笔敲击盖玻片(注意勿将盖玻片错动),使材料均匀分散成一层薄膜,表示细胞已经分离开,盖上滤纸用拇指紧压盖玻片即可。

7.镜检仔细观察制片,了解有丝分裂各时期染色体的行为,将合格的压片制成永久制片。

六、作业绘有丝分裂各时期的细胞形态图,并说明染色体的行为特征。

实验二植物细胞的减数分裂一、实验目的观察植物花粉形成过程中的减数分裂过程及各时期中染色体的变化特征,掌握花粉母细胞涂抹制片技术。

二、实验原理高等植物在形成花粉的过程中,花药内的某些细胞分化成小孢子母细胞(2n),每个小孢子母细胞进行两次连续的细胞分裂,最后产生四个小孢子,每个小孢子内细胞核的染色体数目已经减半,成为单倍体(n)。

根据染色体的变化特征,可人为地把减数分裂分为前期Ⅰ、中期Ⅰ、后期Ⅰ、末期Ⅰ、前期Ⅱ、中期Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ等八个时期。

在适当的时机采集植物的花蕾,经固定后进行染色、压片,在显微镜下观察小孢子母细胞形成花粉时的减数分裂过程。

三、实验用具及药品显微镜、天平、载玻片、盖玻片、解剖针、刀片、镊子、滤纸、冰箱、小烧杯。

醋酸、95%乙醇、铁矾、无水乙醇、苏木精、水合三氯乙醛、丙酸。

四、实验步骤1.采集材料采集材料时要掌握恰当的时机,要采到正处于减数分裂期的花粉母细胞。

不同植物取材时期不同,同一植物在不同地区、不同年份的取材时期也不同,马尾松在南昌地区为3月上旬,杉木为2月上旬,具体哪一天因当年的气温而异,一天中以6~9时为宜。

2.固定采回来的材料用卡诺氏液固定24h左右,然后放入70%的酒精溶液中低温保存。

3.染色用醋酸-铁矾苏木精染色,其配制方法如下:A液:2g苏木精溶于100ml150%的丙酸或冰醋酸B液:0.5g铁矾溶于100ml150%的丙酸或冰醋酸染色液:将A液和B液按1:1比例混合,并在每5 ml混合液中加2g水合氯醛,充分溶解、摇匀。

A液能较长久地保存,染色液一般只能保存一个月,而在两周内使用效果较好,以后会逐渐产生沉淀而失效。

4.压片压片时,用镊子直接从固定液或保存液中取出材料,置于滤纸上吸去多余的固定液,将花药转移到洁净的载玻片上,加一小滴染色液,用镊子或刀片切破花药,并轻轻挤压花药,使花粉母细胞从切口逸出,清除花药壁残渣,加盖玻片,稍停片刻,在盖片上加一滤纸吸去多余的染色液,压片。

5.镜检在显微镜下观察减数分裂各时期染色体的行为。

五、作业1.绘减数分裂各时期的细胞形态图,并描述染色体的行为和特征。

2.比较分析减数分裂与有丝分裂的异同。

实验三染色体组型分析一、实验目的通过实验初步掌握染色体组型常规形态分析方法。

二、实验原理生物细胞内染色体的形态、结构和数目总称为染色体组型,每一生物的染色体组型都是相对稳定的。

分析染色体组型就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各染色体的形态特征,如对染色体的长度、着丝点位置、臂比和随体有无等观测,从而描述和阐明该生物的染色体组成,这对研究生物的遗传变异、生物的系统演化、物种之间的亲缘关系以及生物的起源等均有重要意义。

三、实验材料有丝分裂或减数分裂中合格的染色体制片。

四、实验用具及药品显微镜(附摄影装置)、冰箱、胶卷、目镜测微尺、镜台测微尺、载玻片、盖玻片、酒精灯、剪刀、解剖针、刀片、镊子、毫米尺、铜丝、吸水纸、烧杯、大培养皿、恒温水浴锅、量筒、天平。

醋酸、铁矾、苏木精、8-羟基喹啉、秋水仙素、二甲苯、盐酸、叔丁醇、无水乙醇、95%乙醇。

五、实验步骤1.数染色体数目。

2.测量依次测量染色体长度、长臂和短臂长度(分别量到着丝点中部),记录是否有随体。

3.计算染色体的相对长度相对长度是指单个染色体的长度占单套染色体组总长度的百分数。

染色体的相对长度=100% 单套染色体组总长单个染色体长度 4.计算臂比 以长臂长度为分子,短臂长度为分母,即臂比=短臂长长臂长 5.配对 根据随体的有无及大小、臂比是否相等、染色体长度是否相等进行配对。

6.分类 臂比是反映着丝点在染色体上的位置,据此可确定染色体所属的形态类型,其划分可依据利文(LeWen A.K)等在1964年确定的标准(下表)。

六、作业1.根据染色体长度、长臂长度和短臂长度绘制染色体模式图,绘制时使着丝点处于同一水平线上,并一律短臂在上,长臂在下。

2.将测量和计算的结果分别填入下表。

实验四基因的分离一、实验目的通过一对相对性状的遗传杂交试验,分析F1花粉粒的性状,验证基因的分离原则。

二、实验原理在减数分裂形成配子时,同源染色体上的等位基因会随着所在染色体的分离而分离,形成带有不同基因的配子。

将具有一对相对性状差异的两个亲本杂交,如果这一对相对性状受一对基因控制,且这一对基因之间具有显隐性关系,则其F1产生的雌雄配子各有两种,其比例为1:1,F2的表现型也是两种,其比例为3:1。

玉米等作物种子的胚乳的糯性和非糯性为一对相对性状,一般由单基因控制,例如:玉米非糯性(W X W X)品种与糯性(w X w X)品种杂交,其F1的种子表现为非糯性(W X w X)的杂合体,当F1花粉母细胞减数分裂形成配子时,这对等位基因分离,形成含有基因W X或w X的花粉粒,具有非糯性基因(W X)的胚乳能产生直链淀粉,遇碘液呈蓝黑色,具有糯性基因(w X)的胚乳能产生支链淀粉,遇碘液呈棕黄色,这两种花粉粒在数量上的理论比例为1:1,F1的雌雄配子相互结合,则产生的非糯性种子对糯性种子的比例为3:1。

三、实验用具及药品显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、皮头玻棒、小烧杯、培养皿、碘、碘化钾。

四、实验步骤1. 采集材料材料从糯性×非糯性的F1植株上取得,于开花前把将要撒粉的雄花序放入卡诺氏固定液中保存备用。

2. 配制药品1%碘—碘化钾溶液的配制:取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中,加入1g金属碘,待其溶解后再加入295ml蒸馏水,保存于棕色瓶中。

3. 压片取花药置于载玻片上,夹破以使花粉粒逸出,去除花药壁残渣,滴一小滴碘—碘化钾溶液,盖上盖玻片。

4. 镜检仔细观察花粉粒颜色的变化(注意调节反光镜),其中非糯性的染成蓝黑色,糯性的染成棕黄色。

取多个视野观察,记录两种花粉粒的数量(畸形、皱缩、特小、发育不良的花粉粒不计),检查的花粉粒总数应有5000粒以上。

5. 适合性测定 用卡方检验法检验实际分离比是否与理论比相符,根据观察结果填下表:X 2=∑⎥⎦⎤⎢⎣⎡-C C O 2)( 自由度=2-1 查X 2表得X 20.05(1)=3.84,将实际所得X 2值与3.84相比较,若大于,表示实际观察数不符合1:1的分离比,若小于,则表示实际观察数符合1:1的分离比,从而可认证分离原则的正确性。

相关文档
最新文档