一种促凝血草药有效部位的初步确定及其凝血试验的研究
抗凝中药成分分析报告
抗凝中药成分分析报告抗凝中药成分分析报告抗凝中药是指具有抑制血液凝固作用的中药，广泛应用于心血管疾病的治疗中。
本次实验对常用的抗凝中药进行成分分析，以便更好地了解其药理作用和临床应用价值。
本次实验选取的抗凝中药为三七草、益母草和夏枯草。
实验采用高效液相色谱-质谱联用仪（HPLC-MS）对三种药材进行成分分析。
首先，对样品进行样品制备工作，将三七草、益母草和夏枯草样品分别制成细粉，然后通过超声提取的方法提取药材中的成分。
然后，通过HPLC-MS技术进行成分分析。
实验中采用的是C18色谱柱，以乙腈和水为流动相，进行梯度洗脱。
通过HPLC分离后的样品再通过质谱仪进行检测和定量分析。
经过实验分析，得到了三七草、益母草和夏枯草的成分分析结果。
三七草中主要成分为三七皂苷Rb1、Rg1、Rb2和Rd等。
这几种三七皂苷具有抗凝血作用，可抑制血小板聚集，减少血栓形成，从而起到抗凝作用。
益母草主要成分为益母草苷和益母草甙。
这些成分具有抗凝作用，能够延长凝血时间，抑制血小板聚集，预防血栓形成。
夏枯草中的主要有效成分为牛蒡子内酯。
牛蒡子内酯具有抗凝作用，能够减少血小板聚集，降低血小板活性，从而发挥抗凝血的效果。
以上是本次实验得到的抗凝中药成分分析结果。
从实验结果可以看出，三七草、益母草和夏枯草中的成分具有抗凝血作用，能够抑制血小板聚集，减少血栓形成。
这些成分在临床上具有重要的应用价值，可用于心血管疾病的治疗和预防。
通过本次实验，我们对抗凝中药的成分进行了分析，加深了对其药理作用和临床应用价值的了解。
同时，实验结果也为抗凝中药的研究和开发提供了重要参考。
凝血检验指标在弥漫性血管内凝血诊断中的作用研究
凝血检验指标在弥漫性血管内凝血诊断中的作用研究【摘要】凝血检验指标在弥漫性血管内凝血诊断中扮演着重要角色。
本文通过对凝血检验指标的概述和弥漫性血管内凝血的关系进行分析，探讨了常用的凝血检验指标以及其在诊断中的应用。
研究发现，凝血检验指标对于弥漫性血管内凝血的诊断具有重要的价值，并且能够为临床提供有效的诊断依据。
进一步的研究方向包括深入探讨不同凝血检验指标之间的关系以及提高凝血检验指标的诊断准确性。
凝血检验指标在弥漫性血管内凝血诊断中的应用具有重要性，为临床诊断和治疗提供了有力支持。
通过不断的研究和探讨，将能更好地指导临床实践并提高患者的生存质量。
【关键词】凝血检验指标、弥漫性血管内凝血、诊断、研究、意义、概述、关系、应用、价值、重要性、方向、总结、展望。
1. 引言1.1 研究背景弥漫性血管内凝血（DIC）是一种严重临床病症，其发生机制复杂，病理生理过程涉及到多种凝血指标的异常改变。
凝血检验指标在DIC 的诊断和监测中起着至关重要的作用。
在临床实践中，通过对凝血检验指标的监测和分析，可以及时发现DIC的危险因素，提前干预，有效预防DIC的进一步发展。
随着DIC发病机制的深入研究和凝血检验技术的不断提高，越来越多的凝血检验指标被应用于DIC的诊断和评估中。
而如何准确、快速地运用这些凝血检验指标，成为临床医生关注的焦点之一。
对凝血检验指标在DIC诊断中的作用进行深入研究，对于提高DIC的早期诊断率、减少患者的病情恶化具有重要意义。
本研究旨在探讨凝血检验指标在DIC诊断中的作用及其临床意义，为进一步完善DIC诊断标准、提高DIC的诊断准确性和及时性提供参考。
通过对凝血检验指标的综合分析，希望能够为DIC的早期筛查和诊断提供更为可靠的依据，为DIC的诊治提供更有效的手段。
1.2 研究目的研究目的是通过分析凝血检验指标在弥漫性血管内凝血（DIC）的诊断中的作用，探讨其在临床诊断和治疗中的应用前景。
具体来说，研究将对凝血检验指标与DIC的关系进行深入剖析，比较不同指标在DIC确诊中的准确性和敏感性，以及在不同阶段DIC患者中的动态变化，从而为临床医生提供更为客观、全面的诊断依据。
中药抗凝血作用有效成分的研究
中药抗凝血作用有效成分的研究摘要：在凝血性疾病临床治疗中，抗凝是主要措施，而中药存在较多的有效成分，能通过抗血小板凝集和抗凝途径，来起到有效抗凝血的效果，所以是有着有着重要的推广意义，未来发展前景良好。
不过中药品种较多，抗凝成分各不相同，需要对这些内容有深入研究，才能为推广应用提供理论依据。
关键词：中药；抗凝血；血小板凝集；血栓性疾病在饮食、疾病、药物等因素影响下，会让血液出现高凝现象，凝血状态一旦启动，就容易出现凝血性疾病，如：心肌梗死、脑血栓等。
近些年来此类疾病患者人数渐长，也成为社会高关注疾病，抗凝药物在疾病预防和控制有发挥重要作用。
而且中药凭借丰富的有效成分、安全可靠等优点受到认可，像地龙、石菖蒲、大枣、黄栌等都是有着抗凝成分的中药，本研究就围绕这些中药抗凝血作用有效成分展开综述。
一、中药抗凝血的有效成分（一）香豆素类化合物包括4-羟基香豆素和其衍生物，都是有着抗癌、抗真菌、抗凝血等多种药理活性的较特殊活性物质。
其母核结构中吡喃环或苯环引人不同的位置、种类取代基，会让生物活性有所不同。
有学者在研究中，不同的脂肪醛或芳香醛与4-羟基香豆素展开化学反应后，所产生的双香豆素衍生物，对脲酶有着良好的抑制作用[1]。
也有学者在研究中，苄基醇与4-羟基香豆素产生催化反应后，产生的衍生物在抗凝血、抗炎等方面作用较强。
（二）皂苷类化合物皂苷是提取自植物的成分，对延长血液凝固有着良好作用，所以是抗凝治疗药物的重要组成成分。
比如，三七、西洋参、人参中可以提取出人参皂苷Rg2和人参皂苷Rg1，这些都是发挥药效的主要成分，抗血栓活性、抗凝血作用较强[2]。
而且与阿司匹林等常用西药相比较，人参皂苷Rg1有着更强的抗血小板活性。
（三）黄酮类化合物作为天然化合物，有着多种生理活性，根据不同的母核结构被分为不同的类型，包括：飞燕草素、矢车菊素等花青素，大豆苷元、葛根素等异黄酮，橙皮素、甘草素等二氢黄酮，山奈酚、水杨梅等黄酮醇，黄芩素、木犀草素等黄酮类[3]。
盾叶秋海棠药材镇痛及抗凝血作用的初步实验研究
盾叶秋海棠药材镇痛及抗凝血作用的初步实验研究肖莉;蒋佳雯;杨亮;徐文芬;黄勇其【摘要】Objective To observe the analgesic and anticoagulative effects of alcoholic extract (ALE) and the aqueous extract (AQE) of rhizome of Begonia cavalerei herb from Guizhou province ,and to determine the acute toxicity of the extracts .Methods The indexes were tested asfollows :writhes of abdominal cavity on mice caused by ip of aceticacid ,the incubation of pain induced by heated plate stimulation inmice ,bleeding time (BT) by cutting the mouse s tail and the maximal tolerance dose (MTD) .Results ALE could obviously decrease the numbersof writhe and prolong the incubation of pain of mice .ALE could obviously shorten BT of mice .MTD of AQE for mice was 7 .175 g ? Kg and that of ALE was 3 .865 g ? Kg by ig thr ee times in 12 h (be equal to 3X50 g · kg-1 of dried herbs in 12 h) .Conclusion The pharmacological basis of ALE of rhizome of Begonia cavalerei herb on analgesia and anticoagulation are proved .The acute toxicity of ALE and AQE of rhizome of Be gonia cavalerei herb is slight.%目的观察盾叶秋海棠根茎乙醇提取物(ALE)和水提取物(AQE)的镇痛、抗凝血作用及其急性毒性.方法采用小鼠扭体法、热板法及断尾出血时间(BT)、最大耐受量(MTD)测定法.结果不同剂量的ALE能明显减少醋酸致小鼠扭体次数及延长热板致痛的潜伏期;ALE大剂量时能明显延长小鼠BT.ALE和AQE小鼠口服MTD为3.865和7.175 g· kg-1 (相当于干燥原生药50 g· kg-1),12 h内,共3次.结论盾叶秋海棠根茎的ALE具有显著的镇痛及抗凝血作用,且盾叶秋海棠根茎的ALE和AQE的急性毒性均较小.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2012(027)003【总页数】3页(P229-231)【关键词】盾叶秋海棠药材;镇痛;抗凝血;急性毒性【作者】肖莉;蒋佳雯;杨亮;徐文芬;黄勇其【作者单位】贵州省黔西南州食品药品检验所,兴义,562400;贵阳中医学院,贵阳,550002;贵阳中医学院,贵阳,550002;贵阳中医学院,贵阳,550002;贵阳中医学院,贵阳,550002【正文语种】中文【中图分类】R965秋海棠科植物盾叶秋海棠Begonia cavalerei Lévl.以新鲜或干燥根茎入药，具有散瘀止痛等功效，用于痛经、闭经、跌扑肿痛等，是贵州省少数民族常用药[1]。
养心草止血有效部位的筛选研究
养心草止血有效部位的筛选研究陈卫琳;邱麒;林珠灿;郭素华【期刊名称】《浙江中医药大学学报》【年(卷),期】2012(36)2【摘要】[目的]采用药效学实验筛选养心草止血的有效部位.[方法]通过小鼠出血时间和凝血时间试验,观察养心草醇、水提取液及不同萃取部位的止血效果.筛选出养心草的止血有效部位.[结果]养心草水提液的止血效果优于醇提液,且水提液的乙酸乙酯部位具有明显的止血作用.[结论]养心草止血的有效部位为其水提液的乙酸乙酯部位.%[Objective] To screen the hemostasis effective fraction from sedum aizoon L. [Methods] Hemostasis of the ethanol and water extraction combined with different extraction sites from Sedum aizoon L. Were observed by mice bleeding time trial and clotting time trial, then the effective parts of Sedum aizoon L. Were selected. [Results] Hemostasis of the water extraction was better than that of the ethanol, moreover, the acetic ether fraction of water extraction was the best. [ Conclusion ] Hemostasis effective fraction was the acetic ether extraction from water.【总页数】2页(P182-183)【作者】陈卫琳;邱麒;林珠灿;郭素华【作者单位】福建中医药大学福州 350108;福建中医药大学福州 350108;福建中医药大学福州 350108;漳州卫生职业学院【正文语种】中文【中图分类】R282.7【相关文献】1.回心草抗大鼠急性心肌缺血有效部位筛选研究 [J], 谢婷婷;汪进良;王东晓;王波;刘屏2.广西壮药笔筒草降血糖有效部位筛选研究 [J], 梁宁;陈壮3.烟草废弃物止血和抑菌有效部位的筛选 [J], 陈菊英;李春;李钟;李玲;郭培国4.民族药九头狮子草治疗细菌性阴道炎有效部位的筛选研究 [J], 范菊娣;钱志瑶;龙义国;覃容贵5.九头狮子草治疗霉菌性阴道炎有效部位的筛选研究 [J], 范菊娣;钱志瑶;龙义国;覃容贵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
部分中草药促凝作用筛选的实验研究
部分中草药促凝作用筛选的实验研究
王秀琴;伍素华;苏踊跃;罗向东
【期刊名称】《第三军医大学学报》
【年(卷),期】2004(26)23
【摘要】目的从药典已有记载或文献报道凝血效果较好的 2 0多种促凝中草药 ,筛选出凝血时间最短 ,促凝效果最好的中草药。
方法用家兔体外凝血实验 ,对 2 0余种具有止血作用的中药和民间草药初提物及有机溶剂萃取提取物的对比研究 ,观察了凝血时间 (CT) (凝血板法 ,试管法 )、凝血酶原时间 (PT)、血浆复钙时间 (RT)等指标。
结果发现采自云贵高原的一种多年生草本植物 (简称HB)初提物及其氯仿萃取纯化后的水相提取物的凝血时间、凝血酶原时间、血浆复钙时间与空白对照组比较显著缩短 (P <0 0 1) ,并且凝血时间比研究中的其它中草药初提物和对比物明显缩短 (P <0 .0 1)。
结论HB及氯仿萃取纯化后的水相提取物有明显的体外促凝血作用。
【总页数】3页(P2149-2151)
【关键词】中草药;初提物;氯仿萃取水相提取物;凝血时间
【作者】王秀琴;伍素华;苏踊跃;罗向东
【作者单位】第三军医大学西南医院全军烧伤研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71;R284
【相关文献】
1.玻璃棒促凝作用在临床实验室快速检测中的应用研究 [J], 王其春
2.内皮细胞促凝与抗凝作用机理的研究进展 [J], 白建平;汪钟
3.中草药“促生长剂”对肉鸡促生长作用的研究 [J], 徐传涛;韩夏
4.中草药“促生长剂”对肉鸡促生长作用的研究 [J], 徐传涛;韩夏
5.9种中草药镇痛作用的筛选实验 [J], 王顺祥;魏经建;王奕鹏
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豨莶草抗血栓组分对凝血系统的作用研究_孟倩超
草、七叶一枝花清热解毒、八月札、莪术理气活血,临床可随证加减。
临床上化疗后患者常出现头晕乏力、气短懒言、纳呆便溏、发热盗汗、心烦口干、舌淡苔少、脉细等症状和体征,表现出气阴两虚之证为主,故治疗时选用健脾益气,滋水涵木之法,以补气血生化之源,佐以清热解毒凉血之品,共同发挥扶正祛邪作用。
本研究运用血清药理学的方法,获得益气养阴解毒方的实验用大鼠含药血清,通过设立含药血清组、化疗药5-F U组、含药血清+5-FU组及不含药的空白血清对照组,分别观察其对肝癌HepG2细胞的作用,结果显示:在不同时相含药血清组与对照组相比HepG2细胞的生长率均无差异,亦未能明显诱导细胞发生凋亡,提示中药含药血清单独作用对HepG2细胞的生长无明显抑制作用。
但在作用48h和72h后,5-Fu组和含药血清+5-Fu组均表现出对HepG2细胞增殖的抑制且观察到细胞发生明显的凋亡现象,而在72h含药血清+5-F u组细胞的抑制率和凋亡指数均较5-Fu组更为显著,说明本方含药血清能增强化疗药5-Fu诱导细胞凋亡的作用。
本研究结果显示益气养阴解毒方的含药血清能通过促进化疗药诱导的细胞凋亡而增加化疗的敏感性,起到协同增效作用。
既往的研究多集中在中药能抑制肿瘤细胞的增殖和诱导凋亡而产生直接的抗肿瘤作用,而本研究的结果显示,益气养阴解毒方的含药血清单独作用于肝癌HepG2细胞未见到明显的诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖作用,但却能促进化疗药诱导的细胞凋亡,说明中药复方由于配伍的不同,其作用是多机制的,另外可能与本实验中选用的给药剂量和血清添加浓度有一定关系,不同的给药剂量所制备的含药血清其有效成分亦存在差异,可导致不同的实验结果,值得今后从多角度、多层次进一步的深入研究探讨。
参考文献[1] 王庆才,李 苏,田力平,等.中药配合介入治疗原发性肝癌50例[J].江苏中医,1998,19(8):31-32.[2] 王力倩,李仪奎,府胜光,等.血清药理学方法研究探索[J].中药药理与临床,1997,13(3):29-31.(收稿2008-07-15;修回2008-11-04) 莶草抗血栓组分对凝血系统的作用研究*孟倩超 金若敏 王 聃 桂新△ 上海中医药大学科技实验中心(201203) 摘 要 目的:通过血瘀模型动物灌胃给药,探讨莶草抗血栓组分(腺梗莶IIA)对凝血系统的影响。
裸花紫珠提取物凝血有效部位的研究
裸花紫珠提取物凝血有效部位的研究张利;黄胜;颜小捷;杨子明;谷陟欣;李典鹏【期刊名称】《环球中医药》【年(卷),期】2015(000)011【摘要】目的：研究裸花紫珠提取物凝血作用及其有效部位。
方法以质控血浆为研究对象,通过测定裸花紫珠粗提物及各分离部位和单体对凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、血浆纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)四项指标观察其对凝血系统的影响。
结果与溶媒对照比较,裸花紫珠粗提物能明显缩短 PT、APTT、TT 的时间,能明显提高 FIB 含量；裸花紫珠40%甲醇洗脱部位能明显缩短 APTT、TT 的时间,能明显提高 FIB 含量；与粗提物比较,40%甲醇洗脱部位效果最接近于粗提物。
结论裸花紫珠有较好的凝血效果,其有效部位可能在40%甲醇洗脱部位。
【总页数】4页(P1359-1362)【作者】张利;黄胜;颜小捷;杨子明;谷陟欣;李典鹏【作者单位】541006 桂林，广西植物功能物质研究与利用重点实验室广西植物研究所;九芝堂股份有限公司; 海南九芝堂药业有限公司;541006 桂林，广西植物功能物质研究与利用重点实验室广西植物研究所;541006 桂林，广西植物功能物质研究与利用重点实验室广西植物研究所;九芝堂股份有限公司;541006 桂林，广西植物功能物质研究与利用重点实验室广西植物研究所【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.裸花紫珠凝血活性研究 [J], 杨子明;黄胜;颜小捷;张利;谷陟欣;李典鹏2.裸花紫珠片辅助抗生素、凝血酶对变应性鼻炎合并鼻出血患者凝血功能和血清因子的影响 [J], 王学慧;梁彬;顾兴智;张兰聪;郭敬福;梁生棵;李志伟3.裸花紫珠提取物抗大鼠宫颈炎作用机制研究 [J], 杨娟;尚曙玉;贾安;薛跃光4.裸花紫珠提取物抗大鼠宫颈炎作用机制研究 [J], 杨娟;尚曙玉;贾安;薛跃光5.一种促凝血草药有效部位的初步确定及其凝血试验的研究 [J], 王秀琴;伍素华;苏踊跃;罗向东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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文章编号:100025404(2004)2021841204论著一种促凝血草药有效部位的初步确定及其凝血试验的研究王秀琴,伍素华,苏踊跃,罗向东 (第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038) 提 要:目的 本研究介绍了一种促凝血草药萃取物成分的提取、分离、薄层分析及紫外光谱含量测定,并进行了体外、创面凝血试验的研究,以确定其止血有效部位。
方法 采用水提法得到初提物,经丙酮2水(1∶1)冷浸去掉部分杂质;氯仿萃取、硅胶G柱层析得到更纯的提取物。
应用薄层层析(thin layer chromatography,T LC)法对萃取物所含成分进行鞣质类、黄酮类、生物碱、有机酸、氨基酸、挥发油进行初步分离、鉴定和分析。
以日本纯系大耳白兔、W istar大鼠为研究对象,进行体外及创面(皮肤、肝脏、股动脉)止血试验。
结果 草药萃取物以鞣质类成分为主、并含有少量有机酸及微量生物碱成分;鞣质含量(70143%)较高;其使兔体外凝血时间显著短于阳性对照组及空白对照组(P<01001);使大鼠创面止血时间显著短于阳性对照组(云南白药组)及阴性对照组(生理盐水组)P<01001。
结论 T LC法初步分离、鉴定出该草药萃取物,含有丰富的鞣质类成分、极少量有机酸及微量生物碱成分;氯仿萃取物有良好的体外促凝血及创面止血作用,是草药的止血有效部位。
关键词:促凝血草药;萃取物;T LC法;有效部位;成分;凝血试验 中图法分类号:R282.71;R284.2;R973.1 文献标识码:APreliminary definition of the effective fraction of a herb and its procoagulant activity W ANG X iu2qin,W U Su2hua,S U Y ong2yue,LUO X iang2dong(S tate K ey laboratory of T rauma,Burns and C ombined Injury,Institute of Burns,S outhwest H ospital,Third M ilitary Medical University,Chongqing400038,China) Abstract:Objective The purpose of this study was to report the is olation,extraction,analysis of its effective fraction and the investigation of its blood coagulant activity in vitro and in local w ound surface.Methods Part of the im purities were rem oved from the initial water extract by infusion extraction method in acetone2water(1∶1)s olu2 tion.The advanced purification was achieved by chloroform extraction and silicagel column chromatography.Thin lay2 er chromatography(T LC)was em ployed to determine the constituents of tannins,chrom ocors,alkaloids,organic acids,amino acids,and v olatile oils in the extract.The study on the hem ostatic property of the extract was conducted in w ound surfaces(skin,liver,and fem oral artery)in Wistar rats and in the blood of rabbits in vitro.Re sults The extract was mainly com posed of tannins(70134%)as well as a small quantity of organic acids and trace alkaloids.The clotting time was obviously shortened as com pared with that of the positive control(Yunnan Baiyao group)and saline group(P<01001).Conclusion The extract,determined by T LC,contained mainly tannins(70143%),a little organic acid and trace alkaloid.Chloroform extract may have procoagulant effect in vitro and roles in w ound hem ostasis in our experiments.In addition,the chloroform extract is the effective fraction of this herb. K ey w ords:procoagulant herb;extract;T LC technique;effective fraction;com ponent;coagulation test 能促进血液凝固而使出血停止的药物,称为止血药。
是临床应用范围广泛的药物之一,在(战)创伤中也有重要的应用价值。
它主要通过增强体内凝血因素或抑制抗凝血因素,促使凝血,以达到止血目的。
止血 作者简介:王秀琴(1970-),女,河北承德市人,硕士研究生,主管护师,主要从事生物敷料止血方面的研究。
电话:(023)6875414928082 通信作者:罗向东,E2mail:lu oxd@ 收稿日期:2004207205;修回日期:2004209205中药具有收敛、凝固、凉血等作用,用以治疗咯血、衄血、咳血、便血、尿血及崩漏等出血症,并用于创伤性出血[1,2]。
目前用中草药生药进行实验研究的比较多,用有效部位进行的实验研究比较少见。
本研究对一种促凝血草药进行提取、分离及成分薄层分析、用UV进行含量测定,结合凝血试验确定其止血有效部位。
薄层层析是一种简便、快速、准确、灵敏度高、微量的定性定量分析方法[3]。
广泛应用于有机化合物的分1481第26卷第20期2004年10月 第 三 军 医 大 学 学 报ACT A AC ADE MI AE ME DICI NAE MI LIT ARIS TERTI AEV ol.26,N o.20Oct.2004析鉴定、中草药有效部位的分离提纯、有机合成、结构分析、生物测定等,尤其在研究开发中草药有效部位和中成药质量控制中,是用于定性、定量分析的最简便的方法。
1 材料与方法111 实验材料1.1.1 实验动物 Wistar大鼠30只,体质量300～350g,雌雄兼用;日本纯系大耳白兔,体质量215～3kg。
由本校实验动物中心提供。
1.1.2 药物 促凝草药采自云贵高原民间草药;云南白药,云南省大理制药厂生产,批号960510;鞣质标准对照品均购自中国药品生物制品检定所。
1.1.3 主要试剂与仪器 旋转蒸发仪(日本进口),紫外荧光灯(上海光学仪器厂),UV2754紫外2可见分光光度计(日本岛津),硅胶G(由青岛海洋化工厂出品);正丁醇、醋酸、甲酸已酯、甲酸、丙酮、氯仿均为分析纯,由本院试剂中心提供。
112 实验方法1.2.1 草药初提物的制备[4,5] 100g粗粉用1500ml去离子水于室温下浸泡4～6h,煎煮3次,每次为115h,过滤,取上清;残渣弃掉;合并3次滤液,离心(8000r/min,30min,25℃),取上清;旋转蒸发浓缩至糊状约100ml,测其pH值为5178;加4倍量体积95%乙醇搅拌均匀,密闭静置过夜;离心弃掉沉淀,取上清,滴加40%NaOH溶液调至pH值为8,搅拌均匀,0℃～4℃冷藏4h,旋转蒸发仪浓缩成200ml,蒸发去掉乙醇至无醇味,水溶液置0℃～4℃冷藏24h;经S igma低温离心机离心(3 000r/min,20min,4℃),得沉淀,冷冻抽干得棕褐色片状物,用研钵研碎即得草药粗提物。
1.2.2 萃取物的制备[6] 取粗提物,分别用丙酮2水(1∶1) 200、150、150ml冷浸24、24、24h过滤,合并滤液,滤液减压回收丙酮后,放置过滤,沉淀弃去。
滤液用氯仿少量多次萃取,水相静置、过滤、离心,得沉淀,硅胶柱层析,10%的醋酸洗脱,取结晶物,即得更纯的萃取物。
1.2.3 萃取物成分的薄层分析[6,7]1.2.3.1 层析条件 ①薄层板的制备:吸附剂用硅胶G2羧甲基纤维素钠铺板,105℃活化120min。
②点样:用毛细玻管吸取样品液在薄层板上点样,距板下端底边不得少于215cm或310cm处点样,间距不少于1cm,板两边空出的距离最好不少于115cm。
③展开方式及展距:直立上行,展开10cm。
④点样浓度为015%。
1.2.3.2 样品处理及对照液的配制 样品液的制备:称取萃取物10mg加50%丙酮2ml溶解,摇匀,即得。
鞣质对照品液的制备:取鞣质对照品10mg加50%丙酮2ml溶解,摇匀,即得。
1.2.3.3 萃取物中鞣质成分T LC比较[10,11] 照薄层色谱法[9]试验,用内径为2mm毛细玻管取样品液、鞣质对照品液点于同一硅胶G薄层板上,以甲酸已酯:甲酸∶水(8∶1∶1)为展开剂展开,取出,晾干,用氯化铁2铁氰化钾显色剂喷雾,待挥干后,样品液及鞣质对照品液显示蓝黑色斑点;有效部位显示R f 值分别为0118和0132两个主要斑点,说明鞣质含量很高,鞣质对照品显示一个斑点,Rf值为0132。
1.2.3.4 萃取物中生物碱类成分T LC比较[9～11] 以鞣质对照液作为参考,毛细玻管吸取点板,以正丁醇∶醋酸∶水(4∶1∶5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷碘—碘化钾试剂,待挥干后,于紫外灯下(365nm)观察。
结果显示,样品液及鞣质对照品液无斑点及颜色变化,样品液仅隐约出现大约1cm淡黄色条带,R f 值为0105说明样品液含有微量的生物碱成分。