空气中细菌含量的测定
室内空气中细菌的测定
十、注意事项：
1.若测定空气中的溶血性链球菌及绿色链球菌，则 用血琼脂平板，其他操作及计算方法与细菌总 数测定方法相同。 2.平皿的底面积直径不宜小于9cm。 3.选择采样点时，应尽量避开空调、门窗等气流变 化较大处。整个采样过程中，应动作轻缓，避 免扬起灰尘，并要注意无菌操作。 4.采样中打开皿盖时，可将皿盖向下，切忌血盖向 上而暴露于空气中，影响采样结果。暴露5分钟 后，应按打开皿盖的顺序，盖上皿盖，带回实 验室置培养箱，37℃、24小时培养后计数菌落。
营养琼脂培养基： （2）制法：将上述成分混合后，加热溶解。调节PH 值7.8～8.0。过滤除去沉渣，分装于三角烧瓶中，经 121℃（103kPa）高压蒸气灭菌20分钟，然后倾注适 量（15～20毫升）于已灭菌处理的平皿内，制成营养 琼脂平板备用。若当天不用，应置冰箱内保存。
五、操作步骤： （一）制作营养琼脂平板（无菌操作）
住密度、居民健康情况、人们的活动情况、室内通风效果
等。居住密度大、活动频繁、通风不良时，细菌总数就多。
所以它可以代表居室一般卫生状况的意义；
理论依据和实际应用：
附着于室内悬浮颗粒物和唾液与痰液飞沫的微生物中 含有一定数量的致病微生物（溶血性链球菌、结核杆菌、 白喉杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、流感病菌等），
四、实验准备：
（一）仪器与设备：
高压蒸汽灭菌器
电热恒温干燥箱
恒温培养箱
电冰箱 玻璃平皿及制备培养基用的一般设备
（二）试剂与材料：
营养琼脂培养基：
（1）成份： 蛋白胨 牛肉浸膏 氯化钠 磷酸二氢钠 琼脂 蒸馏水 10克 3克 5克 1克 15～20克 1000毫升
（二）试剂与材料：
医院空气消毒效果和污染状况的评价：
空气细菌总数测定中自然沉降法和撞击法的应用与比较
空气细菌总数测定中自然沉降法和撞击法的应用与比较摘要：目的：对自然沉降法和撞击法在空气细菌总数测定中的应用效果进行探究。
方法：选择酒店室内和室外以及万级实验室作为研究对象，分别使用自然沉降法与撞击法来获得三个环境中空气细菌总数情况，对测定结果进行对比分析。
结果：空气细菌总数的自然沉降发和撞击法测定结果存在正的线性相关关系，在测定灵敏度上，撞击法优于自然沉降法（P＜0.05），差异有统计学意义。
结论：撞击法具有较高的灵敏度，能够较为准确的反映空气中细菌含量情况，但当采样时间较长时，其准确度会下降。
关键词：自然沉降法；撞击法；空气细菌总数；应用效果比较随着人们保护意识的不断增强，对空气环境的质量提出了更高的要求，细菌等空气微生物的危害得到人们的充分重视，加强空气细菌的检测，对于提高控制质量水平十分重要[1]。
本文就对分别选择了酒店室内和室外以及公司无菌实验室空气环境为研究对象，探讨自然沉降法和撞击法在空气细菌总数测定中的效果，以提高空气细菌检测工作水平，现报道如下：1材料和方法1.1实验材料仪器准备，空气微生物采样器，型号TYK-6型；营养琼脂培养基，批号20131125-00；培养皿，直径9cm。
1.2空气环境采样对象：某酒店室内和室外以及公司万级实验室。
1.3空气细菌总数测定方法1.3.1自然沉降法测定1.3.1.1根据现场大小，选择3~5个采样点（室内面积不足50m2，设置3个采样点；50m2以上的设置5个采样点；采样点按均匀布点原则布置，室内3个采样点设置在室内对角线四等分的3个等分点上，5个采样点的按梅花布点。
）采样高度为1.2~1.5m，距离墙壁不小于1m，避开通风口、通风道等。
1.3.1.2将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，分别自然暴露在空气中，时间为5min和10min，盖上皿盖，采样完成。
1.3.1.3将平板倒置放入35℃~37℃恒温培养箱中，培养48h后取出，进行菌落计数[4]。
校园不同场所空气中细菌数量测定及分析
校园不同场所空气中细菌数量测定及分析发布时间：2023-02-22T05:20:35.027Z 来源：《科技新时代》2022年第10月19期作者：邹俊杨杰豪张园方罗紫依董丹丹[导读] 目的本文以山东协和学院为研究对象，评估校园内空气中细菌的污染状况。
方法选用自然沉降法对校园室教室、操场、食堂、宿舍、图书馆、微机室、实验室等场所中的空气细菌进行了采样研究，分析校园内不同场所细菌的差邹俊杨杰豪张园方罗紫依董丹丹山东协和学院摘要：目的本文以山东协和学院为研究对象，评估校园内空气中细菌的污染状况。
方法选用自然沉降法对校园室教室、操场、食堂、宿舍、图书馆、微机室、实验室等场所中的空气细菌进行了采样研究，分析校园内不同场所细菌的差异。
结果校园的教室、操场、食堂、宿舍、图书馆、微机室、实验室等场所空气均检测出细菌，各采样点细菌的浓度均存在差异。
结论校园环境空气细菌的污染程度与人群密度、人员活动时间长短、通风状况等因素有关。
关键词：空气细菌；检测分析；污染评价悬浮在空气中的细菌能造成环境污染和传染病的爆发流行。
大学校园是师生学习、生活比较集中的区域，普遍存在空气微生物污染问题[1，2,3,4]。
因此，加强对校园空气细菌的监测，对了解校园空气污染现状，防止呼吸道疾病的传播，保护师生身体健康具有重要的现实意义。
1 材料与方法1.1采样方法。
采用自然沉降法对山东协和学院校园内的细菌进行采样，选取山东协和学院东校区为采样区域。
采样点为6号教学楼教室、操场、第一食堂食堂、11号公寓（男生宿舍）、图书馆、微机室、医护中心实验室。
采样时间设置为8：00—10：00、12：00—14：00、17：00—19：00 这3 个时间段。
1.2细菌培养基为牛肉膏蛋白胨培养基。
1.3 细菌培养方法。
每种微生物一天采样 3 次，每次 5 min，采样后将培养皿倒置于恒温培养箱内培养，细菌于 37 ℃培养 48 h。
分别对各自平皿进行菌落计数，计算空气微生物浓度(cfu/m3)。
用菌落计数器检测空气中细菌的方法
1 对象与方法1.1 监测对象电子阅览室2个、学生食堂3个、教室6个、学生宿舍10个(其中女生宿舍5个、男生宿舍5个)、学生实验室4个。
1.2 采样点设置按照《室内空气质量标准》(GB/T18883 2002)[3]的要求进行。
每个监测目标设置5个采样点,即室内墙角对角线交点为一采样点,该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。
采样高度为1.5 m.采样点应远离墙壁l m 以上,并避开空调、门窗等空气流通处。
1.3 空气样品采集与细菌培养采用自然沉降法采集样品。
采样时,将营养琼脂平板置于采样点,打开皿盖,于空气中暴露5 min,盖上皿盖,翻转平板,经37℃、24 h培养后,计数每块平板上生长的菌落数,求出全部采样点的平均菌落数。
根据奥梅梁斯基公式计算空气细菌总数。
细菌总数(cfu/m3)= 50 000N/AT,式中:A:平板面积(cm2);T:平板暴露时间(min);N:平均菌落数(cfu/平皿)。
1.4 评价标准依据我国《室内空气质量标准》,室内空气菌落总数≤2 500 cfu/cm3 为合格,超过以上结果为不合格。
1.5 统计分析数据用表示,采用SPSS 13.0软件进行分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 校园不同场所空气中细菌浓度检测对校园内共25个不同功能区进行采样分析,除了有一间学生宿舍细菌数超标外,其余各检测点的合格率均为100%(表1)。
表1 校园不同场所空气中细菌浓度检测结果2.2 学生宿舍空气中细菌浓度检测共检测10间学生宿舍,其中男生宿舍5间,女生宿舍5间。
两者空气中细菌浓度无统计学意义(P>0.05),但男生宿舍的菌落均数高于女生宿舍,且有1间男生宿舍空气中细菌浓度明显超标,达到3 065.207 cfu/m3(表2)。
表2 学生宿舍空气中细菌浓度检测3 讨论空气中微生物含量是衡量室内空气质量的一个重要指标。
世界卫生组织认为,空气中细菌浓度为700～l 800 cfu/m3时,有发生空气感染的明显危险因素,当≤180 cfu/m3时,就安全得多[4]。
校园空气中细菌的调查
校园空气中细菌的调查空气中因缺乏养料且受日光直照并不适宜微生物的繁殖，所以空气中没有固定的微生物群体。
但由于人的活动，身上呼吸道口腔及人的走动会带来细菌，导致某些环境空气中还有较大的细菌，其中一部分是病原菌，可能会导致疾病的传播。
榆林学院是一所大学，有近两万人，学生上课或下课会有很多人的走动，带动的尘土使得空气里有较多的细菌，因此研究空气中微生物十分重要。
它可以让同学们知道我们生活的环境究竟是怎样的，并能及时做好及时清洁，爱护我们的校园环境，关注我们的身体健康。
实验设计：在校园内的广场、道路、教室和体育场所随机进行取样，检测校园空气中的细菌情况。
用牛肉膏蛋白胨培养基进行空气中细菌平板培养，间隔一段时间进行一次实验，了解校园内细菌的大致分布和变化情况。
实验计划：1取样方式：培养基直接暴露在空气中2平板培养：恒温培养24h3计数观察：对菌落进行观察计数4多次实验：分别进行记录统计1试剂：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、1mol/L HCL、KNO3、NaCL、 K2HPO4.3H2O、MgSO4.7H2O、FeSO4.7H2O、KH2PO4 2用具：三角瓶、棉塞、烧杯、天平、电炉、玻璃棒、吸管、标签、250ml锥形瓶、250ml烧杯、药匙、PH试纸、称量纸、培养皿（90mm或60mm）、酒精灯、记号笔、3实验仪器：高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、培养箱、显微镜、4实验步骤：参考(微生物学实验教程pag6,第2版，周德庆，高等教育出版社) 牛肉膏蛋白胨培养基：参考(微生物学实验教程pag77,第2版，周德庆，高等教育出版社)取材：牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、琼脂 15—20g、水 1000ml、pH 7．4—7．6（Ph7.2-7.4）器材：牛肉膏，蛋白胨， NaCl，琼脂；1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（ pH 5．5—9．0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
空气培养细菌总数的卫生学标准
空气培养细菌总数的卫生学标准
空气中的细菌总数是衡量空气卫生状况的重要指标之一。
空气中的细菌数量过
多可能会对人体健康造成影响，因此对空气中细菌总数的卫生学标准有着严格的要求。
首先，根据卫生学标准，空气中细菌总数的测定方法应当符合相关的规范和标准。
通常采用的方法是空气采样后在培养基上进行培养，然后通过计数方法来测定细菌总数。
这一过程需要严格控制培养条件和操作流程，以确保测定结果的准确性和可靠性。
其次，根据卫生学标准，空气中细菌总数的限定值应当符合相关的卫生标准。
一般来说，不同场所对空气中细菌总数的要求也有所不同。
例如，医疗机构、食品加工场所等对空气中细菌总数的要求更为严格，而一般办公场所、居住区域对空气中细菌总数的要求相对较低。
这些限定值的制定应当考虑到不同场所的特点和实际需求，以保障人们的健康和安全。
此外，根据卫生学标准，空气中细菌总数的监测和管理应当符合相关的规范和
要求。
定期对空气中细菌总数进行监测，及时发现和处理空气污染问题，是保障空气卫生的重要手段。
同时，对空气中细菌总数的管理也需要建立健全的制度和措施，加强对空气质量的管理和控制。
总的来说，空气培养细菌总数的卫生学标准是保障空气卫生的重要依据，对空
气中细菌总数的测定、限定值的制定以及监测和管理都有着严格的要求。
只有严格遵守这些标准和要求，才能有效保障人们的健康和安全。
因此，各相关单位和个人都应当重视空气培养细菌总数的卫生学标准，加强对空气质量的管理和控制，共同营造一个清洁、卫生的空气环境。
[说明]空气中微生物检测1
![[说明]空气中微生物检测1](https://img.taocdn.com/s3/m/6e671f3a7275a417866fb84ae45c3b3567ecdd38.png)
一、空气中微生物的检测一、实验目的1了解空气中微生物的分布状况，学习空气采样方法2掌握空气中微生物的检测方法二实验原理空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。
空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。
空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等，它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面，可较长时间停留在空气中。
某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处，给身体健康带来严重危害，也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区，给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。
因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量，是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。
测定的细菌指标有细菌总数和绿色链球菌，在必要时则测病原微生物。
空气并非微生物的繁殖场所，空气中缺乏水分和营养，紫外线的照射对微生物也有致死作用。
微生物产生的孢子本身也可以飘浮到空气中，形成“气溶胶”，借风力传播。
空气中的微生物中，真菌的孢子数量最多，细菌较少。
而且藻类、酵母菌、病毒都会存在于空气中。
目前，还无统一的关于空气的卫生学指标，一般以室内1m3 空气中细菌总数为50~1,000个以上作为空气污染的指标。
病原菌在空气中一般很易死亡，但结核菌、白喉杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、流感病毒和脊髓灰质炎病毒等，也可以在空气中存活一段时间。
尘埃多的地方，如畜舍、公共场所、医院、城市街道的空气中，微生物数量较多。
高山、海洋、森林、积雪的山脉和高纬度地带的空气中，微生物较少。
在本次实验中测量空气中微生物含量，主要是利用空气的自然沉降法，也有其它方法，如撞击法，过滤法等。
三实验器材电炉，培养基，培养箱，无菌台四实验步骤1配制牛肉膏蛋白胨培养基1000毫升，并灭菌备用2倒平板凝固完全3空气采样，在实验室的四角及中央采取五个点，每个点做两个平行，一个对照，十一个培养皿。
实验报告-2010-细菌总数
大学活动场所室内环境细菌密度测定实验成员：罗小青、施俊译、上官玉虎、叶紫宇、徐丹丹1、目的：了解在校学生主要活动场所室内环境细菌密度情况，提高学生对自己环境卫生意识，同时锻炼学生的实际操作能力。
2、方法：该测定有两种方法，其一是撞击法，它是通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到培养琼脂平板上，经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。
另一种方法是自然沉降法，即采样法，它是在直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露5min，或更多暴露时间进行分析，再经37℃、48h培养后，计算生长的细菌菌落数的采集测定方法。
由于设备的不完全，该细菌测定方法采用采样法。
3、仪器和设备3.1 高压蒸汽灭菌器3.2 恒温培养箱3.3 30个培养皿（直径90mm）3.4 锥形瓶3.5 PH试纸3.6 酒精灯4 培养基4.1 营养琼脂培养基4.1.1 成分：蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化钠 5g琼脂 15~20g蒸馏水 1000mL4.1.2制法：将上述各成分混合，加以溶解，校正PH至7.4，过滤分装，在121℃20min高压灭菌，用自然沉降法测定时，倾注15mL于培养皿中，制成营养琼脂平板。
5操作步骤5.1设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点，通常设置5个采样点，高度为1.2~1.5m。
采样点应远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗等空气流通处，本实验选择了食堂、宿舍作为实验场所，其中采样宿舍位于食堂旁边的六楼，也是我们队员男生生活的地方（四人间），通过我们生活场所来反映我们学校学生宿舍的环境情况，其采样布置点为阳台、床铺旁、书桌、门口和卫生间。
采样食堂位于人比较密集的地方，以更准确的反映食堂卫生环境，其采样布置为收餐台、台子、门口、洗碗池和窗户。
5.2将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5min盖上皿盖，翻转平板，置36℃±1℃恒温箱中，培养48h5.3计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以每平皿菌落数（CFU/皿）报告结果。
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实验室空气中细菌含量的测定
一．实验目的
测定实验室空气中沉降菌的含量，了解实验室的洁净程度。
二．实验原理
空气中漂浮着各种微生物，将盛有无菌培养液的平民放于监测点上，暴露5min，空气中的细菌便会落在培养基上，然后在37摄氏度的恒温培养箱中培养24h，计数每个培养皿表面的菌落数，由于一个菌落是由一个细菌繁殖而来，菌落总数便可认为是细菌总数。
三．实验材料
琼脂，锥形瓶，无菌水，电热炉，培养皿，卧室灭菌锅，烘箱，37℃生化培养箱，超净工作台
四．实验方法
称取2.35g琼脂，加热溶解到100ml无菌水，存放于锥形瓶中，用封口膜和牛皮纸包装好锥形瓶。
准备五个培养皿，用牛皮纸包好，和锥形瓶一起放进卧室灭菌锅中灭菌，温度121℃，时间30min。
于无菌工作台上，每个培养皿倒进10ml培养基，待冷却凝固。
分别置于室内同一平面五个不同的点（四角加中央），打开皿盖，暴露15min,盖好平皿盖，37℃恒温箱中培养24h，
五．计算方法
按照奥梅梁斯基氏计算法，面积为100平方厘米的培养基表面5min沉降下来的细菌数相当于10L空气中所含菌落数来计算
细菌数（m³）=N*100/A*5/T*100/10=50000N/AT
(A:平板面积cm2、T平板暴露时间min、N：平板菌落数)。