微生物资源开发与利用实验指导(定)
微生物资源的开发与利用研究
微生物资源的开发与利用研究一、微生物资源的开发与利用概述微生物资源是指存在于自然界中的微生物个体或群体，主要包括细菌、真菌、病毒、原生动物等，具有广泛的分布性、丰富的种类、多样的代谢途径、高度的再生能力和可持续性等特点，其具有巨大的开发利用潜力。
目前，常见的微生物产品主要包括抗生素、酶制剂、保健食品等，这些产品在医药、生物工程、食品等领域中发挥着重要作用。
因此，对于微生物资源的开发与利用研究具有重要的意义。
二、微生物资源的开发研究1. 微生物的筛选与鉴定微生物的种类繁多，如何从中选取具有生产力的微生物进行进一步开发与利用是微生物资源开发研究的重要步骤。
一般从自然环境中采集样品，通过传统的分离、纯化等方法筛选出具有生产力的微生物，确定其种类、鉴定其性状，进而进行进一步的优化培养。
2. 微生物发酵工艺优化微生物产生生物活性物质的过程主要是通过微生物发酵技术实现的。
发酵工艺的优化是微生物资源开发研究中的关键技术之一。
通过对发酵条件的优化及代谢途径的调控，提高微生物产物的产量、纯度和质量，达到最优生产状态。
3. 微生物代谢产物研究微生物代谢活性物质是微生物开发与利用中最重要的产物之一。
微生物代谢产物研究一方面是确定化合物的结构、活性及其作用机制，另一方面是为后期的产物转化、扩大生产提供理论依据和技术支持。
三、微生物资源的利用研究1. 微生物产品的应用微生物产品有很多种类，如抗生素、生物酶、抗菌素等。
这些产品广泛应用于医药、生物工程、食品等领域。
例如，抗生素是重要的临床药物，可以用来治疗疾病和预防感染病；酶制剂可应用于绿色工艺、食品加工、医药等多个领域；保健食品则可以增强人体免疫功能，提高身体免疫力。
2. 微生物技术在环境治理中的应用微生物资源的利用不仅局限于医药、生物工程、食品等领域，还可以在环境治理领域中发挥作用。
例如，微生物可以被应用于废水、废气等环境治理领域，用于生物处理、微生物降解等方面。
这种微生物技术是一种无害、环保的绿色技术，在未来的环保行业中具有重要的应用前景。
微生物实验指导书（1）范文
微⽣物实验指导书（1）范⽂《微⽣物学实验》实验⼀显微镜的使⽤、细菌⾰兰⽒染⾊法及细菌特殊结构的观察（⼀）实验⽬的1.了解普通光学显微镜的基本构造和⼯作原理2.学习并掌握油镜的原理和使⽤⽅法。
3. 在油镜下观察细菌⼏种基本形态4．掌握细菌⾰兰⽒染⾊法（⼆）实验原理1．显微镜的基本结构及油镜的⼯作原理现代普通光学显微镜利⽤⽬镜和物镜两组透镜系统来放⼤成像，故⼜常被称为复式显微镜。
它们由机械装置和光学系统两⼤部分组成。
在显微镜的光学系统中，物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。
⽽在普通光学显微镜通常配置的⼏种物镜中，油镜的放⼤倍数最⼤，对微⽣物学研究最为重要。
与其他物镜相⽐，油镜的使⽤⽐较特殊，需在载玻⽚与镜头之间加滴镜油，这主要有如下⼆⽅⾯的原因：1. 增加照明亮度油镜的放⼤倍数可达100 Χ，放⼤倍数这样⼤的镜头，焦距很短，直径很⼩，但所需要的光照强度却最⼤。
从承载标本的玻⽚透过来的光线，因介质密度不同（从玻⽚进⼊空⽓，再进⼊镜头），有些光线会因折射或全反射，不能进⼊镜头，致使在使⽤油镜时会因射⼊的光线较少，物像显现不清。
所以为了不使通过的光线有所损失，在使⽤油镜时须在油镜与玻⽚之间加⼊与玻璃的折射率（n=1.55 ）相仿的油镜（通常⽤⾹柏油，其折射率n=1.5 2）。
2. 增加显微镜的分辨率显微镜的分辨率或分辨⼒(resolution or resolving power) 是指显微镜能辨别两点之间的最⼩距离的能⼒。
从物理学⾓度看，光学显微镜的分辨率受光的⼲涉现象及所⽤物镜性能的限制，分辨⼒D可表⽰为：D=λ/2N.A，式中λ= 光波波长；NA= 物镜的数值孔径值。
光学显微镜的光源不可能超出可见光的波长范围（0.4--0.7 µ m ），⽽数值孔径值则取决于物镜的镜⼝⾓和玻⽚与镜头间介质的折射率，可表⽰为：NA=n × sin α式中α为光线最⼤⼊射⾓的半数。
它取决于物镜的直径和焦距，⼀般来说在实际应⽤中最⼤只能达到120 O ，⽽n 为介质折射率。
《微生物技术大实验》实验指导
《微⽣物技术⼤实验》实验指导《微⽣物技术⼤实验》实验指导（适⽤专业：11级本科⽣物技术微⽣物学⽅向）柯野编韶关学院英东⽣命科学学院2014年实验⼀、重组毕⾚酵母发酵表达蛋⽩酶及其初步鉴定⼀、实验⽬的1、学习重组毕⾚酵母培养基产物表达的⽅法。
2、学习发酵过程中菌体浓度的测定。
3、学习表达的重组蛋⽩酶的鉴定及其酶活的测定。
⼆、实验内容1、毕⾚酵母的菌体⽣长和诱导表达的培养基的制备。
2、重组毕⾚酵母⽣长菌体曲线的测定。
3、对重组毕⾚酵母⼯程菌株的诱导表达。
4、对重组毕⾚酵母⼯程菌株的诱导表达发酵液的酶活测定。
5、SDS-PAGE鉴定重组蛋⽩酶。
三、实验原理蛋⽩酶是催化蛋⽩质化合物中肽键⽔解为⼩肽或氨基酸的⼀类酶总称，⼴泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实及微⽣物中，并且对⽣物体的⽣理调控、催化各种代谢反应等⽅⾯具有重要的作⽤。
蛋⽩酶是⼀类重要的⼯业⽤酶，约占整个⼯业⽤酶量60%以上；⼴泛应⽤于⾷品加⼯、⽪⾰、医药和化⼯等⾏业。
由于蛋⽩酶具有⼴泛的⼯业、⾷品和医药等⽅⾯的应⽤价值，⽬前⼯业上需求量⼤。
植物中提取的蛋⽩酶主要是中性蛋⽩酶。
植物蛋⽩酶⽣产依赖于植物种植，这易受到季节、地理、⽓候等多因素的影响致使来源不稳定。
动物源性蛋⽩酶多从⽜、⽺和猪等的胰脏中提取⽽得。
动物来源蛋⽩酶⽣产成本较⾼，并受到世界动物保护协会和⼈员的强烈反对，⽬前主要⽤于医药⽅⾯。
因此，动植物源蛋⽩酶不能满⾜当代⼯业的需要。
微⽣物源蛋⽩酶⼏乎具有所有植物和动物来源蛋⽩酶的应⽤特性，成为了⽬前的蛋⽩酶的重要来源。
据统计，微⽣物蛋⽩酶占据了世界蛋⽩酶销售⼤约70%以上的份额。
⽬前商业化的蛋⽩酶主要来源于芽孢杆菌，中性蛋⽩酶来⾃植物⽊⽠，⽽来源于真菌的极少。
⽬前，国内外学者对来源于霉菌的蛋⽩酶的研究主要集中于通过优化固体(或者液体)发酵来提⾼蛋⽩酶的产量或通过分离纯化其产⽣的部分酶进⾏性质研究；⽽优化发酵条件很难⼤幅度提⾼蛋⽩酶产量，且发酵过程易受多种因素(如易污染或菌株⽣长状态)影响。
微生物资源开发与利用研究
微生物资源开发与利用研究在广袤的地球上，微生物是一类最为丰富和重要的生物资源。
微生物包括细菌、真菌、病毒等多种形态，它们存在于土壤中、水体中、空气中，甚至是人体内外。
微生物资源的开发与利用研究已成为当前生物科学的重要领域，不仅对于促进农业发展、改善环境质量，还对于推动生物制药和生物能源的发展有着不可估量的价值。
微生物资源的开发与利用研究主要包括以下几个方面：一、农业领域的研究微生物在农业生产中具有重要作用。
例如，一些土壤中的细菌和真菌可以帮助植物吸收养分、抵御病害，提高植物的抗病能力。
此外，通过利用一些微生物菌株，可以制备有机肥料和生物农药，提高农作物的产量和质量。
微生物资源的开发将有助于农业的可持续发展和生态环境的保护。
二、环境领域的研究随着工业的发展和人类活动的不断增加，环境污染问题日益突出。
微生物在环境修复中具有巨大的潜力。
一些特定的微生物可以分解有害物质、降解废水和土壤中的有机污染物，帮助恢复受污染的环境。
通过研究微生物资源的开发与利用，可以有效解决环境污染问题、改善生态状况。
三、生物制药领域的研究微生物在生物制药中扮演着重要角色。
例如，青霉素、链霉素等许多重要药物都是由微生物发酵生产得到的。
此外，通过基因工程技术的应用，可以利用微生物改造产生人类所需的各种蛋白质和药物。
微生物资源的开发与利用将推动生物制药行业的发展，促进人类健康。
四、生物能源领域的研究随着全球能源需求的增加和化石能源的日益枯竭，寻找一种可再生的、清洁的能源成为当务之急。
微生物能够通过光合作用或发酵过程产生氢气、甲烷等生物质能源，开发利用微生物资源将有助于解决能源危机。
此外，微生物还可以通过生物电化学反应产生电能，有望应用于微型电池和可穿戴设备等领域。
综上所述，微生物资源的开发与利用研究在农业、环境、生物制药和生物能源等领域有着广泛的应用前景。
未来的发展还需要加强对微生物多样性的研究，挖掘和利用更多的微生物资源。
此外，研究人员还需加强对微生物生态系统的保护，避免资源的过度开发和环境的进一步破坏。
微生物学实验指导-湖南农大
微生物学实验指导生物秀—专心做生物！ｗｗｗ．ｂｂｉｏｏ．ｃｏｍ易生物－领先的生物医药商务平台ｗｗｗ．ｅｂｉｏｅ．ｃｏｍ生物秀论坛－学术交流，资源共享，互助社区ｗｗｗ．ｂｂｉｏｏ．ｃｏｍ／ｂｂｓ／湖南农业大学植物科学实验教学中心2006年8月目录实验一细菌染色技术 (2)实验二细菌的芽孢染色和鞭毛染色 (6)实验三植物病源真菌的形态观察 (7)实验四植物病原细菌及其所致病害症状观察 (13)实验五接合菌门真菌基本形态及所致病害观察 (17)实验六担子菌门真菌的基本形态及所致病害的观察 (22)实验七有丝分裂孢子真菌的基本形态及所致病害的观察 (27)实验八病原物的分离培养与接种 (28)实验九植物的抗病性和病原菌的生理分化 (29)实验一细菌染色技术细菌个体微小，普通光学显微镜下不易直接观察，故常用染色技术使细菌细胞着色。
包括细菌单染技术、细菌的革兰氏染色技术、细菌的芽孢染色技术、细菌的荚膜染色技术和细菌的鞭毛染色技术Ⅰ、细菌的单染技术简单染色通常只用一种染色剂，使细菌整个细胞染上颜色。
但看不清结构。
所以只便于检查细菌的形态、大小和排列方式等。
【实验目的】1、掌握单染色的操作技术2、观察细菌的基本形态【实验原理】单染色即用单纯的种染料进行染色，多数采用美蓝、结晶紫或石碳酸复红等碱性染料。
此法仅能显示细胞的外部形态，而不能辨别其内部结构。
染色前必须将细胞固定，其目的是杀死细菌，并使它粘附在载玻片上。
此外，还可以增加菌体对染料的亲和力。
常用的有加热和化学固定两种方法。
无论用哪种方法都应尽量使细菌维持原有的形态，防止细胞膨胀或收缩。
【实验材料、药品及器具】1、菌种大肠杆菌（Escherichia col i）枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）2、染色液石炭酸品红染色或结晶紫染色液（Stining Solutions）3、无菌水4、洗瓶装蒸馏水5、洗净的载玻片（Slicle）5片6、显微镜、香柏油、接种环、酒精灯、擦镜纸、吸水纸、二甲苯【实验步骤】1、涂片：取一片干净无油载玻片，在其中央滴一滴无菌水，然后用接种环以无菌操作方法取少许培养好的大肠杆菌，放在载玻片的水滴中涂匀，注意菌量不宜过多，否则，不易看清单个菌体。
微生物资源开发及利用ppt
放线菌：洛卡氏菌属和分支杆菌属，但对烃类降解 不彻底，有中间产物积累。
四、主要类型及特点
投菌法
生物培养法
原位修复
(In-situ bioremediation)
生物通风法
修
复 方
土地耕作法
法
堆肥法
异位修复
(On-situ bioremediation)
预制床法 生物反应器法
四、主要类型及特点
原位修复 不需要将土壤挖走，直接向污染土壤中投加N、P 等营养物质和供氧,促进以石油为碳源的微生物的 生长。
异位修复 是把污染土壤挖出进行集中生物降解。
在杂酚油、石油、农药等污染土壤的修复中已获 得了一些成功案列。
四、主要类型及特点
微生物修复的优点
(1) 污染物被完全从环境 中去除；
（3）加入到修复现场的微生 物会与土著菌株竞争，可能 因其竞争不过土著微生物， 而导致目标微生物数量减少 或代谢活性丧失 ；
（4）微生物个体微小，难以 从土壤中分离。
五、研究趋势及发展
（1）加强微生物修复技术与其他环境修复技术有效 的集成；
（2）高效降解菌株的筛选和基因工程菌的开发； （3）表面活性剂对生物降解的强化作用； （4）做大量的野外试验以获得准确的试验参数与室 内试验结果相比较，以期微生物修复技术的推广。
六、应用前景
• 污染土壤微生物修复技术具有耗资少，处 理效果好等优点，因其许多国家的重视， 我国也成立了专门的机构，旨在研究和推 动污染土壤的修复工作。通过研究人员的 努力，污染土壤微生物修复技术已走出实 验室，并在许多受有毒有害有机污染物污 染的土壤修复计划中得到应用。
微生物学类实验指导书(下)
实验一产酶微生物的分离、纯化与选育酶是生物体内进行生物化学反应的催化剂，在生物体中已发现的酶有2500多种。
由于酶促反应的特异性强，反应条件温和，安全无毒，环境污染少，在洗涤剂、皮革、纺织、造纸、诊断、制药等领域具有广泛的应用价值。
目前，能由工业生产的50多种酶制剂包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、葡萄糖氧化酶，葡萄糖异构酶等，这些酶大部分是由霉菌、细菌、链霉菌和酵母菌产生的。
通过本实验项目，使学生学会从自然界中分离产酶微生物的方法，菌种的纯化技术及其高产菌的选育技术。
1. 淀粉酶产生菌的分离与纯化1.1 实验目的学习从自然界中分离淀粉酶产生菌，并进行分离与纯化。
1.2 实验原理淀粉是由葡萄糖通过α-1，4糖苷键构成的直链淀粉和α-1，6位有分支的支链淀粉组成的。
按照水解淀粉方式的不同，主要的淀粉酶可分为α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和解枝酶（或异淀粉酶）4大类。
产淀粉酶的微生物有细菌、霉菌和酵母菌等。
利用淀粉遇碘液变为蓝色的特性，将分离的芽孢杆菌（或其他微生物）接种在含有淀粉的固体培养基表面进行培养，利用滴加碘液后菌落周围出现的透明圈判断该菌是否产生淀粉酶及初步判断淀粉酶活力的高低。
1.3实验仪器与材料土壤样品或其他富含淀粉质的样品、牛肉膏蛋白胨培养基平板、淀粉培养基平板、无菌水（带玻璃珠）、芽孢染色液；显微镜、恒温水浴锅、酒精灯、接种针、游标卡尺、无菌移液管、无菌试管、量筒等。
1.4 实验方法与步骤1.4.1分离1）采集土壤样品，用无菌水制备1：10土壤悬液；2）取1：10土壤悬液5 ml，注入已灭过菌的试管中，将此试管放入75-80 ℃水浴中热处理10min，以杀死非芽孢细菌；3）取加热处理过的土壤悬液100-200 μL，涂布接种到牛肉膏蛋白胨培养基平板，将平板倒置，于30-32 ℃培养24-48 h；4）对长出的单菌落进行编号，选择表面干燥、粗糙、不透明的菌落，挑取少许菌苔涂片，做芽孢染色，判断是否为芽孢杆菌。
(完整版)微生物学实验指导书
03微生物在自然界和人类生活中的作用阐述微生物在生态系统、工业生产、医疗卫生等领域的重要性。
01微生物的定义与分类包括细菌、真菌、病毒等微生物的基本概念和分类方法。
02微生物的生物学特性介绍微生物的形态、结构、生理生化特性等。
微生物学概述01实验室安全制度包括实验室安全守则、危险标识识别、紧急情况下的应对措施等。
02实验操作规范介绍实验前准备、实验过程中的操作规范、实验后清理等注意事项。
03生物安全阐述生物安全的概念、生物安全级别的划分及相应防护措施。
实验室安全与规范介绍显微镜的种类、使用方法和维护保养。
显微镜介绍离心机的类型、使用方法和维护保养。
离心机阐述培养箱和摇床的工作原理、使用方法和注意事项。
培养箱与摇床包括分光光度计、电泳仪、PCR 仪等设备的简要介绍和使用方法。
其他常用设备常用仪器与设备实验报告格式包括标题、作者、摘要、正文、结论、参考文献等部分的撰写要求。
数据处理与图表制作介绍数据处理的方法、图表的制作规范及注意事项。
实验结果分析与讨论阐述实验结果的分析方法、讨论实验结果的合理性及可能存在的问题。
实验报告提交与评审说明实验报告的提交方式、评审标准及相关注意事项。
实验报告撰写要求03根据实验需求，选择适当的培养基类型，如营养琼脂、马丁氏琼脂等。
选择合适的培养基按照培养基配方准确称量各成分，加入蒸馏水或去离子水，加热溶解后调整pH 值。
配制培养基将配制好的培养基分装到试管、培养皿等容器中，采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌处理。
培养基分装与灭菌培养基制备与灭菌微生物接种与培养接种前准备准备好无菌操作台、无菌接种环、酒精灯等接种工具，确保无菌操作环境。
微生物接种采用划线法、倾注法等方法将待测微生物接种到培养基上。
培养条件设置根据微生物的生长需求，设置好培养温度、湿度和光照等条件。
观察前准备准备好显微镜、载玻片、盖玻片等观察工具，确保无菌操作环境。
微生物形态观察通过显微镜观察微生物的形态、大小、排列方式等特征，记录并描述观察结果。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
微生物资源开发与利用实验指导适用于森林资源保护与游憩专业北京林业大学森林保护学科二零零二年8月实验一培养基的配制及灭菌培养基是人工配制的适于微生物生长、繁殖或保存的营养基质。
培养基的种类繁多，但一般应具备以下几个条件：1.含有适宜的碳源、氮源、无机盐类、生长因素等营养成分；2.含有适量的水分；3.适宜的酸碱度。
根据培养基的成分来源不同可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基。
环境微生物学中，常用废水或废水补加少量氮、磷等无机盐来培养微生物，可认为是天然培养基或半合成培养基。
根据培养基的物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。
液体培养基中加一定量的凝固剂（常加琼脂 1.5—2%）。
溶化冷凝后即成固体培养基。
半固体培养基含琼脂0.2—0.5%。
某些工农业生产废渣及生活废渣可视为天然的固体培养基。
根据培养基的特殊用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
选择培养基在环境微生物学中应用较广，它是根据待培养微生物的特殊营养要求或生物特征而设计的培养基，利用这种培养基可将所需要的微生物从环境混杂的微生物中分离出来。
如以石油作碳源的培养基可以分离到降解石油的微生物；以纤维素为唯一碳源的培养基可以分离到纤维素分离菌。
本实验介绍培养基配制及灭菌的一般原则和方法步骤。
培养基配制的方法和步骤1.称量：先按配方计算培养基各成分的需要量，称量时用1/100粗天平即可。
在烧杯或搪瓷杯中先放少量水，依次加入培养基各组分，溶解后补足至所需的总水量。
对于肉膏之类粘、胶状物，可盛在小烧杯或表面皿内称量，以便用水移入培养基中。
蛋白胨等极易吸潮物质，在盛取时应动作迅速。
某些无机盐类如磷酸盐和镁盐相混合时易产生沉淀，必要时应分别灭菌后再混合。
此外，生长因素及微量元素等成分因用量极少，可预先配成较浓的储备液，使用时按要求取一定量加入培养液中即可。
2.溶化：各成分必须溶解在培养液中。
最好溶解一种组分后，再加第二种，有时需要加热使其溶解。
如果配方中有淀粉，则应先将其用少量冷水调成糊状，再兑入其他已溶解的成分中，边加热边搅拌，至完全融化即溶液由混浊转为清亮后，补水至所需总量。
溶化琼脂时，应注意控制火力使不至溢出或烧焦，并要不断搅拌。
因加热过程中水分损耗较多，最后应补足至原体积。
根据需要，有时需将溶化后的培养基用脱脂棉或纱布过滤，已使培养基清亮透明。
3.调pH值：以10% HCI或10% NaOH调节培养基至所需pH值。
一般用广泛pH试纸矫正，必要时亦可用酸度计。
调时需注意逐步滴加，勿使过酸或过碱而破坏培养基中某些组分。
4.分装：将矫正pH后的培养基按需要趁热分装于三角瓶或试管内，以免琼脂冷凝。
分装时应注意勿使培养基粘附于管口与瓶口部位，以免沾染棉塞而滋生杂菌或影响接种操作。
可以通过下边套有橡皮管及管夹的普通漏斗进行分装。
分装量视需要而定。
一般分装入三角瓶以不超过其容积的一半为宜。
分装试管时，斜面培养基以试管高度的1/5左右为宜，半固体培养基以试管高度的1/3左右为宜。
5.加棉塞：试管和三角瓶口需用棉花堵塞，主要目的是过滤除菌，避免污染。
做棉塞所用的棉花应是普通长纤维棉花，不要用脱脂棉，因为脱脂棉易吸水变湿而滋长杂菌。
棉塞制作方法有多种，主要的要求是不宜过松或过紧，应宜塞拔方便而又不易脱落为准。
正确的棉塞其头部应较大，约有1/3在试管外，2/3在试管内（示范），试管以内部分不应有缝隙。
6.灭菌：在装培养基的三角瓶或试管的棉塞外面包一层牛皮纸，即可灭菌。
应用铅笔注明培养基名称、配制日期等。
如制斜面培养基时，灭菌后趁热将试管斜放（示范），注意勿使培养基沾染棉塞。
如制平板培养基时，灭菌后待培养基温度降至50℃左右时以无菌操作将培养基倒入无菌培养皿内，每皿约15-20ml，平放冷凝即成平板培养基，简称平板。
若制半固体深层培养基，灭菌后垂直放置，冷凝即成。
二、灭菌与消毒灭菌指杀死或消灭所有微生物体。
消毒则是指破坏或消灭病原微生物，只能杀死微生物的营养细胞，而不能杀死全部芽孢。
灭菌与消毒的方法很多，可概分为物理和化学的两类。
如湿热灭菌、间歇灭菌、煮沸消毒、干热灭菌、紫外线灭菌和化学灭菌与消毒等。
实验室常用的方法介绍如下。
高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌是一种湿热灭菌法。
在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时，湿热的穿透力强，而且当蒸汽与被灭菌物体接触冷凝成水时，又可放出热量，使温度迅速升高，从而增加灭菌效力；另一方面，随着压力增高，达到饱和蒸汽时所具有的温度也高。
这样，高压蒸汽灭菌时微生物体受热、湿及压力的作用而被杀死。
由于高压蒸汽灭菌具有灭菌效果好，适用面广的特点，因此，是实验室最常用的消毒灭菌方法。
适于消毒在高温高压下不易分解变压的培养基。
将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中，使其压力增至15磅后/吋²(相当于121℃)。
维持半小时。
即可达到灭菌目的。
高压蒸汽灭菌器分为立式，卧式及手提式等几种。
但原理都是相同的，使用时必须注意以下几点：1.使用前必须首先注意将器内加入足够的水。
2.将需要灭菌的器物放在灭菌器中，将盖密闭，打开气门。
3.加热，待器内冷空气完全排除后（蒸汽从气门有力地冲出），才可关闭气门，因为空气本身有压力，如不完全赶出，则压力表上所指示的压力便不准确，达不到灭菌要求。
4.当压力上升到所需要的指标后，开始计算时间，灭菌过程中保持压力不变。
5.达到需要灭菌时间后，停止加热，使器内压力自然下降，如欲使压力下将快些，可将气门稍稍打开，使蒸汽徐徐放出（愈慢愈好），切勿将气门立即全部打开放气，不然因器内压力骤然降低，引起瓶内和管内的培养基沸腾外溢，沾污棉塞，不但增加以后操作的困难，而且培养基也易污染。
6.当内外压力相等（压力表指针降到0时），才能打开高压蒸汽灭菌器的盖。
7.千万注意，加热时必须有专人看管，不可疏忽，勿使压力过大。
超出允许范围，以免发生危险。
三、几种常用培养基配方及制作法1.牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏 3g蛋白胨 10gNaCl 5g蒸馏水 1000mlpH7.2—7.4，121℃高压蒸汽灭菌20分钟。
2.高氏一号培养基可溶性淀粉 20gKNO 3 1gNaCl 0.5gK 2HPO 4 0.5gMgSO 4·7H 2O 0.5gFeSO 4 0.01g琼脂 15—20g蒸馏水 1000ml自然pH7.2-7.4,121℃高压蒸汽灭菌20分钟。
3.查氏培养基NaNO 3 2gK 2HPO 4 1gKCL 0.5gMgSO 4·7H 2O 0.5gFeSO 4 0.01g蔗糖 30g琼脂 15-20g蒸馏水 1000ml自然pH,121℃高压蒸汽灭菌20分钟。
4.马丁氏培养基葡萄糖 10g蛋白胨 5gKH 2PO 4 1gMgSO 4·7H 2O 0.5g琼脂 15—20g蒸馏水 1000ml自然pH ，115℃高压蒸汽灭菌20分钟。
5.马铃薯培养基马铃薯 200g蔗糖或葡萄糖 20g琼脂 15-20g蒸馏水 1000ml新鲜马铃薯去皮，切成薄片，称200g,加蒸馏水1000ml ，煮沸半小时，用纱布过滤，补足因蒸发而减少的水量，即制成20%马铃薯汁.在马铃薯汁中加入琼脂, 煮沸溶化，加糖搅匀，补足水分，115℃高压蒸汽灭菌20分钟。
自然pH,加入蔗糖，用于培养霉菌；加入葡萄糖，用于培养酵母菌。
将pH 调至7.2-7.4，加入葡萄糖，用于培养放线菌及芽孢杆菌。
四、实验报告和思考题1. 将琼脂培养基分装试管时应如何操作及其注意事项。
2. 高压蒸汽灭菌时应注意什么问题？为什么？五、参考资料王家玲环境微生物学实验高等教育出版社实验二显微镜的使用、微生物的大小的测定显微镜的种类很多，一般可分为光学显微镜与非光学显微镜两大类。
光学显微镜按其性能不同又可分为明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、紫外光显微镜、偏光显微镜和荧光显微镜等。
非光学显微镜为电子显微镜。
本实验学习明视野显微镜的使用方法，重点介绍油镜物镜的基本原理与操作步骤。
一、显微镜的使用1. 光学显微镜的一般构造光学显微镜的结构分为光学和机械两大部分。
光学部分包括接物镜、接目镜、聚光器、虹彩光圈及反光镜；机械部分包括镜头转换器、粗调节器、细调节器、载物台（镜台）、镜筒、镜臂和镜座等。
接物镜：接物镜在成像中起最重要的作用。
普通光学显微镜的接物镜有高倍镜、低倍镜及油镜三种。
接物镜上刻有放大率如10×，45×，100×等符号。
油镜头上刻有“OI”“HI”等字样，并有黑圈或红圈标志。
接目镜：接目镜的作用是把接物镜的实像再放大一次，并把物象映入观察者的眼中。
一般有接目镜2—3个，其上刻有5×、6×、10×等符号以表示它的放大倍数，数字越大，放大率越高。
一般计算显微镜的放大倍数是：接目镜的放大率×接物镜的放大率=显微镜的放大倍数例如接目镜放大率为10，接物镜放大率为45，此时显微镜的放大倍数为450，其余类推。
反光镜：显微镜下方的圆镜，可向四面转动，用镜面收集光线，使光线射向聚光器，反射到接物镜中。
反光镜有平、凹两面，凹面镜聚光力强，适合于光线弱时或无聚光器的显微镜，以及收集通过窗纱的光线或光源为日光灯、物体放大低于100倍时用；平面镜聚光力较弱，适合于光线较弱，如光源为显微镜灯时用。
聚光器：在载物台下方，能聚集光线，增强视野的亮度。
聚光器有的可以升降，升高时增强反射光，下降时减弱反射光。
聚光器内部附有虹彩光圈（也称光圈或光阑），可开大或缩小，以调节进入镜头的光线。
光圈大小应适当，使物像能得到更清晰的效果。
2. 显微镜效能与油镜使用原理：利用显微镜观察菌体时，总希望能看见最细小的部分，即分辨力（分辨本领）要高。
分辨力是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力，主要是由接物镜来决定的。
分辨力与接物镜的数值口径成反比，与镜检光波长度成正比：分辨力=（1/2光波长度）/数值口径数值口径（亦称开口率，numerical aperture,简写为N.A.）愈大，光波愈短，则所能辨晰的物体愈小。
人们肉眼所能感受的光（即可见光）波长范围在400—700nm，平均光波长度为0.55µm 。
如果放大率为90倍的油镜（N.A. =1.25）和放大率为9倍的接目镜时，其总放大率虽为810倍，但分辨力为0.55/2×1.25=0.22µm。
即便用倍数更大的接目镜，使显微镜的总放大率增加，也仍然分辨不出小于0.22µm的结构。
数值口径可由下式计算：N.A. =n·sinɑɑ为镜口角（最大入射角）的半数。
N为介质折射率。
镜口角(图2-1)的大小，决定于接物镜的透镜的直径和焦距，是显微镜光学质量的关键。
介质的折射率。