人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则人用单克隆抗体质量控制技术指导原则单克隆抗体是目前最为广泛应用的药物之一，其广泛的应用范围包括治疗恶性肿瘤、自身免疫性疾病、感染病及癌症的诊断和治疗等。
然而，如何控制单克隆抗体的质量对其应用效果具有重大影响，因此，制定一套完整的单克隆抗体质量控制技术指导原则是十分必要的。
一、单克隆抗体的质量控制技术单克隆抗体质量控制技术主要涉及抗体的生产、加工和检测等多个环节。
其中，抗体的生产包括细胞毒性和毒性等药理学指标的监测，加工则包括缓冲剂、保存剂和抗体的冻干等处理方式，检测则包括重组抗体的纯度、杂质和有效成分含量的测定等方面。
二、单克隆抗体生产过程的质量控制单克隆抗体生产过程中的质量控制主要涉及以下几个方面：首先，应在生产过程中严格控制细胞毒性和毒性等药理学指标的监测，保证单克隆抗体的制备安全、有效。
其次，在单克隆抗体的发酵和加工过程中，应优先使用高效的菌种进行培养和发酵，同时采用适当的缓冲剂和保存剂进行加工，以保证单克隆抗体产品的稳定性和持久性。
在单克隆抗体的提纯过程中，要严格控制杂质含量，保证抗体产品的纯度。
最后，在生产完成后应对单克隆抗体的结构和活性进行检测，了解单克隆抗体产品的性质和活性，对后期的药品研发和生产提供重要数据支持。
三、单克隆抗体应用过程的质量控制单克隆抗体应用过程中的质量控制主要涉及药品贮存和运输、药品使用和高效监测等方面。
首先，应采用适当的药品储存方式和条件，保证单克隆抗体的稳定性和有效性，在运输和使用过程中要注意避免药品受潮、受热或冻结等情况对药品产生不良影响。
其次，在单克隆抗体的使用过程中，应注意依据疾病的状态和药品使用历史等因素进行个性化调整，同时采用高效、准确的监测手段进行鉴定，保证单克隆抗体的使用效果和安全性。
最后，应对药品使用过程中产生的临床数据进行收集和整理，进行药品疗效、副作用和安全性的监测和评价，为药品质量控制提供重要数据支持。
人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则
人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则一、序言体细胞治疗是指应用人的自体、同种异体或异种（非人体）的体细胞，经体外操作后回输（或植入）人体的治疗方法。
这种体外操作包括细胞在体外的传代、扩增、筛选以及药物或其他能改变细胞生物学行为的处理。
经过体外操作后的体细胞可用于疾病的治疗，也可用于疾病的诊断或预防。
体细胞治疗具有多种不同的类型，包括体内回输体外激活的单个核白细胞如淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）、单核细胞、巨噬细胞或体外致敏的杀伤细胞（IVS）等等；体内移植体外加工过的骨髓细胞或造血干细胞；体内接种体外处理过的肿瘤细胞（瘤苗）；体内植入经体外操作过的细胞群如肝细胞、肌细胞、胰岛细胞、软骨细胞等等。
由于体细胞治疗的最终制品不是某一种单一物质而是一类具有生物学效应的细胞，其制备技术和应用方案具有多样性、复杂性和特殊性，因此不能象一般生物制品那样制订出适合于每一种方案的具体标准，本指导原则只提出一个共同的原则，具体的申报资料和应用方案应根据本技术指导原则加以准备、申请和实施。
对每个方案的整个操作过程和最终制品必须制定并严格执行（实施）标准操作程序，以确保体细胞治疗的安全、有效。
二、申报资料（一）体细胞治疗制剂的名称、选题目的与依据、国内外研究现状或生产使用情况1．申请表2．体细胞治疗制剂的名称及命名依据3．选题的目的和立题依据4．国内外有关该制剂的研究现状、生产及临床应用情况（包括专利查询情况）5．临床应用的风险性评估（二）体细胞的采集、分离和检定1．体细胞类型和供体的情况须指出细胞来源是属于自体、同种异体、异种还是细胞系。
必须提供细胞的组织来源及细胞类别的确证资料，其中包括形态生化或表面标志等。
（2）供体若体细胞来源于同种异体，需说明供体的年龄、性别，供体必须符合国家对献血员的要求，并提供测试的方法及符合条件的依据。
供体必须经过检验证明HBV抗原、抗HCV、抗HIV-1/2、梅毒抗体、细菌、霉菌均为阴性，必要时需说明供体的既往病史、家族史等临床资料。
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则单克隆抗体（Monoclonal Antibodies，mAb）是一种重要的生物药物，广泛应用于治疗、诊断和研究领域。
为了确保单克隆抗体的质量，需要制定相应的质量控制技术指导原则。
本文将详细介绍人用单克隆抗体质量控制技术指导原则的内容和要求。
一、单克隆抗体的质量控制原则1. 产品特性分析针对单克隆抗体的特性进行分析，包括抗原特异性、亲和力、稳定性、纯度等指标的测定。
2. 表征方法使用合适的方法对单克隆抗体进行表征，包括结构分析、功能分析、免疫活性测定、亲和力测定等。
3. 杂质检测对单克隆抗体中的杂质进行检测，包括重链异质体、轻链异质体、聚集体等的测定。
4. 稳定性评估对单克隆抗体的稳定性进行评估，包括温度、湿度、光照等因素对其质量的影响，以及冻融循环、离子强度等因素对其稳定性的影响。
5. 生物活性测定对单克隆抗体的生物活性进行测定，包括细胞增殖抑制、细胞凋亡诱导、细胞表面标记等功能的检测。
二、单克隆抗体质量控制技术指导原则1. 抗原特异性测定使用合适的方法对单克隆抗体的抗原特异性进行测定，如ELISA、Western blot等。
2. 亲和力测定使用合适的方法对单克隆抗体的亲和力进行测定，如表面等离子共振（SPR）等。
3. 纯度测定使用合适的方法对单克隆抗体的纯度进行测定，如凝胶电泳、高效液相色谱（HPLC）等。
4. 结构分析使用合适的方法对单克隆抗体的结构进行分析，如质谱分析、X射线晶体学等。
5. 功能分析使用合适的方法对单克隆抗体的功能进行分析，如细胞功能实验、动物实验等。
6. 杂质检测使用合适的方法对单克隆抗体中的杂质进行检测，如聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western blot等。
7. 稳定性评估对单克隆抗体的稳定性进行评估，包括温度、湿度、光照等条件下的稳定性测试。
8. 生物活性测定对单克隆抗体的生物活性进行测定，如细胞增殖抑制实验、细胞凋亡诱导实验等。
9. 质量控制标准制定根据上述各项指标的测定结果，制定相应的质量控制标准，确保单克隆抗体的质量符合要求。
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则单克隆抗体是一类高度特异性的抗体分子，由单一B细胞克隆所产生。
其优势包括高亲和力、高特异性、低背景信号、可重复制备等。
为了确保单克隆抗体的质量和稳定性，需要进行严格的质量控制和技术指导。
以下是人用单克隆抗体质量控制技术指导原则的主要内容。
1.选择适当的细胞系和培养条件：细胞系的选择对于单克隆抗体的质量至关重要。
细胞系应保证其遗传稳定性、生长活力和抗体产量的稳定性。
培养条件包括培养基的配方、温度、CO2浓度、培养时间等，应根据具体细胞系的特性进行优化。
2.保证单克隆性：单克隆抗体应具有单一的抗原结合位点和抗原特异性。
确保单克隆性需要采用适当的细胞分离技术，如限稀稀释法或单细胞克隆法。
此外，还可以通过PCR扩增和DNA测序等方法进行验证。
3.确认抗体特异性：单克隆抗体的特异性是其在分子诊断和治疗中的关键。
可以通过免疫印迹、免疫组化、流式细胞术等技术验证抗体的特异性和交叉反应性，并与其他抗体进行比较。
4.抗体纯化和浓缩：纯化和浓缩方法对于单克隆抗体的质量控制非常重要。
常用的纯化方法包括亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤、透析等。
通过这些方法可以去除杂质和非特异性抗体，提高抗体的纯度和活性。
5. 稳定性测试：单克隆抗体的稳定性对于存储和使用非常重要。
稳定性测试应包括冻融稳定性、温度稳定性、保存时间稳定性等。
这些测试可以通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western blot等方法进行。
6.结果解读和评估：对于单克隆抗体的结果进行解读和评估是质量控制的最后一步。
需要比较样品与对照组的差异性，以确定抗体的特异性和可靠性。
同时，还需要评估抗体的灵敏度、准确性以及与其他方法的一致性。
以上是人用单克隆抗体质量控制技术指导原则的主要内容，通过严格遵循这些原则，可以确保单克隆抗体的稳定性和可靠性，为疾病诊断和治疗提供有力支持。
EMA单抗指导原则
Guideline on development, production, characterisation and specification formonoclonal antibodies and related products,EMA/CHMP/BWP/532517/20081、研发阶段1.1 结构应阐明抗体在作用机理、生物活性和稳定性方面的结构特征，至少包括抗体的免疫化学属性（例如亲和力，组织交叉反应，同种型[isotype]，同种异型[allotype]）的合理性，效应子功能对抗体活性的重要性和效应子功能的完整性。
谨慎考虑可能在患者身上产生抗体反应的风险，特别当单抗与人Ig不是高度同源时，或者在抗体结构上鉴定出潜在的免疫原性表位时。
这可能会导致临床不良反应和/或改变治疗潜能。
1.2 细胞系生产单抗的细胞基质应为稳定、连续的单克隆细胞系。
应阐明选用该细胞系的理由，说明与其他途径相比该细胞系有能力生产出预期的产品。
重组DNA技术获得的细胞基质应遵循“Production and Quality Control of medicinal products derived by recombinant DNA technology”(3AB1A)，以及相关的ICH指导原则Q5A (viral safety)，Q5B (expression constructs)和Q5D (cell substrates)。
分离单克隆细胞系前的过程，如细胞融合、病毒转化、噬菌体展示筛选所用的基因库、体内和体外技术等内容无需太详细描述。
但关乎产品安全性和有效性的信息，如氨基酸和翻译后修饰等对免疫原性或效应子功能有影响的改变、外源试剂和潜在污染物的使用等，需要提交充分的资料来评价单克隆细胞系的同一性和纯度。
慎重考虑通过细胞融合或转化获得的永生化人/非人B淋巴细胞作为单克隆细胞系。
以人B淋巴细胞作为母细胞系会带来传染性病原体（包括变异型克雅氏病[variant Creutzfeldt-Jakob disease，vCJD]和EB病毒）的传播隐患。
人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则
人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则一、序言体细胞治疗是指应用人的自体、同种异体或异种（非人体）的体细胞，经体外操作后回输（或植入）人体的治疗方法。
这种体外操作包括细胞在体外的传代、扩增、筛选以及药物或其他能改变细胞生物学行为的处理。
经过体外操作后的体细胞可用于疾病的治疗，也可用于疾病的诊断或预防。
体细胞治疗具有多种不同的类型，包括体内回输体外激活的单个核白细胞如淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）、单核细胞、巨噬细胞或体外致敏的杀伤细胞（IVS）等等；体内移植体外加工过的骨髓细胞或造血干细胞；体内接种体外处理过的肿瘤细胞（瘤苗）；体内植入经体外操作过的细胞群如肝细胞、肌细胞、胰岛细胞、软骨细胞等等。
由于体细胞治疗的最终制品不是某一种单一物质而是一类具有生物学效应的细胞，其制备技术和应用方案具有多样性、复杂性和特殊性，因此不能象一般生物制品那样制订出适合于每一种方案的具体标准，本指导原则只提出一个共同的原则，具体的申报资料和应用方案应根据本技术指导原则加以准备、申请和实施。
对每个方案的整个操作过程和最终制品必须制定并严格执行（实施）标准操作程序，以确保体细胞治疗的安全、有效。
二、申报资料（一）体细胞治疗制剂的名称、选题目的与依据、国内外研究现状或生产使用情况1．申请表2．体细胞治疗制剂的名称及命名依据3．选题的目的和立题依据4．国内外有关该制剂的研究现状、生产及临床应用情况（包括专利查询情况）5．临床应用的风险性评估（二）体细胞的采集、分离和检定1．体细胞类型和供体的情况（1）体细胞类型须指出细胞来源是属于自体、同种异体、异种还是细胞系。
必须提供细胞的组织来源及细胞类别的确证资料，其中包括形态生化或表面标志等。
（2）供体若体细胞来源于同种异体，需说明供体的年龄、性别，供体必须符合国家对献血员的要求，并提供测试的方法及符合条件的依据。
供体必须经过检验证明HBV抗原、抗HCV、抗HIV-1/2、梅毒抗体、细菌、霉菌均为阴性，必要时需说明供体的既往病史、家族史等临床资料。
浅析单抗原液的生产工艺
浅析单抗原液的生产工艺单抗即单克隆抗体，是通过将抗原注入到宿主动物体内启动机体免疫应答而产生的。
单抗药物在病毒性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤及烈性传染病的防治领域有着突出的作用。
单抗都是采用哺乳动物细胞进行表达，主要以中国仓鼠卵巢细胞系（CHO）为主。
在抗体纯化过程中除了要考虑回收率和纯度以外，还需有效的灭活和清除病毒。
单抗原液车间生产的原液不适用热力灭菌工艺，通常选择无菌操作的非最终灭菌生产工艺。
单抗生产中病毒污染风险：CHO细胞系是制造许多治疗性蛋白质的主力。
CHO细胞的生物安全等级为一级，CHO本身存在内源性逆转录病毒，这是已经被证实了的，但这种病毒对人类不具有致病性。
从药物质量安全角度出发，遵循SFDA 公布的《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》，加入病毒去除和灭活方法。
此外，基于哺乳动物细胞进行的培养发酵，产品被病毒污染是考虑的主要生产风险之一。
病毒污染的其他潜在来源可能还有：使用已经被污染了的主细胞种子库或工作细胞种子库；操作员可能带进病毒，污染工艺；细胞线残留上一级仍有活力的病毒。
因为哺乳动物细胞为带入的病毒污染物提供了合适的宿主细胞，因此病毒量可能会随着细胞培养而放大，进而可能增加生产过程的整体风险。
单克隆抗体药品生产通常包含四个模块：上游培养、下游纯化、分析质控和制剂。
单抗的生产工艺：单抗原液的生产工艺主要概括为两个阶段：上游细胞的培养、发酵和下游的纯化。
细胞种子经摇瓶、WAVE反应器、一、二、三级种子培养扩增后进入发酵罐进行发酵培养。
发酵结束后经离心机进入下游进行纯化。
离心后的料液经过层析、超滤后变成原液。
具体的工艺流程描述如下：（1）细胞复苏：细胞复苏和冻存讲究“慢冻快溶”，复苏时一定要将冻存在液氮或-80℃中凝固的细胞冻存液快速融化至37℃，使胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
（2）细胞传代培养：①悬浮细胞培养：是指细胞在培养液中呈悬浮状态进行生长繁殖，能连续培养和连续收获的培养技术。
人用单克隆抗体质量控制技术指导原
人用单克隆抗体质量控制技术指导原单克隆抗体是高度特异性的抗体，可用于生命科学研究、临床诊断和治疗。
单克隆抗体具有高度稳定性和可重复性，因此在开发和制造过程中需要对其质量进行严格的控制和监测。
本文将介绍人用单克隆抗体质量控制技术的指导原则。
一、制备过程的质量控制单克隆抗体的制备过程需要严格控制，包括质量控制、稳定性评估和保存条件的优化。
制备过程的质量控制需要遵循以下几个步骤：1. 筛选细胞系细胞系的选择与繁殖条件对单克隆抗体质量有着重要的影响。
细胞系应具备良好的生长特性、稳定的遗传背景、高产量和易于维护等特点。
繁殖条件应考虑细胞的生长和分化状态、培养基成分和培养条件等因素。
2. 制备单克隆抗体在制备单克隆抗体时，需要监测其生长速度、抗体产量和产品稳定性等指标。
监测生长速度可以评估细胞健康状态和生产能力，并优化培养条件以提高产量。
监测抗体产量可以为产量优化提供参考，并且可以通过测量此过程中的抗体表达稳定性来检测产品一致性。
单克隆抗体的纯化需要遵循严格的规定，并使用合适的技术。
需要对所选纯化方法的适用性进行评估，并根据抗体的物理化学特性进行优化。
二、产品质量控制单克隆抗体作为生物制品，其产品质量的评估需要对其相关指标进行检测和监测。
产品质量控制常用的指标有：1. 纯度纯度是指单克隆抗体中实际含有的目标蛋白质与其他蛋白质的比例。
可以通过电泳、高效液相色谱等方法进行检测。
2. 功效单克隆抗体的功效是指其针对目标分子的亲和性和特异性。
可以通过酶联免疫吸附试验、免疫荧光染色等方法进行监测。
3. 稳定性稳定性是指单克隆抗体在长期储存和使用中保持其活性的能力。
可以通过储存条件的优化和稳定性测试来评估产品的稳定性。
三、原材料质量控制原材料对单克隆抗体的制备和产品质量有着重要的影响。
常用的原材料包括培养基、抗体对、生物材料等。
原材料的质量控制需要遵循以下几个步骤：1. 选择优质原料原材料应具有高纯度、低毒性、稳定性和良好的质量控制文档等特点。
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人用单克隆抗体质量控制技术指导原则本要点适用于供治疗的体诊断用的利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体，适用于在人体应用的利用重复DNA技术制备的基因工程抗体一、杂交瘤技术制备的单克隆抗体（一）杂交瘤细胞1．亲本细胞（1）骨髓瘤细胞SP2/0或其他适宜的骨髓瘤细胞系。
应为不合成或不分泌免疫球蛋白链型，具有符合骨髓瘤细胞的染色体特征，并有明确的来源历史及符合要求的保存条件。
（2）免疫亲代细胞经抗原免疫的鼠脾B淋巴细胞或外周血B淋巴细胞。
应有明确的免疫原来源、性质及动物种系，免疫原详细的制备过程。
适宜的免疫方案及免疫淋巴细胞制备的方法。
2．细胞融合与克隆化采用适宜的方法进行融合、筛选及克隆化。
3．杂交瘤细胞检定（1）抗体分泌稳定性连续克隆化后抗体阳性率达100%，经体外连续传代3个月以上和反复冻存、复，细胞系能保持稳定分泌特异性抗体。
（2）细胞核学特征检查细胞分裂中期染色体，应符合杂交瘤细胞特征。
4．鼠源病毒检查按附录要求检测鼠源病毒。
5．支原体检查按现行《中国药典》生物制品无菌试验规程进行。
6．无菌试验按现行《中国药典》生物制品无菌试验规程进行。
（二）单克隆抗体的检定1．免疫球蛋白类及亚类用免疫双扩散法或其他适宜的方法测定。
2．亲和力用可靠、准确的方法测定单克隆抗体（以下简称为单抗）的亲和常数或相对亲和力。
一般情况下，对于免疫原为可溶性的单抗，测其亲和常数，对于免疫原为颗粒性抗原的单抗，测其相对亲和力。
3．特异性测定单抗对靶抗原的特异性；对多株单抗识别的抗原决定簇进行相关性分析。
4．交叉反应按附录要求。
免疫组织化学法测定单抗与人体组织交叉反应，用冰冻及石蜡包埋的各种正常脏器组织测定。
来源于肿瘤相关抗原的单抗应进行与各种肿瘤组织的交叉反应试验。
5．效价测定用适宜方法测定。
（三）其他原材料1．细胞培养用小牛血清支原体检测应为阴性。
经小量试验适于杂交瘤细胞生长。
2．培养液应有培养液来源，质量指标。
3．化学试剂规格应达到分析纯以上。
二、基因工程抗体参考《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和本指导原则中的有关要求进行。
三、细胞库的建立应分别建立原始细胞库、主细胞库、工作细胞库的三级管理细胞库，一般情况下主细胞库来自原始细胞库、工作细胞库来自主细胞库。
各级细胞库应有详细的制备过程、检定情况及管理规定等。
四、单抗生产包括用小鼠腹水法和细胞培养法制备。
（一）小鼠腹水法1．小鼠制备腹水必需使用合格的SPF级BACB/C小鼠或BACB/C和瑞士小鼠杂交子一代。
2．动物实验设施动物实验设施应有相关部门颁发的二级以上合格证。
3．腹水制备取适量扩增培养的杂交瘤细胞注射小鼠腹腔制备腹水，小鼠可以预先用液体石蜡或降植烷等处理。
（二）细胞培养法可以采用发酵罐培养，亦可用细胞培养瓶培养收集上清液制备单克隆抗体。
培养基用无牛血清或低牛血清培养基，不能用-酰胺类抗生素。
（三）抗体纯化可采用盐析法、分子筛层析、离子交换亲和层析等适宜的方法。
1．尽可能选用一些不引起免疫球蛋白聚合、变性等的纯化方法及条件。
2．应验证所用的纯化方法能去除可能存在的非目标产物污染，如不需要的免疫球蛋白分子、宿主DNA、用于生产腹水抗体的刺激物、毒素、其它热原质、培养液成分或层析柱析出成分等。
3．应验证所用的纯化方法能有效的去除/灭活病毒。
4．连续产生的各批产品必须符合质检要求，批间具有良好的重复性。
5．纯化后处理必要时对纯化后抗体采用适宜方法进行处理。
（四）半成品、成品制备五、检定包括原液（小鼠腹水、细胞培养上清液、纯化抗体）、半成品及成品的检定等。
（一）物理化学检测1．外观液体制剂应为接近无色微带乳光的澄清液体，不应含有异物、浑浊或摇不散的沉淀。
2．pH值电位法测定3．蛋白质含量的测定用Lowry法或其它适宜的方法测定。
4．纯度测定（1）电泳法用还原和非还原条件SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法。
扫描后免疫球蛋白含量应达到95%以上，二聚体≤10%。
（2）HPLC法纯度应≥95%。
（3）多聚体测定用FPLC或HPLC法，用适宜的分子筛层析，多聚体应≤10%。
5．DNA含量测定用DNA分子杂交法。
每一剂量残余鼠骨髓DNA含量不高于100pg。
6．水分产品如为冻干制品，应进行残余水分测定，其含量应≤3%。
（二）生物学检定1．活性及效价测定用适宜方法进行。
2．鼠源病毒检定同上鼠源病毒检查。
3．无菌试验同上无菌试验。
4．支原体检定同上支原体检定。
5．安全试验用小白鼠和豚鼠进行试验。
6．热原质试验按照现行版《中国药典》生物制品热原质试验规程进行。
采用家兔法时，家兔注射剂量=（人用剂量/50）*20*家兔体重（kg）。
也可用鲎试剂法，1mg/mL蛋白浓度不应检测出有凝集活性。
7．异常毒性实验（三）非免疫球蛋白杂质分析包括来源于细胞基质、培养基和下游工艺的相关杂质，采用适当的技术和方法进行分析检测。
六、经修饰的单克隆抗体为了提高单克隆抗体在治疗和体诊断中的作用，常用单抗与毒素、药物、放射性核素或其它物质偶连形成免疫结合物，或在同一段多胎链包含非免疫球蛋白和免疫球蛋白序列的嵌合重组蛋白来获得。
研究者除对前面提到的有关未偶连单克隆抗体（未修饰单克隆抗体）的要求外，还应提供下列容：（一）免疫结合物的构建应提供构建免疫结合物所用试剂和过程的详细资料，包括：1．描述与单克隆抗体连接的成分如：毒素、药物、酶及细胞因子，包括：所有成分的来源、结构、制法、纯度及特征。
2．制备免疫结合物所用化学试剂的描述，如连接剂和螯合剂。
这些资料应该包括试剂来源、制备方法，以及合成或纯化时残留杂质的测定等容。
还应提供合成反应途径的图解，以及与免疫结合物中所用化学试剂毒性相关资料。
3．在确定成品的标准时应首先确定该原料与抗体的平均结合率及每个抗体被结合部分的数量，并揭示免疫球蛋白置换数量、效力和稳定性间的关系。
4．用重组DNA技术制备的制品（如来源于转染细胞系或微生物培养基，嵌合的、易形的，互补决定区［CDR］接合的及单链Fv抗体，以及重组免疫结合物）应提供构建和置备过程的全部资料。
重组免疫结合物的稳定性应认真研究。
因聚合物形成构形改变或变性而减弱了特异免疫反应性（如通过重组Fvs形成"双抗"）可能导致药代动力学的改变和/或与非靶组织结合。
（二）免疫结合物的纯度1．应采取特殊措施保证抗体尽可能无外源免疫球蛋白或非免疫球蛋白污染，因这些污染物质在构建免疫结合物过程中，能与核素、毒素或药物发生反应。
2．应规定最终产品中游离抗体或游离组分的限量。
活性中间体应被灭活或去除。
（三）免疫结合物的免疫反应性，效力及稳定性毒素或药物偶联至抗体上会改变其中任一成分的活性。
1．应采用适当的方法；评估偶联前后的免疫反应性。
2．免疫结合物非免疫球蛋白成分的活性应在适当的时候用效力试验来进行评估（例如，毒素、细胞因子或酶等），用于造影的放射性免疫结合物除外。
3．免疫结合物构建后，应确定免疫反应性变化的百分率限值，并作为产品规格的组成部分。
4．应通过在合并的人血清中37℃无菌条件下孵育，来检测免疫结合物在体外的稳定性。
假如所用抗凝剂不会影响免疫结合物的稳定性，血浆可以用来代替血清。
经过规定间隔时间分析样品中完整免疫结合物及分解产物的浓度。
应详细说明评估产品的稳定性的条件及所用阴、阳对照。
（四）与放射性核素偶联单克隆抗体的特殊问题放免结合物应用标准化的、严格控制并经过验证的方法制备。
应建立检测游离同位素、结合单克隆抗体、标记的非免疫球蛋白物质的放射性百分率的方法。
1．放射性标记单克隆抗体的初始研究用新药申报包含连续3次放射标记试生产的分析结果，应证明所制备的产品未改变免疫特异性、无菌、无热原质。
放射性标记试生产应由在研究中对单克隆抗体进行放射性标记及使用试剂的同一组人员进行。
2．制备免疫结合物时应使用放射性药品及同位素并应提供其无菌及无热原质的分析证书及横向参比的信涵。
3．在标记试生产过程中，应测定最终产品中共价结合的和游离的同位素的浓度，以及标记试剂及其分解产物的残留水平。
4．应描述给每一个病人应用前后进行的质控试验。
5．适当的时候，应检测免疫结合物形成胶体的情况，并对其进行限定。
6．有关单抗制备中放射性标记物的质控标准参考国家关于放射性药品规定。
七、产品稳定性产品稳定性应满足临床方案制定的要求。
加速稳定性试验资料可作为产品审批及标定用，但不能代替实际的稳定性资料。
（一）应制定稳定性检定规划，包括在规定效期全过程中，每间隔一定时间进行制品的物理化学完整性试验（如断裂或聚合），效力试验，无菌试验，以及水分、pH和防腐剂的稳定性测定。
（二）确保制品生物活性的稳定性试验（例如定量体外效率试验）应包括厂参比品。
如可能在试验的全过程中只使用一批试验抗原（如：纯化的抗原、细胞或组织）。
应用定量效力试验使对生物活性进行有意义的比较成为可能。
（三）加速稳定性试验，既将制品储存在温度高于常规储存温度后的稳定性试验，可能有助于鉴定及建立稳定性指示试验。
表示稳定性的特定参数应通过对每一批制品用趋向分析方法进行监测。
八、临床前研究由于生产条件或配方的改变可引起制品生物活性的明显变化。
因此，建议在临床前研究中所使用的单抗应与临床试验中拟使用的单抗的生产工艺一致。
（一）交叉反应性试验当相同或相关抗原决定簇在人的非预定的细胞或靶组织表达时，可观察到抗体与它们结合。
非靶组织结合可能具有严重后果，特别是使用药理活性抗体或细胞毒性免疫结合物时。
因此，一般在Ⅰ期临床试验前应经过用人组织或细胞进行交叉反应性或非靶组织结合的实验室检测。
对于双特异性抗体，除检测双特异性产品外，还应对每株亲本抗体进行逐个评估。
1．检测交叉反应性的体外试验目前，用人细胞或组织进行免疫细胞化学及免疫组织化学技术检测，应使用有效的并被确认的新技术（参照1．2．4）。
2．测定交叉反应性的体试验当有适当模型时，单克隆抗体与非靶人组织的交叉反应性应在动物中进行一次综合的体试验。
试验结果，特别是对具有溶细胞性的免疫结合物或具有ADCC活性的抗体，通常要求进行更广泛的临床前试验，包括用一种以上动物超剂量及重复剂量进行动物试验。
设计临床试验时应考虑对非靶组织的定位。
（二）临床前药理学和毒性试验1．设计单克隆抗体临床前安全试验是为了预测在人体中可能的毒性评估在人体中潜在不良反应副作用的可能性和严重程度，并可能确定安全初始剂量和逐步提高剂量。
有关单克隆抗体的临床前试验，包括免疫原性、稳定性、组织交叉反应性和效应功能。
2．动物毒理学研究当设计单克隆抗体的毒理学试验时，应考虑如下：（1）若被试样品为未偶联抗体，且无合适的动物模型或无携带相关抗原的动物，且与人组织交叉反应性试验明显阴性，则毒理学试验不是必须的。
（2）动物体相关抗原的性质与人体相关抗原的生物学分布、功能及结构应具有可比性。