肿瘤坏死因子α
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析
人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T20 ng/L -400 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。
用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（TNF-α），再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
肿瘤坏死因子α及其抑制剂的研究进展
肿瘤坏死因子α及其抑制剂的研究进展肿瘤坏死因子（TNF）α是一种在多种生物效应中起作用的细胞因子，主要由单核细胞、巨噬细胞和胸腺依赖淋巴细胞产生，分为溶解型和膜结合型。
TNFα通过与其受体（TNFR）特异性结合引起一系列细胞因子改变，进而实现促细胞生长和程序性细胞死亡并促进牙周炎、种植体周围炎以及局限性肠炎和类风湿性关节炎等疾病发展的作用。
TNFα抑制剂分为大分子抑制剂和活性小分子抑制剂，种类繁多，作用机制复杂，已大量应用于临床治疗并取得了优异的疗效；而新型TNFα抑制剂TNFR1前配体结合序列复合物对于TNFα引起的程序性细胞死亡、关节炎破骨活动有明显的抑制作用，具有治疗TNFα参与的炎性疾病的潜能。
标签：肿瘤坏死因子；肿瘤坏死因子受体；抑制剂；作用机制[文献标志码]A在牙周炎和种植体周围炎等炎性疾病中，肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）α是释放最早并起枢纽作用的炎性因子，其下游的核因子（nuclear factor，NF）-κB会改变破骨细胞NF-κB受体活化因子配基和骨保护因子的表达，而RANKL与OPG间的比例变化可以参与破骨细胞的形成，导致骨的吸收。
TN Fα达到一定质量浓度时还可以直接抑制成骨细胞的增殖和分化。
TNFα不仅在种植体周围炎及其所引起的失败种植体周高表达，而且其表达水平与炎症和骨吸收的严重程度呈正相关。
在许多TNFα相关疾病的治疗过程中，TNFα抑制剂收到了明显的疗效；但是，随着有关TNFα的作用机制逐渐清晰，人们对TNFα抑制剂有着更高的期盼，希望其可以更精确地作用到疾病产生的核心步骤，更少的不良反应，又不影响TNFα在宿主防御中可能起到的有利的生物学功能。
1 TNFαTNFα是一种在多种生物效应中起作用的细胞因子，属于TNF超家族成员。
TNFα主要由单核细胞、巨噬细胞和胸腺依赖淋巴细胞（简称T细胞或T淋巴细胞）产生，其主要作用是促炎症反应发生发展和调节自身免疫，譬如炎性骨吸收、程序性细胞死亡和自身免疫疾病等。
肿瘤坏死因子TNFα
人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。
用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α，再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
心力衰竭中肿瘤坏死因子-α的作用机制及抗细胞因子治疗概要
心力衰竭中肿瘤坏死因子-α的作用机制及抗细胞因子治疗北京大学医学部基础医学院04级临床一班90401123 王茜婷90401124 王天昱90401125 王玮90401126 王玺90401127 王琰90401128 王燕磊[摘要]心力衰竭是常见的临床综合征，是多数原发性心血管疾病的严重或终末阶段。
近年来，越来越多的研究证实肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 等细胞因子在充血性心力衰竭的发展中起重要的作用。
其通过抑制心肌收缩力、促进心肌细胞凋亡及介导心肌重构等作用引发或加重心力衰竭。
鉴于目前对细胞因子生物效应的认识及其在心力衰竭中病理、生理发生机制的作用,抗细胞因子治疗心力衰竭已成为近年来研究治疗心力衰竭的热点。
本文将TNF-α在心力衰竭时对心脏的作用机制, 及抗细胞因子治疗心力衰竭的现状做一综述。
[关键词]心力衰竭发病机制细胞因子肿瘤坏死因子-α抗细胞因子治疗1.引言心力衰竭( heart failure, HF)是指由各种心脏疾病导致心功能不全的一种综合征,绝大多数情况下是指心肌收缩力下降使心排出量不能满足机体代谢需要,器官、组织灌流不足,同时出现体循环和(或)肺循环淤血表现。
心力衰竭为各种心脏疾病的终末期表现,是导致心脏病患者死亡重要原因。
心力衰竭发病机制复杂,神经体液机制、氧化应激和心肌细胞凋亡在心力衰竭中扮演不同角色。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是由激活的单核/巨噬细胞分泌的一种具有多种生物活性的细胞因子，与受体结合能产生多种生物效应，如免疫刺激、调节机体的抗菌作用、蛋白激酶C 的激活和涉及多种炎症、细胞生长的基因表达的激活。
心肌细胞等多种非免疫细胞在某些应激状态下(如心力衰竭) 也具有产生TNF-α的能力。
心力衰竭时心肌细胞可能通过如下机制产生TNF -α：(1)心肌组织缺血、缺氧激活了心肌细胞和心肌局部单核/巨噬细胞,导致TNF - α的表达增加；(2)压力负荷刺激作用心脏时,心肌细胞表达TNF - α明显增加; (3)心力衰竭时交感-肾上腺系统及肾素-血管紧张素-醛固酮系统的激活可能直接影响细胞因子的表达。
肿瘤坏死因子
肿瘤坏死因⼦基本简介肿瘤坏死因⼦（TNF）是⼀种由巨噬细胞对细菌感染或其他免疫源反应⾃然产⽣的细胞因⼦。
是由巨噬细胞分泌的⼀种⼩分⼦蛋⽩。
是⼀类能直接造成肿瘤细胞死亡的细胞因⼦。
肿瘤坏死因⼦与⼲扰素协同作⽤可杀死肿瘤细胞。
根据其来源和结构不同分为两种类型，即TNF－α和TNF－β。
前者主要由巨噬细胞产⽣，LPS是诱导其产⽣的较强刺激剂，T细胞和NK细胞在某些刺激因⼦（如PMA）作⽤下也可分泌TNF－α；后者主要由活化T细胞产⽣，T细胞在抗原、丝裂原等刺激下可产⽣⾼⽔平的TNF－β。
TNF－β原称淋巴毒素（1ymphotox－in，LT）。
肿瘤坏死因⼦TNF-α主要由单核－巨噬细胞分泌；TNF-β主要由活化的T淋巴细胞分泌，两者有相似致热性。
⼩剂量呈单峰热，⼤剂量呈双峰热；TNF在体内外均能刺激IL-1的产⽣。
不耐热，70℃30min失活。
1975年Carswell等发现接种BCG的⼩⿏注射LPS后，⾎清中含有⼀种能杀伤某些肿瘤细胞或使体内肿瘤组织发⽣⾎坏死的因⼦，称为肿瘤坏死因⼦。
1985年Shalaby把巨噬细胞产⽣的TNF 命名为TNF-α，把T淋巴细胞产⽣的淋巴毒素(lymphotoxin,LT)命名为TNF-β。
TNF-α⼜称恶质素。
基本信息药物类别：抗肿瘤药所属类别：⽣物反应调节剂药物名称：肿瘤坏死因⼦产⽣过程⼤量蛋⽩质本质的肿瘤坏死因⼦（1）TNF-α是⼀种单核因⼦，主要由单核细胞和巨噬细胞产⽣，LPS是较强的刺激剂。
IFN-γ、M-CSF、GM-CSF对单核细胞/巨噬细胞产⽣TNF-α有刺激作⽤，⽽PGE则有抑制作⽤。
前单核细胞系U937、前髓细胞系HL-60在PMA刺激下可产⽣较⾼⽔平的TNF-α。
T淋巴细胞、T细胞杂交瘤、T淋巴样细胞系以NK细胞等在PMA刺激下也可分泌TNF-α。
SAC、PMA、抗IgM可刺激正常B细胞产⽣TNF-α。
此外，中性粒细胞、LAK、星状细胞、内⽪细胞、平滑肌细胞亦可产⽣TNF-α。
肿瘤坏死因子正常参考范围
肿瘤坏死因子正常参考范围全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：肿瘤坏死因子（TNF）是一种由免疫细胞产生的蛋白质，是机体的重要炎症介质之一。
TNF存在于体内的主要两个亚型为TNF-α和TNF-β，其中TNF-α是最为广泛研究的亚型。
TNF-α主要由巨噬细胞、淋巴细胞、树突细胞等免疫细胞分泌，以及一些非免疫细胞如肿瘤细胞、血管内皮细胞等也可产生TNF-α。
TNF-α的主要作用是发挥促炎效应，同时也具有调节免疫反应、调节细胞增殖凋亡等功能。
肿瘤坏死因子的异常水平与多种疾病的发生、发展密切相关。
TNF-α过高或过低的表达都可能导致机体的免疫应答紊乱，从而引起免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等多种疾病的发生。
监测肿瘤坏死因子的水平是临床诊断和治疗重要的一环。
肿瘤坏死因子正常参考范围则是指肿瘤坏死因子在健康人群中的典型范围。
由于不同的实验室、不同的测量方法可能有所不同，因此肿瘤坏死因子的正常参考范围会存在一定的差异。
一般来说，正常人群中肿瘤坏死因子的水平较低，在健康成年人血清中，TNF-α的正常水平一般在2-20pg/mL之间。
在特定疾病状态下，肿瘤坏死因子的水平可能出现异常。
在炎症性疾病如类风湿关节炎、炎症性肠病等中，TNF-α的水平常常明显升高；而在某些感染性疾病、免疫相关性疾病、恶性肿瘤等中，TNF-α的水平也可能发生变化。
对于某些疾病的诊断和疗效监测，监测肿瘤坏死因子的水平具有一定的临床意义。
肿瘤坏死因子在体内的浓度受到多种因素的影响。
除了疾病状态外，情绪、环境、生活方式、饮食等也可能对肿瘤坏死因子的水平产生影响。
在进行肿瘤坏死因子水平检测时，需要综合考虑患者的临床情况和全面评估。
肿瘤坏死因子正常参考范围是指在一般健康人群中，肿瘤坏死因子的典型水平范围。
监测肿瘤坏死因子的水平对于一些炎症性疾病、感染性疾病、免疫相关性疾病的诊断和治疗具有一定的帮助。
了解肿瘤坏死因子的正常参考范围，在临床实践中也能为医生提供参考，有助于更准确地评估患者的健康状况和疾病状态。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物学活性测定
响。因为 TNF-β 细胞毒生物学作用等很多生物学效应均与 TNF-α 相似。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子，不仅具有选择性 地杀伤某些肿瘤细胞，而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免 疫学检测方法。其中细胞毒生物学检测方法敏感性较高，最为常用；免疫学检测方法包括酶 联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫测定法。
(一) 原理: TNF-α 受体广泛地分布于多种肿瘤细胞和血细胞，根据 TNF-α 与相应靶细胞结合后引 起不同的生物学效应，建立了多种检测 TNF-α 生物学活性方法。某些肿瘤细胞膜表面的 TNF-α 受体与 TNF-α 结合后，可导致这些肿瘤细胞的死亡，可通过检测对肿瘤细胞的杀伤 能力，来反映 TNF-α 的生物学活性。若这种肿瘤细胞先用 3H-TdR 标记，则被杀伤后３H-TdR 释放至细胞外，牽 I 通过测定肿瘤细胞释放３H-TdR 的量来反映 TNF-α 的杀伤活性。 (二) 操作步骤:
用 DYQ-Ⅱ型多头细胞收集器收集样品于 "9999"型玻璃纤维滤纸上
↓ 烤干后，进行 β 计数
结果判定:
1. TNF-α 作用 24h 后，在倒置显微镜下判定 50％L929 细胞杀伤的稀释度即为１个
TNF-α 活性单位。
2. 根据测得的 cpm 值按下列公式计数活性单位:
TNF-α 活性单位(U／ml)
对照组 cpm 值。
3. 胰蛋白酶和 DNA 酶浓度和消化时间要严格控制，犆?批酶均要摸索最适浓度和时间。
否则，消化时间过长或过短者会影响实验结果。
4. 为了增强检测系统的敏感性，在测定系统中加入放线菌素 D，但浓度不宜过大，一
般最终浓度为 0.5～1μg／ml。
肿瘤坏死因子α的生物学作用
及修复细胞等生物学意义的细胞因子ｉ － ｉ 。Ｃ ａ ｒ ｓ ｗ ｅ ｌ ｌ 等研究发现 ， 接种 卡 介苗后的小 鼠 ． 其血清 中含有一种高活 性的细胞 因子 ， 这种 因子可 引 起肿 瘤细胞出血坏死 ． 后来将 其命 名为肿瘤坏死因子 。肿瘤坏死 因子 方面具有调节 机体 的免疫 功能 ． 使某些肿 瘤细胞坏 死的作用 ： 另一 方 面又可介导炎症过程 、 组织损伤 、 休 克等病 理生理 反应 。 Ｌ Ｐ Ｓ 是诱 导 肿瘤坏死 因子产 生的较 强刺激 剂． 此外 ． Ｔ细胞 和 Ｎ Ｋ细胞在某些刺激 因子 的作 用下也 可分泌肿瘤坏死 因子 肿瘤 坏死 因子包括 Ｔ ＮＦ — 和 Ｔ Ｎ Ｆ ～ Ｂ两种 。其 中 ， Ｔ Ｎ Ｆ — Ｂ由活化 的淋 巴细胞产 生 ，又称淋巴毒素 ； Ｔ Ｎ Ｆ ～ Ⅱ由活化的单核巨噬细胞 产生 ， 又称 恶液 症 反 应 和 肿 瘤 发 生 的 机 制 及 其 抗 肿 瘤 功 能 。 ｅ
２ Ｔ ＮＦ — ａ表 达
．
［ １ ］ Ｃ ｈ ｅ ｎ Ｊ Ｗ， Ｃ ｈ ｅ ｎ Ｙ Ｈ ． Ｌ ｉ ｎ Ｓ Ｊ ． Ｌ ｏ ｎ ｇ — ｔ ｅ ｒ ｍ ｅ ｘ ｐ ｏ ｓ ｕ ｒ ｅ ｔ ｏ ｏ ｘ ｉ ｄ ｉ ｚ ｅ ｄ ｌ ｏ ｗ－ ｄ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｙ
ｆ ｍｏ ｎ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ ｂ ｙ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ ｏ ｘ ｉ ｄ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｄ ｏ ｘ － ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｐ ａ ｔ ｈ ｗ ａ ｙ ｓ ［ Ｊ ］ ． 巨 噬 细 胞 和 Ｔ细胞是 Ｔ Ｎ Ｆ — ｄ的主要生产者 ，其它细胞也 可产生 ｏ
７ 总 结
Ｔ Ｎ Ｆ — ｄ的生 理学和病理生理学作用非常复杂。 作为最重要的促 炎 细胞 因子 ． Ｔ Ｎ Ｆ — ｄ参 与血管舒张和水肿形成 、促进炎症部位的氧化 应 １ Ｔ ＮＦ — ｏ ｃ 的分 类和 蛋 白质 结 构 激， 间接诱发发热。 Ｎ ｆ Ｔ Ｎ Ｆ — 抗体在治疗一些 自身免疫性疾病 中发挥 Ｔ Ｎ Ｆ 一 ０ 【 分为 １ ７ ｋ Ｄ ａ 的可 溶性 Ｔ Ｎ Ｆ — ａ （ ｓ Ｔ Ｎ Ｆ — ｃ ｔ ） 和２ ６ ｋ Ｄ ａ 膜结 合 了非常重要的作用。 在我们的后续 研究 中 ， 需要进一步 了解 Ｔ Ｎ Ｆ — 调 的Ｔ Ｎ Ｆ — ａ（ ｔ ｍＴ Ｎ Ｆ 一 ０ 【 ） 。ｔ ｍＴ Ｎ Ｆ 一 ０ 【 的一级结构有 ２ ３ ３个氨基酸残基 ， 在金 属蛋 白酶 Ｔ ＡＣ Ｅ的作 用下 ． ｔ ， Ｎ Ｆ — ｄ的胞 外段 １ － １ ５ ７位 可被水 解。 脱落为 ｓ Ｔ ＮＦ — Ｏ ｌ ［ ４ ］ 。 【 参考文献 】 ，
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肿瘤坏死因子α
文章目录*一、肿瘤坏死因子α的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、肿瘤坏死因子α的
正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、肿瘤坏死因子α的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、肿瘤坏死因子α的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、肿瘤坏死因子α的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应
肿瘤坏死因子α的基本信息
1、定义α肿瘤坏死因子(TNF α)是一种主要由巨噬细胞和
单核细胞产生的促炎细胞因子,并参与正常炎症反应和免疫反应。
α肿瘤坏死因子在许多病理状态下产生增多,包括败血症、恶性
肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病。
在重症类风湿关节炎患者的血液及关节中都可发现肿瘤坏死因子增多。
2、专科分类肿瘤科
3、检查分类免疫检查
4、适用性别男女均适用
5、是否空腹空腹
肿瘤坏死因子α的正常值和临床意义
1、正常值 4.3±2.8ng/ml
2、临床意义测定血清或其他体液中TNF浓度,对原发性或继发性肾小球疾病、器官移植性排异、肿瘤、重症感染等疾病有诊断意义。
肿瘤:许多肿瘤细胞可产生TNF,因此在多种肿瘤时机体内TNF表达明显升高。
TNF又可通过细胞毒作用,杀死肿瘤细胞或抑制某些肿瘤细胞增殖。
风湿性关节炎患者的滑膜中有大量TNF。
在脓毒败血症、感染性肺炎等严重炎性疾病时血清中TNF含量明显增高。
许多寄生虫病患者中TNF也显著改变。
艾滋病患者体液中TNF也高于正常人。
疟疾抗原、病毒和细菌均可诱导TNF 产生,TNF又反过来具有抗病毒、抗细菌、抗疟疾作用。
TNF与移植排斥反应密切相关,在患者的血清或尿液中TNF 的表达与排斥反应程度呈正相关。
肿瘤坏死因子α的检查过程及注意事项
1、检查过程用双抗体夹心酶免疫分析法。
将TNF α单克隆抗体包被于PVC板上,样品种的TNF α和单抗体结合后再与辣根
过氧化物酶标记免抗TNFα多克隆抗体结合,过氧化物酶与TMB 反应终止后用酶标仪测定450nm的光密度,结果与标准曲线比较确定TNFα的含量。
2、注意事项检查前禁忌:患者应该避免接近各种放射源。
检查时要求:标本均与确诊时取静脉血3ml,及时分离血清,-40℃冻存集中测定。
肿瘤坏死因子α的相关疾病和症状
1、相关疾病肿瘤
2、相关症状肝脏炎症、组织炎症、血糖异常
肿瘤坏死因子α的不适宜人群和不良反应
1、不适宜人群暂无。
2、不良反应暂无相关并发症和危害。