大肠杆菌的分离以及药敏试验
猪大肠杆菌的分离鉴定与药物敏感试验3
1.3.2细菌的生化鉴定挑取可疑菌落纯培养物，分别接种于蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖、卫矛醇、乳糖、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、鼠李糖、精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸柠檬酸钠、乳糖胆盐、M.R 试验、靛基质、侧金盏花醇、肌醇、水杨苷、尿素、明胶、半固体及H2S培养基中37 ℃培养24～48 h。
1.3.3致病力试验将分离到的细菌接种普通肉汤培养基，37℃培养24h。
选择日龄、体重、性别、精神状态相似的小白鼠12只，分为三组。
第一组与接种所分离到的大肠杆菌，每只腹部皮下接种0.3ml。
第二组接种等同量的肉汤作为对照。
能致小白鼠发病死亡，并从试验小白鼠体内分离细菌，再经生化试验鉴定为性大肠杆菌的菌株用于药敏试验。
1.4药敏试验采用纸片琼脂扩散法（K-B法）。
大肠埃希氏菌菌液浓度标化后15min之内接种于药敏培养基，以无菌棉拭子蘸取已制备好的菌液，并在管壁上拧压除去多余的菌液后，向一个方向均匀涂布接种于M-H琼脂平板表面，然后将平板每转动60度涂布一次，共涂三次，最后沿平板边缘涂布一圈。
盖上平皿盖，置室温干燥3~5min待平皿面稍干后用无菌镊子或纸片分配器将含药纸片平放于含菌琼脂平板表面，并轻压使其紧贴在上面。
纸片应贴得均匀，各纸片中心距离不小于24mm，纸片距平板内缘应不少于15mm。
直径为90mm 的平皿可贴6~7张纸片。
纸片贴牢后避免再次移动，因为有些药物立刻就可扩散于琼脂内。
平板经室温放置15min再倒置于35℃培养箱中，培养16~18h后阅读结果。
1.5防治措施对猪舍进行全面的消毒；病猪硫酸卡那霉素等敏感药物进行治疗对与病弱的仔猪进行补液、强心等支持疗法；对与临床水肿症状明显的猪进行消肿利尿、镇静等治疗。
对病猪使用以下处方：卡那霉素(25万单位／毫升)2毫升、5％碳酸氢钠30毫升、25％葡萄糖液40毫升，混合后1次静注，每日2次；同时肌肉注射维生素C(0.l克)2毫升，每日2次。
2.试验结果2.1病原菌的分离培养与鉴定结果2.1.1菌落形态与涂片、染色、镜检结果普通琼脂平板上形成圆形、隆起、边缘整齐、湿润、中等大小、灰白色的半透明菌落。
仔猪大肠杆菌分离鉴定及药敏试验
各种药片贴于平板 上 ， 每个平板７ 张药
片 ，将 贴 好 药 片 的平 板 置 于３ ７ ℃ 的恒 猪
肠 道 菌 群失 调 、 大肠 杆 菌 过 量 繁殖 是
温 箱 中培 养 ２ ４ ｈ 后 观 察 实 验 结 果 并 测
其 培 养特 性 、 形态 、 染 色 反 应 符 合 大肠 杆 菌 的 菌 株确 定 为 致 病 性 大 肠杆 菌 。
１ － ２ ． ３ 药敏试验 ： 将 致 病 性 大 肠 杆 菌
采用世界 卫生组织（ ＷＨ Ｏ ） 推荐 的Ｋ ｉ ｒ －
ｂ ｙ ． Ｂ ａ ｕ ｅ ｒ 氏法ｆ 即美 国 临 床 实 验 室 标 准
１ ． １ ． ２ 主要试剂 ： 培 养 基 及 细 菌 鉴 定 用 的生 化试 剂等 购 自河 南 美 凯 生 物科 技有限公司。 １ ． １ ． ３ 供试药片 ： 购 自杭 州 微 生 物 试 剂责任有限公司。 １ ． １ ． ４ 试验动物 ： 清 洁 级 昆 明 系小 白 鼠雌 雄 各 半 ， 共２ ０ 只。 １ ． １ ． ５ 器材： 蒸 汽高 压灭 菌锅 、 培 养
素 ，抗 生 素 广 泛 使 用 对 此 病 的 预 防 与
控 制 取 得 了一 定 的 效 果 。但 由于 养 殖 户 的不 合 理 用 药 ．使 动 物 长 期 服 用 大 量抗菌药物 ， 易 破坏 肠 道 正 常 菌群 ， 增 加 反 复感 染 和继 发 感 染 的几 率 ．加 速 了猪大肠杆 菌耐药性 的产生 和扩散 ， 从 而 给该 病 的 防治 带 了前 所 未 有 的 困
睑 或 其 它部 位 水 肿 、神 经 症 状 为 主要 特 征 的 疾 病 。仔 猪 大肠 杆 菌病 在集 约
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪大肠 杆菌 的分离鉴定及药敏试验
廖 娟 ， 小春 ， 萌 ， 超 ， 钢★ 任 唐 伍 王
（ 四川乐山师范学院化学与生命科学学院，乐山 ６ ４ ０ ） １ ０ ０
ＤＯ １ ０３ ６ ／ ． ： ．９ ９ ＪＩ １ ＳＳＮ．６ １ ６ ２ ．０１ ．７ ０ ３ １ ７ － ０ ７２ ２０ 。 １
中草药包括天然 的动植 物类药和矿物质类药 ， 不仅含有 丰富的维生素 、 白质等 营养物 质 ， 蛋 还含 有生物 碱 、 甙类 、 鞣
消化吸收 ， 还刺激动物 的免疫机制 ， 提高免疫能力 。
１ 材 料 及 方 法
质等 ， 在提 高动物 的抗病 力保护 动物健康 的 同时 ， 高 了动 提
中草药对杂交肉牛育肥效果观察
何 继红 ， 张
摘
令
（ 贵州省盘县农业局，盘县 ５ ３ ３ ） ５５７
要 ： 试 验 选 购 了 １￣ ６月龄 ， 本 ４１ 活体 重 约 ３ ０ ｇ西 杂 肉牛 ２ 头 ， 据 完全 随机 分 组 原 则 平 均 分 成 ３组进 行 试 验 。 ０ｋ １ 根 结
２ 染色镜检 ． ２ ２３ 生化鉴 定 ．
分离菌株革兰 氏染色为阴性小杆菌 ， 两端 钝 分离 出的菌株 均能发酵葡萄糖 、 糖 、 芽 乳 麦
圆， 多单个存在 ， 与大肠 杆菌染色特性相符。 糖、 甘露醇 ， 均能产 酸产气 ， 大多数菌株 不利用蔗糖 ， 少数 缓
慢发酵 ， Ｐ实验 、 Ｖ 枸橼酸盐试 验均为 阴性 ， 吲哚试验 、 ＭＲ试 表１ 分 离菌株的药物敏感性试验结果
仔 猪大肠杆菌病 俗称 白痢 、 黄痢 ， 由致病性大肠杆 菌 是 引起 的急性肠道传染病 ຫໍສະໝຸດ 该疾病是常见且危害性极大 的传染
鸡致病性大肠杆菌的分离、鉴定及药敏试验
中 图 分 类 号 ：８ ２６ ￥ ５ ．１ ４ ２
文 献 标 识 码 ：Байду номын сангаас Ｂ
文 章 编 号 ：０ ４ ５ ９ （ ０ ）２ ０ ０ — ２ １０ — ０ ０ ２ １ ０ — ０ ３ ０ １
鸡 大肠 杆 菌 病 是 由大肠 杆 菌 的某些 致 病 性 血清 型 引
临床 剖检 有典 型心 包炎 、 周炎 、 肝 气囊炎 或 卵黄 性腹 膜炎 ，
疑 似 为 大 肠 杆 菌 感 染
１２ 试 剂 ． ・
分 离 、 定 ， 到接 种后 ７ｄ为止 。７ｄ后仍 存 活 的鸡 进行 鉴 直 解 剖 ．观 察病 变 作 细菌 分离 鉴 定 根 据 鸡 的死 亡 数 和病 变 程度确 定 分离株 的致 病性 １３ ．． 药 敏 试验 ４ 按 ＷＨ Ｏ推 荐 的 Ｋｒｖ Ｂ ｕ ｒ 片 扩散 ｉ — ａｅ 纸 ｂ
加 大肠 杆 菌病 给养禽 业造 成 了严 重的 经济 损失 ． 国每 我 年 因大 肠杆 菌病 造成 的经 济损 失达 ３ 多元 ． 亿 而且还 有增
加 的 趋 势 … 据 对 南 阳 市 及 周 边 主 要 养 禽 集 中 区 及 兽 医 门
诊 的调查 ． 规模 养禽场疫 病 的发 生 以大肠 杆菌病 居首位 。 由 于其 血清型 复杂 ． 耐药菌株 不断增 加 ． 给防治工 作带 来 了巨
苯尼 考 等有 一定 的 耐药 性 对 头孢 噻肟 、 丁胺 卡那霉 素 、 壮 观霉 素 和新 霉素 较 敏感
３ 讨 论 ３１ 血 清 型 分 析 ．
是卫 生 状 况差 、 养 密度 大 、 理 粗放 、 毒 不 严格 、 用 饲 管 消 使
雏鸭大肠杆菌分离鉴定与药敏试验
３ 结 果
试验小 白鼠体重６２±２ ． ５ ） ｇ ， 由广西 中医学
院实验动物 中心提供 。 ２ ． １ 菌株的分 离 以无菌 的方法将 病料分别接种于普通 肉 汤培养基内， ３ ７ ℃培养 １ ８ ～ ２ ４ ｈ后 ， 划线接种于麦康凯琼脂平
１ ． ３ 培养基
普通 肉汤培养基 、 普通琼 脂培养基 、 将 菌液稀 释至含 １ ０ ８ ｃ ｕ ｆ ｍ Ｌ细菌 （ 与
标准 比浊管 比较 ） 的菌悬 液 ， 用无菌棉拭子蘸取菌悬 液 ， 于管
培养基 由广西农业职业技术学实验室提供 。ｓ ｓ琼脂培养基 、
１ ８ ２ ４ ｈ ， 观察结果。
２ ． ２ 酋株 的生化 实验 按 常规方法进行 ， 分别挑取分离菌的
可疑菌落进行纯培养 ， 再将各菌株新鲜纯培养的 肉汤培养 物
接种于各种生化鉴定管 内 ， 进行糖发 酵试验（ 葡萄糖 、 乳糖 、 麦芽糖 、 甘露醇和 蔗糖 ） ， Ｍ ． Ｒ试验 ， Ｖ — Ｐ试 验 ， 靛基质试 验 ， 硫化氢试验 ， 尿素分解试验 ， 硝酸盐还原试 验 ， 枸橼酸盐利用 试验。接种后将生化鉴定管置 于 ３ ７ ℃恒温培养箱 中 ，培养
素、 卡那霉 素 、 庆大霉素 、 大观霉素 、 阿米卡 星 、 妥 布霉 素 、 多 粘菌 素 Ｂ、 四环素 、 氯 霉素 、 复 方新诺 明 、 诺氟 沙星 、 环丙 沙
星、 氧氟沙星 、 呋喃妥因等 ２ ３种药敏纸片。
９株菌株进行药物敏感性实验 。按 照常规药敏纸片扩散法进
行操作 ，分 离菌株活化后接种于 ３ ｍ Ｌ肉汤培养基 内 ３ ７ ℃培
１ ． １ 病料 的采集 以无菌的方法从南宁周边某个养殖场 生 病死亡 的雏鸭肝脏中采取 ， 采集时间是 ２ ０ １ ０年 ３月份。 １ ． ２ 药敏纸 片 头孢 噻吩 、 头孢 呋辛 、 头孢他 啶、 头孢哌酮 、 头孢噻肟 、 头孢 曲松 、 氨苄西林 、 苯 唑西 林 、 哌 拉西林 、 链 霉
大肠杆菌的分离鉴定
斜面和深层均为红色
斜面为红色；深层为黄色； 若产生H2S，为黑色
分离鉴定---麦康凯培养基
原理：在培养基中含有胆盐，可抑制大部分革兰氏阳 性菌的生长，培养基含乳糖，大肠杆菌能分离乳糖， 使pH下降（中性指示剂5.5--7.5，红--黄）形成红色 菌落，而沙门氏菌和志贺氏菌，不能分解乳糖，菌落 小且为无色
点
击
此 验大
处 及肠
添 生杆
加 化菌
副 实的
标 验分
题
离
鉴
定
、
药
敏
实
202X
目的要求
熟悉鉴别培养基的原理 了解大肠杆菌的主要生理生化特性
一、鉴别培养
菌种 培养基类别
麦康凯培养基
大肠杆菌
红色菌落
沙门氏杆菌
无色或浅黄色菌落
SS琼脂培养基
红色菌落
浅黄色菌落
伊红美兰琼脂培养基
三塘铁培养基
紫红色或紫黑色并带有金 粉红色菌落 属光泽菌落
结果判定
鲜桃红色或微红色， 菌落中心呈深桃红色
圆形，扁平，边缘整 齐，表面光滑，湿润
二、药敏试验
方法：取一菌种，用灭菌的 接种环致密划线于琼脂表面 （可重复来回划线），用无 菌镊子，将各种抗菌药物圆 纸片，分别贴于培养基表面。 各片距离相等，370C，24h后， 观察结果。
药敏结果判定
抑菌直径（mm） 敏 感 性
>20
极敏感
15-20
高敏感
10-14
中敏感
<ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ0
低敏感
0
不敏感
三、生化实验
1糖发酵试验
• 原理：各种细菌具有不同的酶，有的细菌能分解某些 糖类而产酸产气，有的细菌虽能分解某种糖类，但只 产酸不产气，有的细菌则不能分解。从而鉴别细菌。
青海一例犊牛腹泻大肠杆菌分离鉴定与药敏试验讨论
DOI:10.3969/j.issn.1003-1650.2024.15.028为探究青海省犊牛腹泻的优质治疗方案，本次试验依据当地牛养殖场内的犊牛腹泻发病案例，收集患病犊牛新鲜粪便为病料，采取实验室细菌分离法将病料中的大肠杆菌分离出，并明确大肠杆菌的致病性。
同时采取纸片扩散法对提取出的大肠杆菌实施药敏试验，筛选出对大肠杆菌表现敏感的药物。
研究结果表明：在本次病例中共分离出大肠杆菌致病菌株15种，且不同的菌株对药物的敏感性不同。
其中对恩诺沙星、头孢噻呋钠敏感率较高，分别为87%、80%，对链霉素、阿莫西林、四环素耐药性较高，为67%。
因此，建议该养殖户在实施犊牛腹泻治疗时，可使用恩诺沙星及头孢噻呋钠交替轮换治疗，并对发病严重的犊牛群体加以辅助药剂治疗，减少犊牛腹泻治疗的盲目性，以提升治疗效果。
一、青海省犊牛腹泻发生现状青海省作为养殖大省，牛羊养殖为当地牧民的重要经济来源。
在牛养殖期间，犊牛腹泻属于一种较为常见的传染性疾病，致病因较为复杂，通常包含环境因素、饲料因素、自身免疫因素等。
犊牛在出生之后，由于其自身的消化道系统发育不完善，对致病原的抗性差，当养殖环境不良、营养供应不足、初乳不足或无法吃上初乳的情况下，均会导致犊牛的肠胃消化功能异常，较易受各种致病原的侵染，出现腹泻病症。
通过对青海省的犊牛腹泻的发生与流行特征调查，青海省犊牛腹泻发生率逐年提升，且发病后持续周期长，药物治疗效果不佳，并且犊牛腹泻病症在经过治疗后，无法达到痊愈的效果，常表现出周期性、顽固性的传播与流行。
为更好的防治青海省犊牛腹泻疾病，降低其对犊牛养殖的影响，需加强对致病原的研究与调查，并采取致病原分离鉴定、药敏试验，分析出最佳的药物治疗方案，以期能够在犊牛腹泻发病之初，短时间内控制出病情的恶化与传播，减轻其对牛养殖产业的不良影响。
二、犊牛腹泻大肠杆菌病原分离鉴定与药敏试验1、试验材料与方法（1）病情分析在青海省格尔木市的一个肉牛养殖场内，共有牛104头，其中犊牛21头。
鸡大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验
分 离菌 纯培养 物 的菌种接 入后封 口，置于３ ＂ ７ Ｃ培养箱 中 培养１ ～ ４ ，观 察结果。 ８ ２ ｈ－ １２ 致病 性试验 将 分离 到 的大肠杆 菌接种 普通 肉汤 ．． ４ 培 养物 ，３ ℃培 养２ ｈ。经 测 定每 毫升 肉汤培 养物 约 含 ７ ４ ｌ ｌ９ Ｆ 。按 每株菌３ ５ ｘ０Ｃ Ｕ 只（ 日龄 健康非免疫雏鸡） ，颈部
关键词 鸡 大肠杆 菌 分 离鉴定 药敏试验 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０．７３ ０１ ７０ １． ０７１３（ １） ． ５０ ２ ０ ０ ２
器、无菌实验台、微量移液器等。
１ 方 法 ． ２
中图分类号：￥ ５． ＋ ８２ １４ ６
鸡 大肠 杆菌病 是 由致病 性血清 型 的埃希 氏大肠 杆菌
１ ． 试验 动物 各 日龄健 康鸡 （ 自山东 济南Ｓ Ｆ ．３ １ 购 Ｐ 种鸡 场） 。 ．
２ 结果
２１ 大肠杆 菌 麦 康凯琼脂 上形成 红色 、圆形隆起 、光 ．
滑湿润 、边缘整齐 、直径为 １ ～ ． ． ２５ ５ ｍｍ的小菌落 ；在伊 红
１１ ．＿ 仪 器及设 备 光 学 显微 镜 、恒温 箱 、高 压 灭 菌 ４
１ ． 培 养 基 与试 剂 麦康 凯 琼 脂 （Ａ 、伊 红 美 兰 琼 ．２ １ Ｎ ）
脂 、普通 肉汤、营养 琼脂（ Ａ） Ｎ （ 均购 自上海伯奥 生物科 技 有 限公） ；硝酸 盐 还原 剂 、氧 化 酶试 剂 、微 量生 化 试验 管 、 药敏 纸 片购 自（ 购 自杭 州天 和 微生 物 试剂 有 限 公 均
１ ５
山东畜牧兽医
美蓝 琼脂上 形成 紫黑 色 、具 有金 属光泽 的小 菌落 ；在普
通 琼脂斜 面上 的菌落 为灰 白色 ；在普 通 肉汤 中呈 均匀浑 浊 ，管底 有灰 白色 沉淀，并有粪臭味。
犊牛大肠杆菌分离鉴定与药敏试验
Veterinary clinical science | 兽医临床科学56 ·2022.010 引言犊牛腹泻性大肠杆菌病是新生犊牛群体中发病流行率较高的一类细菌性传染性疾病，有时发病率高达90%，致死率高达30%。
犊牛腹泻性大肠杆菌病主要表现为严重的腹泻和败血症，机体严重脱水，短时间内死亡，即便是能够渡过急性期，也会表现为生长发育不良，甚至停止生长，使犊牛的淘汰率显著升高，危及到养殖场的经济效益。
随着牛养殖业的迅猛发展，需要养殖户高度重视犊牛腹泻性大肠杆菌病的针对性防控，及时采取措施做好有效的病原分离鉴定，并筛选出敏感的药物，确保短时间内将病情控制住，避免病原产生耐药性，保证防治的针对性、合理性。
1 养殖场发病情况青海省海西州的某种牛场以养殖牦牛为主，2020年3月13日，在新生犊牛群体中出现一类腹泻疾病，患病牛表现为严重的腹泻，排出的腹泻物中夹杂很多没有消化的凝乳块和饲料，身体迅速脱水，眼球向内凹陷，并表现出不同程度的败血症症状，短时间内出现了死亡病例。
发病后种牛场的兽医按照细菌性腹泻开展抗生素治疗，选择青霉素、链霉素、庆大霉素等药物进行治疗，没有取得很好的效果，随后将病情上报上级的兽医站，兽医到达养殖场后结合整体的发病情况和典型的病理解剖，初步判定犊牛为大肠杆菌引发的腹泻，随后采集了病死牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、淋巴结组织进行病原分离鉴定。
2 病原分离鉴定及药敏试验大肠杆菌分离鉴定主要涉及到营养琼脂培养基、革兰氏染色液、恒温培养箱、载玻片、药敏试验纸片、光基金项目：财政部和农业农村部，国家现代农业产业技术体系资助作者简介：李国良（1976-）男，土族，青海大通人，大专，助理兽医师，研究方向：兽医。
犊牛大肠杆菌分离鉴定与药敏试验李国良，吉春花（青海省大通种牛场，青海 大通 810102）摘要：犊牛腹泻通常是由致病性的大肠杆菌侵染引发的一种威胁严重的消化道疾病，短时间内引发大量的新生犊牛死亡，造成的经济损失不可估量。
滨州地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
杭州天和微生物试剂有限公司。 １ ． 药敏试 纸 红霉 素、环 丙沙星 、青霉 素、氟苯尼 ．３ １
考 、 链 霉 素 、 庆 大 霉 素 、 氟 呱 酸 、 丁 胺 卡 那 霉 素 、 强 力 霉 素 、 新 霉 素 等 １ 种 药 敏 试 纸 片 购 自杭 州 天 和 微 生 物 试 ０
后 对 可 疑 菌 株 再进 行操 作 。 １ ＿ 染 色镜 检 ．３ ２ 按 常规 步 骤 进 行 染 色 。 取 病 料 无 菌 接 种
１１ 培养基 ．． ２
营 养琼 脂、营养 肉汤 、麦 康凯琼 脂均购
１ － 病原 菌的分 离纯化及 生化试验 ．４ ２
于 上海 伯 奥 生 物 科 技 有 限 公 司 。 微 量 生 化 发 酵 管 ， 购 于
血琼脂平板 的制备 ：按常 规法（ 谢
死 亡 鸡 的 心 、肝 中 回 收接 种 菌 。
正 肠 等 ， １９ ） ￣ ，加 入 ５ ９ ４￥ 备 ％的 绵 羊 血 ，冷 却 后 置 于４Ｃ ＂
’ ： 一 ： 一 １ ．Ｐ ： ： ：’；’： ： ’ Ｔ
１ ． 分 离茵的血清型鉴 定 （ ）抗原 的制 备。将纯培 ．６ ２ １
１ ． 细菌分 离鉴定 ．２ ２
选择 疑似大肠 杆菌病 死鸡 的病 料
１１１ 病料来 源 病 料来源 于滨州 地区各养 殖场 及养殖 ．． 户送检 的病 、死鸡 ，临床剖 检有典 型心包 炎 、肝 周炎 、 气囊炎或卵黄性腹膜 炎，疑似 为大肠杆菌病 。
接种 于普通 营养 琼脂平板 上 ，经 过３ ￣ 养 １ ４ ，然 ７Ｃ培 ６ ２ｈ
冰箱 中备用 。营养琼 脂平板和 麦康凯 琼脂平板 的制备 ：
按 常 规 法 （ 正 肠 等 ，１９ ） ￣ ， 冷却 后 于 ３ 谢 ９ ４￥ 备 ７Ｃ温 箱 培 养
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大肠杆菌的分离以及药敏试验（悠然）
摘要：山东某集团送检的疑似大肠杆菌病的病死鸡的心、肝、脾，进行病原菌的分离、鉴定和药敏试验。
结果显示引起该鸡场鸡只发病的病原为大肠杆菌，对阿米卡星、新霉素敏感，对头孢和新霉素的复方制剂中度敏感，几乎对可克林霉素不敏感。
表明该鸡场出现了耐药的致病性大肠杆菌，在以后的肉鸡生产中应慎用抗生素，在使用药物治疗大肠杆菌病时，应根据药敏试验结果，选择敏感药物，且应注意交替用药，按疗程投药。
关键词：大肠杆菌；分离鉴定；致病性；药敏试验
大肠杆菌病是由大肠杆菌某些血清型菌株引起的一类疾病的总称。
各个品种和日龄的鸡均可发病，但肉仔鸡最易感。
随着养禽业的迅速发展与高度集约化饲养，鸡大肠杆菌病已成为鸡群重要的疾病之一。
为了控制鸡大肠杆菌在鸡群中的传播，我们对送检的疑似大肠杆菌病例进行病原的分离鉴定，并对分离菌的培养特性、致病力及抗菌药物的敏感性进行了研究，为有效防制鸡大肠杆菌病提供了依据。
1 材料与方法
1.1 病料来源
2006年11月山东省某集团养殖场场送检的疑似大肠杆菌病的病料若干，已死亡鸡只死亡时间不超过24 h。
1.2 细菌分离培养
无菌采集病、死鸡的肝脏、心血等组织，接种在普通琼脂平板及普通肉汤，37℃培养20 h，抹片，革兰氏染色后镜检。
挑取表面光滑，边缘整齐，灰白色半透明的单个小菌落划线接种于EC肉汤中，于37 ℃培养20 h。
1.3药敏试验――打孔法
常规制备琼脂板。
用已灭菌处理的微型加样器吸取已培养好的生长16小时菌液0.5ml，加入普通琼脂板上，摇匀。
无菌打孔，将每孔加入以稀释好的药液0.1ml。
置于37 ℃培养24 h，观察结果。
2 结果
2.1细菌分离
在营养琼脂平板上37 ℃培养20 h后，形成中等大小，圆形微凸起，表面光滑湿润，浅灰色半透明菌落。
以及针尖大露珠样菌液。
经分析部分为沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。
2.2肉汤中生长情况分离菌在肉汤中培养18 h～24 h，呈均匀混浊，管底有黏性沉淀，液面管壁有菌环。
部分菌株产气。
2.3药敏试验
结果见表1。
由表1可见，此次分离的大肠杆菌对阿米卡星、新霉素敏感，对头孢和新霉素的复方制剂中度敏感，几乎对可克林霉素不敏感。
其他药物的抑菌效果有待进一步证实，分离菌对其不敏感的一个可能原因是药物已接近其使用期限。