2 山药多糖的纯化
山药皮多糖的分离纯化、结构特征及体外抗氧化活性研究
叶美芝，伍紫仪，吴金松，等. 山药皮多糖的分离纯化、结构特征及体外抗氧化活性研究[J]. 食品工业科技，2023，44（19）：78−85.doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022120074YE Meizhi, WU Ziyi, WU Jinsong, et al. Study on Separation, Purification, Structural Characteristics and in Vitro Antioxidant Activity of Polysaccharides from Chinese Yam Peel[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(19): 78−85. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022120074· 研究与探讨 ·山药皮多糖的分离纯化、结构特征及体外抗氧化活性研究叶美芝，伍紫仪，吴金松，钟青萍*（广东省食品质量安全重点实验室，华南农业大学食品学院，广东广州 510642）摘 要：本研究通过三氯乙酸法、Sevag 法以及Sevag-木瓜蛋白酶法，研究了山药皮粗多糖的除蛋白工艺，对提纯后的山药皮多糖组分进行红外光谱和单糖组分等结构特征分析，并对体外抗氧化活性进行测定。
研究结果表明：提取山药皮多糖的适宜的乙醇终浓度为90%，多糖得率为9.55%，酶结合Sevag 法为最优的脱蛋白工艺，在此条件下多糖保留率为64.7%，蛋白脱除率为76.8%。
山药皮多糖经过DEAE-52纤维素柱层析后得到CYPP-1和CYPP-2两种主要多糖组分，其分子量分别为4.442 kDa 和4.278 kDa 。
CYPP-1由盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，摩尔比为：11.1:14.4:21.8:35:10.8；CYPP-2由盐酸氨基葡萄糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，摩尔比为：10.5:47.9:16.8。
山药多糖提取纯化工艺研究进展
2013年第2期江苏调味副食品总第133期山药多糖提取纯化工艺研究进展余芳，朱秋红(江苏经贸职业技术学院工程技术学院，江苏南京211168)摘要：山药多糖作为药食兼用植物山药中的重要活性物质，具有增强免疫、抗衰老、抗肿瘤、降低血糖等多种生物活性。
对近年来山药多糖的提取分离工艺、纯化方法等研究进行系统分析，为进一步探索山药多糖的提取新工艺，促进山药资源的综合开发利用提供参考。
关键词：山药多糖；提取；纯化中图分类号：TS218文献标志码：A文章编号：1006—8481(2013)02—0013—04山药是传统的药食同源植物，为薯蓣科植物的块茎，具有补脾养胃、补肺养肾的功效，首见于《神农本草经》，被列为上品，言其“主伤中补虚赢，除寒热邪气，补中益气力，长肌肉，久服耳目聪明，轻身不饥延年”。
山药含有粗纤维、果胶、多糖、淀粉酶、黏液质、糖蛋白、尿囊素、皂苷、山药素、胆碱、脂肪酸等成分，以及碘、钙、铁和磷等人体不可缺少的微量元素。
山药多糖是目前公认的山药有效成分，也是山药化学和药理研究的重点。
大量研究表明，山药多糖具有增强免疫-l j、抗衰老‘2J、抗肿瘤口J、降低血糖H1等多种药理作用。
山药多糖的组成和结构较为复杂，不同研究者提取分离出不同的山药多糖，其中有均多糖、杂多糖、蛋白复合多糖等；就分子质量而言，覆盖了7×103到2×106的偌大范围，其糖基组成也各不相同。
这些多糖的获得与研究者采用的提取纯化方法密不可分。
1山药多糖的提取方法1．1水提法影响水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH值、醇析浓度和植物颗粒大小等。
用水提取山药多糖，成本低、不破坏生物活性、方便实用且安全性高，但耗时长、提取率不高。
赵卫星等以光皮长柱型新鲜山药为原料，利用水提法工艺浸取鲜山药中的多糖，并用苯酚硫酸法测定其粗多糖的含量”J。
此实验以浸提温度、料液比、浸提时间等为自变量，进行单因素实验，最终确定料液比为1g：9m L、提取温度为70℃、浸提时间为3h、提取多糖总含量为0．905％。
山药多糖的研究进展
山药多糖的研究进展山药多糖是山药中重要活性成分之一。
本文总结近年来的文献期刊，对山药多糖的提取纯化和药理作用做一综述，为山药的开发与利用，奠定一个良好的基础。
标签：山药多糖；提取；纯化；药理活性山药作为我国第一批药食同源的药物，为薯蓣科植物薯蓣（Dioscorea opposita Thunb.）的干燥根茎。
山药味甘，性平，归肺、脾、肾经，具有补脾、养肺、固肾、益精之功效[1]。
薯蓣最早见于我国古代的《山海经》，在汉代《神农本草经》以及宋代的《图经本草》、《求薯蓣苗》、《种山药》，明代的《本草纲目》，清代的《植物名实图考》、现代《中华本草》等都有记载。
现代研究发现，山药中的主要成分为薯蓣皂苷元、黏液质、糖蛋白、甘露聚糖、植酸、尿囊素、山药素、胆碱、多巴胺、粗纤维、果胶、淀粉酶、多种微量元素等活性成分[2-3]，山药中起到药疗作用的主要成分是山药多糖，其具有很强的药理活性。
本文主要在多糖类的提取纯化、药理活性两个方面做一概述。
1 提取纯化山药多糖类成分主要有酸性多糖和中性多糖。
中性多糖主要由鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖组成，其组成比例为8∶16∶25∶10，酸性多糖主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖组成，其组成比例为7∶3∶11∶19∶18[4]。
山药多糖的提取纯化方法很多，有传统的方法如溶剂法提取、酶法提取等，也有新技术、新方法，如微波、超声提取，柱层析法、膜分离法等。
以下简述山药多糖的提取纯化的方法。
1.1 提取方法1.1.1 溶剂法提取水提煎煮法是提取山药最常见的提取方法之一。
孙锋等[5]优选出的工艺为料液比1 g∶9 mL，75%乙醇提取时间2.5 h，提取温度50℃，得出的山药粗多糖收率为0.244 9%。
徐琴等[6]对淮山药的水提工艺进行优选后，得出最佳的工艺加入60倍量的水，在80℃提取6 h。
溶剂法优选后对山药的收率有着明显的提高。
1.1.2 酶提取赵希等[7]采用碱性蛋白酶法一步提取了山药中多糖成分，并确定了碱性蛋白酶提取山药多糖的优化工艺为山药粉∶10倍量的酶，酶用量为70 U/g（山药粉），提取时间1.5 h，同时pH和温度分别为9.5、45℃。
怀山药中多糖的提取与纯化
4.1提取条件对多糖率的影响
超声波功率对多糖含量的影响
由图1可知，使用超声波进行辅助提取与未使用相比，多糖含量有显著的提高；随着超声波功率的增加，多糖含量呈上升趋势。
超声波功率在150~200 W范围内，多糖含量较为稳定，当超声波功率达到250 W(超声波仪器最大允许工作功率)时，多糖含量有显著提高
由图2可知，在3O～5O℃的温度范围内，随着水提温度的升高，山药多糖含量逐渐增大。
在50～70℃温度范围内，随着水提温度的升高，山药多糖含量下降，这是因为山药中含有大量的淀粉，即其储能物质，而非通常所称的活性多糖。
温度过高，一方面使得淀粉在溶液中溶解度增加，另一方面使得淀粉糊化，影响后续的操作，给之后的分离等工艺带来困难。
由图3可知，在2O～60 min内，随着提取时间的延长，山药中多糖含量随之升高，60 min 末接近最大值，可见反应时间越长，提取越充分。
在8O～140 min，山药多糖含量趋于平缓。
因此，考虑实验指标的可观察性，选择水提时间30，60，90 min作为正交实验的三个水平。
由图4可知，开始时随着料液比的增加，山药多糖含量增长缓慢，料液比为1：1O时含量达到最高。
当料液比大于16，含量开始降低。
因此，选择1：10，1：12，1：16作为正交试验的三个水平。
山药多糖的提取分离及活性初步研究的开题报告
山药多糖的提取分离及活性初步研究的开题报告题目：山药多糖的提取分离及活性初步研究1. 研究背景山药是一种常见的蔬菜，富含多种营养成分。
其中山药多糖是一种重要的生物活性成分，具有较强的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等生物活性，因此备受关注。
本研究旨在提取分离山药多糖，并对其生物活性进行初步研究，为山药多糖的开发利用提供科学依据。
2. 研究内容（1）提取山药多糖的最佳工艺条件的研究：采用不同浓度、不同比例的溶剂，对山药多糖的提取工艺进行优化，得到最佳工艺条件。
（2）山药多糖的分离纯化：采用氨基硅胶柱层析、凝胶过滤层析、超滤等方法进行山药多糖的分离纯化。
（3）山药多糖的物化性质研究：包括分子量、糖含量等的测定。
（4）山药多糖的生物活性研究：主要包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面的活性测试，探究山药多糖的生物学功能。
3. 研究意义山药多糖作为一种生物活性成分，具有广泛的开发利用价值。
本研究可以进一步探究山药多糖的生物学功能，为其在保健食品、药品等领域的应用提供科学依据。
4. 研究方法（1）植物材料的购买和加工：从市场上购买山药，并进行加工处理。
（2）山药多糖的提取：采用不同的提取条件，包括溶剂体系、提取时间、提取温度等条件的优化，提取山药多糖。
（3）山药多糖的分离纯化：采用氨基硅胶柱层析、凝胶过滤层析、超滤等方法进行山药多糖的分离纯化。
（4）山药多糖的物化性质研究：包括分子量、糖含量等的测定。
（5）山药多糖的生物活性研究：主要包括免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面的活性测试。
5. 预期结果本研究预期能够提取纯化山药多糖，并进行初步的物化和生物活性研究，进一步探究山药多糖的功能，为其在保健食品、药品等领域的应用提供科学依据。
山药多糖提取分离纯化及生物活性的研究进展
山药多糖提取分离纯化及生物活性的研究进展作者：刘明月周维群邹荣灿来源：《现代农业科技》2019年第22期摘要; ; 山药多糖（Rhizoma dioscorea polysaccharide，RDP）的提取、分離纯化及生物活性等对山药多糖的深度研发具有重要意义。
本文通过查阅国内外近年来有关山药多糖的提取、分离纯化及生物活性研究进行分析和总结，结果表明，山药多糖的提取方法有热水浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、酶法、超声波-酶辅助提取法;含量测定方法有苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法、紫外分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）;分离纯化方法有离子交换树脂法、凝胶过滤柱色谱法。
不同提取和分离纯化方法之间存有利弊，建议科研工作者对自身研究的目的、条件及研究结果对其合理选择;RDP的生物活性研究虽已取得一定进展，但更多局限于RDP粗提物，对于开发更多符合临床需求的药物制剂及相关保健产品有待进一步深入研究。
关键词; ; 山药多糖;提取;分离纯化;生物活性中图分类号; ; R284;R284.1; ; ; ; 文献标识码; ; A文章编号; ;1007-5739（2019）22-0171-02; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）Abstract; ; Rhizoma dioscorea polysaccharide（RDP）of extraction，isolation and purification and biological activity are of great significance to the depth of the research and development ofR.dioscorea polysaccharide.In this paper，the following results were analyzed and summarized by referring to the relevant literatures on the extraction，purification and biological activity of polysaccharides from at home and abroad in recent years.The results showed that the extraction methods of polysaccharides from R.dioscorea included hot water extraction，ultrasonic assisted extraction，microwave-assisted extraction，enzymatic extraction and ultrasonic-assisted extraction.The content determination methods of R.dioscorea polysaccharide included phenol-sulfuric acid method，anthrone-sulfuric acid method，ultraviolet spectrophotometry and high performance liquid chromatography（HPLC）.Although some progress has been made in the study of the bioactivity of R.dioscorea polysaccharides，it is mostly confined to crude extracts.Therefore，the development of more drugs and related health products in line with clinical need further in-depth research.Key words; ; Rhizoma dioscorea polysaccharide;extraction;isolation and purification;biological activity山药为薯蓣科薯蓣属地下块茎，其为珍惜的药食同源植物。
山药多糖提取制备工艺
03
山药多糖的提取工艺
原料预处理
清洗
去除山药表面的泥沙和其他杂质。
切片
将山药切成小块或片状，便于后续的提取操作。
干燥
将切好的山药块或片进行干燥处理，以便保存和 使用。
提取方法选择
热水提取法
利用热水将山药中的多糖成分提取出来，适用于初步 提取。
酶解提取法
利用酶分解山药中的纤维素等成分，提高多糖的提取 率。
选择适宜的原料粒度
根据具体的提取方法和设备，选择适宜的原料粒度以获得 最佳的提取效率和过滤效果。
06
结论与展望
研究结论
01
成功建立了山药多糖提取制备工艺，实现了山药多 糖的高效提取。
02
通过优化工艺参数，提高了山药多糖的得率和纯度 。
03
验证了所建立工艺的稳定性和可重复性，为后续研 究提供了有力支持。
02
山药多糖的生物活性与作用
免疫调节作用
增强免疫力
山药多糖能够增强机体的免疫功 能，提高抵抗力。
调节免疫系统
对免疫系统具有调节作用，促进 或抑制细胞因子的产生，从而影 响机体的免疫应答。
抗肿瘤作用
抑制肿瘤生长
通过抑制肿瘤细胞的生长和扩散，对多种癌症具有预防和治 疗作用。
增强化疗效果
与化疗药物联合使用，能够增强化疗药物的疗效，减轻化疗 副作用。
结构鉴定
采用红外光谱、核磁共振等方法对山药多糖的结 构进行鉴定。
ABCD
纯度分析
通过凝胶电泳、高效液相色谱等方法对山药多糖 的纯度进行分析。
安全性评估
对提取得到的山药多糖进行急性毒性试验、长期 毒性试验等安全性评估，确保其安全无毒。
05
工艺参数对山药多糖提取制备 的影响
山药多糖的功效与提取纯化及含量测定
Vol.7 No.1Feb. 2021生物化工Biological Chemical Engineering第 7 卷 第 1 期2021 年 2 月山药多糖的功效与提取纯化及含量测定李沂格（石河子大学，新疆石河子 832003）摘 要：山药作为日常生活中一种常见的食材，口感细腻，营养丰富，具有增强人体免疫力、改善睡眠、补脾益肺等功效。
现代医学研究表明，山药具有多种生物活性，并认为山药中的主要功效成分是山药多糖。
本文对山药多糖的功效及其提取、纯化、含量测定方法研究予以综述。
关键词：山药多糖；功效；提取；纯化；含量测定中图分类号：R927.2 文献标识码：AEfficacy, Extraction, Purification and Content Determination of Yam PolysaccharideLI Yige(Shihezi University, Xinjiang Shihezi 832003)Abstract: Chinese yam as a common food in our daily life, because of its delicate taste, rich nutrition, enhance human immunity, improve sleep, strengthen the spleen and stimulate the lung and other effects and popular. Modernmedical research shows that Chinese yam has a variety of biological activities, and it is considered that the main functional components of Chinese yam polysaccharide. In this paper, the efficacy, extraction, purification and content determination of polysaccharide from Chinese yam were described.Keywords: polysaccharide from Chinese yam ; extraction; purification ;content determination山药是薯蓣科薯蓣属植物，主产地为河南、广东、广西等地，以河南省焦作市所产最佳，又称怀山药，是当地“四大怀药”之一。
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2 山药多糖的纯化
2.1 化学试剂除杂
在提取的山药粗多糖中还有许多杂质如蛋白质、
脂类、色素等。
常用的脱蛋白的方法有：Sevage 法、三氟三氯乙烷法、三氯乙酸法、酶法和等电点沉淀法。
试验证明，Sevage 法比较温和，而三氯乙酸法
反应剧烈[8]。
王美秋等人[9]采用双氧水与乙醇共用的
方法脱色，取得了良好的效果。
2.2 色谱除杂
以往除去粗多糖杂质的方法常采用化学试剂的
方法，在除去杂质的同时也会带走多糖。
采用色谱
层析的方法除杂能最大限度的减少多糖的损失，而
且除杂效果远高于化学试剂法。
已经有许多学者在
纯化山药多糖时采用色谱技术，如顾林[4]、王刚[10]在
山药多糖的纯化采用了DEAE 柱层析和Sephadex
G- 100 层析，均取得了良好效果。
3 测定方法
3.1 紫外—可见分光光度法
紫外—可见分光光度法是目前测定多糖含量最
常用的方法，常用的显色剂有苯酚，蒽酮—硫酸和
3，5- 二硝基水杨酸（DNS）。
前两者主要利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其衍生物，然后与酚
类或者胺类反应缩合，生成有特定吸收波长的有色
物质进行测定；DNS 法则是利用了多糖的还原性。
目前最常用的为苯酚硫酸法，曾凡梅[6]采用此法测定
山药中多糖的质量分数为24.8 mg/g。
3.2 高效液相色谱法
目前，鲜有见运用高效液相色谱法测定山药多
糖的报道。
王刚[10]在建立山药中多糖的含量测定时，
选用C18 100A 色谱柱（150 mm×4.60 mm），以乙腈- 磷酸盐缓冲液（70∶30）为流动相，以葡萄糖为对
照品，在波长210 nm 下检测，结果在0.5～1.5 g/L
内呈良好线性关系（R2=0.999 6），测得山药中总多
糖的质量分数为16.42%，RSD 为0.09%，结果良好，方法快速、准确，重复性好。