人源化单克隆抗体的研究进展
单克隆抗体人源化研究进展
上 溶 液 可 及 的 残 基 免 疫 球 蛋 白 Ｆ ｖ区 中 表
面 可 及 残 基 （ ＡＲ） 常 是 指 ３ 氨 基 酸 暴 Ｓ 通 ０
露 在 溶 液 中 的 区段 。 ｅ ｅｓｎ等 对 １ 。 Ｐ ｄ ｒｅ ２个 株、 鼠单 抗 的 Ｖ 区 晶 体 结 构 进 行 了 比 对 ， 找
到顺 序校正 后的 ４ ５个 Ｓ ＡＲ， 中 ９ 不 同 ， 其 ８
具 有 明 显 的 物 种 特 异 倾 向性 。Ｐ ｄａ ａ ｌｎ等 ＿ 对
非 人 源 抗 体 的 Ｆ ＡＲ 中与 人 抗 体 明显 不 同 ｖＳ 的 区 域 进 行 了 相 应 的 替 换 ， 立 了 表 面 重 塑 建 法 。 方法的原 则是 仅替换 与人抗体 Ｓ 该 ＡＲ 差
由 于 其 整 个 Ｖ 区都 是 异 源 的 ， 以 嵌 台 抗 体 所
的 异 源 性 还 很 明 显 ， 决 ＨＡＭ Ａ 的 效 果 并 解
不理 想 。嵌合抗体 完整地 保 留 了异源单 抗的
维普资讯
１ ｌ８
国 外 医学 ； 防 、 断 、 疗 用 生 物 制 品 分 册 预 诊 治
体 时 常 被 人 免 疫 系 统 所 识 别 ， 生 人 抗 鼠 抗 产
体（ ＨＡＭＡ） 再 次 ， 源 抗 体 在 人 体 循 环 系 ； 外
统 中很 快 被 清 除 。 因此 ， 据 抗 体 结 构 与 功 能 根
之 间 的 联 系 ， 保 持 原 单 抗 对 特 异 抗 原 表 位 在 的高 亲 和 力 的 基 础 上 对 其 进 行 体 外 人源 化 改 造 ， 少 异 源 抗 体 的 免 疫 原 性 成 为 改 进 单 抗 减 治疗 的重 点 。 目前 报 道 的 人 源 化 方 法 主 要 有 ： 嵌 合 、 面 重 塑 （ｅ ｕ ｆｅｎ ） 重 构 （ｅ ｈ ｐ 表 ｒ ｓ ｒａ ｉｇ 、 ｒｓ ａ ｉ ｇ 以 及 链 替 换 （ ｈ ｉ ｈ ｆｌ ｇ 。 ｎ） ｃ ａｎ ｓ ｕ ｆ ｎ ） ｉ
单克隆抗体的研究进展
单克 隆抗体 的研究 进 展
邢海权 闫梦菲 赫晓燕 ， ，
（． １山西农 业 大学动 物 科技 学院 。太 谷 ０ ０ ０ ；２南 京农 业大 学动物 科 技学 院 ，南京 ３８ １ ．
摘
２０ ９ １ ０ ５）
要 ： 体 分子是 生物及 医学领 域 中用途 最为广 泛 的蛋 白质 分子 。 抗 上世 纪 ３ ～６ ０ ０年代 对抗体 的
至今 ，科 学 家们 已经 建 立众 多 鼠原性 ｍ ｂ 来 Ａｓ 诊 断 和治 疗多 种人 类疾 病 。然 而作 为在人 体 内的应
用， 鼠源性单抗 尚存 在一些问题 。鼠源性抗体作为
异 种 蛋 白应 用 于人 体 可 引起 免 疫反 应 ， 生人 抗 鼠 产 抗体 ， 很大 程度 上 限 制 了 ｍＡ ｓ 临床应 用 。此外 ， ｂ的 鼠源性 ｍＡ ｓ ｂ 不能 与人 类抗 体 ＦＲ ｃ ｎ结合 。 了克服 为 以上 这些 问题 ， 年 ， 着分 子 生物 学 的发 展 ， 们 今 随 人 已有可 能 通 过抗 体 工程 技 术制 备 人 一鼠契 合 抗体 、 人 源化 抗体 或全 人抗 体 。
术能 将 特定 分 子 的基 因型 和表 型相 统 一 的特 点 ， 即
噬菌 体 表面 表达 了特定 的蛋 白质 ， 噬 菌体 的 Ｄ Ａ 则 Ｎ
中必 然 含 有该 蛋 白质相 应 的结 构 基 因 ， 过 多 次 的 通
作 者 简 介 ： 海权 （９４ ） 山西 临 汾 人 ， 读 硕 邢 １８ ～ ， 在
发 展推 向 了高潮 ， 抗体 制备技 术进入 了一个全 新 的 时代 。 使
关 键词 ： 克 隆抗体 ； 源 ； 因工程 ； 究进 展 单 人 基 研
人源化抗体制备及其应用研究进展
文 章 编 号 ：０ ９ ０ ０（０ ７０ — ６ ３ ０ １０ — ０ ２２０ ）４ ０ ８ — ５
综
述
人源 化抗 体 制备及 其应 用 研 究进展
王 业荣 一 童德 文 李 立 ， 文 明 王 业炳 ， ， 刘 ，
１ ．西 北农 林 科技 大 学 动物 科 技 学 院 ， 西 杨 凌 ７２ ０ ；２ 陕 １ １０ ．河 南省 纯种 肉牛繁 育 中心 ， 南 郑 州 ４ ０ ０ 河 ５０３
ａ ｍａ ，ａ ｔｂ ｙ ｅ ｈ ｉ ｕｅ ｈａ ｅ ｅ ｅｏ ｄ ｒ ｍ ｃ ｉ ｅ ｃ ｎｔ ｄ ａ ｄ ｅ ｈ ｐｅ ａ ｉ ｏ ｙ ｏ ｈｕ ｎｉｅ ｎｔ ｄ ．Ａｓ ｈ ｒ ｎｉ ｌ ｎ ｉｏｄ ｔ ｃ ｎ ｑ ｓ ｖ ｄ ｖ ｌｐｅ ｆｏ ｈｍ ｒ ａ ｉ ｙ ｎ ｒ ｓ ａ ｄ ｎｔｂ ｄ ｔ ｍａ ｚ ｄ ａ ｉ ｙ ｉ ｂｏ ｂｏ ｔ ｅ — ａ ｕｔｃ ｎ ｉｏ ｅ ， ｐｅ ｉ ａ ｔｂ ｄｉｓ ｔ ｈ ｈｅ ｕｍａ ｉｅ ａ ｔｂ ｉｓ ｎ ｚ ｄ ｎ ｉｏｄｅ ｈａ ｅ ｖ ｂｅ ｎ ｓ ｏ ｄ ｓ ｅ ｉｉ ａ ｖ ｎ ａ ｅ ｎ ｅ ｈ ｗｅ ｐ ｃｆｃ ｄ ａ ｔ ｇ ａ ｄ ａ ｌｃ ｔｏ ｐｒ ｐ ｃ ｆｒ ａｎ ｅ ｐｐｉ ａｉｎ ｏｓ ｅ ｔ ｏ ｃ ｃ ｒ
ｔｎ ｅ ｃ ｆ ｈ ｍａ ｉｅ ｎ ｉ ｏ ｉ ｓ ｉ ｌ ｉａ ｐ ｌ ａ ｉｎ ｈ ｖ ｅ ｎ ｓ ｍｍａ ｚ ｄ ｉ ｈ ｓ ｐ ｐ ｒ ｅ ｄ ｎ ｙ ｏ ｕ ｎ ｚ ｄ ａ ｔ ｄ ｅ ｎ ｃｉ ｃ ｌ ａ ｐ ｉ ｔ ａ ｅ ｂ ｅ ｕ ｂ ｎ ｃ ｏ ｉ ｒ ｅ ｎ ｔｉ ａ ｅ ．
生物制药--人源化单克隆抗体
局限性
1.在噬菌体展示过程中涉及细菌转化、噬菌体包装、展示 跨膜分泌，这就大大限制了所建库的容量噬菌体中获得很好的表达，因为 有些蛋白质功能的实现需要折叠、转运、膜插入和络合， 导致在体内系统依赖于细胞内基因的表达，所以一 些对细胞有毒性的分子（如生物毒素分子)很难得到有效表 达和展示。
2002年，的世界首个药物——阿达木单抗上市。人源 化及全人源单克隆抗体由于副作用小，在体内停留时间长， 更有利于治疗。
人源化程度
1.嵌合抗体（Chimeric antibody)
用人源基因代替鼠源单抗的恒定区，即该单抗由鼠的 可变区和人的恒定区组成的嵌合抗体。 缺点 由于嵌合抗体可变区（V）约占整个抗体的30%，鼠源 性抗体V区中的框架区（FR)仍残留一定的免疫原性，可 诱导HAMA反应。 解决方案
4.全人单克隆抗体（Fully humaneantibody)
4.1.抗体库筛选技术
4.1.1.噬菌体表面展示技术
它是将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体，转 染工程细菌进行表达，然后用抗原筛选即可获得特异的单 克隆噬菌体抗体。 在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特 的优越性。
鼠源抗体
4.1.2.核糖体展示技术 基本原理和程序
人免疫细胞基因组 体外转录、翻译、偶联 mRNA-核糖体-蛋白质三聚体 构建
基因型和表型联系
RT- PCR核糖体展示的蛋白利用抗原-抗体特异性 筛选所需抗体复合体 EDTA解离 获得特异m亲和力的抗体
Thanks!
单克隆抗体的发展史
第一代：鼠源性单抗 药物特异性很强，副作用大，现在已经渐渐退出市场。 不过由于其代谢比较快，目前在放射性元素标记的单克 隆抗体药物中使用。 第二代：人鼠嵌合性单抗 进行人源化改造，使其人源化程度达到70%左右。 第三代：CDR移植抗体和SDR移植抗体 人源化程度达到95%左右，大大降低了毒副作用。 第四代：全人源化单抗
人源化单克隆抗体研究进展
人源化单克隆抗体研究进展人源化单克隆抗体是一种具有高度特异性和亲和力的生物药物，通过杂交瘤技术将鼠源单克隆抗体的可变区与人类抗体的恒定区进行交换，以减少免疫原性，提高治疗效果。
近年来，随着科技的不断进步，人源化单克隆抗体研究取得了显著的进展，为肿瘤、自身免疫性疾病、神经系统疾病等治疗领域提供了新的思路和方法。
研究现状：人源化单克隆抗体方法、成果与不足人源化单克隆抗体研究主要包括抗体库的建立、抗体筛选和优化、以及抗体生产等多个环节。
目前，研究人员已成功建立了多种人源化单克隆抗体，并应用于临床试验，取得了一定的疗效。
例如，针对肿瘤治疗的人源化单克隆抗体药物能够特异性地识别肿瘤细胞，并通过激活免疫反应来杀死肿瘤细胞。
然而，人源化单克隆抗体研究仍存在一定的不足之处，如抗体药物的免疫原性、毒副作用等问题需要进一步解决。
研究方法：人源化单克隆抗体研究实验设计与数据分析人源化单克隆抗体研究的实验设计主要包括建立人源化抗体库、筛选和优化抗体，以及进行药效和毒理试验等。
在实验过程中，需要采集和处理大量的实验数据，并进行深入的统计分析和比对，以获得抗体的最佳配对组合和最佳治疗剂量等参数。
成果和不足：人源化单克隆抗体研究的成果与不足人源化单克隆抗体研究在肿瘤、自身免疫性疾病、神经系统疾病等多个治疗领域取得了显著的成果。
例如，针对肿瘤治疗的人源化单克隆抗体药物已经成功应用于临床试验，并显示出较好的疗效和安全性。
在自身免疫性疾病和神经系统疾病治疗领域的人源化单克隆抗体药物也在研发和试验阶段。
然而，人源化单克隆抗体研究仍存在一定的不足之处，如抗体药物的免疫原性、毒副作用等问题需要进一步解决。
同时，抗体药物的生产成本较高，限制了其在临床上的广泛应用。
尽管人源化单克隆抗体研究取得了一定的成果，但仍存在许多问题需要进一步解决。
未来，研究人员需要进一步探索人源化单克隆抗体的作用机制和优化方法，以获得更高效、安全、低成本的药物。
同时，需要加强抗体药物的工艺研究，提高生产效率和降低生产成本。
人源化单克隆抗体的研究进展
人源化单克隆抗体的研究进展
袁松范
【期刊名称】《上海医药》
【年(卷),期】1999(020)011
【摘要】最早的单克隆抗体是用小鼠得到的,所以会产生一种人抗小鼠抗体(HAMA)的免疫反应。
随着抗体工程技术的发展,从小鼠得到的单克隆抗体越来越接近人类。
一些嵌合性的或人源化的单克隆抗体已经被批准上市。
嗜菌体表达技术和转基因动物技术的发展,使人类有可能得到完全人源化的单克隆抗体,由于可以进一步减少免疫反应的危险性,将获得更好的临床效果。
【总页数】2页(P38-39)
【作者】袁松范
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R392－33
【相关文献】
1.鼠源单克隆抗体人源化研究进展 [J], 王臣;温文彦;张春杰
2.人源化单克隆抗体用于肿瘤分子靶向治疗的研究进展 [J], 彭建柳;杨丽华
3.治疗性人源化单克隆抗体研究进展 [J], 陈立慧;宋海峰;刘秀文
4.人源化治疗性单克隆抗体的研究进展 [J], 彭如意;王捷
5.高亲和力的人源化CD20单克隆抗体的研究进展 [J], 张倩倩;郭尚敬
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利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的研究进展
利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的研究进展利妥昔单抗（Rituximab）是一种人源化的单克隆抗体，已经在临床上被广泛应用于多种自身免疫性疾病的治疗。
视神经脊髓炎（NMOSD）是一种少见的、以视神经和脊髓为靶器官的自身免疫性疾病，目前对于NMOSD的治疗一直是一个难题。
近年来，利妥昔单抗在NMOSD的治疗中引起了广泛的关注和研究。
本文将探讨利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的研究进展，以期为临床实践提供一定的参考价值。
1. 利妥昔单抗的治疗机制利妥昔单抗是一种能够靶向CD20抗原的单克隆抗体，CD20抗原主要表达在B细胞表面。
其治疗机制主要包括：直接抑制CD20阳性B细胞的活性、诱导B细胞凋亡、调节B细胞功能和介导抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用。
通过这些作用，利妥昔单抗可以有效地抑制自身免疫性炎症反应，从而达到治疗自身免疫性疾病的目的。
2. 利妥昔单抗在NMOSD治疗中的研究进展在过去的几年里，关于利妥昔单抗治疗NMOSD的研究不断进行，一系列临床试验和实验研究陆续发布。
这些研究结果显示，利妥昔单抗在NMOSD的治疗中表现出了良好的疗效和安全性，逐渐成为了NMOSD的重要治疗选择之一。
（1）疗效方面多项研究证实，利妥昔单抗可以显著减少NMOSD的发作频率和严重性，降低残疾率，改善患者的生活质量。
一项针对22例NMOSD患者的研究显示，经过12个月的利妥昔单抗治疗后，患者的年发作率显著降低，且部分患者出现了病情稳定或改善的情况。
另一项纳入了47例NMOSD患者的研究也表明，利妥昔单抗可以有效地预防NMOSD的发作，并且在长期治疗中仍能够保持疗效。
（2）安全性方面利妥昔单抗治疗NMOSD的安全性也得到了充分的验证。
大多数研究显示，利妥昔单抗治疗NMOSD的不良反应较为轻微，且大部分患者能够良好耐受。
常见的不良反应包括注射部位反应、感染和胃肠道不适等，这些不良反应大多可以通过对症治疗或减量调整来控制。
利妥昔单抗在治疗NMOSD中的安全性较高，为患者提供了更多的治疗选择。
利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的研究进展
利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的研究进展1. 引言1.1 研究背景视神经脊髓炎是一种罕见的自身免疫性疾病，通常表现为视力减退、眼球运动障碍及四肢感觉障碍等症状。
目前尚无特效治疗方法，临床上常采用激素治疗、免疫抑制剂等方式进行管理，但效果并不理想。
寻找更有效的治疗手段显得尤为重要。
利妥昔单抗是一种人源化单克隆抗体，能够靶向结构特异性地结合于人体免疫系统中的CD20抗原，从而实现调控免疫反应的目的。
近年来，利妥昔单抗在治疗自身免疫性疾病的研究逐渐增多，并且取得了一定的成果。
其在类风湿关节炎、多发性硬化症等疾病的治疗中已显示出良好的疗效。
1.2 研究意义视神经脊髓炎是一种罕见但具有严重破坏性的自身免疫性疾病，其病因和发病机制尚不完全清楚。
目前的治疗方法多为免疫抑制剂和免疫球蛋白等治疗手段，但效果有限并且存在严重的不良反应。
寻找一种安全有效的治疗方法对于视神经脊髓炎患者来说至关重要。
利妥昔单抗是一种抗体药物，已在多种自身免疫性疾病中显示出显著疗效。
其通过特异性结合CD20抗原，抑制B细胞的活化和增殖，从而减少炎症反应和自身免疫反应。
利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的潜在机制至今还在探索中，但已有一些初步研究结果显示其可能对该疾病具有较好的疗效。
研究利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的意义在于为患者提供一种新的治疗选择，可能带来更好的疗效和更少的不良反应。
通过深入研究其机制和药理特点，可以为进一步优化治疗方案和提高患者生活质量提供重要参考。
利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的研究具有重要的临床意义和应用前景。
2. 正文2.1 利妥昔单抗治疗视神经脊髓炎的机制利妥昔单抗（Rituximab）是一种人源化的单克隆抗体，主要通过靶向CD20抗原来发挥治疗作用。
在视神经脊髓炎的治疗中，利妥昔单抗的机制主要包括以下几个方面：1. 抑制B细胞活化和增殖：CD20是B细胞表面的标志性抗原，利妥昔单抗特异性结合CD20，导致B细胞凋亡和消失。
利妥昔单抗可以有效抑制B细胞的活化和增殖，减少炎症介质的释放。
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论人源化单克隆抗体的研究进展***（生物工程一班生命科学学院 ***大学哈尔滨 150080）摘要：自从单克隆抗体问世至今已广泛应用与临床治疗，然而鼠源性单克隆抗体在临床治疗中会产生人抗鼠抗体反应，从而使鼠源性单克隆抗体的应用受到极大限制。
随着基因工程技术和抗体工程技术的迅速发展，人源性单克隆抗体开始快速发展而逐渐代替鼠源性单克隆抗体。
本文将就人源化单克隆抗体的构建以及其在临床治疗方面的应用进行综述。
关键词：单克隆抗体人源化临床治疗Theory humanized monoclonal antibody research progress***(The 1st class of Bioengineering , College of Life Science, *** University, Harbin, 150080) Abstract: Since the advent of monoclonal antibody has been widely applied in clinical treatment, but the mouse source sex monoclonal antibodies in clinical treatment will produce people resistance to mouse antibody response, so that the rat source sex monoclonal antibody application are highly limited. Along with the genetic engineering technology and the rapid development of antibody engineering technology, humanized sex monoclonal antibody began to rapid development and gradually replaces the rat source sex monoclonal antibody. This paper will review humanized monoclonal antibody construction and the application of clinical treatment in this article.Keywords: monoclonal antibody humanized clinical treatment1975年。
Kohler和Milstein将小鼠骨髓瘤细胞和经免疫的小鼠脾细胞融合，形成了可产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，该细胞机能产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术[1]，此后单抗药物开始迅速发展并广泛应用于临床。
1982年，Philip Karr 将第一株抗独特型单抗(anti- ld) 应用于B细胞淋巴瘤的临床治疗并取得成功[2]，使得治疗性抗体的研究很快成为生物医药的热点，许多以单克隆抗体为研究对象的公司相继成立。
然而，鼠源性单克隆抗体应用于人类有较强的免疫原性，能诱发人抗鼠抗体( Human ant-i mouse antibody, HAMA) 反应，引起强烈的免疫排斥反应[3]，而且鼠源性单克隆抗体不能有效地激活人体的生物效应功能，因此限制了其临床应用。
这使研究学者意识到研制鼠源性单克隆抗体人源化或完全的人源性抗体才有可能减少或避免HAMA反应并提高疗效。
然而反复实验证明, 杂交瘤技术不能提供稳定分泌人抗体的细胞株。
直到80年代末期，随着分子生物学研究的深入，在抗体基因工程研究领域相继出现了一些技术突破，如用PCR 方法扩增抗体可变区基因、大肠杆菌表达功能性抗体片段以及噬菌体展示抗体功能片段等，这些技术为抗体人源化和人抗体的研究奠定了基础。
1、人源化单克隆抗体的构建鼠抗体人源化的构建就是通过基因改造，使其和人体内的抗体分子具有极其相似的轮廓，从而逃避人免疫系统的识别，避免诱导HAMA 反应。
当用人的序列代替鼠的框架时，其氨基酸残基的接触作用发生改变，进而影响鼠抗体互补决定区( Complementaritydeterm ining re ign, CDRs)的空间构型而使其抗原亲和力降低或消失[4]。
人源化单克隆抗体的构建经历了非人源抗体、人-鼠嵌合抗体、人源化抗体、全人源化抗体等的先后发展，最终制备全人源化单抗的转基因小鼠和噬菌体展示文库。
1.1、嵌合抗体20 世纪80 年代中期开始研制的第一代人源化抗体, 即简单的嵌合抗体, 是利用DNA 重组技术将鼠源单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中, 转化哺乳动物细胞表达出人鼠嵌合抗体, 其人源化程度达到70% 左右。
这样构建的嵌合抗体不仅保留了抗原抗体结合的特异性, 又大大降低了鼠源单抗的免疫原性。
“Rituximab”作为第一个用于肿瘤治疗的基因工程抗体, 就是由鼠可变区和人恒定区组成的嵌合抗体。
但由于嵌合抗体可变区( V) 约占整个抗体的30% , 鼠源性抗体V 区中的框架区( FR) 仍残留一定的免疫原性, 可诱发HAMA 反应[5]。
虽然嵌合抗体仍有30%左右的鼠源性成分，但90%的HAMA 反应是针对抗体恒定区的[6]。
为了降低在嵌合抗体中鼠源部分, 只移植鼠抗体互补决定区( Complementaritydetermining reign, CDRs), 而不移植整个抗体可变区, 所构建的“嵌合”抗体随后就成为了研究热点。
1.2、CDR 移植的人源化抗体由于鼠源性抗体V 区中的FR 仍残留一定的免疫原性, 这种抗体还远非真正的人源化抗体, 有些还能产生很强的抗独特型反应。
为减少鼠源成分, 人们进一步用人的FR 替代鼠FR, 形成更为完全的人源化抗体，即鼠源单抗上六个CDR 通过PCR 等方法克隆到人抗体相应的框架区(FR) 上构建成新抗体。
与嵌合抗体相比, CDR 移植进一步减少了抗体中异源序列的含量, 降低了抗体异源性, 其人源性可达90% 以上[7]。
但对于特定的抗原分子来讲，FR 并不是可以随意替代的。
具有支持作用的FR 不仅为CDR 的构象提供了环境, 有时还参与抗体结合位点正确构象的形成, 甚至参与抗原的结合。
因此, 简单CDR 移植到人抗体FR而忽略某些关键位点的氨基酸残基，往往会明显降低抗原- 抗体反应的亲和力, 甚至丧失与抗原结合的能力[8]。
多数情况下, 仅仅移植CDRs到人抗体FR 上产生的改型抗体将丧失全部或大部分抗原亲和力, 只有同时再移植某些关键位点的氨基酸残基后才能保持改型抗体的抗原亲和力。
所以，在抗体重构试验中, 识别人源抗体框架区中影响CDR构象的氨基酸残基位点非常关键。
近年来人们利用抗体基因库，通过对抗原-抗体相互作用的计算机模拟, 并分析氨基酸残基、CDR的几何距离和分子间氢键作用力, 可以推测出这些关键氨基酸残基的位点, 指导抗体重构试验。
袁清安等[9]对肝细胞癌特异性抗体HAb52可变区进行了同源模建，然后分析决定CDR初始构象的可能残基，对所有的暴露残基都进行人源化，改构后的抗体的免疫原性明显地降。
尽管人源化单克隆抗体人源化程度达到70%左右, 在抗原特异性和亲和力方面都较好地保留了亲代抗体的特征, 而免疫原性则降低至12%左右, 在体内的半衰期和效应功能也更加接近于人抗体。
但由于人源化单克隆抗体( 嵌合或CDR 移植抗体) 内还含有10%～30%的鼠源蛋白, 因而在临床应用时, 或多或少地存在一些免疫排斥反应, 没有达到治疗性抗体发展的最终目标——抗体完全人源化。
1.3、全人源化抗体全人源化抗体是治疗性抗体的发展趋势，随着抗体工程的快速发展，目前生产全人抗体的方法已达到比较成熟的阶段, 主要包括抗体库技术和转基因小鼠技术[10]。
抗体库技术主要是将抗体重链可变区( V H ) 和轻链可变区( V L ) 基因与噬菌体的外壳蛋白( P ) 或外壳蛋白( P ) 基因随机重组, 继而感染大肠杆菌, 经增殖并在噬菌体表面以抗体片段Fab或ScFv- 外壳蛋白融合蛋白的形式表达[11]，从而获得相应的特异性抗体。
抗体库技术的发展使体外不经过免疫获得抗体成为可能，即用PCR 技术从生物体内扩增出整套编码人抗体的基因序列, 克隆到噬菌体载体上, 并以融合蛋白的形式表达到噬菌体表面, 用固相化抗原,通过反复吸附-洗脱-扩增的过程, 从而筛选出特异性PhAb片段[12]。
此项技术不仅可以获得具有人体性质的单克隆抗体, 而且利用抗原可直接从抗体库中筛选出所需基因, 而不需要细胞融合, 甚至不需经过免疫动物, 实验周期短, 过程较简单, 这是人源抗体制备技术的重大突破。
此外，由于细菌细胞增殖快，培养成本低廉，利于大量制备高纯度抗体，进行蛋白晶体结构研究和应用。
因此，抗体库技术将对生物学和医学的发展起着重要的推动作用。
另一条生产人源化单克隆抗体的途径是通过基因敲除技术, 使小鼠自身的基因失活, 并导入新基因, 创造出携带人抗体重轻链基因簇的转基因小鼠。
这种转入抗体基因的小鼠所携带的人DNA片段具有完备的功能, 可有效地进行同种型转换和亲和力成熟。
任何靶抗原均可被用来免疫该小鼠，使其产生高亲和力的人抗体。
该领域的最新进展是所谓“转染色体小鼠”的产生。
这种小鼠携带人微小染色体, 即从人14及2号染色体上分离的含有全部人抗体重轻链胚系基因簇(包括所有的V、D、J片段和抗体恒定区) 的染色体片段。
这种携带微染色体的小鼠能够提供几乎完全相同的人免疫球蛋白基因环境并在鼠体内精确的重现了人抗体的产生过程。
另外, 利用该技术还获得了抗表皮生长因子受体(EGRF) 、TNF-α、CD4 等的完全人抗体[13]。
2、人源化单克隆抗体的临床应用近十几年来，随着分子生物学技术和抗体工程技术的快速发展，人源化抗体和人抗体的出现为临床应用带来了新的希望。
当前正处于临床研究的多种抗体中，嵌合抗体和人源化抗体所占比例大于70%[14]。
目前的人源化抗体主要用于肿瘤、自身免疫性疾病的治疗以及抗病毒感染等临床治疗。
2.1、在肿瘤治疗方面的应用人源化单克隆抗体的研制的主要任务之一就是治疗肿瘤疾病，人源化抗体药物是针对那些与肿瘤发生、发展相关的靶分子，这些靶分子在正常组织或细胞中就存在一定的表达，但在许多肿瘤细胞中过度表达，因此可作为肿瘤特异的标志物。
如Herceptin是1998年9月被FDA批准上市的人源化IgG1单抗，用于转移性乳腺癌的治疗，其靶向抗原为人类表皮生长因子受体- 2( HER- 2)。
Colomer等[15]试验表明，HER- 2 在乳腺癌细胞表面的过表达与细胞的恶性转化相关，使其成为肿瘤治疗的靶点。