体外细菌实验方案

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体外抗细菌实验报告

体外抗细菌实验报告

体外抗细菌实验报告引言抗生素的研发与应用在医学领域具有重要意义。

目前,细菌对抗生素的耐药性成为严重的问题,需要不断探索新的药物和治疗方法。

本实验旨在评估不同抗生素对细菌的抗菌活性,为临床治疗提供参考和建议。

实验设计材料和方法- 细菌菌株:选择常见的大肠杆菌作为实验菌株。

- 抗生素:选择常用的青霉素、头孢菌素和红霉素作为实验药物。

- 生长培养基:使用适合大肠杆菌生长的营养琼脂培养基。

- 平板计数器:用于计数菌落的数量。

- 培养皿:用于培养菌落。

实验步骤1. 通过接种线接种大肠杆菌菌株于含有足够营养适合培养大肠杆菌的琼脂平板上。

2. 使用接种环将抗生素涂抹在贴近边缘的地方。

每个琼脂平板上涂抹一种抗生素,留有一块区域作为对照组,不涂抹抗生素。

3. 将培养皿在恒温培养箱中培养24小时。

4. 取出琼脂平板,使用平板计数器计算每个区域的菌落数量。

5. 分析数据并得出结论。

结果实验结果如下表所示:抗生素区域菌落数量:: :: ::青霉素 A 120青霉素 B 50头孢菌素 C 80头孢菌素 D 100红霉素 E 150红霉素 F 200对照组G 500讨论与分析通过对实验结果的观察,我们可以得出以下结论:1. 在本次实验中,细菌对红霉素的抗菌活性最强,对青霉素的抗菌活性最弱。

2. 头孢菌素对细菌的抗菌活性居于中等水平。

3. 与对照组相比,使用抗生素处理的培养皿中,菌落数量明显减少。

结论根据本次实验结果,我们可以得出以下结论:1. 青霉素对大肠杆菌的抗菌活性较弱,使用青霉素抗生素时,需注意其治疗效果和耐药性问题。

2. 红霉素对大肠杆菌的抗菌活性较强,可以作为治疗选择之一。

3. 头孢菌素在对抗大肠杆菌方面的抗菌活性居于中等水平。

4. 本实验结果可为临床抗生素选择提供参考和指导。

参考文献(请根据实际情况添加参考文献)。

体外抑菌实验方案

体外抑菌实验方案

体外抑菌实验方案一、实验目的1.探究不同抑菌剂对特定细菌的抑制效果。

2.优化抑菌剂的配方,提高抑菌效率。

3.为临床应用提供理论依据。

二、实验材料1.实验菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等。

2.抑菌剂:酒精、碘伏、过氧化氢等。

3.实验器材:培养皿、移液器、酒精灯、生物安全柜等。

三、实验方法1.菌株活化:将实验菌株从冻存管中取出,接种至斜面培养基,37℃培养24小时。

2.制备菌液:将活化后的菌株用无菌生理盐水洗涤,调整菌液浓度为10^6CFU/mL。

3.抑菌剂配制:按照实验设计,配制不同浓度和配比的抑菌剂。

4.抑菌实验:在生物安全柜中,将菌液均匀涂布于培养皿,加入不同抑菌剂,置于37℃培养箱培养24小时。

5.观察结果:观察各培养皿中细菌生长情况,记录抑菌效果。

6.数据处理:统计分析各抑菌剂的抑菌效果,计算抑菌率。

四、实验步骤1.活化菌株:从冰箱取出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等菌株,接种至斜面培养基,放入37℃培养箱培养24小时。

2.制备菌液:将活化后的菌株用无菌生理盐水洗涤,调整菌液浓度为10^6CFU/mL。

3.配制抑菌剂:按照实验设计,配制酒精、碘伏、过氧化氢等抑菌剂的不同浓度和配比。

4.抑菌实验:在生物安全柜中,将菌液均匀涂布于培养皿,加入不同抑菌剂,放入37℃培养箱培养24小时。

5.观察结果:观察各培养皿中细菌生长情况,记录抑菌效果。

6.数据处理:统计分析各抑菌剂的抑菌效果,计算抑菌率。

五、实验结果1.不同抑菌剂对金黄色葡萄球菌的抑制效果:酒精浓度为75%时,抑菌效果最佳,抑菌率为99.99%;碘伏浓度为5%时,抑菌率为99.95%。

2.不同抑菌剂对大肠杆菌的抑制效果:过氧化氢浓度为3%时,抑菌效果最佳,抑菌率为99.99%;酒精浓度为75%时,抑菌率为99.90%。

3.不同抑菌剂对白色念珠菌的抑制效果:碘伏浓度为5%时,抑菌效果最佳,抑菌率为99.99%;过氧化氢浓度为3%时,抑菌率为99.95%。

抑菌试验预习方案

抑菌试验预习方案

抑菌试验1 定义抑菌试验,用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验抑菌活性的研究实验方案。

实验方法1. 纸片法(抑菌圈法)将测定菌株接种到培养基中,置37度条件下培养6-24小时,取出备用。

再用无菌吸管吸取上述培养液0.1ml,再用三角刮刀将菌液涂匀。

待培养基表面稍干后,用无菌小镊子分别取出所需的药敏纸片均匀地贴在培养基的表面,轻轻压平,各纸片间应有一定距离,并分别做上标记。

将培养皿置37度恒温箱内培养18-24小时后,测量各种药敏纸片抑菌圈直径的大小。

2. 挖孔法(1)在平板上打孔,然后将药液滴入孔内,用经酒精灯灭菌的接种环挑取适量细菌培养物,以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。

具体方式:用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌,以每点开始划线涂菌至平皿的1/2,依次划线,自至细菌均匀密布于平皿(将测定菌株接种到培养皿中,置37度条件下培养18-24小时,用灭菌的棉拭子将带将细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。

要求涂布均匀)。

(2)以无菌操作将灭菌的不锈钢小管,(外径4mm,孔径与孔距均为3mm,管的两端要光滑,也可用玻璃管和瓷管),放置在培养基上打孔,将孔中的培养基用针头挑出,并以火焰封底,使培养基能充分的与平皿融合(3)加样时,按不同药液加样,用无菌滴管将样品加至满而不溢为止。

3. 牛津杯法(1)双碟的制备方法:将灭菌培养基溶化后取15ml倒入灭菌平皿内。

吸取待测菌株的菌液1-5ml与100ml冷至45度的培养基混匀,然后分别每一平皿加入5ml。

并均匀摊布在具有底层培养基的平皿内。

(2)待培养基凝固后,在每碟中均匀立放小钢管(及牛津杯)4个,用陶瓦盖覆盖。

(3)将下列实验药液分别加入小钢管中,置37度培养18-24小时,量取抑菌圈大小,判定抗菌药物抑菌作用的强弱。

乳酸菌的抑菌实验1产抑菌活性物质乳酸菌的初筛采用纸片法。

将培养好的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌培养液 OD 600分别调整到 0.17、0.19、0.10,各取 100μL 接种于 LB 固体培养基,涂布均匀,固定1h。

第4章抗菌药物敏感试验

第4章抗菌药物敏感试验

第4章抗菌药物敏感试验一、需氧菌和兼性厌氧菌的体外抗菌药物敏感试验1.扩散法(K-B法)(1)原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在接种有待检菌的琼脂平板上,该点称为抗菌药源。

药物向周围扩散,形成了随着药源距离增加,琼脂中药物浓度递减的浓度梯度。

在药源周围可抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制,形成无菌生长的透明圈即抑菌圈,其大小可以反映待检菌对测定药物的敏感性,并与该药对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈愈大,MIC愈小。

(2)实验材料①培养基:采用水解酪蛋白(M-H)琼脂,pH为7.2,琼脂厚度4mm。

对生长条件要求高的细菌,如链球菌属细菌需加入5%脱纤维羊血,嗜血杆菌属细菌需加入1%血红蛋白(含Ⅴ因子)和1%Ⅹ因子复合物。

②抗菌药物纸片:选用直径为6.35mm,吸水量20μl的专用药敏纸片。

制备时取灭菌药敏纸片,经加样或浸泡药物溶液后冷冻干燥,置4℃保存备用,在有效期内使用。

③接种菌液挑取平板上形态相同的菌落4~5个,接种于3~5ml M-H肉汤中,于35℃中培养2~8h。

嗜血杆菌属和链球菌属细菌需用加血肉汤培养过夜。

用生理盐水或肉汤校正菌液至0.5麦氏比浊标准(相当于1.5×109/ml的含菌量)后在15min内接种。

(3)试验方法以无菌棉拭蘸取已制备好的菌液(其浊度为0.5麦氏比浊标准),在M-H琼脂表面均匀涂布接种3次,每次平板旋转60°,最后沿平板内缘涂抹1周。

平板置室温干燥3~5min,后用无菌镊子或专用纸片分配器将含药纸片贴于琼脂表面。

纸片应贴得均匀,各纸片中心相距>24mm,纸片距平板内缘>15mm。

直径为90mm的平板可贴6张纸片。

纸片贴牢后应避免再移动。

平板室温放置15min后倒置于35℃培养箱中培养16~18h后读取结果。

(4)结果解释平板置黑色背景上,从背面量取包括纸片直径在内的抑菌圈直径,单位为mm。

培养基中如果加有血液须打开皿盖从正面测量抑圈菌。

紫外灯灭菌效果验证方案

紫外灯灭菌效果验证方案

紫外灯灭菌效果验证方案为验证紫外灯的灭菌效果,可以采取以下方案:1.实验目的和背景:紫外灯是一种常见的紫外线辐射设备,具有杀灭细菌和病毒的能力。

本实验旨在验证紫外灯对菌落的灭菌效果,为生活和医疗领域的卫生防护提供科学依据。

2.实验材料和仪器:-紫外灯-培养皿-培养基-显微镜-显微镜载片-培养菌种3.实验步骤:a.实验前准备:-准备培养皿和培养基。

-选取需要验证的菌种,如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。

-将培养基平铺在培养皿上。

b.紫外灯辐射时间的确定:-设定不同的辐射时间组,如5分钟、10分钟、15分钟等。

-每个组设置一个对照组,不进行紫外灯辐射。

c.灭菌实验:-在每个培养皿的中央划分两部分,一部分进行紫外灯辐射,一部分作为对照组。

-将紫外灯辐射在划分出的部分上,按照设定的时间进行辐射。

d.菌落观察:-在培养皿上观察菌落的生长情况,对比辐射部分和对照组的菌落情况。

-采用显微镜进行菌种鉴定,确认是否成功灭菌。

4.数据处理和结果分析:-统计每个组的菌落数量,对比辐射组和对照组。

-统计不同辐射时间下的菌落数量变化情况,分析紫外灯对菌落灭菌效果的影响。

-使用统计学方法进行数据分析,如方差分析等。

5.实验安全措施:-在进行紫外灯辐射时,避免直接暴露于紫外光下,以防灼伤皮肤和眼睛。

-在进行菌种培养和观察时,采取无菌操作,避免交叉感染。

6.预期结果:-预期紫外灯会对菌落具有一定的灭菌效果,辐射时间越长,灭菌效果越好。

-辐射过程中,对菌落进行了较全面的杀灭,菌落数量应明显少于对照组。

-统计分析结果将提供辐射时间对灭菌效果的具体影响,进一步验证紫外灯的灭菌效果。

7.实验的局限性:-本实验仅针对特定的细菌菌种进行验证,结果可能不适用于其他菌种。

-仅考虑了紫外灯的辐射时间对灭菌效果的影响,其他因素如辐射距离、光强等未考虑。

本实验方案可通过操作实践来验证紫外灯的灭菌效果,并通过数据分析的方式,提供初步结论和科学依据。

实验教案设计:观察抑菌圈实验及其意义

实验教案设计:观察抑菌圈实验及其意义

实验教案设计:观察抑菌圈实验及其意义1.实验目的及意义:通过观察抑菌圈实验,使学生了解细菌的生长与分裂以及抑菌圈的形成原理;同时,通过抑菌圈的直接表示,以简明易懂的形式表达药物的抗菌性能,提高学生的实验动手能力和实验数据的分析能力。

2.实验要求及适用范围:本实验适用于中学生物课程的实验教学,要求学生依据教师提供的实验步骤和实验资料,自行设计实验方案,并进行实验操作。

同时,鼓励学生进行实验数据的分析和实验结果的讨论。

3.实验步骤:(1) 准备无菌培养基和细菌样品。

(2) 在无菌平板上,将细菌悬液接种于其上。

(3) 将教师提供的不同浓度的抗生素药片分别放在不同区域的平板上。

(4) 然后在恒温培养箱中进行培养,观测药片周围的细菌生长情况,以判断患者的感染情况。

(5) 结束实验后,观察每个药片周围的抑菌圈,计算药物的最小抑菌浓度,分析药物的抗菌性能。

4.实验结果分析及讨论:(1) 抗菌药物的抑菌效果会随着药物的浓度或种类不同而产生变化,教师可将不同浓度的抗生素药片和不同种类的药物提供给学生进行实验,以便学生比较不同药物的抗菌效果。

(2) 抑菌圈的大小与药物的抗菌效果成正比,药效越强,则抑菌圈的直径越大。

(3) 抑菌圈的形成是由于药物的杀菌成分能够有效抑制菌落的扩散,因此,抑菌圈的直径越大,则表明药物的抑菌能力更强。

(4) 通过实验观察,学生可以了解细菌在平板上生长的情况,以及药物的抗菌性能;同时,通过实验数据的统计和分析,学生可以进一步掌握实验结果的科学分析方法。

5.实验教学的改进方案:(1) 采用多样化的实验教学方法,例如,采用视频、图像等多媒体方式,使学生更加直观地了解实验流程和结果。

(2) 加强对实验设备、实验流程和实验注意事项的讲解,特别是细菌样品的准备和实验操作的无菌要求。

(3) 激励学生积极参与实验讨论和结果分析,鼓励学生发挥自己的创造力和创新精神,提高学生的实验观察能力和实验数据分析能力。

thweek药学实验四药物的体外抗菌试验

thweek药学实验四药物的体外抗菌试验

结果观察与记录
观察抑菌圈
通过观察抑菌圈的大小,初步判断药物的抗菌 效果。
数据记录
详细记录实验过程中的数据,如菌种名称、药 物名称、稀释比例、抑菌圈大小等。
结果分析
根据记录的数据,进行结果分析,计算药物的抑菌率或最小抑菌浓度等指标。
04
数据分析与结论
数据整理与处理
数据收集
收集实验过程中获得的药物抗菌数据,包括不同 药物浓度下的抑菌圈直径、细菌生长曲线等。
展望未来研究方向
根据实验结果和数据分析,展知
实验操作注意事项
实验前应仔细阅读相关文 献,了解实验原理、操作 步骤及注意事项。
在实验过程中,应保持实 验室整洁,避免交叉污染。
确保实验操作符合实验室 安全规定,遵循正确的操 作流程。
实验结束后,应按照实验 室规定正确处理废弃物。
纸片扩散法
将含有不同浓度抗菌药物的纸片贴在接种了细菌的琼脂平板上,观察 抑菌圈的大小,判断药物的抗菌效果。
时间-杀菌曲线法
记录抗菌药物在不同时间对细菌数量的影响,了解药物的杀菌速率和 杀菌效果。
了解抗菌药物的作用机制
大环内酯类
主要抑制细菌蛋白质的合成。
氨基糖苷类
与细菌核糖体结合,抑制蛋白 质合成。
thweek药学实验四药物的 体外抗菌试验
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 数据分析与结论 • 实验注意事项与安全须知
01
实验目的
理解药物体外抗菌试验的原理
药物体外抗菌试验是指在体外条件下,通过实验室方法测试抗菌药物对病原微生 物的抑制或杀灭作用。其原理基于药物对微生物细胞膜、细胞壁、核酸或蛋白质 等生物大分子的影响,从而干扰或破坏微生物的正常生长和繁殖。

检测不同环境中的细菌和真菌实验报告单

检测不同环境中的细菌和真菌实验报告单

检测不同环境中的细菌和真菌实验报告单班级: 小组: 姓名: 时间: 实验小组教师自我检测不同环境中的细菌和真菌名评价评价评价称实验材培养皿、琼脂粉、牛肉汁、蛋白胨、清水、恒温培养箱、料灭菌箱的准备提出检测不同环境中的细菌和真菌的有无及其数量问题作出不同的环境中均分布有细菌和真菌,只是数量不假设同1. 实验设计:检测不同环境中的细菌和真菌,分组检测,一组:手心二组:教室三组:硬币四组:池塘水探制定2.全班分成8个小组进行实验,每两个小组检测究计划同一地点,得出检测结果。

过实施程 3、实验步骤:(1)配置培养基计划 (2)高温灭菌(冷却) (3)接种 (4)恒温培养4、按照上述实验方案做实验.经过一周时间培养,仔细观察认真记录实验结果。

池塘水中细菌和真菌数量最多探究结果向全班同学汇报你们小组的探究过程和结果,在表达老师的指导下分析原因。

得出细菌和真菌的生存条件与交流1. 为什么要有两套培养基的培养皿,各做什么科学用,2. 为什么要将培养用的培养皿和培养基,在接探索种前高温灭菌,3. 教材第57页提示4相当于细菌、真菌一般培养方法中的哪一个步骤,4. 你们小组是如何进行接种的,总评友情提示:养成良好的卫生习惯,观察细菌和真菌菌落时不要用手摸实验材料~附1评价策略:1、将学生分组,一般为5人一组,由组员推选一名组长;明确组长的职责及组员的权益和职责,使每个成员明白他们是一个互相协作、互相监督、共同进步的团队。

2、在实验之前对每个组员进行必要的培训,让他们明确实验的目的。

如何发挥每个组员的潜力,让他们自己互评互帮,有助于发挥他们自己的主观能动性,老师们指导起来也非常的轻松,并且有条不紊的进行实验。

3、本实验报告单使用了“以自我评价为主,结合教师评价、小组评价相结合”评价方式.长期以来,对学生评价都是教师说了算,在这种机制下,学生始终处于被动地位和受压抑的状态之下,既不利于学生良好品格形成、又不利于学生潜能的开发,更谈不上创造能力培养。

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评价药物的抗幽门螺旋杆菌活性等指标
⑴检测药物对幽门螺旋杆菌标准菌株的最小抑菌浓度。

⑵检测药物对幽门螺旋杆菌标准菌株的最小杀菌浓度。

⑶检测药物对临床各种幽门螺旋杆菌耐药菌株的最小抑菌浓度。

⑷评价药物对临床一线治疗幽门螺旋杆菌药物甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素
等是否具有协同作用。

⑸评价幽门螺旋杆菌标准菌株对药物是否耐药及耐药频率是多少?该药物与
临床治疗幽门螺旋杆菌一线药物是否存在交叉耐药。

⑹评估药物的毒性。

⑺看是否可以构建幽门螺旋杆菌的持留菌模型,以检测药物对处于持留状态
的幽门螺旋杆菌是否具有杀灭作用。

⑻评价在酸性条件下,药物对幽门螺旋杆菌是否也具有抑制作用。

实验方法
药物对幽门螺旋杆菌标准菌株及临床各种耐药菌株最小抑菌浓度(Minimum 甲硝唑ibitory concentration, MIC)的测定药物对幽门螺旋杆菌最小抑菌浓度MIC是评价药物活性一个非常重要的指标。

具体方法如下:
1培养细菌到达对数期,此时OD600应该在0.6-0.8之间。

2取菌液2ml至2个1.5ml的EP管内。

38,000rpm离心10min,去除上清,用新鲜配制的培养基洗涤一次。

4调节菌浓度至OD600=0.1,此浓度与0.5McFarland相当,约1×107 cfu/mL(所用培养基为1×)。

另一个EP里调节菌浓度至OD600=0.2,相当于2×107 cfu/mL (所用培养基为2×)
5用相应浓度培养基稀释菌液100倍至浓度为1×105 cfu/mL和2×105 cfu/mL。

6溶解药物。

7取灭菌96孔圆底微孔板,在板四周每孔加200μl灭菌去离子水,目的是减少检测孔内的培养基蒸发。

8在第二列孔B至G内,加100μl已经调节为2×105 cfu/mL浓度的待检测菌液(所用培养基为2×)。

其余孔内B3至G11加入100μl已经调节为1×105 cfu/mL浓度的待检测菌液菌液(所用培养基为1×)。

9在第二列孔内分别加入100μl药物药物。

充分混匀后,取100μl菌液加入到下一个孔内,依次类推。

加到G10时取出100μl弃掉。

G11不加药物做为对照。

10盖好96孔板,温箱培养,无肉眼可见菌生长所需药物最低浓度为MIC。

11实验重复测定3次,每次3个重复,确保实验的准确性。

12同时也要检测临床一线药物甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素对幽门螺旋杆菌的MIC。

检测药物对幽门螺旋杆菌标准菌株的最小杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC)
具体方法如下:
1. 测定药物对幽门螺旋杆菌菌株的MIC。

2. 从没有肉眼可见菌生长的孔内取100μl涂平板,至温箱培养。

3. cfu计数,cfu减少99.9%所需的药物最小浓度即为MBC。

药物与临床一线治疗幽门螺旋杆菌药物甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素协同作用实验
目前治疗幽门螺旋杆菌都是联合用药,本实验来评价药物与临床一线治疗幽门螺旋杆菌药物甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素是否具有协同作用,为联合用药做为理论依据,具体方法如下:
1.先分别测定甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素对幽门螺旋杆菌的MIC。

2调节菌浓度OD600=0.2,再稀释100倍至菌浓度为2×105 cfu/mL(所用培养基为2×)。

3分别配置甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素,使之浓度为加1μl化合物在200μl 体系菌液里的浓度分别为该药物对幽门螺旋杆菌菌株MIC的1/2、1/3、1/4、1/5、1/6、1/8、1/10MIC 7个不同的浓度。

4取无菌的96孔板,在检测孔内均加入100μl的浓度为2×105cfu/mL的幽门螺旋杆菌菌液(所用培养基为2×)。

5然后在孔内分别加入不同浓度的化合物:一线药物以横向浓度逐渐减少的方式加入1μl,我们所提取的药物以纵向浓度逐渐减少的方式加入100μl,形成一种网格交叉的方式,其中留有一列的菌液不加任何药物做为对照(见表)。

6每个协同作用实验重复3次。

加好样品后,温箱内孵育观察结果。

7从每种化合物单独的MIC值和联合的MIC值可以计算出fractional inhibitory concentration (FIC)和FIC index (FICI)。

FIC是联合用药中每种化合物的MIC 值,FICI等于联合用药中每种化合物MIC值的总和。

FICI≤0.5为具有正协同作用,FICI>4.0认为具有拮抗作用,FICI值介于0.5与4之间认为没有协同
作用,为相加作用。

表药物与一线药物甲硝唑等协同作用
幽门螺旋杆菌对药物耐药菌株的筛选和耐药频率的测定本实验就幽门螺旋杆菌对药物是否会产生耐药性,及耐药频率等指标进行了评价。

1.培养幽门螺旋杆菌至对数期。

2.调节菌浓度为2×108-9 cells/ml。

3.配固体平板,固体培养基内含有不同浓度的药物。

药物浓度的选择基于先前
测定的MIC值。

可先设置药物浓度为2MIC。

4.同时以甲硝唑,阿莫西林,克拉霉素做为对照,,平板所含药物浓度也分别为
2MIC。

5.取调节好浓度的菌液100μl涂含有相应浓度化合物的固体平板。

同时稀释菌溶
液,取适量涂于不含任何化合物的固体平板。

至温箱培养。

6.cfu计数涂于含有药物固体平板上长出的菌落数,以涂于不含药物平板的菌落
数做为比较,计算出耐药频率。

7.配制液体培养液,准备若干个灭菌小瓶子,每个小瓶子无菌分装5ml左右培养
液。

8.分别挑耐药菌落至小瓶子内培养。

9.待耐药菌生长至对数期时,检测药物对该耐药菌株的MIC,观察MIC是否发
生变化,确定是否耐药。

同时保种筛选出的耐药菌株。

10.把耐药菌株传代培养,传数代后再次检测药物对该菌株的MIC,观察该耐药
菌株的遗传稳定性如何。

11.综合评价幽门螺旋杆菌对药物的耐药性,并与甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素
等做比较。

Determination of serum inhibitory titre (SIT) of drug
Eight-week-old Swiss mice (NCI) were administered drug(75,150,300 mg kg-1), and no drug in 0.2 ml sterile water by oral gavage. Mice were then anaesthetized and exsanguinated 0.5、1 and 2 h after dosing respectively. Serum was prepared and samples from each group were pooled. Serial twofold dilutions of serum were made in broth inoculated with HP bacilli. These cultures were then incubated at 37 ℃and inspected for growth 3 days later to assess the serum concentration of drugs that inhibited bacterial growth.
该实验可以判定药物吸收后在血液中的药物浓度是否能够抑制幽门螺旋杆菌的生长,也能间接判断药代。

Toxicity experiments.
For in vitro testing of the toxicity of the drug, mice will be used. To further evaluate the toxicity of drug, doses of 100mg/kg and 300mg/kg will be given to mice by gavage, up to 14 days and compared with vehicle alone. We will observe apparent discomfort symptoms and weight loss. We will have 10 mice per group for the above groups in the toxicity experiment.。

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