中药制剂检验

3）指纹图谱的应用
人参须根 人参主根
不 同 产 地 高 良 姜 的 气 相 指 纹 图 谱
（三）杂质检查
水分 总灰分和酸不溶性灰分 主要项目 重金属 砷盐 残留农药
杂质来源及检查意义
水分 —— 结块、霉变或有效成分水解 灰分 —— 控制药物本身及泥土、沙石等无机杂质 重金属 —— 环境污染和使用农药引入 砷盐 —— 剧毒，常由除草剂、杀虫剂或化肥引入 残留农药—— 有毒
2） 色谱指纹图谱的基本属性
• 整体性
将指纹图谱作为一个整体来分析和比较它的综合 特征以达到鉴别的目的。
• 模糊性
强调分析、比较指纹图谱的相似性，而不是完全 相同。
• 是一种综合的、量化的色谱鉴别手段。
色谱指纹图谱在中药质量评价中能够尽可 能多地反应中药的全貌。 不需要清楚每一个组分的化学结构；不需 要对每一个组分都进行定量；只要求不同 批号的同一种药品的指纹图谱保持一致。
原理 超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出 现“空化”现象（气泡的形成、产生及破裂现象） 形成超过1000个大气压的冲击力
6、 超临界流体萃取 （SFE法）
当压力和温度超过气体的临 界点时所形成的单一相态
超临界流体 是一种处于超临界点之上的流体，
是介于气体与液体之间的一种物相，兼 有气体与液体的一些特性
第十四章
常用中成药的 检验
主要内容
1、了解中药制剂的分类及中药制剂分析的 特点
2、熟悉中药制剂分析的一般程序 3、掌握中药制剂常用的分析方法
一、定义 中药制剂（中成药）是根据药典、制剂
规范和其它规定的处方，将中药的原料药物 加工制成具有一定规格，可以直接用于防病、 治病的药品。
注意：中药制剂必须是以中医药 基础理论和用药原则为指导制成 的单方或复方制剂。
佐、使 郁金—活血去瘀药，主含挥发油。
鉴别
显微鉴别 郁金—糊化淀粉团块几乎无色。 栀子—种皮石细胞。 黄芩—纤维淡黄色，梭形，厚壁，孔沟细。 黄连—纤维鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显。 朱砂—不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色
或棕黄色。
郁金—糊化淀粉团块 栀子—种皮石细胞 黄芩—纤维 黄连—纤维 朱砂—不规则块状物或颗 粒状物，暗红棕色、鲜红 色或棕黄色
缺斤短两
2. 中药材质量的不稳定性
GAP 中药材生产质量管理规范
生长环境、采收季节及部位差异
A 生长环境
麻黄 东北→西北（-）麻黄碱含量↓ （+）麻黄碱含量↑
润肺止咳，风寒感冒
B 采收季节
丹参酮 11、12月份含量最高
抗菌消炎，用于痤疮，扁桃腺炎， 外耳道炎、疖、痈。 高血压
益母草 水苏碱 营养期含量最高 益母草碱 营养期含量最低
对照药材溶液的制备：黄连对照药材 50mg，加甲醇10ml，回流加热15min ,滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照 药材溶液。
对照品溶液的制备：再取盐酸小檗碱对 照品，加甲醇制成每1ml含 0.5mg的溶液，作 为对照品溶液。
TLC法
固定相 硅胶G （ CMC-Na） 展开剂 苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液
二、 中药制剂分析的特点
GAP 中药材生产质量管理规范
1、中药市场混乱 2、中药材质量的不稳定性 3、各种有效成分在中药中含量相差悬殊 4、成分复杂，而且大多数中药的有效成分尚不清楚 5、同一成分在不同药材中的药理作用不同 6、制剂工艺不同，有效成分的量也不同 7、剂型繁多，辅料干扰大
二、 中药制剂分析的特点
仪器 普通回流装置 通过更换溶剂，使提取更完全
3、 连续回流提取法
样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经 冷凝流回样品管的提取方法
特点
节省溶剂，提高提取效率 适宜受热稳定的药物 费时
仪器 索氏提取器
4、 水蒸气蒸馏法
适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定 麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油
5、 超声提取法 利用超声波的助溶作用进行提取 超声波振荡器（超声波清洗器） 简便 省时 提取率高
对照品溶液的制备：栀子甙对照品加甲醇 制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
TLC法
固定相 硅胶G （CMC-Na） 展开剂 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（10 : 7 : 2 : 0.5） 显色剂 10%硫酸乙醇
1050C, 10min 紫色斑点
栀 子 甙
供试 品
栀子空白
5. 黄连的鉴别
供试品溶液的制备：取含量测定项下 剩余的盐酸-甲醇提取液4ml，水浴蒸干， 残渣加甲醇溶解，使成1ml作为供试品溶液。
中药药效的发挥是多种成分协同作用 的结果，因此应从整体上来控制中药的 质量。
问题：双黄连注射液、香丹注射液 柴胡注射液、清开灵注射液
5. 同一成分在不同药材中的药理作用不同
有效← →无效 鞣质 地榆（止血） 其他（无药效）
6、制剂工艺不同，有效成分的量也不同
例
三黄泻心汤干浸膏 有效成分与浓缩干燥方法的关系(%)
（12:6:3:3:1） 显色剂 UV（365nm）
盐 酸 小 檗 碱
黄连
黄连空白 供公试式品品
2、 化学鉴别 抗干扰能力差 组 分 试剂显色、↓、↑、荧光
例 二妙丸中苍术的鉴别 燥湿清热
样品乙醚醚层KMnO4 褪色
苍术酮 苍术炔
3、 色谱鉴别
TLC法——应用最多（Rf、颜色、荧光） GC法 ——适用于含挥发性成分的药物 HPLC法——常与含量测定同时进行
阴、阳对照法
化学鉴别
1. 朱砂的鉴别
取本品3g，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物， 可得少量朱红色沉淀，取出，加入盐酸1ml及铜片少 量，加热煮沸，铜片由黄色变为银白色（汞齐）。
HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S
2. 人工牛黄的鉴别
取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研匀，加 氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加热回流30min,放 冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解， 滤过，滤液作为供试品溶液。
1985
5.31
1990
8.73
1995
12.81
2000
62.09
（HPLC 36% TLCS 24% GC 3%毒药建立含量测定方法 2 其次考虑臣药及其他味药 3 有效成分明确的，可选有效成分 4 成分类别清楚的，可测某一类总成分的含量
5 检测成分应与中医用药的功能主治相近 6 确无法含量测定的，可测定浸出物含量
小檗碱
• 固定相：硅胶Ｇ • 展开剂： 苯－醋酸乙酯－甲醇－异丙醇－浓氨试液(12:6:3:3:1) • 检视：紫外光灯(365nm)， 黄色荧光斑点
O
O
O
O
O
×××
样
对照
小
品
药材
檗 碱
4、中药鉴别新技术－中药指纹图谱
1）定义：
中药材或中药制剂经适当处理后，采用 一定的分析手段，得到的能够标定该中药材 或中药制剂特性的共有峰的图谱
胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml含1mg的 混合溶液，作为对照品溶液。
TLC法
固定相 展开剂 显色剂
硅胶G 醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇（32:6:1:1） 10%磷钼酸乙醇液， 1100C，10min
猪去氧胆酸
胆 酸
人供 工试 牛品 黄
牛 黄 空 白
3. 黄芩的鉴别
供试品溶液的制备：取本品3g，剪碎， 加硅藻土0.5g，研匀，加甲醇20ml，加热回 流1h，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。
[性状] 本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气
特异，味甜、微涩、苦。
[功能主治] 清热解毒，镇惊安神。用于热邪内闭，
烦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。
[方药分析]
君
牛黄—清热解毒药，主含胆酸类成分。
黄连—清热燥湿药，主要为小檗碱。
臣
黄芩—清热燥湿药，主要为黄酮类。
栀子—清热泻火药，主含栀子甙。
朱砂—安神药，主含硫化汞（HgS）。
➢ 重金属的测定
WHO规定植物药
铅≤10ppm 镉≤0.3ppm
➢ 砷盐的测定 ① 古蔡氏法
② 二乙基二硫代氨基甲酸银法 [简称Ag -DDC法]
➢ 残留农药的测定
1、 总氯量的测定 2、 总磷量的测定 3、 GC法
（四） 含量测定项目的选定
中国药典中药制剂含量测定所占比例
版本
%
1977
1.48
化学分析法 常用定量方法 分光光度法
色谱法
分析实例—万氏牛黄清心丸
[处方] 牛黄10g 朱砂60g 黄连200g 黄芩120g 栀子120g 郁金80g
分析实例—万氏牛黄清心丸 [制法]
以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎成极细 粉；其余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研 细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g 粉末加炼蜜100-200g制成大蜜丸，即得。
清热，凉血。用于吐血，衄血， 便血，血痔，血痢，崩漏， 风热目赤，高血压病，痈疽，疮毒
长春花 长春新碱（百万分之一）
凉血降压，镇静安神。 用于高血压、火烫伤、 恶性淋巴瘤、绒毛膜上皮癌、 单核细胞性白血病。
美登木 美登木碱（千万分之一）
活血化瘀
4. 成分复杂，而且大多数中药的有效
成分尚不十分清楚。
对照品溶液的制备：黄芩甙对照品加甲 醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
TLC法 固定相 硅胶G（4%醋酸钠）
使斑点更为集中
展开剂 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1） 显色剂 2%三氯化铁乙醇液
-OH与Fe+3络合
黄
供
芩
试
空
品
白
黄 芩 甙
4. 栀子的鉴别
供试品溶液的制备：取本品3g，加乙醚 15ml，研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚，加醋酸 乙酯30ml，加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸 干，残渣加甲醇3ml溶解，滤过，滤液作为供试 品溶液。