微生物实验六糖发酵实验
乳糖发酵实验报告结果
一、实验目的1. 了解乳糖发酵的原理及其在微生物鉴定中的应用。
2. 掌握通过观察乳糖发酵实验结果来鉴别细菌的能力。
二、实验原理乳糖发酵实验是微生物鉴定中常用的生化反应之一。
该实验基于细菌对乳糖的代谢能力，即某些细菌能够将乳糖分解为乳酸和气体（主要是二氧化碳和氢气），从而在培养基中产生酸性环境，导致指示剂颜色变化或气泡产生。
三、实验材料与方法1. 实验材料：- 乳糖发酵培养基（含有乳糖、蛋白胨、指示剂等）- 待检菌种（如大肠杆菌、伤寒杆菌等）- 无菌接种环、接种针、试管、培养箱等2. 实验方法：- 将待检菌种接种于乳糖发酵培养基中。
- 将接种后的培养基置于37℃培养箱中培养24小时。
- 观察培养基颜色变化和气泡产生情况。
四、实验结果与分析1. 大肠杆菌- 培养基颜色：紫色变为黄色，说明产生了酸性产物。
- 气泡产生：有气泡产生，说明产生了气体。
- 结论：大肠杆菌能够发酵乳糖，产酸产气。
2. 伤寒杆菌- 培养基颜色：紫色保持不变，说明没有产生酸性产物。
- 气泡产生：无气泡产生，说明没有产生气体。
- 结论：伤寒杆菌不能发酵乳糖，不产酸不产气。
3. 其他菌种（此处可根据实际情况添加其他菌种的实验结果）五、讨论1. 乳糖发酵实验是微生物鉴定的重要手段之一，通过观察细菌对乳糖的代谢能力，可以初步判断细菌的种类。
2. 大肠杆菌和伤寒杆菌对乳糖的代谢能力存在明显差异，前者能够发酵乳糖，后者则不能。
3. 该实验结果与文献报道相符，具有一定的参考价值。
六、实验结论通过乳糖发酵实验，我们成功观察到大肠杆菌能够发酵乳糖，产酸产气，而伤寒杆菌则不能发酵乳糖，不产酸不产气。
这表明乳糖发酵实验在微生物鉴定中具有重要作用，有助于我们更好地了解不同细菌的代谢特性。
七、实验注意事项1. 实验过程中应注意无菌操作，避免污染。
2. 观察结果时，应仔细观察培养基颜色变化和气泡产生情况，确保实验结果的准确性。
3. 实验结果应与文献报道进行对比，以确保实验结果的可靠性。
微生物的生理生化反应
实验六微生物的生理生化反应一、实验目的掌握细菌鉴定中主要生理生化反应的常规实验法。
二、实验原理由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。
具体个原理如下：1、淀粉水解试验：在淀粉固体培养基上接种两种细菌（1—枯草杆菌，5—大肠杆菌），培养两天以后，再往培养基中加碘液染色，若该细菌能分泌胞外淀粉酶，则能利用其周围的淀粉，淡然在染色后，其菌落周围不呈蓝色，而是无色透明圈。
2、明胶水解试验：穿刺接种于明胶培养基中的细菌，若能产生明胶酶利用明胶，则该培养基在4摄氏度条件下会处于液体状态，从而区别于正常条件下4摄氏度时固态的明胶培养基。
3、糖发酵试验：不同的细菌分解糖的能力不同，有些细菌能利用糖发酵产酸和产气，有些则不能。
酸在加入溴甲酚指示剂后会使溶液呈黄色，且德汉氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且德汉氏小管中无气体。
4、IMVC实验包括四个试验，主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水环境的细胞血检查。
①吲哚试验：在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
本次不做该试验。
②甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲酸，乙算和乳酸等多种有机酸，是培养液PH值降至4.2以下，加入甲基红后溶液呈红色。
③柠檬酸盐利用试验：有些细菌能利用柠檬酸盐作为唯一的碳源，而有些细菌则不能利用。
由于细菌不断地利用柠檬酸盐并生成碳酸盐，使培养基PH由中性变为碱性，培养基中的指示剂有浅绿色变为蓝色。
④伏-普试验（乙酰甲基甲醇试验 VP）：某些细菌在代谢过程中，能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸在羧化酶的催化下脱羧后形成活性乙醛，后者与丙酮酸缩合，脱羧形成乙酰甲基甲醇，或者乙醛化合生成乙酰甲基甲醇。
实验六 发酵法检测大肠菌群培养基制备
第5组：包培养皿，并协助第4组配制培养基。
① 6付1包。包90付。共15包。 ② 高压蒸汽灭菌。115℃，灭菌30min。
后续试验分组
2013-1班：分6组（5-6人1组） 2013-2班：分6组（5-6人1组） 2012-1班：分5组（5-6人1组） 2012-2班：分6组（5-6人1组）
30g 9g 15g 15g 3ml 1000ml
配制方法：
①将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000ml水中， 调整pH为7.2-7.4。
②定量加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液，充分混匀。
③分装试管（内有小倒管）。用注射器分装每管5ml。装36支 试管。
④高压蒸汽灭菌。115℃，灭菌30min。
实验六 发酵法检测水中大肠菌群培养基的制备
一 实验目的
1 学习并掌握液体培养基配制方法。 2 学习培养皿的包扎方法。 3 掌握并巩固高压蒸汽灭菌方法。
二 实验操作步骤（分组操作：6-7人1组,分5组）
第1组：3倍浓缩乳糖培养基制备。（配制200ml）
蛋白胨 牛肉膏 乳糖 氯化钠 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 水
③ 分装试管（内有小倒管）。用注射器分装每管10ml。每 组装55支试管。
④ 高压蒸汽灭菌。115℃，灭菌30min。
第4组：伊红美蓝储备培养基制备（配制1400ml）
蛋白胨 乳糖 磷酸氢二钾 琼脂ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ水
10g 10g 2g 20g 1000ml
配制方法： ① 将琼脂加入900ml水中，加热溶解；
② 然后加入磷酸二氢钾及蛋白胨，混匀溶解； ③ 加水补足1000ml，调pH7.2-7.4。 ④ 加入乳糖后溶解混匀。 ⑤ 分装三角瓶。每瓶200ml（定量）。 ⑥ 高压蒸汽灭菌。115℃，灭菌30min。
实验六细菌的生理生化试验教学
02
酶活性测定是了解细菌代谢途径的重要手段。
03
在实验中，我们对该细菌的几种关键酶进行了活性测定。通过分析酶活性，我 们发现该细菌具有较高的酶活性水平，这表明该细菌具有较为活跃的代谢状态 。这些结果有助于我们进一步了解该细菌的生化特性和代谢途径。
结果总结与讨论
总结
通过对生理和生化试验结果的综合分析，我们对该细 菌的生理生化特性有了更深入的了解。这些结果不仅 有助于我们更好地认识该细菌的生长、繁殖和代谢特 点，还为进一步研究该细菌的生物学特性和应用提供 了重要的参考依据。
糖发酵试验是鉴定细菌生化特性的重要手段。
生化试验一：糖发酵试验
在糖发酵试验中，我们观察到该细菌能够利用不同的 糖类作为碳源进行发酵。通过分析不同糖类的发酵产 物，我们可以了解该细菌对不同糖类的代谢能力和发 酵特性。这些结果对于进一步了解该细菌的生化特性 具有重要的意义。
生化试验结果与分析
01
生化试验二：酶活性测定
生理试验结果与分析
生理试验二：对数生长期的代谢产物
在细菌的对数生长期，其代谢产物具有一定的特点。
在对数生长期，我们观察到该细菌产生了一些具有特殊性质的代谢产物， 这些代谢产物可能对该细菌的生长和繁殖具有重要作用。通过对这些代 谢产物的分析，我们可以更深入地了解该细菌的生理特性。
生化试验结果与分析
实验六细菌的生理生化试验 教学
contents
目录
• 实验目的与简介 • 实验材料与试剂 • 实验步骤与操作 • 实验结果与分析 • 实验结论与建议 • 参考文献与拓展阅读
生理生化 特性，了解不同细菌 在生化反应中的差异。
通过实验结果分析， 能够对细菌进行初步 鉴定。
《细菌与人类健康》
发酵食品工艺六大实验
发酵食品工艺六大实验引言发酵是一种利用微生物代谢产物来改变食品性质的传统食品加工方法，已经在人类的饮食中存在了几千年。
通过发酵，食品中的一些成分会发生转化，从而产生出独特的风味、口感和营养特性。
发酵食品工艺的实验是研究发酵过程中微生物活性以及对食品品质的影响的重要方法。
本文将介绍发酵食品工艺中的六个主要实验，包括酵母发酵实验、乳酸菌发酵实验、酸奶制作实验、豆豉制作实验、酱油酿造实验和葡萄酒酿造实验。
每个实验都将详细介绍所需材料、步骤和实验结果。
实验一：酵母发酵实验材料：•酵母•糖•水•发酵容器步骤：1.将一定量的酵母、糖和水混合在发酵容器中。
2.将发酵容器密封，并放置在适宜的温度下。
3.观察发酵液中气泡的产生和发酵液的膨胀情况。
4.记录发酵时间和发酵液的味道特征。
实验结果：•发酵过程中，酵母会利用糖分解产生二氧化碳和乙醇。
•发酵液会产生气泡，并逐渐膨胀。
•发酵液会具有酒精味道。
实验二：乳酸菌发酵实验材料：•乳酸菌培养基•酸奶样品•培养皿步骤：1.将乳酸菌培养基倒入培养皿中。
2.从商业酸奶样品中取一定量涂抹在培养皿的表面。
3.将培养皿密封，放置在适宜的温度下。
4.观察培养皿中乳酸菌的生长情况。
5.记录乳酸菌生长的时间和培养皿中的酸奶味道特征。
实验结果：•培养皿中会出现白色或黄色的菌落。
•培养皿中的酸奶样品会发酵产生酸味。
实验三：酸奶制作实验材料：•牛奶•酸奶菌种•酸奶制作器步骤：1.将牛奶加热至80℃，然后快速冷却至40℃。
2.加入酸奶菌种到牛奶中，并充分搅拌均匀。
3.将混合好的牛奶和菌种倒入酸奶制作器中。
4.将酸奶制作器密封并放置在适宜的温度下，静置6-8小时。
5.取出制作好的酸奶，放入冰箱冷藏。
实验结果：•经过发酵，牛奶会变酸，具有酸奶的口感和酸味。
•酸奶中的乳酸菌有益于肠道健康。
实验四：豆豉制作实验材料：•黄豆•豆豉菌种•盐步骤：1.将黄豆浸泡在水中约8小时，然后将水倒掉。
2.锅中加入适量水，将黄豆煮熟。
生物化学实验报告(实验六)
与
在
碱性条件下形成 2，4-二硝基苯肼-丙糖的
，其棕色程度与 3-磷酸
甘油醛含量成正比。
【材料与设备】
1、仪器设备
试管、吸量管、恒温水浴、烧杯
2、材料试剂： 新鲜酵母
3、主要试剂
成绩：
教师签字：
批阅日期：
2，4-二硝基苯肼、0.56 mol/L 硫酸肼溶液、5%葡萄糖溶液、10%三氯乙酸溶 液、0.75 mol/LNaOH 溶液、0.002 mol/L 碘乙酸溶液
要
，每一反应步骤基本都由特异的酶催化。在
条件下丙酮酸
则可在乳酸脱氢酶的催化下，接受磷酸丙糖脱下的氢解，称为糖的有氧氧化，丙酮酸可进一步氧化
分解生成乙酰 CoA 进入三羧酸循环，生成
。
利用
对糖酵解过程中
的抑制作
用，使
不再向前变化而积累。硫酸肼作为
，
用来保护
使其不自发分解。
天津科技大学生物化学实验报告
专 业： 姓名
学号
班 级：
组别
第组
实验 项目
验证型
同组人
完成 时间
年月 日
【实验名称】
《糖酵解中间产物的鉴定》
【实验目的】
了解糖酵解过程的某一中间步骤及利用抑制剂来研究中间代谢的方法。
【实验原理】
糖酵解定义：是指将
或
分解为
和
的
过程，此过程中伴有少量
的生成。这一过程是在细胞质中进行，不需
杯号
10%三氯乙酸/mL
碘乙酸/mL
硫酸肼/mL
2
3
4.取 3 个试管，分别加入上述滤液 0.5mL，并按表 3 加入试剂和处理。
表 3 3-磷酸甘油醛含量测定
糖的发酵实验报告
一、实验目的1. 了解糖发酵的原理和过程。
2. 掌握糖发酵实验的基本操作方法。
3. 通过实验观察糖发酵过程中的现象，加深对糖发酵原理的理解。
二、实验原理糖发酵是指微生物将糖类物质分解成有机酸、气体等产物的过程。
在微生物的作用下，糖类物质经过一系列生化反应，最终转化为有机酸和气体。
实验中常用的糖类物质有葡萄糖、乳糖、麦芽糖等。
三、实验材料1. 实验仪器：培养皿、接种环、酒精灯、无菌水、蒸馏水、糖发酵培养基等。
2. 实验试剂：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、酵母提取物、氯化钠、溴甲酚紫等。
3. 实验菌株：酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌等。
四、实验方法1. 制备糖发酵培养基：称取葡萄糖、乳糖、麦芽糖各10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，溴甲酚紫0.1g，加入100ml蒸馏水，搅拌均匀，分装于培养皿中，待凝固。
2. 接种：用接种环分别挑取酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌等菌株，分别接种于糖发酵培养基中。
3. 培养与观察：将接种后的培养皿放入恒温培养箱中，培养一段时间（如24小时），观察糖发酵现象。
五、实验现象与结果1. 酵母菌发酵葡萄糖：酵母菌在葡萄糖发酵培养基中生长迅速，产生气泡，溴甲酚紫指示剂由黄色变为紫色，说明产生了酸性物质。
2. 大肠杆菌发酵乳糖：大肠杆菌在乳糖发酵培养基中生长迅速，产生气泡，溴甲酚紫指示剂由黄色变为紫色，说明产生了酸性物质。
3. 乳酸菌发酵麦芽糖：乳酸菌在麦芽糖发酵培养基中生长迅速，产生气泡，溴甲酚紫指示剂由黄色变为紫色，说明产生了酸性物质。
六、实验讨论与分析1. 酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌等微生物在糖发酵过程中，通过分解糖类物质，产生有机酸和气体，从而降低了培养基的pH值。
2. 溴甲酚紫指示剂在酸性条件下由黄色变为紫色，可作为判断糖发酵现象的依据。
3. 不同的微生物对糖的发酵能力不同，如酵母菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖，而大肠杆菌主要发酵乳糖，乳酸菌主要发酵麦芽糖。
七、实验结论1. 本实验成功观察到了糖发酵现象，验证了糖发酵原理。
细菌生化实验报告
一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理和实验方法。
2. 掌握常见细菌生理生化反应的检测方法，如糖发酵、吲哚产生、甲基红反应等。
3. 学会通过生理生化反应对细菌进行初步鉴定。
二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长繁殖过程中，利用酶催化底物发生的一系列化学反应。
通过检测细菌对特定底物的利用能力、酶的产生以及代谢产物的生成，可以判断细菌的种类和特性。
三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、吲哚试剂、甲基红试剂等。
3. 仪器：酒精灯、接种环、培养皿、试管、试管架、滴管等。
四、实验方法1. 糖发酵实验：将待测菌接种于糖发酵培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
观察菌落周围是否出现透明圈，判断细菌是否能发酵该糖。
2. 吲哚产生实验：将待测菌接种于蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
取培养液滴加吲哚试剂，观察是否产生红色沉淀，判断细菌是否能产生吲哚。
3. 甲基红反应实验：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
取培养液滴加甲基红试剂，观察颜色变化，判断细菌是否能产生有机酸。
五、实验结果与分析1. 糖发酵实验结果：- 大肠杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 金黄色葡萄球菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 枯草芽孢杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 变形杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阳性。
2. 吲哚产生实验结果：- 大肠杆菌：吲哚产生阴性。
- 金黄色葡萄球菌：吲哚产生阳性。
- 枯草芽孢杆菌：吲哚产生阴性。
- 变形杆菌：吲哚产生阳性。
3. 甲基红反应实验结果：- 大肠杆菌：甲基红反应阴性。
- 金黄色葡萄球菌：甲基红反应阴性。
- 枯草芽孢杆菌：甲基红反应阳性。
- 变形杆菌：甲基红反应阳性。
根据实验结果，我们可以初步判断：- 大肠杆菌为革兰氏阴性菌，发酵葡萄糖，不产生吲哚和有机酸。
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四、实验方法和步骤
1、编号 用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌
名。
2、接种 取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支，按编号1支接种大肠杆
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产酸产气的鉴定
产酸的判断：指示剂溴甲酚紫(pH5．2为黄 色，pH6．8为紫色)，当发酵产酸时，使培 养基由紫色变为黄色。
产气的判断：倒置的德汉氏小管（有无气泡）
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糖发酵试验结果： 右侧为空白对照， 左侧为发酵产酸阳 性，但不产气，中 间为产酸、产气
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三、实验器材
实验六 糖发酵实验
林标声
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实验六 糖发酵实验
一、实验目的
1、了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中 的重要作用。
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二、实验原理
糖发酵试验是最常用的生化反应【糖发酵实验， IMVIC实验（吲哚、甲基红、伏普、柠檬酸盐实 验）】，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多 数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们 在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分 解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气 体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产 酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产 酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气， 不能分解乳糖；枯草芽孢杆菌分解葡萄糖产酸产 气，不能分解乳糖，普通变形杆菌能分解葡萄糖 产酸、产气，但不能分解乳糖。
对照
葡萄糖发酵
乳糖发酵
将实验结果填入下表。分别用产酸产气、产酸不产气、不产酸不产气 表示
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六、思考题
假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发 酵试验应该出现什么结果？
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菌，另1支接种枯草芽孢杆菌，第3支不接种，作为对照。另 取乳糖发酵培养基试管3支，同样1支接种大肠杆菌，1支接种 枯草芽孢杆菌，第3支不接种，作为对照。 3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温 室中培养24小时。 4．观察结果，并填表记录。
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五形杆菌