质粒大量提取试剂盒(离心柱型)操作方法及步骤说明书
高纯度质粒大量快速提取试剂盒(离心柱型)操作方法及步骤说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://HighPure Plasmid Maxi Kit高纯度质粒大量快速提取试剂盒目录号：PL12试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存10次(PL1201)RNaseA（10mg/ml）－20℃750µl溶液P1 4℃77 ml溶液P2 室温77 ml溶液N3 室温77 ml去蛋白液PE 室温63 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇漂洗液WB 室温25 ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温20 ml吸附柱DC 室温10个收集管（50ml）室温10个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100μg/ml）置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独有的去蛋白液配方，可以高效去除残留的核酸酶，即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。
有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
快速、方便，从150-300ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-1.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80 %左右。
质粒提取试剂盒说明书
质粒抽提：质粒抽提方法即去除RNA，将质粒与细菌基因组DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。
实验原理：提取质粒DNA的方法有很多种，从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取，从使用仪器上分可分为一般提取和试剂盒方法提取，从具体操作方法分可以分为碱裂解法、煮沸法、牙签法等，各种不同的方法各有其优缺点，根据不同的实验目的可以采用合适的提取方法。
详细内容请参考《分子克隆实验指南》。
另外，复旦大学生化与分子生物学实验室一篇文章，提供了质粒提取机理的详细解说。
碱裂解法人们使用碱与SDS裂解法从E. coli（大肠杆菌）中分离制备质粒DNA已有30多年的历史。
将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。
尽管碱性溶剂使碱基配对完全破坏，闭环的质粒DNA双链仍不会彼此分离，这因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。
只要OH-处理的强度和时间不要太过，当pH值恢复到中性时，DNA双链就会再次形成。
在裂解过程中，细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体DNA会相互缠绕成大型复合物，后者被十二烷基硫酸盐包盖。
当用K+取代Na+时，复合物会从溶液中有效地沉淀下来，离心除去变性剂后，就可以从上清中回收复性的质粒DNA。
在SDS存在的条件下，碱水解是一项非常灵活的技术，它对E. coli的所有菌株都适用，并且其细菌培养物的体积可以从1-500mL 以上。
煮沸法煮沸法是将细菌悬浮于含有Triton X-100和能消化细胞壁的溶菌酶的缓冲液中，然后加热到100℃使其裂解。
加热除了破坏细菌外壁，还有助于解开DNA链的碱基配对，并使蛋白质和染色体DNA 变性。
但是。
闭环质粒DNA链彼此不会分离，这是因为它们的磷酸二酯骨架具有互相缠绕的拓扑结构。
当温度下降后，闭环DNA的碱基又各就各位，形成超螺旋分子，离心除去变性的染色体DNA和蛋白质，就可从上清中回收质粒DNA。
质粒试剂盒提质粒步骤
质粒试剂盒提质粒步骤质粒试剂盒提质粒步骤操作步骤* 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇!* 将RNase A全部加入溶液P1中，混匀，每次使用后置于2-8℃保存。
1 取1.5-4.5毫升过夜培养的菌液，9000rpm，离心30秒，弃上清，收集菌体，尽可能的倒干上清。
处理超过1.5毫升菌液可以离心去上清后，在同一个1.5ml管内加入更多的菌液，重复步骤1，直到收集到足够的菌体。
2用250 ul溶液P1重悬菌体沉淀，涡旋振荡至彻底悬浮。
如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。
3加250ul的溶液P2，温和的上下翻转6-10次使菌体充分裂解，直到溶液变得清亮。
温和的混匀，不要剧烈震荡，以免基因组DNA剪切断裂！所用时不应超过5分钟！以免质粒受到破坏。
此时菌液应变得清亮粘稠，如果菌体少，很快清亮粘稠后就可以做下一步。
4 加400ul溶液P3，立即温和的上下翻转6-10次，室温放置5分钟。
室温13，000rpm离心10分钟，小心取上清。
5 将吸附柱安置于收集管上，加入500ul溶液P4 ，室温13，000rpm离心1分钟，弃滤液；将上一步所得上清液加入吸附柱AC中（吸附柱放入收集管中），13，000rpm离心1分钟，弃滤液。
6 加入500ul去蛋白液PE，13，000rpm离心30-60秒，弃滤液。
此步骤为了去除痕量核酸酶等杂质，如所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株，核酸酶含量丰富，应加此步骤；如所用菌株为XL-1 Blue和DH5α等缺陷型菌株，核酸酶含量低，则可忽略此步骤。
7 加入500ul漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇！），13，000rpm离心30-60秒，弃滤液。
8 重复步骤7一次，13，000rpm离心30-60秒，弃滤液。
空柱13.000rpm离心2 分钟。
室温放置3-5分钟，除去残留乙醇。
9 取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加60-100ul 洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65℃-70℃水浴中加热效果更好），室温放置1分钟，13，000rpm离心1分钟洗脱DNA，可立即用于下游分子生物学实验或-20℃保存。
大提质粒步骤完整版
大提质粒步骤完整版大提质粒步骤试剂配制：1. 1M NaOH (400ml )：分子量为40，秤取16g NaOH，溶于400ml DDW中。
2. 2M Tris-HCl (500ml)：分子量为121.14，秤取121.14g Tris，溶于400 ml DDW 中，用HCl调节pH值为8.0，定容至500ml。
3. Buffer P1 (1000ml)：用50ml离心管量取20ml 0.5M的EDTA，然后量取25ml 2M 的Tris-HCl，加入700ml DDW，用HCl调节pH 值为8.0，定容至1000ml。
4. Buffer P2（1000ml）：称取10g SDS，放入1000ml的玻璃瓶中，然后加入750ml DDW，最后加入200 ml 1M的NaOH，混匀，室温放置过夜，使其自溶。
(注：不需要定容，严格按步骤操作。
)5. Buffer P3 (1000ml)：秤取294.42g乙酸钾，溶于800ml DDW 中，用冰醋酸调节pH值为5.5，定容至1000ml。
6. Buffer QBT（1000ml）：分别称取NaCl 43.83g，MoPS 10.46g，加入600ml DDW，用NaOH调节pH值为7.0，然后加入150ml 异丙醇，定容至1000ml。
7. Buffer QC（1000ml）：分别称取NaCl 58.44g，MoPS 10.46g，加入600ml DDW，用NaOH调节pH值为7.0，然后加入150ml异丙醇，定容至1000ml。
8. Buffer QF（1000ml）：称取NaCl 73.05g，量取2M Tris-HCl 25ml，加入800ml DDW，用NaOH调节pH值为8.5，然后加入150ml 异丙醇，定容至1000ml。
9. 10×TE Buffer：量取1MTris-HCl(pH8.0) 100ml，500mM EDTA(pH8.0) 20ml，加入800mlDDW，均匀混合后定容至1L。
无内毒素质粒大量快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://EndoFree Plasmid Maxi Kit无内毒素质粒大量快速提取试剂盒目录号：PL13试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存10次(PL1301)RNaseA（10mg/ml）-20℃750µl溶液P1 4℃77 ml溶液P2 室温77 ml溶液N3 室温77 ml内毒素清除剂-20℃25 ml漂洗液WB 室温25 ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温20 ml吸附柱DC 室温10个收集管（50ml）室温10个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
内毒素清除剂常温运输，4度可以保存一个月，长期保存放-20℃。
储存事项:1.第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会混杂有微量RNA 残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，粗提物通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心除去内毒素，然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点：1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
快速，方便，从150-300ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-1.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90 %。
无内毒素质粒大提取试剂盒中文操作指南
无内毒素质粒大提取试剂盒中文操作指南（omega）详细内容：E.Z.N.A. ® Fastfiler Endo-free Plasmid MaxiprepProtocol(无内毒素质粒大抽提)1. 在1-4升的培养瓶中加入200-500ml LB培养基,然后加入菌种于37℃摇床培养12-16小时；Tip:为获得最好的结果，请接种1ml培养过夜的菌种（12-16hr）。
并强烈推荐使用E.coli(endA-)品系用于常规的质粒提取，如DH5a和JM109。
注意：菌液的培养时间不能超过16小时；2. 收集200ml培养基至适当的离心管，室温下，3,500-5,000×g离心10分钟沉淀；3. 吸尽并去除培养基，用干净的吸水纸吸尽壁上多余的液体。
加12.0ml Solution I/RNase A到细菌培养物中，涡旋和枪头抽打细菌以重悬细胞；注：充分重悬细菌沉淀物对获得高产量的质粒是相当关键的。
充分重悬后溶液是均匀的，不存在小块物质；请尽量吸弃残余的培养基以防止稀释加入的溶液；4. 加入12.0ml SolutionII，轻轻颠倒旋转混匀7-10次至获得澄清的裂解液；室温放置3-5分钟可以有是必须的。
避免剧烈振荡混匀而打断染色体DNA，降低质粒的纯度。
（Solution II使用后请盖紧盖子且于室温保存）；5. 将取出Lysate Clearance Filter Syrine活塞，将其放置于架子上；6. 加入12 ml Neutralization Buffer，轻轻颠倒混匀几次至出现絮状沉淀。
这可能需要放置2-3分钟并间断颠倒混匀；7. 立即将裂解液转移到lysate Clearance Filter Syrine中，垂直放置5分钟。
这时白色的絮状沉淀物会漂上溶液的上层，裂解液可能开始流出过滤器，用新的50ml管子收集细菌裂解液，并将活塞轻轻插入过滤器中；8. 握住过滤器，轻轻推动活塞将裂解液打到收集管中；注意不要将任何杂质打到收集管中；9. 加入0.1体积的ETR Solution（蓝色）到收集液中，轻轻颠倒旋转混匀7-10次，冰浴放置20分钟；注意：加入ERT Solution后，溶液应变得浑浊，但冰浴静置后溶液应是澄清的。
Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书
Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书AxyPrep质粒DNA⼩量试剂盒本试剂盒采⽤改进的SDS碱裂解法，结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的⽅法达到快速纯化质粒DNA的⽬的。
适合于从1-4 ml细菌培养物中提取多⾄20 µg⾼纯的质粒DNA，⽤于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分⼦⽣物学实验。
⼀、试剂盒组成、贮存、稳定性Cat. No. AP-MN-P-4 AP-MN-P-50 AP-MN-P-250制备次数 4 preps 50 preps 250 preps250 制备管 4 502502 ml离⼼管 4 502501.5 ml离⼼管 4 50RNase A 10µl30µl150µlBuffer S1 2 ml 15 ml 75 mlBuffer S2 2 ml 15 ml 75 mlBuffer S3 2.5 ml 21 ml 105 mlBuffer W1 2.8 ml 28 ml 135 mlBuffer W2 concentrate 2.4 ml 24 ml 2×72 mlEluent 1 ml 5 ml 25 ml说明书 1 1 1 RNase A：50 mg/ml，室温可贮存6个⽉，长期贮存于-20°C。
Buffer S1：细菌悬浮液。
加⼊RNase A后，混合均匀，4°C贮存。
Buffer S2：细菌裂解液（含SDS/NaOH），室温密闭贮存。
Buffer S3：中和液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使⽤前，按试剂瓶上指定的体积加⼊⽆⽔⼄醇（可⽤100%⼄醇或95%⼄醇）。
混合均匀，室温密闭贮存。
Eluent：2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5，室温密闭贮存。
⼆、注意事项Buffer S2、Buffer S3和Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶⼿套和眼镜，避免沾染⽪肤、眼睛和⾐服，谨防吸⼊⼝⿐。
AxyPrep质粒大量提取试剂盒操作步骤
AxyPrep质粒大量提取试剂盒操作步骤AxyPrep Maxi Plasmid Kit (AXYGEN) AxyPrep质粒大量提取试剂盒操作说明实验准备:, 检查Buffer S1中是否已加入RNaseA。
, 检查Buffer W2中是否已加入无水乙醇。
, 检查Buffer S2是否出现沉淀，如有沉淀，在37?水浴中溶解沉淀，再平衡至室温。
,注意,Buffer S2不用时请立即盖紧，防止被空气中的CO中和。
, 2, 将Buffer S1，Buffer S3K和Buffer B放置4?预冷。
, 将洗脱液Eluent放置65?水浴中预热。
实验步骤:1. 将待提取的质粒对应菌液在5mL含有对应抗性的LB培养液中扩增培养过夜。
2. 次日，将5mL培养后的菌液接种至200mL含有对应抗性的LB培养液中扩增培养过夜。
3. 将菌液分装至5个50mL离心管中，每管40mL，4? 3000×g离心5min，彻底弃净上清。
4. 加入Buffer S1(已加RNaseA，4?预冷)，每管4mL，共20mL，涡旋充分重悬菌体。
5. 加入Buffer S2，每管4mL，共20mL，温和晃动混匀，室温作用5min。
6. 加入Buffer S3K(4?预冷)，每管4mL，共20mL，温和晃动混匀，室温作用5min。
7. 加入Buffer B(4?预冷)，每管4mL，共20mL，温和晃动混匀。
8. 4?10000×g离心10min，小心取上清至新管，最终合并为2管。
9. (可选步骤)再次4? 10000×g离心10min，小心取上清至新管。
10. 将上步收集的上清全部加入Maxiprep syringe filter中，将注射器芯从上方推入，下方用纯化柱(Maxiprep column)盛接滤液。
11. 推注注射器芯，将液体滤至纯化柱中，同时在纯化柱下方连接输液器(预先剪除输液针)，并用10mL注射器负压反复抽吸，直至液体滤尽。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
Plasmid Maxi Kit
质粒大量快速提取试剂盒
目录号：PL11
试剂盒组成、储存、稳定性：
试剂盒组成保存10次(PL1101)
RNaseA（10mg/ml）－20℃750µl
溶液P1 4℃77 ml
溶液P2 室温77 ml
溶液N3 室温77 ml
漂洗液WB 室温25 ml X 2
第一次使用前按说明加指定量乙醇
洗脱缓冲液EB 室温20 ml
吸附柱DC 室温10个
收集管（50ml）室温10个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
1.第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100μg/ml）
置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热
几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时
盖紧盖子。
产品介绍：
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗
脱。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附
量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
快速、方便，从
150-300ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-1.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、
体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1.本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue、Top10和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。
所
用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株，核酸酶含量丰富，应购买本公司生产的高纯度质粒大量快速提取试剂盒(PL1201)。
2.所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达到12,000 x g，带
50ml转头的台式离心机。
3.提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
如果所提质粒为低拷贝
质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、N3的用量，洗脱缓冲液应在70℃预热。
可以适当的延长吸附和洗脱的时间，提高提取效率。
4.得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
OD260
值为1相当于大约50μg/ml DNA。
电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。
本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5.质粒DNA确切分子大小，必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。
处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
6.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。
也可以使用水洗
脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。
用水洗脱，质粒应该保存－20℃。
质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：
⇨第一次使用前请先在漂洗液WB瓶中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
⇨将RNase A全部加入溶液P1中，混匀。
每次使用后置于2-8℃保存。
1.取150-200 ml (最多不超过300 ml)过夜培养的菌液，12,000 x g（约10,000rpm），
离心1-2分钟，尽可能的倒干上清，收集菌体。
收集超过50毫升菌液，可以离心弃上清后，在同一个50ml管内加入更多的菌液，重复步骤1，直到收集到足够的菌体。
2.用7.5ml溶液P1重悬菌体沉淀，移液器吹打或者涡旋振荡至彻底悬浮。
如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。
3.加7.5ml的溶液P2，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解，室温放置4-5分钟。
温和地混合，不要剧烈震荡，以免基因组DNA剪切断裂！所用时间不应超过5分钟！以免质粒受到破坏。
此时菌液应变得清亮粘稠。
如果很浑浊，可能由于菌体过多，裂解不彻底，应减少菌体量。
4.加7.5ml溶液N3，立即温和地上下翻转6 -8次，充分混匀此时会出现白色絮状沉
淀。
12,000 x g离心10-15分钟，小心取上清至新管，避免吸取到漂浮的白色沉淀。
加入溶液N3后应该立即混匀，以免产生SDS的局部沉淀。
5.向上清中加入0.5体积异丙醇（约10ml）后充分颠倒混匀后分多次（每次不超过
15ml）转入吸附柱DC中（吸附柱放入收集管中），12,000 x g离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
直到所有混合溶液通过此吸附柱。
6.加入10ml漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 x g离心1分钟，
弃掉废液。
再加入10ml漂洗液WB，重复漂洗一次。
7.将吸附柱DC放回空收集管中，最高速（最好大于12,000 x g）离心3分钟以干燥
基质膜上残留乙醇，用枪头吸除内圈压环和柱壁之间可能残留的乙醇，打开盖子室温晾干3-5分钟。
该步骤为彻底去除吸附柱中残留乙醇，残留乙醇抑制下游反应并且严重降低洗脱效率，降低质粒产量。
8.取出吸附柱DC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加1-2ml洗脱
缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热可提高产量），室温放置3分钟，12,000 x g离心3分钟。
推荐：为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置3分钟，12,000 x g离心3分钟。
洗脱两遍可提高浓度约10%。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要质粒浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是需注意体积过小降低质粒洗脱效率，减少质粒产量（最小不应少于1ml）。