高效液相色谱的日常使用和维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种高效分离和分析样品成分的仪器，广泛应用于医药、化工、环境监测、食品等领域。
在使用HPLC 的过程中，保养和维护工作非常关键。
良好的保养和维护能够延长设备寿命，保证分析结果的准确性和可靠性。
本文将就HPLC的保养和维护进行较全面的探讨，以期为相关使用者提供帮助和指导。
一、日常保养1. 清洗：定期对HPLC进行清洗是保持设备正常工作的关键。
清洗前，首先应关闭色谱柱开关，拔掉电源，然后用无水乙醇清洗柱及管路，最后用纯水冲洗干净。
在一些需要不断更新样品溶剂的实验中，还需要对溶剂瓶、进样器等部件进行定期清洗。
2. 检查密封性：检查HPLC各接口的密封性，确保各部件之间无漏气、不漏液，避免因为漏气或漏液造成分析数据的误差。
3. 检查压力：在使用HPLC过程中，经常检查色谱柱前后的压力表读数，确保在正常范围内。
如果发现异常，应及时排查原因并进行处理。
4. 校准：定期对HPLC进行校准，保证设备和检测器的准确性。
可以借助标准物质进行定期的校准维护。
5. 检查溶剂余量：定期检查溶剂瓶的余量，确保实验过程中不会因为溶剂用尽而中断。
6. 检查灯管：若HPLC设备配备有紫外-可见检测器，需要定期检查和清洗灯管，以保证检测器的灵敏度和准确度。
二、周期性维护1. 良好的使用环境：保持HPLC设备使用环境的干净整洁，避免灰尘、化学气体等对设备造成影响。
需要注意设备周围的温度和湿度，避免影响设备的正常工作。
2. 正确存放标准溶液：在使用标准溶液时，要注意存放条件，避免因为存放不当导致标准溶液的失效。
3. 定期更换消耗品：HPLC设备的使用需要大量耗材，比如柱、进样器、检测器灯管等，这些耗材的使用寿命有限，需要定期更换，以保证设备的正常工作。
4. 记录维护情况：建立设备的维护记录，记录设备的使用情况、维护情况以及出现的问题及处理情况，为设备的维护提供参考。
GPC_3_GPC仪器操作日常维护
GPC_3_GPC仪器操作日常维护GPC（Gel Permeation Chromatography）是一种高效液相色谱技术，用于分析和测定聚合物的相对分子质量和分子量分布。
为了确保GPC仪器的良好性能和准确性，日常维护是必不可少的。
下面是一些常见的GPC仪器操作日常维护措施：1.仪器外观清洁：定期清洁仪器外观，使用柔软的布或棉花棒沾湿丙酮或去离子水擦拭仪器表面，确保表面无菌。
注意避免使用酸、碱、有机溶剂等对仪器造成损害的物品。
2. 柱的使用和保养：根据样品的性质选择合适的Gel柱，并保证柱的保质期和储存条件。
使用前，用洗脱剂进行预浸泡，并检查是否有视频残留。
使用后，用洗脱剂进行洗涤，并储存于柱条件的保护剂中。
3.GPC柱的再生：当柱出现分离能力下降时，可以进行柱的再生。
使用再生溶剂（如甲醇、二甲苯等）循环过柱，去除附着在柱上的杂质。
再生后，用洗脱剂进行冲洗，恢复柱的性能。
4.密封件和连接件的检查：定期检查仪器的密封件和连接件，如流向阀门、T型连接件等。
如发现有损坏、松动或泄漏的情况，及时更换或修理，确保GC系统的正常运行。
5.流动相和洗脱剂的准备：根据样品的需要，准备适当的流动相和洗脱剂。
注意检查溶剂的纯度和储存条件，以确保溶剂质量良好。
6.检测器的校准和维护：定期检查和校准检测器，如折射率检测器、光散射检测器等。
根据仪器操作手册的要求，进行校准和维护，确保检测器的准确性和稳定性。
7.仪器性能验证：定期进行仪器性能验证，如通过测定标准物质的回收率、峰形和峰高等参数来评估仪器的准确性和重现性。
根据验证结果，相应调整和优化仪器的设置。
8.数据保存和备份：对实验数据进行及时保存和备份，避免数据丢失。
使用电脑软件进行数据分析和处理时，注意检查软件的版本和更新，并保证数据的准确性和一致性。
总之，仪器操作日常维护是保证GPC仪器正常运行和获得准确结果的重要环节。
只有通过有效的日常维护，我们才能确保GPC仪器的长期稳定性和可靠性。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，在科研实验和工业生产中都有广泛的应用。
为了保证仪器的正常运行和数据的准确性，必须对高效液相色谱仪进行定期的保养和维护。
本文将从日常保养、仪器维护和故障排除等方面对高效液相色谱仪的保养与维护进行浅谈。
一、日常保养1. 清洗进样口：进样口是高效液相色谱仪中最容易受到污染的部件之一。
在每次使用完毕后，应用纯水进行适当的清洗，以防止残留物的积累影响仪器的使用寿命。
2. 清洗流动相管路：流动相是高效液相色谱仪的核心组成部分之一，其管路中的积聚物可能导致流动相的流动受阻、流动相质量下降等问题。
定期对流动相管路进行清洗是十分必要的。
一般可以使用甲酸、乙酸或无机酸等进行清洗，然后用纯水反复冲洗，最后用流动相进行冲洗，确保完全清洗干净。
3. 更换柱芯：柱芯是高效液相色谱仪中最易损坏的部件之一，一旦柱芯损坏或堵塞，都会导致分离效果下降、峰形不良等问题。
定期更换柱芯是保证分析结果准确的关键。
一般情况下，柱芯的使用寿命为100～400次，具体情况视样品性质和柱芯类型而定。
二、仪器维护1. 检查液路连接：高效液相色谱仪中的液路连接是保证仪器正常运行的关键。
定期检查液路连接是否紧固，确保没有泄露现象。
若发现泄露，应及时修复或更换相关部件。
2. 校准仪器：高效液相色谱仪的准确性和稳定性是保证分析结果准确的重要因素。
在使用高效液相色谱仪之前，应对仪器进行校准。
一般可以使用标准样品进行校准，并根据校准结果进行相应的调整。
3. 检查电源和供液系统：电源和供液系统是高效液相色谱仪正常运行的基础。
定期检查电源和供液系统是否正常运行，确保电源稳定、供液顺畅。
三、故障排除1. 泵压不稳：高效液相色谱仪中的泵压是保证流动相流动的关键因素，若泵压不稳定，会导致流动相流速波动、峰形不良等问题。
可能的原因包括：流动相泵密封件老化、流动相泵进水等。
解决方法：更换密封件、清洗泵柱、检查进样口阀门等。
保养维护高效液相色谱仪的要点
保养维护高效液相色谱仪的要点高效液相色谱仪（High-performance liquid chromatography，HPLC）是一种常用的分离和定量分析仪器。
为了保证其正常运行和延长使用寿命，需要进行定期的保养和维护。
下面是保养维护高效液相色谱仪的主要要点：1.保持色谱仪周围环境清洁干燥：色谱仪应该放置在无尘、无水、无振动、无干扰的环境下。
养成定期清理仪器外壳和工作台面的习惯，防止灰尘和异物进入仪器内部。
2.定期检查和更换耗材：液相色谱柱是色谱仪的核心部件，需要定期检查柱子的状况，包括柱液的流量、背压、峰形等参数。
当出现异常时，需要及时检查和更换柱子。
此外，溶剂瓶、垫片、接头和密封件等耗材也需要定期检查和更换。
3.保持良好的进样系统：进样系统是色谱仪样品进入柱子的关键部件。
需要注意致样器、进样针和进样管的清洁和灵敏度。
定期检查进样系统的各个部件，保证样品进入柱子的准确性和稳定性。
4.注意溶剂和流速的选择：溶剂和流速的选择对色谱分离的质量和分析结果有很大的影响。
应该选择优质的溶剂，在使用过程中定期更换，并注意保持合理的流速。
在使用有机溶剂时，要避免过高浓度的有机溶剂对仪器造成损害。
5.定期校准和质控：定期校准色谱仪可以保证分析结果的准确性和可靠性。
常见的校准包括柱液流量校准、波长和检测灵敏度的校准等。
此外，在样品分析过程中应该加入合适的质控标准品，并定期检查质控品的回收率和重复性。
6.注意样品的准备和处理：样品的准备和处理对HPLC分析结果有直接影响。
样品准备过程中应注意去除杂质和颗粒，避免对色谱柱和检测器造成污染或损坏。
对有机样品，要避免过高浓度的有机溶剂对进样系统造成损害。
7.定期维护仪器：除了日常保养，还应定期对仪器进行维护和检修。
定期检查和更换仪器中的各种装置、阀门、泵、检测器等关键部件。
根据仪器厂家的推荐，进行润滑和清洗等维护工作，保持仪器的正常运行。
8.进行严格的记录和文档管理：在使用和维护过程中应该做好记录和文档管理。
高效液相色谱仪在使用和维护中的注意事项
高效液相色谱仪在使用和维护中的注意事项高效液相色谱仪（HPLC）是一种常见的分析仪器，用于分离、检测和定量化合物。
在使用和维护HPLC时，需要注意以下几点：1. 样品处理在样品处理过程中，必须避免样品受到污染，否则会影响分析的准确性。
因此，在样品的制备和处理过程中应该使用高质量的试剂和纯水，并避免使用有机溶剂和其他可能对分析产生干扰的物质。
2. 色谱柱选择选择合适的色谱柱是非常重要的，因为不同的色谱柱会对分析结果产生影响。
在选择色谱柱时，应该考虑要分析的样品和分离的目标化合物，以及柱的反相、离子交换、凝胶过滤等不同类型。
3. 溶液配制HPLC中的溶液应该严格按照配方进行配制，以确保分析结果的准确性。
溶液中可能存在的离子、杂质或气泡都会对流速、峰形和灵敏度产生影响。
4. 色谱条件在进行分析时，需要根据样品和柱的特性，选择适当的流速、洗脱剂和温度等条件。
这些条件对分析结果的准确性和分离效率都有很大的影响。
5. 维护和保养为了保证仪器的长期稳定和良好工作状态，需要定期进行维护和保养。
维护包括冷却系统、压力检测、检测器等组件的检查和清洗。
保养包括柱的定期调整和更换、溶液的更换等。
在使用和维护HPLC时，需要严格按照实验室规程操作，注意安全和环保，并做好记录和统计分析工作。
只有保证仪器操作正确、保养到位，才能获得准确、可重复的分析结果。
6. 检测器选择HPLC检测器的选择对分析结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。
常用的检测器包括紫外线（UV）检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
根据需要分析的化合物的性质进行选择。
7. 校正和标定在使用HPLC进行分析之前，必须进行校正和标定，以确保分析结果的准确性。
校正过程中通常涉及标准曲线的制备、内标物的选择和添加等。
8. 数据照实记录HPLC分析结果的准确性需要依赖于实验数据的准确记录。
在使用过程中应保持谨慎和可重复性，制定实验方案，不断记录实验数据，并评估结果的准确性。
高效液相色谱仪的维护和保养
高效液相色谱仪的维护和保养高效液相色谱仪是一种复杂的的分析设备，需要定期进行维护和保养，以确保其长期稳定运行和准确结果。
以下是一些建议的维护和保养步骤：
1、定期清洗系统：定期清洗系统可以清除色谱柱和流路中的残留物质，包括流动相、样品和清洗液。
这可以防止堵塞和污染，并保持系统的清洁和高效。
2、定期更换流动相：流动相是高效液相色谱仪运行的关键组成部分。
建议定期更换流动相，以避免其变质或受到污染。
3、定期检查和更换泵密封垫：泵密封垫是防止流动相泄漏的关键部件。
建议定期检查和更换泵密封垫，以避免其磨损或老化。
4、定期校准系统：定期校准系统可以确保色谱仪的准确性和重复性。
建议定期进行校准，并使用已知的标准物质进行校准。
5、定期检查和更换流路配件：流路配件是高效液相色谱仪的重要组成部分，需要定期检查和更换。
例如，过滤器、单向阀、密封圈等都需要定期更换或修理。
6、保持电源和仪器连接稳定：保持电源和仪器连接稳定可以避免仪器故障和数据失真。
建议使用UPS电源，并定期检查电缆和接口是否松动或损坏。
7、定期进行软件和硬件更新：高效液相色谱仪需要进行软件和硬件更新以保持其最新状态和功能。
建议定期检查和更新软
件和硬件。
总之，高效液相色谱仪的维护和保养是非常重要的的工作，需要专业人员进行定期维护和保养。
建议用户根据自身的实际情况，制定一个合理的维护和保养计划，并严格执行。
高效液相色谱使用与维护
高效液相色谱法与经典液相色谱法
高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最 大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。 高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百 倍。由于经典色谱是重力加料，流出速度极慢； 而高效液相色谱配备了高压输液设备，流速最高 可达 103cm/min。对氨基酸分离，用经典色谱 法，柱长约170cm，柱径0.9cm，流动相速度为 30cm/h，需用20多小时才能分离出20种氨基酸； 而用高效液相色谱法，只需lh之内即可完成。
泵，将两种不同极性的溶剂按 一定的比例送入梯度混合室， 混合后进入色谱柱。
内梯度: 一台高压泵, 通过比
例调节阀，将两种或多种不同 极性的溶剂按一定的比例抽入 高压泵中混合。
进样器
通常使用耐高压的六通阀进样装置，其结构如 图所示：
检测器
在液相色谱中，有两种基本类型的检测器。 一类是溶质性检测器，它仅对被分离组分的物 理或化学特性有响应，属于这类检测器的有紫 外、荧光、电化学检测器等。另一类是总体检 测器，它对样品和流动相总的物理或化学性质 有响应，属于这类检测器的有示差折光，电导 检测器等。
4、基线平稳，压力波动不超过1 bar （ 105Pa）后，进样分析 5、样品分析完毕，冲洗系统、关机 体会：充分利用其自动化功能进行批处 理、不同方法间自动转换，可节约时间。
极性问题
溶剂 极性
水 甲醇 异丙醇 乙腈 CNH2 THF ROH 乙酸乙酯 RCN 醛/酮 CH2Cl2 N(R)2 NO2 CHCl3 卤代烷烃 NH3X/ArOH/RCOOH
z 特点
{无需各组份都被检出、洗脱 {需要标样 {标样及样品测定的条件要一致 {进样体积要准确
0 .0 0 0 .0 0 0 .5 0 1 .0 0 1 .5 0 2 .0 0 2 .5 0 3 .0 0 3 .5 0 4 .0 0 4 .5 0 5 .0 0 5 .5 0 6 .0 0 6 .5 0 7 .0 0
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（HPLC）是一种常用的分析仪器，广泛应用于医药、化工、环境监测等领域。
为了确保HPLC仪器的正常运行和分析结果的准确性，保养和维护工作是至关重要的。
下面将从各个方面浅谈HPLC仪器的保养与维护。
一、日常清洁HPLC仪器在长时间使用后，会有一些污垢积聚在各个部件上，为了保证正常运行，需要经常进行仪器的清洁工作。
需要对仪器外壳进行清洁，可用棉布蘸取少量的乙醇进行擦拭，注意不要使用含有颗粒的清洁剂，以免划伤表面。
对移液器、注射器等部件进行清洁，可以用纯水或乙醇进行清洗，并用吹气枪将部件表面的水分吹干。
需对进样针、柱和检测器进行清洁，确保各个部件的表面保持干净。
二、流路清洗HPLC仪器的流路是非常关键的部件，需要经常进行清洗以保证分析结果的准确性。
需要使用纯水对流路进行冲洗，然后使用一定比例的甲醇和水混合液进行清洗，最后再用纯水进行冲洗，以确保流路内没有残留的有机溶剂。
还需要注意定期更换流路上的过滤膜和密封圈，确保流路畅通，避免堵塞和泄漏的情况发生。
三、柱的保养HPLC柱是色谱分析的核心部件，需要经常进行保养和维护以确保分析结果的准确性。
需要在柱使用前对其进行条件耐用性测试，以确定柱的性能是否符合要求。
在使用过程中，要注意避免超压和超温，避免对柱产生损害。
需要及时更换柱前的过滤器，避免杂质进入柱内影响分析结果。
需要注意柱的存放条件，避免受到光照和高温的影响，导致柱的性能降低。
四、检测器的调试HPLC仪器的检测器对分析结果的准确性有着重要影响，需要定期进行调试和校准工作。
需要对检测器进行零点漂移的校准，以确保检测器读数的准确性。
需要对检测器的灵敏度进行调节，以确保检测器对样品的响应能力。
需要注意避免检测器的震动和碰撞，避免损坏检测器内部的光学组件。
五、维护记录对HPLC仪器进行日常保养和维护工作时，需要及时记录下关键数据和操作情况，以便日后进行分析和查找问题。
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高效液相色谱的日常使用和维护
高新科技与现代产业的迅猛发展，促进了以高效液相色谱（HPLC）为代表的复杂样品的分离分析和分离纯化仪器的飞速发展。
HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广、分析检测限低等优势，在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。
高效液相色谱仪是一种高端检测仪器，它精密快速，有效准确检测的同时就要求我们一定要严格正确使用仪器，定期科学有效地维护仪器，只有这样仪器才能长久持续有效使用。
但是从目前实际使用情况看，与高效液相色谱仪的应用及产品技术升级的发展速度相比，其使用和维护则相对比较滞后，从而造成对仪器的滥用和对耗材不必要的浪费。
主要原因是由于对于仪器使用操作者的培训侧重于仪器的初步使用，忽略了仪器的后续培训及维护操作学习；其实很多高效液相色谱都是国外进口仪器，英文版本软件对于大多数理工科毕业的仪器操作者也是一个障碍。
笔者根据自己的工作经验，以岛津LC-20AT液相色谱仪为例，阐述液相色谱仪在使用时应注意的几个问题及日常使用后的仪器维护基本事项，并对仪器使用过程中容易遇到的问题进行分析，提出解决方法。
1、高效液相色谱仪的组成
高效液相色谱仪主要是由输液系统、进样器、色谱柱、检测器和色谱软件数据处理系统组成。
1.1输液系统
输液系统主要包括溶液贮器、在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。
溶液贮器用于存放符合HPLC要求的流动相。
在线脱气装置主要功能是流动相在进入柱子前排除气泡。
高效液相色谱柱的填料颗粒较小，通过2～5mm的色谱柱受到的流动阻力很大，因此需要通过高压输液泵抽取流动相输送至色谱柱。
高压泵按输液性能可分为恒压泵和恒流泵两种。
按机械结构又可分为液压隔膜泵、气动放大泵、螺旋注射泵和往复柱塞泵四种，前两种为恒压泵，后两种为恒流泵。
恒压泵可以输出稳定不变的压力。
在一般的分析仪器中，由于系统阻力不变，恒压亦可达到恒流的效果。
但是当系统阻力发生变化时，输入压力即使不变，流量却可随阻力而变化。
恒流泵则无论系统阻力如何变化都可保证其流量基本不变。
在色谱实际操作中，系统阻力可能随着运行时间的增加产生微小的改变，因此恒流泵比恒压泵更优越。
然而在泵和柱系统所允许的最大压力下操作时，恒压泵较为安全方便。
梯度洗脱装置是采用两种及以上不谈性质的溶剂，在分离过程中按照一定的程序设定改变流动相组成的一种洗脱模式。
通过流动相极性的变化来调整被分离样品的选择因子和保留时间，可以使柱系统具有最佳的选择性和最大的峰容量。
梯度洗脱能够提高分析成分之间的分离度，缩短分析周期，降低最小检测限，提高分析精度。
对于复杂混合物，特别是保留值相差较大的样品的分离，梯度洗脱是一种极为有效的分析方法。
1.2进样器
进样系统是将分析样品送入色谱柱的装置，分为手动、自动进样器两种。
手动进样器配有20～100μL的定量环。
1.3色谱柱
色谱柱以液体为流动相，以广义的固相为固定相来进行分析样品的分离工作，它是高效液相色谱仪的心脏，柱效能高、选择性好是对色谱柱的基本要求。
色谱柱按照分离模式大致可以分为：正相色谱柱和反相色谱柱。
正相色谱柱通常以硅胶(Silica)、胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)等极性官能团的)非极性化合物的分离，样品一般能溶于有机溶剂。
反相色谱柱通常以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相为填料；使用极性较强的流动相，通常为水缓冲液与甲醇、已腈等混合物；适用于大多数有机化合物，生物大、小分子，样品一般能溶于水。
以C8、C18反相色谱柱为代表。
1.4检测器
检测器、泵与色谱柱是组成HPLC的三大关键部件。
检测器是将色谱柱分离出的样品的物理或者化学特性转换为可以测量的电信号，通过色谱图记录下来，由色谱图中的峰形状判断分离效果，依据标物物质、分析样品的色谱图中的出峰时间、峰面积分别对样品进行定性、定量分析。
常用的检测器主要有紫外吸收检测器（UVD）、示差折光检测器（RID）、荧光检测器（FD）。
2、高效液相色谱仪的日常维护
2.1高效液相色谱仪器的开机、关机注意事项。
一切分析准备工作做好后，依次按顺序打开稳压电源、高压输液泵、柱温箱、检测器，待以上各部件自检结束后，打开连接仪器的电脑，启动工作软件。
仪器分析工作结束后，关闭工作软件，再依次按顺序关闭检测器、柱温箱、高压输液泵。
2.2对流动相的要求
液相色谱所用的流动相一般为低沸点有机溶剂与水或者缓冲溶液的混合物。
为保证液相色谱仪器的正常使用，所有流动相必须是色谱级的，且经过过滤杂质、排除气泡后装入干净的流动相贮存瓶中待用。
2.2.1流动相的物理性能要求
对分析物要有足够的溶解能力，以利于提高检验的灵敏度；流动相的黏度要小，以保证合适的柱降压；流动相的沸点要低，以利于制备分离时样品的回收；
2.2.2流动相的温度
一般以硅胶为基质的色谱柱最高使用温度不超过60℃，以低于40℃为宜。
温度过高会加速键合相水解和硅胶的溶解，从而使填料性质改变，柱塌陷，降低柱效。
最低使用温度不超过0℃。
2.2.3流动相的过滤
所有流动相在使用前都必须经过0.45μm（或0.22μm）的有机相/脂溶性和水相（水溶性）滤膜过滤，以除去杂质微粒。
2.2.4流动相的脱气
液相色谱所用到的流动相必须预先脱气，否则容易在系统内产生气泡，影响泵的工作，影响基线的稳定性。
此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相反应。
溶解氧能与某些有机溶剂（如甲醛、四氢呋喃）形成有紫外吸收的络合物，提高背景吸收，会在梯度洗脱时造成基线漂移或形成鬼峰。
常有的脱气方法有以下四种：
（1）在线真空脱气法
把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，使流动相在进入输液泵前脱气，此法效果较好，尤其适用于多元溶剂体系。
（2）超声波脱气法
此法是实验室较常用的一种方法，将配置好的流动相连同容器一起放入超声波水浴中超声15至30分钟。
（3）抽真空脱气法
使用微型真空泵，降压至0.05～0.07MPa即可出去溶解的气体。
由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故对于多元溶剂体系应该先预先脱气后再进行混合，以保证混合后的
组分不变。
2.3泵的维护
含有缓冲盐的流动相不能保留在泵内，尤其是停泵过夜或更长时间。
分析结束后一定要先用纯水冲洗泵，然后再换合适溶剂冲洗（一般反相键合固定相，可以是甲醇或者甲醇和水溶液）。