肠道菌群鉴别
肠道菌群的鉴定
鉴别肠道菌群的实验方案一、仪器与试剂玻片，接种环，生理盐水，酒精灯，结晶紫溶液，卢戈氏染液，石炭酸-复红溶液，沙黄液，光学显微镜，二甲基氨基苯甲醛试剂，葡萄糖蛋白胨水培养基，甲基红试剂（甲基红0.02g，95%酒精60mL，蒸馏水40mL），6%α-萘酚酒精溶液，40% KOH，铵盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源的培养基，层析滤纸，正丁醇，甲酸，1.5%乳酸，1.5%乙酸溶液，3%溴甲酚蓝酒精溶液，层析缸，需氧血琼脂平板，厌氧血琼脂平板，七叶苷培养基，胆汁七叶苷培养基，65g/L NaCl血清肉汤，PYR试剂，DNA琼脂平板，1 mol/L盐酸，MRS培养基，X-Gal。
二、实验步骤：1.观察（1）形态、染色和结构中等大小，两端钝圆的革兰阴性杆菌，无芽胞，医学教育`网搜集整理多数为周鞭毛（除外志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭毛），大多有菌毛，少数有荚膜或包膜。
（2）培养特性需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。
（3）生化反应特点生化反应活泼。
乳糖发酵试验：肠道非致病菌+，肠道致病菌-（除外变形杆菌）。
肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阳性2.革兰染色法（1）涂片：取玻片在火焰上稍微加温，以清洁纱布擦净，放置桌上，左手握培养皿，右手持接种环，用无菌接种环取生理盐水一滴，置于载玻片的中央，再用接种环在火焰上灭菌，待冷却后，取培养细菌少许与盐水混匀，直接取1~2环菌液作涂片即可，涂片应厚薄均匀。
接种环采菌后，要通过火焰灭菌才能放下。
（2）干燥：目的是是菌体水分慢慢蒸发，固定菌形。
涂片最好在室温中自然干燥，必要是将标本面向上，小心断续在弱火高处略烘，以助水分蒸发；但切勿紧靠火焰，以致标本烤枯，不堪检视。
（3）固定：手执玻片一端，标本面向上，在火焰外层快速地来回通过三次，共2-3秒，以玻片反面触及皮肤不觉过烫为度。
冷却后，染色。
目的是杀死细菌，是菌体与玻片粘附较牢以及改变对染料的通透性，因活的细菌一般不能使许多染料进入细胞。
肠道菌的分离与鉴定
肠道菌的分离与鉴定一、背景介绍肠道菌是指生活在人类肠道内的微生物群落，其中包括细菌、真菌、病毒等多种微生物。
这些微生物与人体之间存在着密切的相互作用关系，对于人体的健康和疾病发展都有重要影响。
二、肠道菌的分离方法1. 粪便样品采集：粪便是肠道菌分离的主要来源，采集前应注意卫生和消毒。
2. 菌落计数：将粪便样品经过稀释后接种在含有富营养成分的琼脂平板上，培养一段时间后进行菌落计数。
3. 纯化：从培养出来的单个菌落中挑选纯化出目标细菌。
4. 鉴定：通过形态学特征、生理生化特性和分子生物学方法等手段对目标细菌进行鉴定。
三、肠道菌的鉴定方法1. 形态学特征鉴定：通过观察目标细菌在琼脂平板上形成的形态和颜色等特征来进行初步鉴定。
2. 生理生化特性鉴定：通过对目标细菌的代谢特征、生长条件和对不同物质的反应等进行测试来进一步鉴定。
3. 分子生物学方法鉴定：通过PCR扩增目标细菌的特异性基因序列，或者进行全基因组测序等方法来进行高精度的鉴定。
四、肠道菌分离与鉴定的意义1. 研究肠道微生物群落结构和功能，探究其与人体健康和疾病发展之间的关系。
2. 为临床诊断提供参考依据，如对于某些疾病的诊断和治疗方案制定等。
3. 为微生物资源库建设提供重要数据，有助于保护和利用微生物资源。
4. 对于工业发展也有一定作用，如利用某些肠道菌进行发酵制品生产等。
五、肠道菌分离与鉴定存在的问题1. 样品来源不确定：粪便样品来源受到个体差异、食品摄入和环境污染等多种因素影响，可能导致结果不稳定。
2. 培养条件不确定：培养条件也会影响菌落的形成和生理生化特性表现，可能导致鉴定结果有误。
3. 鉴定方法存在局限性：不同的鉴定方法对于不同细菌有不同的适用范围，可能会漏检或误判。
六、肠道菌分离与鉴定的发展趋势1. 高通量测序技术的应用：利用高通量测序技术可以对肠道微生物群落进行全面深入地研究，揭示其更多的结构和功能信息。
2. 人工智能技术的应用：通过人工智能技术可以对大量数据进行处理和分析，提高分离和鉴定效率和准确性。
大肠菌群判定标准
大肠菌群判定标准大肠菌群是一组与粪便污染有关的细菌，其判定标准主要基于它们的特性和在特定条件下的生长情况。
这些细菌通常被称为“大肠菌群”，是因为它们主要存在于人和动物的肠道中，并且与粪便污染密切相关。
大肠菌群的判定标准主要包括以下几个方面：1. 革兰氏阴性无芽胚杆菌：大肠菌群是一群革兰氏阴性无芽胚杆菌，这是它们的基本特性之一。
这种细菌在显微镜下呈现出特定的形态和染色特性，可以通过染色和显微镜观察来确认。
2. 需氧及兼性厌氧：大肠菌群是需氧及兼性厌氧菌，这意味着它们可以在有氧或无氧条件下生长。
在实验室中，可以通过提供适当的氧气条件来培养这些细菌，并观察它们的生长情况。
3. 分解乳糖产酸产气：大肠菌群的另一个重要特性是能够在37℃下分解乳糖，产生酸和气体。
这是通过特定的生化试验来检测的，通常被称为乳糖发酵试验。
在这个试验中，细菌被接种到含有乳糖的培养基中，并在适当的温度下培养。
如果细菌能够分解乳糖并产生酸和气体，那么它们就被认为是大肠菌群的一部分。
基于以上特性，大肠菌群的判定标准通常是通过检测样品中的大肠菌群数量来确定的。
在实验室中，可以使用特定的培养基和条件来培养细菌，并通过计数菌落数量来确定大肠菌群的数量。
不同的样品和检测标准可能有不同的大肠菌群判定标准值，这些值通常是根据经验、科学研究和法规要求来确定的。
大肠菌群不是细菌学上的分类命名，而是一组具有某些特性的细菌的统称。
因此，大肠菌群的判定标准并不是基于细菌的种类或属，而是基于它们的特性和在特定条件下的生长情况。
同时，大肠菌群的数量可能受到多种因素的影响，如样品的来源、处理方式、保存条件等，因此在判定大肠菌群时需要综合考虑各种因素。
肠道菌群检测评价的指标
肠道菌群检测评价的指标
肠道菌群检测评价的指标可以分为以下几个方面：
1. 菌群种类和数量：通过检测肠道内不同种类的菌群数量，可以了解肠道菌群的组成情况。
常见的肠道菌群种类包括双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌等。
2. 菌群多样性：菌群多样性是指肠道内不同菌群种类的数量和比例。
菌群多样性高的人肠道健康状况通常较好，反之则容易出现肠道问题。
3. 菌群平衡：菌群平衡是指肠道内不同菌群种类的数量和比例是否处于一个相对稳定的状态。
菌群平衡失调可能会导致肠道问题，例如菌群失调性腹泻等。
4. 菌群与宿主关系：通过检测肠道菌群与宿主之间的相互作用关系，可以了解肠道菌群对宿主健康的影响。
例如，肠道菌群可以通过产生短链脂肪酸等物质来促进肠道健康。
5. 肠道菌群与疾病关系：通过检测肠道菌群与某些疾病之间的关系，可以了解肠道菌群对疾病的影响。
例如，肠道菌群失调与炎症性肠病等疾病有关。
6. 肠道菌群与药物代谢：肠道菌群与药物代谢有密切关系，可以通过检测肠道菌群对药物代谢的影响来评估肠道菌群的健康状况。
例如，肠道菌群可以影响药物的吸收、分布、代谢和排泄等过程。
综合上述指标，可以全面评估肠道菌群的健康状况，为肠道菌群相关疾病的预防和治疗提供参考依据。
肠道菌群分类及分布(一)2024
肠道菌群分类及分布（一）引言概述:肠道菌群是指在人体的肠道中存在的各种微生物群落。
它们在人体健康中起到至关重要的作用，如维持肠道健康、促进消化吸收和免疫调节等。
本文将从肠道菌群的分类及分布的角度，详细介绍其组成和重要性。
正文内容:1. 常见肠道菌群的分类- 厌氧菌群：厌氧菌适应于低氧环境，如肠道。
常见的厌氧菌有双歧杆菌、梭菌等。
- 好氧菌群：好氧菌能在含氧环境中生长繁殖，如大肠杆菌、肠球菌等。
- 口腔菌群：口腔菌群与肠道菌群紧密相关，如放线菌、放线放线菌等。
- 耐酸菌群：耐酸菌适应于酸性环境，如乳酸杆菌等。
2.肠道菌群的分布差异- 不同部位的差异：肠道分为多个部位，如胃肠道、小肠、结肠等，每个部位的环境条件和营养物质会导致菌群分布有所区别。
- 年龄差异：肠道菌群在不同年龄段的人中也存在差异，如婴儿期菌群主要由妈妈传递，中年人的菌群相对稳定，老年人的菌群会发生一定变化。
- 生活方式差异：饮食结构、生活习惯等因素也会影响肠道菌群的分布差异。
- 地理因素：不同地理区域的环境条件和食物特点也会对肠道菌群的形成和分布产生影响。
3. 肠道菌群的重要性- 消化吸收：肠道菌群参与食物的消化和吸收，如脂肪的分解和吸收。
- 免疫调节：肠道菌群能够影响机体的免疫系统，调节免疫应答，维持肠道免疫平衡。
- 营养合成：某些菌株能够合成多种维生素和氨基酸，为机体提供必需的营养物质。
- 环境保护：肠道菌群可以与致病菌竞争营养物质和空间，起到保护机体免受侵害的作用。
- 药物代谢：肠道菌群参与药物的代谢和解毒，影响药物的疗效和安全性。
4. 肠道菌群的影响因素- 遗传因素：个体的基因组对菌群的组成和分布有一定影响。
- 饮食因素：膳食纤维和益生菌的摄入可以促进有益菌群的增殖。
- 抗生素使用：抗生素会不可避免地破坏菌群平衡，导致菌群的改变。
- 环境污染：环境因素如重金属污染、食品添加剂等也可能对菌群的组成产生影响。
5. 肠道菌群的健康问题- 肥胖和代谢疾病：菌群的失衡可能与肥胖、糖尿病等代谢性疾病发生风险增加有关。
鉴别大肠杆菌的方法
鉴别大肠杆菌的方法大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌是正常肠道菌群的一部分，但有些菌株可以引起食物中毒和感染。
因此，准确鉴别大肠杆菌的方法对食品安全和公共卫生至关重要。
在鉴别大肠杆菌时，通常需要从样品中分离出细菌，并进行初步的鉴定。
下面是一些常用的鉴别大肠杆菌的方法：1. 培养基选择：大肠杆菌可以在普通富营养的培养基上生长，如营养琼脂和TSA 寒天琼脂。
与其他致病菌不同的是，大肠杆菌具有乳糖发酵能力，因此可以使用含有乳糖的培养基如EOH（大肠杆菌溶血素乳糖琼脂）、MacConkey琼脂和XLD （硫代硫酸亚铁氧化琼脂）来选择性培养大肠杆菌。
2. 形态学特征：在琼脂平板上培养后，大肠杆菌形成小型、粉红色的圆形菌落。
在显微镜下观察，大肠杆菌呈革兰阴性，为杆状细菌，长度约为2微米，直径约为1微米。
此外，大肠杆菌具有移动性，在液体培养基中呈现出活跃的运动。
3. 生化特性：通过测试大肠杆菌的生化特性，可以进一步鉴别该菌株。
常见的生化试验包括蔗糖发酵试验、气体发酵试验、硫化试验和尿素酶试验等。
大肠杆菌通常可以产生气体和酸，而不产生硫化物，同时具有尿素酶活性。
4. 分子生物学方法：PCR（聚合酶链式反应）和基因测序技术能够快速、准确地鉴定大肠杆菌。
通过特定引物放大大肠杆菌特有的基因片段，再进行测序比对，可以确定分离菌株是否为大肠杆菌。
5. 抗生素敏感性测试：鉴别大肠杆菌的方法还可以包括抗生素敏感性测试。
通过对细菌进行抗生素敏感性的测试，可以确定菌株对不同抗生素的敏感程度。
大肠杆菌通常对多种抗生素敏感，但也能产生耐药株。
通过该方法，可以观察和评估细菌感染的治疗方法。
综上所述，鉴别大肠杆菌的方法包括培养基选择、形态学特征观察、生化特性测试、分子生物学方法以及抗生素敏感性测试。
这些方法可以相互配合，提供准确和可靠的鉴别结果，对于食品安全和公共卫生具有重要意义。
肠道菌群检测
肠道菌群检测简介肠道菌群是人体肠道内存在的一种微生物生态系统，其中包含各种细菌、真菌和病毒等微生物。
肠道菌群的平衡与人体健康密切相关，它在维持肠道功能、消化和吸收营养物质、调节免疫系统等方面发挥着重要的作用。
肠道菌群检测可以通过分析肠道中的微生物组成和数量来评估肠道菌群的健康状况，并为调整菌群平衡提供指导。
肠道菌群检测的方法1. 16S rRNA测序技术16S rRNA测序技术是一种用于鉴定细菌的方法，通过对细菌16S rRNA基因进行测序，可以确定细菌属种的多样性和相对丰度。
这种技术可以快速、高效地分析肠道菌群的组成，并提供宏观上的菌群结构信息。
2. 全基因组测序技术全基因组测序技术可以对肠道微生物进行更为详细的分析。
它不仅可以鉴定细菌种类和相对丰度，还可以预测微生物功能和代谢产物。
全基因组测序技术可以提供更全面、准确的菌群信息，并帮助找出不同菌群之间的相互作用。
3. 肠道菌群代谢产物分析肠道菌群代谢产物是肠道菌群与宿主相互作用的结果，对人体健康起着重要作用。
通过分析肠道菌群代谢产物，可以更直接地评估肠道菌群的功能，并帮助了解菌群与宿主之间的相互作用机制。
肠道菌群检测的意义1. 健康评估和疾病风险预测肠道菌群的失衡与很多疾病的发生和发展相关，如肠炎、肠易激综合征、自身免疫性疾病等。
通过肠道菌群检测，可以了解个体的肠道菌群健康状况，并预测患某些疾病的风险。
2. 调整肠道菌群平衡肠道菌群的失调可能导致多种健康问题，而调整肠道菌群平衡则可以改善健康状况。
通过肠道菌群检测，可以针对个体的具体情况制定相应的干预措施，如饮食改变、益生菌补充等，以优化肠道菌群的健康状态。
3. 个性化医疗和药物治疗肠道菌群的状态会对个体对药物的反应产生影响。
通过肠道菌群检测，可以了解个体对药物的代谢情况，从而指导个性化的药物治疗。
肠道菌群检测的注意事项1. 样本采集肠道菌群检测通常需要获取个体的粪便样本。
为了确保样本准确和可靠，应在样本收集前注意以下事项：•避免使用含有抗生素的药物一周内。
肠道菌群的析测方法
肠道菌群的析测方法
肠道菌群的分析方法通常包括以下几种：
1. 16S rRNA测序：通过测序菌群样本中的16S rRNA基因，可以研究不同菌群的组成和多样性。
这种方法可以提供宏观的信息，但无法获得菌群的功能信息。
2. 全基因组测序：通过对肠道菌群中所有基因的测序，可以获得详细的菌群组成和功能信息。
这种方法可以揭示不仅是菌群成员，还有它们的代谢路径、毒性等功能特征。
3. PCR技术：通过特定引物扩增目标基因片段，然后进行测序分析。
这种方法具有高度特异性和敏感性，可以用于检测特定菌群或特定基因。
4. 转录组测序：通过测序菌群中的RNA，可以研究菌群中基因的表达情况，从而揭示菌群在不同环境条件下的功能和代谢调控。
5. 扩增子测序：通过扩增目标基因片段（如V1-V3或V3-V4区段），然后通过测序分析，可以获得菌群的组成和多样性信息。
这些方法各有优缺点，选择适当的方法取决于具体的研究目的和问题。
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肠道致病菌:
1、形态与染色
均为革兰氏阴性杆菌，中等大小，无芽胞，多数具有周身鞭毛能运动，志贺氏菌属无鞭毛无动力。
2、培养和生化反应
（1）、需氧或兼性厌氧，菌落中等大小，表面光滑，液体培养基混浊生长。
（2）、肠道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳糖、葡萄糖产酸或产酸产气。
（3）、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。
肠道杆菌是一大群寄居于人和动物肠道中，生物学性状近似的革兰阴性无芽胞短小杆菌，其中大多数是肠道的正常菌群，少数为致病菌，如伤寒沙门菌、志贺菌、医学教育`网搜集整理致病性大肠埃希菌等，可通过污染的饮水及食物、经消化道传播，引起人类肠道疾病。
肠道杆菌属于肠杆菌科。
肠道杆菌具有下述共同特性：
一、形态、染色和结构
中等大小，两端钝圆的革兰阴性杆菌，无芽胞，医学教育`网搜集整理多数为周鞭毛（除外志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭毛），大多有菌毛，少数有荚膜或包膜。
二、培养特性
需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。
三、生化反应特点
生化反应活泼。
乳糖发酵试验：肠道非致病菌+，肠道致病菌-（除外变形杆菌）。
肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阳性。
三糖铁琼脂（TSI）试验原理
1、TSI适合于肠杆菌科细菌的鉴定。
用于观察细菌对糖的利用和硫化氢（变黑）的产生。
2、TSI含有乳糖、蔗糖和葡萄糖（比例为10:10:1）。
（1）只能利用葡萄糖的细菌（如沙门氏菌），分解葡萄糖产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红；底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。
（2）能发酵乳糖的细菌（如E.coli），可产生大量的酸，使整个培养基（斜面和底部）均呈现黄色。
（3）如培养基接种后产生黑色沉淀，是因为某些细菌（如大多数沙门氏菌菌株）能分解蛋白胨中的含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀。
大肠杆菌：分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖，不产生H2S。
（斜面黄色色，底部黄色，产气，无黑色沉淀。
图4）
沙门氏菌：分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生H2S，多数产气。
（斜面红色，底部黄色，产气，产生黑色沉淀。
图3）
志贺氏菌：分解葡萄糖产酸不产气，大多不发酵乳糖，不产生H2S。
（斜面红色，底部黄色，不产气，无黑色沉淀。
图2）
各种指标菌的检验
一、菌落总数
食品验样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等），所得1mL（或1g)验样中形成菌落的总数。
国家标准规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。
卫生学意义：
二、大肠杆菌
1、卫生学意义：
2、生物学特性
(1)形态与染色特性。
大肠杆菌是肠杆菌科埃希氏菌后的细菌，它为革兰氏阴性、两端钝圆的中等大小杆菌，长为1—3um，宽约o．6um，有时呈卵圆形，本菌为周毛菌，能运动，不产生荚膜，而且一般对碱性染料着色良好，有时两端浓染，要注意与巴氏杆菌区别。
(2)培养特性。
本苗为需氧及兼性厌氧菌，对营养要求不高，在普通琼脂培养基上即可生长良好，最适生长温度为37℃，最适PH为7．2—7．4。
新分离出来的大肠杆菌一般是光滑型(5)菌株，这些大肠杆菌在肉汤中培养18—24h后呈均匀混浊，随着时间的增加，在管底出现熟性沉淀；在普通琼脂平板上培养24h，可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明的或接近无色的中等大菌落，其菌落与沙门氏菌的菌落很相似，但大肠杆菌菌落对光(45度角折射)观察可见荧光，部分菌落可溶血(P型)，用鉴别培养基培养时，在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色茵落，在s．s琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌，也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落，在伊红美蓝琼脂上形成带金属光泽的黑色菌落；在麦康凯琼脂上24h后的孤立菌落里红色。
(3)生化特性。
本菌不但菌型繁多、而且数量也极多，大多数菌株生化特性是比较一致的，但有的不典型菌株的生化特性不规则。
一般菌株的生化特性如下：可发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇，产酸产气，个别不典型菌株可迟发酵或不发酵乳糖，各菌株对蔗糖、卫矛醉、水杨首发酵结果不一致；本菌可使赖氨酸脱羧，但苯丙氨酸脱楼为阴性，大肠杆菌不产生疏化氢，不液化明胶，不分解尿素，不能在氰化钾培养基上牛长，能产生靛基质，MR试验阳性，v—P试验阴性，不利用相毖酸盐。
这最后四项生化特性结果是典型的大肠埃希氏茵，此外的反应类型为非典型大肠杆菌。
三、沙门菌
1、生物学特性
1.形态染色特性
• G-无芽孢杆菌。
大小通常为0.7～1.5μm ×2.0～5.0μm，菌端钝圆，散在，偶有短丝状，无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛，能运动，绝大多数菌株有菌毛。
• 需氧或兼性厌氧菌，生长温度范围为10～42℃，最适生长温度为37℃，适宜pH为6.8～7.8，对营养要求不高，在普通培养基中生长旺盛，胆盐可促进其生长。
2.培养特性
需氧或兼性厌氧菌；生长温度范围为10～42℃，最适生长温度为37℃；适宜pH为6.8～7.8；对营养要求不高，在普通培养基中生长旺盛；胆盐可促进其生长。
§普通琼脂：圆形、光滑、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小(2 ～4mm)菌落。
鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒、甲型副伤寒沙门氏菌等只能长成细小菌落。
§麦康凯琼脂和伊红美兰琼脂(EMB)：菌落无色半透明
§Ｓ.Ｓ琼脂和ＤＨＬ琼脂：无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(多数菌株)的菌落
§ＨＥ琼脂：形成蓝绿色或蓝色菌落，产硫化氢菌株菌落中心带黑色。
3.生化特性
发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇产气；不发酵乳糖、蔗糖、水杨苷和侧金盏花醇；产生硫化氢；原硝酸盐；不水解尿素；不液化明胶；V-P反应阴性;不产吲哚(靛基质试验阴性)；能利用枸橼酸盐(个别菌株不利用)。
检验:
（一）前增菌和增菌
前增菌：25克（加工食品）+225毫升缓冲蛋白胨37度培养4小时（干蛋品18—24小时）。
增菌：移取10毫升接种于100mL的增菌液中。
氯化镁孔雀绿（MM）或四硫酸钠煌绿（TTB）、亚硒酸盐胱氨酸（SC）。
（二）分离培养
最适生长温度为35～37℃，
最适pH值为6.8～7.8。
选择性琼脂平板：BS培养基（亚硫酸铋琼脂）、DHL琼脂、HE（海克顿肠内琼脂培养基）或WS琼脂、SS琼脂。
四、志贺菌
（一）形态与染色
革兰氏阴性短杆菌、无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。
2~3um×0.5~0.7um
（二）培养特性
1、需氧或兼氧性厌氧，最适温度37℃，PH7.2~7.4
2、在普通琼脂和SS平板上，能形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、在中等大小的菌落
3、宋氏志贺氏菌菌落较大，较不透明，粗糙而扁平，在SS平板上可迟发酵乳糖，菌落呈玫瑰红色。
4、在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜。
（三）生化反应
1、发酵葡萄糖，产酸不产气，除宋氏志贺氏菌外，均不发酵乳糖。
2、不发酵侧金盏花醇、肌醇、水杨苷。
3、不产生H2S，不分解尿素，V-P试验阴性，不能利用柠檬酸盐。
4、甲基红阳性。
五、金黄色葡萄球菌
(1)形态与染色特性。
金黄色葡萄球菌为革兰氏染色阳性球菌，直径为o．5—1．0um，呈葡萄状排列。
无芽抱，无鞭毛，无荚膜，不能运动。
(2)培养特性。
金黄色葡萄球菌为兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通琼脂培养基上培养18—24h，形成圆形隆起、边缘整齐、光滑湿润、不透明的菌落，直径1—2mm，颜色呈金黄色。
最适生长温度为35—37℃，最适pH7．4。
(3)生化特性。
能利用葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖和甘露酵，产酸不产气；可分解精氨酸、水解尿素、还原硝酸盐；能产生NH3和少量的H 2s，可凝固牛乳，牛乳有时被陈化；不产生鼓基质，MR试验阳性，v—P试验不定，血浆凝固酶阳性。