大肠埃希菌
大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析
大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析大肠埃希菌（Escherichia coli）是肠道常见菌群中的成员之一，同时也是人体和动物肠道中数量最多的细菌。
在很多情况下，大肠杆菌不会对人体产生任何不良影响，但是某些菌株会引起疾病。
这些致病性大肠杆菌主要包括肠致病性大肠杆菌（enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）、产生肠毒素的大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）等。
本文将对大肠埃希菌的临床分布及其耐药性进行分析。
大肠杆菌（E. coli）常常是肠道常见菌群的成员之一，但在某些情况下，这些微生物会被发现在其他区域或组织中。
以下是大肠杆菌在人体中的临床分布：1. 泌尿生殖道感染大肠杆菌是人体泌尿生殖系统中最常见的致病菌之一，据研究，80%以上的泌尿系统感染都是由大肠杆菌引起的。
2. 腹泻大肠杆菌也是腹泻病原菌之一。
产生肠毒素的大肠杆菌（ETEC）和肠致病性大肠杆菌（EHEC）是许多腹泻和食物中毒的元凶。
肠道感染通常通过口-粪途径传播，常常发生在卫生条件较差的地区，如发展中国家。
3. 呼吸道感染大肠杆菌在呼吸道感染中也偶尔被发现，特别是在患者的免疫系统受到抑制的情况下。
由于呼吸道感染通常被其他致病菌占据，因此大肠杆菌在这方面的作用很小，不过在研究中仍有发现。
4. 脑膜炎大脑膜炎是一种由感染性微生物引起的严重疾病。
虽然大肠杆菌通常是肠道菌群的成员之一，但偶尔也会引起脑膜炎。
感染虽然比较罕见，但是非常危险。
5. 其他大肠杆菌还偶尔被发现在胆囊、脾脏和其他组织中。
尽管大肠杆菌的分布范围很广，但在这些区域的感染相对罕见。
大肠杆菌耐药性是世界卫生组织所关注的一项严峻问题。
肠道菌群中的一些E. coli菌株可能会对一些抗生素产生抗性。
以下是大肠杆菌的耐药性分析：1. β-内酰胺类抗生素耐药（如氨苄西林）许多大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素具有耐药性。
大肠埃希菌
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
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细菌特性
• 形态特征
• 培养特性
• 生化反应
• 抗原结构
大肠埃希菌革兰染色
大肠埃希菌电镜图
大肠埃希菌菌落特征（血平板）
大肠埃希菌菌落特征（MAC）
大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）
微生物学检验
（一）检验程序 （二）标本采集 （三）检验方法 （四）耐药性 （五）结果分析与报告
பைடு நூலகம்
大肠埃希菌检验程序
检验方法
1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 – ETEC – EPEC – EIEC – EHEC – EaggEC
ST检测（乳鼠灌胃试验）
LT 检测（ CHO细胞培养）
O157:H7菌落特征（MAC）
O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）
返回
右侧为对照（－－＋＋）
大肠埃希菌抗原结构
临床意义
致病物质
所致疾病
致病物质
• 侵袭力 • 内毒素 • 肠毒素 耐热肠毒素（ST） 不耐热肠毒素（LT） 菌毛、K抗原
所致疾病
• 肠道外感染 泌尿道感染（最常见）
胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎 • 肠道感染 ETEC、EPEC、EIEC、 EHEC、EaggEC
水质大肠埃希菌流程
水质大肠埃希菌流程大肠埃希菌是一种常见的病原微生物，它存在于环境中的水体中，会对水质造成严重的污染。
下面将从人类视角出发，描述水质大肠埃希菌的流程。
我们来了解一下大肠埃希菌。
大肠埃希菌是一种革兰氏阴性杆菌，它的名称来源于其最初在大肠中被发现。
这种细菌在自然界中广泛存在，可以在土壤、水体、动物的消化道等环境中找到。
当水体受到污染，大肠埃希菌就有可能进入水中。
污染源可以是人类或动物的粪便，其中可能携带有大肠埃希菌。
在水体中，大肠埃希菌可以通过不同的途径传播，比如降水、洪水、地下水等。
一旦大肠埃希菌进入水体，就可能对水质造成严重威胁。
大肠埃希菌的流程可以分为以下几个步骤：污染源释放、传播和感染。
污染源释放。
当人类或动物排泄物中存在大肠埃希菌时，如果没有得到正确的处理和处理，就有可能直接或间接地释放到水体中。
这可能是由于不当的排污、污水处理不当、肥料和农药的使用等原因造成的。
传播。
一旦大肠埃希菌进入水体，它可以通过水流的推动，迅速传播到其他地区。
特别是在水体污染严重的地区，大肠埃希菌的传播速度非常快。
此外，大肠埃希菌也可以通过水中的悬浮颗粒、沉积物和水生生物等媒介进行传播。
感染。
如果人类或动物接触到被大肠埃希菌污染的水体，就有可能感染大肠埃希菌。
人类可以通过饮用污染的水或食用污染的食物来感染大肠埃希菌。
感染后，人们可能会出现腹泻、腹痛、发热等症状。
对于免疫力较弱的人群，如婴幼儿和老年人，感染大肠埃希菌可能导致严重的并发症甚至死亡。
为了保护水质和人类健康，我们需要加强大肠埃希菌的监测和控制。
这包括加强污染源的管理，改善污水处理设施，提高水质监测能力等。
同时，公众也应该加强自我保护意识，避免饮用未经处理的水源，注意食品安全，尤其是生食。
水质大肠埃希菌的流程包括污染源释放、传播和感染。
我们需要共同努力，加强监测和控制，保护水质和人类健康。
只有这样，我们才能享受清洁、安全的水资源。
大肠埃希菌革兰染色镜下特点
大肠埃希菌革兰染色镜下特点
大肠埃希菌是一种革兰阴性的杆状细菌，其形态为直杆状或弯曲的杆状。
其大小约为1-3微米长，0.5微米宽。
在镜下观察时，大肠埃希菌具有以下几个特点：
2. 革兰染色：大肠埃希菌是革兰阴性菌，革兰染色后呈粉红色。
3. 核心酸（lipopolysaccharide）：大肠埃希菌的外膜组成为核心酸结构，这也是革兰染色后染色颜色不同的原因。
大肠埃希菌的核心酸是一种复杂的酸性多糖，可用于识别和鉴别大肠杆菌。
4. 附着器：大肠埃希菌具有一种名为菌毛的毛状附着器，可帮助其附着和定位于宿主细胞表面。
5. 胶囊：有些大肠杆菌细菌株还可以产生胶囊，使其更容易存活在宿主细胞内，同时提高其抗药性和耐受性。
大肠埃希菌属于人和动物的肠道内的常见菌群，是一种重要的病原菌。
在食品污染、水源污染、肠道感染等情况下，大肠埃希菌引发的疾病很常见，这也使它成为了医学和生命科学领域的重点研究对象之一。
大肠埃希氏菌检测标准
大肠埃希氏菌检测标准
大肠埃希氏菌是一种常见的肠道细菌，也是食品检测中的重要指标之一。
以下是大肠埃希氏菌检测的标准：
首先，对于饮用水的检测，每升水中大肠埃希菌的数量不应该超过3个。
这是为了保证饮用水的安全性，避免因为水源水中大肠埃希菌超标而引起的肠道疾病。
其次，在水源水的检测中，经过加氯消毒的水源水，每升水中大肠埃希菌的数量平均不应该超过1000个。
这是为了保证水源水的质量，避免因为水源水中大肠埃希菌过多而影响饮用水的质量。
同时，在水源水的检测中，经过净化处理及加氯消毒后供作生活饮用水的水源水，每升水中大肠埃希菌的数量平均不应该超过10000个。
这是为了保证生活饮用水的水质，避免因为水源水中大肠埃希菌过多而影响人体健康。
此外，在食品检测中，对于生肉类的检测，每克生肉中大肠埃希菌的数量不应该超过100个。
这是为了保证生肉类的安全性，避免因为生肉类中大肠埃希菌过多而引起的肠道疾病。
最后，在食品检测中，对于加工过的肉制品的检测，结果应该为阴性。
这是为了保证加工过的肉制品的质量，避免因为加工过程中受到大肠埃希菌的污染而影响产品质量和人体健康。
总之，大肠埃希氏菌检测标准是为了保障人们的饮用水和食品安
全。
在检测过程中，需要采用科学的方法和先进的设备进行检测，确保数据的准确性和可靠性。
同时，也需要加强监管力度，保证食品生产过程中大肠埃希菌的含量符合标准要求，保障公众的健康和安全。
大肠埃希菌结构
大肠埃希菌结构
大肠埃希菌属于肠杆菌科埃希氏菌属，是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌，其细胞一般呈杆状，不具典型的细胞结构，其内的遗传物质没有与组蛋白结合，是长约1000微米的环状DNA分子。
大肠埃希菌细胞体限界膜（胞膜外）还有一层黏多糖蛋白构成的细胞壁，这和植物体细胞相似，胞体（菌体）宽约0.8μm，长2μm。
一般的条件下，大约20多分钟就繁殖一代。
此外，大肠埃希菌还有周鞭毛，兼性厌氧，对营养要求不高。
在麦康凯平板上形成红色、圆形隆起的菌落；在血琼脂平板上通常形成圆形、稍凸、边缘整齐、灰白色、不透明的光滑、湿润菌落，少数菌株产生β-溶血环，少数呈黏液型菌落或较大、扁平、皱起的粗糙型菌落。
大肠埃希菌的抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。
现已知有171种O抗原，100种K抗原和56种H抗原。
一个菌株的抗原类型由特殊的0、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58（B4）:H2。
如需了解更多关于大肠埃希菌的结构信息，建议查阅生物学书籍或咨询专业生物学家获取准确信息。
大肠埃希菌的检验原理
大肠埃希菌的检验原理
大肠埃希菌的检验原理主要是基于大肠埃希菌能够产生酶、产生特定代谢产物以及具有一定生理特征等方面进行检测。
1. 酶的检测：大肠埃希菌能够产生β-半乳糖苷酶和大肠埃希菌酶等酶。
常用方法是利用含有染色底物的培养基，如培养基中加入苔藓素和半乳糖时，大肠埃希菌能够分解底物产生酶，使底物变色。
这样可以通过颜色变化来判断培养基中是否存在大肠埃希菌。
2. 代谢产物的检测：大肠埃希菌在产酸过程中会产生大量的氢离子，降低培养基的pH值，可以使用酚红指示剂来检测pH值的变化。
另外，大肠埃希菌还会产生气体，如二氧化碳和氢气，在含有较少营养物质的培养基上可以形成气泡。
这些变化可以作为大肠埃希菌存在的判断依据。
3. 生理特征的检测：大肠埃希菌有一些特有的生理特征，如能够产生胆红素，对产酸、反应pH等均有一定特殊性。
对大肠埃希菌进行生理生化反应、鉴定和分析可以通过不同试剂和培养基来进行。
综合上述三个方面的检测方法，能够较准确地鉴定出是否存在大肠埃希菌。
当然，最常用的方法是利用尿液或食物中的大肠埃希菌进行培养，并在培养基上观察酶活性、产酸、产气等特征变化。
大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析
大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析大肠埃希菌是一种常见的肠道细菌，通常存在于人和动物的肠道中。
大肠埃希菌也是许多医院感染和社区感染的主要病原菌之一。
由于其广泛存在和对抗生素的耐药性，大肠埃希菌感染已成为临床治疗的严重问题。
本文将对大肠埃希菌的临床分布及其耐药性进行分析，以期为相关研究和临床治疗提供参考。
一、大肠埃希菌的临床分布大肠埃希菌感染可发生在各个年龄段的患者，包括婴儿、儿童、成人和老年人。
在医院内，大肠埃希菌感染常见于各种手术后、尿路感染、呼吸道感染、血液感染等情况下。
社区中也存在大肠埃希菌感染，主要是由于不洁食物、水源或者人际传播所致。
抗生素的过度使用也是导致大肠埃希菌感染的重要因素之一。
大肠埃希菌感染的临床表现多样，包括腹泻、腹痛、发热、尿频、尿急等症状。
严重感染可导致败血症、脓毒症、尿路感染、胃肠道感染等临床疾病。
近年来，大肠埃希菌对抗生素的耐药性日益严重，包括对β-内酰胺类抗生素、氨基糖苷类抗生素、喹诺酮类抗生素、磺胺类抗生素等的耐药性不断增加。
特别是产大肠埃希菌产ESBL的菌株，其对β-内酰胺类抗生素的耐药性已经成为临床治疗的重要挑战。
大肠埃希菌对卡那霉素、利福平等重要的抗生素也呈现出不同程度的耐药性。
临床上发现一些大肠埃希菌对多种抗生素呈多重耐药甚至全耐药现象，导致医生在治疗大肠埃希菌感染时选择的抗生素变得非常有限。
针对大肠埃希菌的耐药性问题，临床上已经出现了一些多重耐药的大肠埃希菌感染病例，给抗生素治疗带来了很大困难。
预防和控制大肠埃希菌感染以及加强抗生素的合理使用显得尤为重要。
对于有高危因素的患者，如免疫功能低下、长期使用抗生素等，应密切监测大肠埃希菌感染的发生，并采用有效的感染控制措施。
改善抗生素使用模式，减少不必要的抗生素使用，避免滥用抗生素，有助于减少大肠埃希菌对抗生素的耐药性发展。
大肠埃希菌感染在临床中的分布广泛，对抗生素的耐药性不断增加，严重影响了临床治疗的效果。
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大肠埃希菌(Escherichia coli)即大肠杆菌，为肠杆菌科埃希菌属的模式种。
用4-甲基伞形酮葡糖苷酸（MUG）和靛基质（Indole）试验检查大肠埃希菌，检验步骤为：增菌培养后，转种MUG-蛋白胨培养基培养，多数情况下不需要从混合菌中分离单个菌，如MUG、Indole 试验为阳性或阴性即可报告结果。
原理：利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物，产生颜色或荧光反应作为指示系统来鉴定目标菌。
实验证明，96%的大肠埃希菌含β-葡糖苷酸酶（GUD）。
MUG被GUD水解，产生荧光，由于荧光反应的敏感度较颜色的反应强，易于观察。
通常将MUG与靛基质试验结合，来检测大肠杆菌。
如MUG与Indole试验的反应不一致时，则需将供试液的增菌培养物用EMB琼脂平板分离培养、革兰染色、镜检及生化试验鉴别。
2．仪器、设备及用具
2.1无菌室微生物检查应有单独的无菌室，每个无菌室应有独立的净化空气系统。
2.2 净化工作台
2.3 培养箱（36℃±1℃）。
2.4 高压蒸汽灭菌器。
2.5 显微镜（1500×）。
2.6 恒温水浴（45℃±1℃）。
2.8 离心机（500~4000r/min）。
2.9 电冰箱。
2.10 匀浆仪。
2.11 366nm紫外灯。
2.12 玻璃器皿、器具[参照细菌、霉菌和酵母菌计数2.2.2]。
3．试液、指示液。
3.1 0.9%无菌氯化钠溶液。
3.2 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。
3.3 pH7.2无菌磷酸盐缓冲液。
3.4 靛基质（Kovacs）试液。
3.5甲基红试液。
3.6 V-P试液。
3.7 革兰染色液。
3.8 中性红指示液。
3.9 亚甲蓝指示液。
3.10 溴麝香草酚蓝指示液。
3.11 酸性品红指示液。
3.12 曙红钠指示液。
4．培养基
4.1 营养肉汤
4.2 营养琼脂
4.3 胆盐乳糖(BL)培养基。
4.4 4-甲基伞形酮葡糖苷酸蛋白胨培养基。
4.5 乳糖培养基、5%乳糖培养基。
4.6 蛋白胨水培养基。
4.7 磷酸盐葡萄糖胨水培养基。
4.8 枸橼酸盐培养基。
4.9 曙红亚甲蓝（EMB）琼脂。
4.10 麦康凯琼脂。
5．对照用菌液
菌液制备：取大肠埃希菌的营养琼脂斜面培养物少许，接种至5ml营养肉汤培养基内，置36℃±1℃培养18~24h，取均匀培养物1ml用0.9%无菌氯化钠溶液稀释制成每1ml含菌10~100cfu 的菌悬液，其菌数在做对照试验的同时用营养琼脂注皿或平板涂布，经培养后计数确定。
6．准备
6.1 供试品的检验量[见细菌、霉菌和酵母菌计数5.3]。
6.2 供试液的制备。
6.2.1 液体供试品[见细菌、霉菌和酵母菌计数
7.1]。
6.2.2 固体、半固体或粘稠液供试品[见细菌、霉菌和酵母菌计数
7.2]。
6.2.3 非水溶性供试品[见细菌、霉菌和酵母菌计数
7.3]。
7．操作步骤
7.1检验程序
MUG阳性、Indole阳性
36℃±1℃MUG阴性、Indole阴性报告
供试品→供试液→BL
或麦康36℃±1℃疑似菌落36℃±1℃革兰染色、镜检36℃±1℃
凯琼脂平板18~24h 纯培养18~24h IMVi C试验18~24h 报告
阳性对照试验各供试品进行控制菌检查时，应做阳性对照试验。
阳性对照试验的加菌量为10~100cfu，供试品和增菌培养基用量及检查按供试品的各控制菌检查。
阳性对照试应检出相应的控制菌。
已做验证试验的供试品，在该供试品检查时不必再做阳性对照。
阴性对照试验取稀释剂10ml加入100ml（或200ml）相应控制菌检查用的增菌培养基中，培养，应无菌生长。
7.2 增菌培养取胆盐乳糖(BL)培养基2份，每份各100ml。
1份加入10ml供试液(相当于供试品1g、1ml、1cm2)，另1份加入与供试液等量的稀释剂作阴性对照。
培养18~24h，必要时可延止48h。
阴性对照应无菌生长。
取上述培养物0.2ml，接种至含5mlMUG培养基的试管内，培养，于5、24 h在366nm紫外光下观察，同时用未接种的MUG培养基作本底对照。
在紫外光下若管内培养物呈现蓝色荧光，为MUG阳性；不呈现荧光，为MUG阴性。
观察后，沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液，液面呈玫瑰红色，为靛基质阳性；呈试剂本色，为靛基质阴性。
本底对照的MUG和靛基质试验应为阴性。
如MUG阳性、靛基质阳性，判供试品检出大肠埃希菌；如MUG阴性、靛基质阴性，判供试品未检出大肠埃希菌。
7.3 分离培养如呈现MUG阳性、靛基质阴性或MUG阴性、靛基质阳性时，应将上述供试品BL增菌培养液轻轻摇动，以接种环沾取1~2环培养液划线于EMB或麦康凯琼脂平板上，培养18~24小时。
若平板上无菌落生长、或生长的菌落与下表所列的菌落形态特征不符，判供试品未检出大肠埃希菌。
当阳性对照的平板呈典型菌落生长时，若EMB或麦康凯琼脂平板上生长的菌落与上表所列菌落形态特征相符或疑似菌落者，应挑取可疑菌落进行分离、纯化、染色镜检和IMViC试验确认大肠埃希菌。
7.4 纯培养如EMB或麦康凯琼脂平板上生长的菌落与上表相符或疑似者，以接种针轻轻接
触单个疑似菌落的表面中心，沾取培养物，应挑选2~3个以上疑似菌落，分别接种营养琼脂斜面，培养18~24h，作以下检查。
如平板上无单个可疑菌落，但有可疑团（紫黑色，或有金属光泽），应沾取可疑菌团培养物少许，或重新取增菌培养液分区划线接种于EMB琼脂平板，培养18~24 h，再挑选单个疑似菌落，纯培养，作以下检查。
7.5 革兰染色、镜检
7.5.1 以接种环沾取无菌水于洁净载玻片上，取上述疑似菌落的营养琼脂斜面新鲜培养物少许，制成均匀涂片，自然或微温干燥，再通过火焰2~3次（载玻片不烫手）固定。
7.5.2 滴加结晶紫染液，染色1min，水洗。
7.5.3 滴加碘液，媒染1min，水洗，以滤纸吸干余水。
7.5.4 滴加95%的乙醇，脱色20~30s，水洗。
7.5.5 滴加沙黄染液，复染1min，待干后，镜检。
7.5.6 染色结果
革兰阳性菌呈蓝紫色；革兰阴性菌呈红色。
大肠埃希菌为革兰阴性短杆菌，或球杆菌状，亦有杆菌状。
8．生化试验
8.1乳糖发酵试验取上述斜面培养物，接种于乳糖发酵管，培养24~48h，观察产酸（指示剂为酸性品红者为红色，指示剂为溴麝香草酚蓝者为黄色），产气（小倒管内有气泡，气泡无论大小）。
为避免迟缓发酵乳糖产生假阴性，亦可接种5%乳糖发酵管。
约大多数迟缓发酵乳糖的细菌，可于24h出现阳性。
可适当延长培养时间。
8.2 靛基质试验（I）取上述斜面培养物，接种于蛋白胨水培养基，培养24~48h，沿管壁加入靛基质试液数滴，轻轻摇动试管，液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。
98%的大肠埃希菌靛基质试验为阳性。
一般24h即可出现阳性结果。
常以无菌操作先从管中取出1或2 ml 培养液进行检查，如靛基质阴性，余下的蛋白胨水培养物再培养24h，作靛基质试验。
8.3 甲基红试验（M）取上述斜面培养物，接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，培养48±2h，于培养液中加入甲基红指示液2~3滴（约每ml培养液加指示液1滴），轻微摇动，立即观察，呈鲜红色或橘红色为阳性，呈黄色为阴性。
8.4 乙酰甲基甲醇生成试验(V-P) 取上述斜面培养物，接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，培养48±2h，于2ml培养液中加入α-萘酚乙醇试液1ml，混匀，再加40%氢氧化钾试液0.4ml，充分振摇，在4h（通常在30min）内出现红色判为阳性，无红色反应为阴性。
8.5 枸橼酸盐利用试验（C）取上述斜面培养物，接种于枸橼酸盐培养斜面上，培养2~4天，培养基斜面有菌苔生长，培养基由绿色变为蓝色时为阳性，培养基颜色无改变，无菌苔生长
为阴性。
9．结果判定
9.1 当阴性对照呈阴性，阳性对照试验MUG呈阳性、靛基质阳性，供试品MUG阳性、靛基质阳性，报告1g或1ml供试品检出大肠埃希菌；MUG阴性，靛基质阴性，报告1g或1ml 供试品未检出大肠埃希菌。
9.2 MUG阳性、靛基质阴性、IMViC试验为- + - - 、革兰阴性杆菌，报告1g或1ml供试品检出大肠埃希菌；MUG阴性、靛基质阳性、IMViC试验为+ + - -、革兰阴性杆菌，报告1g或1ml供试品检出大肠埃希菌。
9.3 供试品培养物检查不符合9.2中的任一项，报告1g或1ml供试品未检出大肠埃希菌。
9.4 当阴性对照有菌生长或阳性对照未生长或生长但非大肠埃希菌。
不能做出检验报告。