RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
血液总 RNA 提取试剂盒 说明书
血液总RNA 提取试剂盒产品组分组分R1081（50 次） 溶液 NL溶液RG60 ml 50µl 溶液 MP10 ml 溶液 MW12 ml DEPC 处理水10 ml RNase-free 纯化柱50 个 RNase-free 离心管50 个 说明书1 份需要自备的溶液● 氯仿● 无水乙醇注意事项-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ● 第一次使用前应该在溶液RW 中加入无水乙醇，加入量请参见瓶上标签。
● 严防操作环境、使用的容器、耗材和试剂的RNase 污染。
操作过程中要勤换手套。
● 请严格遵照操作步骤操作。
实例--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------T1T2R1 R2 M上图中T1/T2是使用血液总RNA 提取试剂盒（R1081）以人类全血为材料提取的血液total RNA ，R1/R2分别是以T1/T2为模板的逆转录产物电泳图，产物大小为750bp ，M 为DS TM 5000。
操作步骤-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1. 取200-500µl新鲜血液，加入1ml裂解液NL，再加入10µl硫基乙醇，混匀，冰浴5min；2. 加入200 μl 氯仿，轻微混匀，静置3min，12,000rpm离心10min；3. 此时，样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA 主要在水相中，水相的体积约为所用溶液NL试剂的60%。
天漠科技 总RNA提取试剂盒说明书
总RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用)Catalog No. TR205-50 (50次反应含DNaseI)TR205-200 (200次反应含DNaseI)TR205-50N (50次反应无DNaseI)TR205-200N (200次反应无DNaseI)Highlights∙适用于从细胞，组织，酵母菌，植物，细菌或生物液体（任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品）中提取到总RNA（含microRNA）。
∙无需进行相分离，无需使用氯仿，无需沉淀过程。
∙提取到的RNA不含DNA,并可应用于Q-PCR，高通量测序等实验。
∙整个过程仅需10分钟。
Ver.1.0.9产品组成:50200RNA洗涤液1 室温40 ml 160 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNA洗涤液2室温12 ml 48 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇DNase I -20℃ 300μl x 1管（5U/μl） 300μl x 4管（5U/μl）DNA消化液室温 4 ml 16 mlRNase-free H2O 室温 6 ml 30 ml2号柱室温50个200个收集管（2ml）室温50个200个特性:1.样品来源：TRIZOL等类似试剂裂解的样品。
2.样品范围：≥17核苷酸。
3.RNA纯度：高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验。
4.RNA结合量：每个柱子可最多结合50μg的RNA。
试剂制备RNA洗涤液在使用之前一定要配好，添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记！！！添加10ml或40ml的无水乙醇（95-100%）到40ml或160ml的RNA洗涤液1中。
添加48ml100%的乙醇（或52 ml95%的乙醇）到12ml的RNA洗涤液2添加192ml100%的乙醇（或208 ml95%的乙醇）到48ml的RNA洗涤液2操作步骤:整个操作步骤是由2个步骤组成：（I）样品裂解匀浆（I I）样品纯化（I）样品裂解匀浆此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量，以下给出我公司提供的可完美替换TRIZOL的TRIcom试剂用量作为参考。
总RNA提取试剂盒说明书
总RNA提取试剂盒说明书货号：R1200规格：50T/100T产品内容：试剂盒组成R1200-50R1200-100保存有效期裂解液50ml100ml2-8℃一年漂洗液15ml15ml×2RT一年洗柱液50ml50ml×2RT一年RNase free ddH2O15ml15ml×2RT一年RNase free吸附柱50个100个RT一年RNase free收集管(2ml)50个100个RT一年操作步骤：1.样品处理：a.植物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b.动物组织：取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液，用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c.贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，每106细胞加1ml裂解液。
用取样器吹打混匀。
d.细胞悬液：离心收集细胞。
每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e.血液处理：取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10000rpm离心1分钟。
弃上清，若沉淀含有红细胞，可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。
离心后沉淀加入1ml裂解液混匀。
2.将处理后的样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白复合物完全分离。
3.向匀浆样品中加0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置3-5分钟。
4.2-8℃12000rpm离心10分钟。
RNA主要在上层无色的水相中，把水相转移到新管中，不要吸到沉淀。
5.吸附柱前处理：在吸附柱中加入500ul洗柱液，室温放置2分钟，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
6.第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀，加入吸附柱静置2分钟，2-8℃12000rpm离心2min，弃废液。
7.向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8℃12,000rpm离心2min，弃废液。
全血总RNA提取试剂盒
全血总RNA提取试剂盒(离心柱型)货号：KTSM2908■产品简介：本产品采用全新技术从全血和血浆中进行RNA提取，本产品在提取时添加了特殊组分，可大幅度提高RNA和硅基质膜的结合能力。
在RNA提取过程中，加入RNase-Free DNase I，可完全去除痕量DNA杂质，而RNase-Free DNase I和其他残留的物质会在随后的漂洗过程中去除，从而有效地保证了提取RNA的得率和纯度。
本产品在常温下1小时内即可完成操作，且不使用酚氯仿等有机试剂。
■产品内容：■储存条件：该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。
2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中孵育10 min，以溶解沉淀。
■注意事项（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项）：（1）自备试剂与耗材：β-巯基乙醇，无水乙醇，1.5 ml RNase-Free离心管。
（2）样品的储存和处理：RNA容易被降解，所以新鲜的血液样品应储存于-70℃，冻存的样品不能反复冻融以避免RNA的降解，样品也可以在匀浆后加入裂解液RL，储存于-70℃，冻存的样品可稳定储存数月。
（3）RNA Carrier：当处理血浆时，可使用试剂盒中提供的RNA Carrier，RNA Carrier的加入将提高RNA的得率，且不会影响后续实验。
（4）所有步骤在室温进行，为了尽量避免RNA的降解，操作越快越好。
（5）在使用前，请用RNase-Free ddH 2O配制乙醇溶液。
（6）操作前在RL中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，最好现用现配。
■操作步骤：使用前请先在去蛋白液和漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶子上的标签。
（1）取100 μl全血或血浆，加入350 μl裂解液RL，涡旋振荡1 min后用匀浆器匀浆30 s。
（2）加入0.1倍体积的醋酸钠，振荡混匀。
总RNA纯化试剂盒说明-中文版
总RNA纯化试剂盒产品说明书此款RNA纯化试剂盒提供了一种从培养的动物细胞、组织样品、血液、细菌、酵母、真菌、植物和病毒中快速提取和纯化总RNA的方法，。
该试剂盒可以纯化所有大小的RNA，从大的mRNA和核糖体RNA到小RNA（microRNA或miRNA）和小干涉RNA（siRNA）。
RNA优先从蛋白等的细胞组分中纯化出来，而不使用抑制的苯酚或者氯仿。
纯化的RNA是高度完整的，可以应用到一系列的下游应用试验中，包括实时PCR，Northern免疫印迹分析，RNase保护实验和引物延伸，以及表达芯片分析。
纯化技术纯化的基础是旋转柱色谱法，用特有的树脂作为分离介质。
RNA优先从其他细胞组分（如蛋白质）中分离出来，而不使用苯酚或者氯仿。
纯化步骤包括首先用合适的裂解液融解细胞或组织，然后裂解液中加入乙醇后上样到旋转柱中。
树脂结合RNA是基于离子的浓度，所以只有RNA结合到柱子上而所有剩余的蛋白和其他的污染物会在流动液中而被除去或者仍在树脂的顶部。
然后结合的RNA用试剂盒提供的洗涤液洗涤以除去所有残余的杂质，然后纯化的总RNA用抽提缓冲液洗涤。
纯化的RNA是高度完整的，可以用于一系列的下游实验分析。
说明优点•使用旋转柱提取，步骤快且简单•提取总RNA，从大的核糖体RNA（rRNA）到小（RNAmicroRNA或者miRNA)•不需要苯酚或氯仿作提取液•从多种种类来源样品中提取高质量的总RNA•可以提取和检测到的RNA组织样品可以小到单个动物细胞试剂盒成分储存条件和产品稳定性所有的溶液需在室温密闭保存。
所有的试剂在不开封条件下稳定保存１年。
预防措施和警告事项该试剂盒只为科研目的设计，不可用于人或者临床。
要确保有合适的实验服，在操作化学试剂时一次性的手套和护目镜会磨损。
需要更多信息，请参考适合的材料安全表（MSDSs）。
所有人和动物组织的问题是要考虑到潜在的感染。
当操作全血样品时，所有在使用国家的有关当局建议的预防措施都要执行。
全血总RNA提取试剂盒
全血总RNA提取试剂盒(离心柱型)货号：KTSM2908■ 产品简介：本产品适用于从血液中提取高品质总RNA。
本试剂盒配有独特的裂解体系，将RNA从组织中释放出来后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过去蛋白液和漂洗液将蛋白等杂质去除，最后由RNase-Free Water将RNA从硅基质膜上洗脱下来。
本产品提取RNA方便快捷，无需使用氯仿、苯酚等有毒有害化学物质，对操作人员及实验环境无毒害作用。
■主要成分：■保存条件：DNase I，10 × DNase I Buffer置于-20℃保存；其他溶液于室温（15-25℃)保存。
■自备试剂：无水乙醇，β-巯基乙醇。
■ 注意事项：1．第一次使用前请先在去蛋白液RD和漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇，并做好标记。
2．裂解液RG在使用前请加入β-巯基乙醇至终浓度为1%，如1 ml裂解液RG加10 µl β-巯基乙醇。
加入β-巯基乙醇的裂解液RG 在4℃可保存1个月，如出现沉淀，请加热溶解后使用。
3．裂裂解液RG和去蛋白液RD中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4．人类的血液或体液可能有潜在的感染性，所以如果对人类的全血进行处理，请注意做好防护措施。
5．在白细胞裂解后，该说明书中的所有步骤需在室温（15-25℃）进行，操作速度越快越好。
6．本试剂盒不适用于冻存的全血。
■ 预防RNase污染：1．全程佩戴一次性手套，经常更换新手套。
皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。
培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。
2．使用无RNA酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。
玻璃器皿可以在150℃的烘箱中烘烤4 h，塑料器皿可以在0.5 M NaOH中浸泡10 min，用水彻底漂洗干净后高压灭菌备用。
■ 操作步骤：1．向新鲜的抗凝全血样本中，加入5倍血液样本体积的1×红细胞裂解液（请于使用前用RNase-Free Water 将10×红细胞裂解液稀释10倍），轻轻涡旋或颠倒混匀。
总RNA的提取_(试剂盒法、氯化锂法和蛋白酶-热酚法)
总RNA的提取(试剂盒法、氯化锂法和蛋白酶－热酚法)所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即1）样品细胞或组织的有效破碎；2）有效地使核蛋白复合体变性；3）对内源RNA酶的有效抑制；4）有效地将RNA从DNA和蛋白混合物中分离；5）对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。
关键词：试剂盒；蛋白酶；总RNA提取；试剂盒法；氯化锂法；蛋白酶－热酚法；Total RNA Isolation完整RNA的提取和纯化，是进行RNA方面的研究工作，如Northern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。
所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即1）样品细胞或组织的有效破碎；2）有效地使核蛋白复合体变性；3）对内源RNA酶的有效抑制；4）有效地将RNA从DNA和蛋白混合物中分离；5）对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。
但其中最关键的是抑制RNA酶活性。
RNA的提取目前阶段主要可采用两种途径，1) 提取总核酸，再用氯化锂将RNA沉淀出来；2) 直接在酸性条件下抽提，酸性下DNA与蛋白质进入有机相而RNA留在水相。
第一种提取方法将导致小分子量RNA的丢失，目前该方法的使用频率已很低。
方法一: 总RNA的试剂盒快速提取一些公司推出的总RNA提取试剂盒，可以用来制备高质量的可用于建库的RNA。
该总RNA纯化系统采用两种著名的RNA酶抑制剂，异硫氰酸弧(GTC)和β-巯基乙醇，加上整个操作都在冰浴下进行，这样就能显著降低RNA的降解速率。
GTC和N-十二烷基肌氨酸钠的联合使用，将促使核蛋白复合体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。
而进一步从复合体中纯化RNA，则根据Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法进行，采用酸性酚-氯仿混合液抽提。
低pH值的酚将使RNA进入水相，这样使其与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离。
水相中的RNA可用异丙醇沉淀浓缩。
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项
rna提取试剂盒的提取流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!RNA提取试剂盒的提取流程及注意事项详解RNA，即核糖核酸，是生物体内的重要分子，对遗传信息的传递和表达起着关键作用。
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RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒
目录号：RN25
目录编号包装单位
RN2502 50次
❖适用范围：
适用于快速提取全血高纯度总RNA
❖试剂盒组成、储存、稳定性：﹢
试剂盒组成保存50次
10X红细胞裂解液RLB 裂解液RL
室温
4℃避光
25 ml
50 ml
去蛋白液RE 室温25 ml
漂洗液RW 室温
10 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free H2O 室温10 ml
70%乙醇室温
9ml RNase-free H2O
第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free吸附柱RA 室温50个
收集管（2ml）室温50个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项：
1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直
接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此
运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
裂解液RL可以常温运输，收到后4℃避光保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及
时盖紧盖子。
❖产品介绍：
1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及
时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2.所有离心步骤如未加说明，均在室温进行。
使用转速可以达到13，000 rpm的传统
台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3.裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免
沾染皮肤、眼睛和衣服。
若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂氯仿，用户使用前需要自备氯
仿。
5.常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。
好的RNA产物
在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb （18S），条带亮度比值约为2：1。
有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。
但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6.检测OD260/OD280吸光度比值时，RNA样品应该溶于TE后检测，如果用水稀释后
检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7.加入裂解液RL匀浆后，加氯仿前，样品可在–60℃-70℃保存一个月以上。
8.关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留, 在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留（一般电泳EB染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1)选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板
参与扩增反应。
2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3)将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。
4)在步骤去蛋白液RE漂洗后，直接在吸附柱RA上进行DNase I消化处理。
❖操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
⇨提示：第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇!
⇨使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X。
1.在适合大小的RNase free离心管中加入1体积（0.5-1.0ml）加入各种抗凝剂新鲜血
液(颠倒混匀后)和3体积的红细胞裂解液RLB,颠倒混匀,可轻弹管壁,确保混匀。
病人血样中白细胞数量可能大幅增加或者减少, 应该适当增加或者减少处理量。
2.室温放置10分钟（期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞）。
如果RNA降解严重,可在冰上裂解,但是时间可长一些以充分裂解。
3.12,000 rpm离心20秒，倒弃红色上清，并小心的尽可能多的吸弃上清（注意不要
吸到管底的细胞团），留下完整的管底白细胞团。
离心后在管底应该见到白色的白细胞团，也可能有一些红细胞残片和白细胞团在一起，但是如果看到的是大部分的红色细胞团，说明红细胞裂解很不充分，应该再加入红细胞裂解液重悬细胞团后重复步骤2，3。
上清尽可能的吸弃,残留过多会稀释裂解液,造成裂解结合异常,产量纯度降低。
4.涡旋或者轻弹管壁将白细胞沉淀完全松散重悬，加入1ml的RL, 用移液枪反复
吹打来裂解细胞。
5.将匀浆样品剧烈震荡混匀，在15 -30°C条件下孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。
6.每1ml RL加0.2ml氯仿。
盖紧样品管盖，剧烈振荡15秒并室温下放置2分钟。
7.于4℃12，000rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上层无
色的水相，RNA存在于水相中。
水相层的容量大约为所加RL体积的60%，把水相转移到新管中，进行下一步操作。
8.加入等体积70％乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!），颠倒混匀（此时可能会
出现沉淀）。
得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱RA中（吸附柱套在收集管内，若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱RA中，请分两次转入吸附柱RA中。
）
9.12，000rpm 离心45秒，弃掉废液，将吸附柱重新套回收集管。
10.加500μl去蛋白液RE，12，000rpm 离心45秒，弃掉废液。
11.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心45秒，
弃掉废液。
12.加入500μl漂洗液RW，12,000 rpm 离心45秒，弃掉废液。
13.将吸附柱RA放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗
液中残留乙醇抑制下游反应。
14.取出吸附柱RA，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中
间部位加50-80μl RNase free water（事先在65-70℃水浴中加热效果更好），室温放置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟。
如果需要较多RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心1分钟,或者另外再加30μl RNase free water，离心1分钟，合并两次洗脱液。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要RNA浓度较高，可以适当减少洗脱体
积，但是最小体积最好不少于30μl，体积过小降低RNA洗脱效率，减少RNA 产量。