去除植物凝集素最好的方法
植物凝集素提取工艺

植物血凝素也称为植物凝集素(PHA),可自制也可购自商品。
自制的方法常用生理盐水提取法。
(A)干品制备法(1)选广东鸡子豆10g,用蒸馏水冲洗,置培养皿内用75%酒精一次性浸洗,倒掉酒精留间隙置37℃。
恒温箱内24-48小时;(2)在无菌条件下研碎鸡子豆,加生理盐水30ml,摇匀后放入4℃冰箱24小时,第二天再加生理盐水70ml,再置4℃冰箱内24小时。
每8-12小时摇荡一次。
(也可一次(3)无菌条件下移入10-50ml离心管内,3000-4000rpm30性加100ml生理盐水);分钟。
在无菌箱内把上清液分装于10ml小瓶,置冰箱冷冻层备用;(4)效价:外周血染色体制备每100ml培养基加PHA约2ml。
注:若整个过程未在无菌条件下进行,分装时用G5玻砂漏斗除菌即可。
(B)鲜品制备法:(1)选择完整无破皮鲜菜豆20g,用75%酒精浸泡10分钟;(2)在净化工作中用无菌盐水或蒸馏水漂洗二次,然后置无菌乳钵中捣成糊状,用100ml无菌盐水浸泡封口;(3)移入4℃冰箱中置24小时,中间摇动数次,次日3000rpm30分钟,在无菌情况下分装上清液于10ml小瓶内,置冰箱冷冻层备用。
(4)效价:正式使用前先用一定量作效价测定,按效价使用。
青豌豆的.提取:取青豌豆100克,加含0.15M氯化钠的0.01M pH7.0磷酸缓冲液200ml浸泡过夜,经膨胀后用组织捣碎机捣碎,倒入布袋中压榨出水提液,在沉渣中再力0入磷酸缓冲液100ml搅拌,浸泡1时,压榨出水提液,合并水提液,量出总体积。
加0.01%叠氮钠防腐。
2.蛋白质沉淀:边搅边加入固体硫酸铵达80%饱和(每升溶液加硫酸铵561克)冷藏过夜。
吸取上清液,沉淀再用二层滤纸抽气过滤至干,即得粗制青豌豆素蛋白沉淀物硫酸铵糊。
置冰箱保存。
3.亲和层析分离(1)装柱:取直径为1.0 cm,长度为25 cm的层析柱,按(实验十五)操作,自顶部缓缓加入稀薄的Sephadex G25悬液,待凝胶上升至距顶柱约3-5 cm即可,用1M NaCl溶液平衡10分钟。
植物凝集素(PHA)的提取及血凝效果研究

植物凝集素(PHA)的提取及血凝效果研究
于敏;王志德;董志芳
【期刊名称】《安徽科技学院学报》
【年(卷),期】2002(016)001
【摘要】凝集素是一类具有糖专一性、可促使细胞凝集的蛋白质或糖蛋白,本文通过提取8种豆科植物种子中的凝集素,分别与人的四种血型红细胞悬液发生凝集反应(A型、B型、O型、AB型),通过血凝反应的强弱程度来验证不同凝集素的血型专一性,并进一步测定其相对含量.
【总页数】3页(P23-25)
【作者】于敏;王志德;董志芳
【作者单位】安徽大学生命科学院,安徽,合肥,230039;安徽大学生命科学院,安徽,合肥,230039;安徽大学生命科学院,安徽,合肥,230039
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.1
【相关文献】
1.红芸豆植物凝集素凝胶剂杀精与凝集精子效果的实验研究 [J], 王静静;姚娅婷;李阔;郑永;张田;王敏康
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3.芸豆植物凝集素的提取及血凝效果研究 [J], 郭春生;于蕾妍;葛蔚;张丽;唐超;王清吉
4.植物血凝素(PHA)治疗非典型新城疫效果好 [J], 李志国;王希臣;耿援非;梁奎
平
5.蒜头果凝集素的提取及血凝效果研究 [J], 袁燕;袁再美;岑晓江;程霞
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植物血凝素的提取

植物血凝素也称为植物凝集素(PHA),可自制也可购自商品。
自制的方法常用生理盐水提取法。
(A)干品制备法(1)选广东鸡子豆10g,用蒸馏水冲洗,置培养皿内用75%酒精一次性浸洗,倒掉酒精留间隙置37℃。
恒温箱内24-48小时;(2)在无菌条件下研碎鸡子豆,加生理盐水30ml,摇匀后放入4℃冰箱24小时,第二天再加生理盐水70ml,再置4℃冰箱内24小时。
每8-12小时摇荡一次。
(也可一次性加100ml生理盐水);(3)无菌条件下移入10-50ml离心管内,3000-4000rpm30分钟。
在无菌箱内把上清液分装于10ml小瓶,置冰箱冷冻层备用;(4)效价:外周血染色体制备每100ml培养基加PHA约2ml。
注:若整个过程未在无菌条件下进行,分装时用G5玻砂漏斗除菌即可。
(B)鲜品制备法:(1)选择完整无破皮鲜菜豆20g,用75%酒精浸泡10分钟;(2)在净化工作中用无菌盐水或蒸馏水漂洗二次,然后置无菌乳钵中捣成糊状,用100ml无菌盐水浸泡封口;(3)移入4℃冰箱中置24小时,中间摇动数次,次日3000rpm30分钟,在无菌情况下分装上清液于10ml小瓶内,置冰箱冷冻层备用。
(4)效价:正式使用前先用一定量作效价测定,按效价使用。
青豌豆的提取:取青豌豆100克,加含0.15M氯化钠的0.01M pH7.0磷酸缓冲液200ml浸泡过夜,经膨胀后用组织捣碎机捣碎,倒入布袋中压榨出水提液,在沉渣中再力0入磷酸缓冲液100ml搅拌,浸泡1时,压榨出水提液,合并水提液,量出总体积。
加0.01%叠氮钠防腐。
2.蛋白质沉淀:边搅边加入固体硫酸铵达80%饱和(每升溶液加硫酸铵561克)冷藏过夜。
吸取上清液,沉淀再用二层滤纸抽气过滤至干,即得粗制青豌豆素蛋白沉淀物硫酸铵糊。
置冰箱保存。
3.亲和层析分离(1)装柱:取直径为1.0 cm,长度为25 cm的层析柱,按(实验十五)操作,自顶部缓缓加入稀薄的Sephadex G25悬液,待凝胶上升至距顶柱约3-5 cm即可,用1M NaCl溶液平衡10分钟。
植物凝集素(PHA)的提取及血凝效果研究

确立 了凝集 素 的血型专一 性 和它 们的糖结 合血 专
一
体 组成 , 每个 单体 的分子量 为 2 ~3 D, 一个 5 0K 有 结合糖 位 点 _ J 凝 集 素 不 仅 具 有 凝 集 诸 如血 l 。 细胞 、 巴细胞 、 子细 胞等 作 用 , 且 参与 了生 淋 精 而
占蛋 白质 总含 量 的 1 %左右 . 由 2个 或 4个 单 0 它
具 有 较 大 应 用 价 值 . 油 麻 藤 种 子 中的 凝 集 素 如 ( L 即 是 一 种 人 A 型 血 专 一 性 的凝 集 素 _ 。 Ms ) 4 】 P 利马 豆凝集 素 ) A 型血专 一 , L 欧洲 百 I A( 对 (
维普资讯
安徽 技术 师范学院学报, 02 1 ( )2 -2 2 0 , 6 1 :3 5
j un l fAn u eh i l a h r olg o r a o h i c nc T a Tec esC l e e
植物凝集素 ( H 的提取及血凝效果研 究 P A)
1 . 试剂 : 8 %Na I 液 ( 1 3 0.5 C溶 生理盐 水 )
生物 体 内细 胞癌变 、 受精 、 化 及分 子识 别等 生命 分
过程 极其 有 用的工具 , 同时 作 为一种试 剂 , 凝集 素
不仅 在l 医学检 验 上 有 着 重要 地 位 , 且 是抗 临床 雨 肿 瘤药物 ( 干扰 素 、 如 白细 胞 介 素一 ) 产 所需 2等 生 的促 有丝 分 裂原 L 7, 3 1国外 近 来还 报道 某 些 凝集 - 素对爱 滋病 毒也 有 抑 制 作 用 ・ 。凝 集 素可 能具
天然果蔬中的亚硝酸盐、草酸、植酸、凝集素

天然果蔬中的亚硝酸盐、草酸、植酸、凝集素亚硝酸盐消除有方法蔬菜中的亚硝酸盐很可能是比农药危害更大的一种成分,我国膳食中80%左右的亚硝酸盐来自蔬菜。
那么,怎样才能远离蔬菜中的亚硝酸盐呢?·洗洁精清洗和漂洗蔬菜相比,泡蔬菜会增加蔬菜中的亚硝酸盐含量,盐水泡也并不比加洗洁精然后用自来水漂洗去除农药的效果更好。
应先用洗洁精清洗,再漂洗干净的蔬菜,其中的亚硝酸盐含量低于用清水浸泡20分钟的蔬菜。
泡蔬菜会增加蔬菜中的亚硝酸盐含量,从而不利于食品安全。
另外,长时间的浸泡还可能使叶片破损,营养成分的损失增加。
·控制好食用时间蔬菜的储存时间和条件对其中的亚硝酸盐含量影响也很大。
刚刚采收的新鲜蔬菜当中,亚硝酸盐含量微乎其微。
而蔬菜在室温下储藏1~3天时,其中的亚硝酸盐达到高峰;冷藏条件下,3~5天达到高峰。
对于像菠菜、小白菜这样的绿叶蔬菜来说,亚硝酸盐产生量特别大,冰箱储藏的效果要明显好于室温储藏,而对于黄瓜和土豆来说,差异并没有那么明显。
对于长期储藏的大白菜来说,储藏多日之后,其中的硝酸盐和亚硝酸盐含量反而有所下降,故而不必担心冬储大白菜的亚硝酸盐问题。
因此,对于绿叶蔬菜来说,选购时要问清是否为当天新鲜蔬菜,了解采摘时间来判断食用时间;如果不能马上吃完,最好清洗干净后放入冰箱冷藏,最好在5天后再食用。
·沸水焯泡添加调料如果把蔬菜先在沸水中焯一下,通常可以除去70%以上的硝酸盐和亚硝酸盐。
可以先焯熟绿叶蔬菜,捞出后放入凉白开中,捞出平摊凉到室温,再存放入冰箱。
亚硝酸盐的含量就会相当少,完全可以放心食用。
如果依然对蔬菜不放心,也可以通过烹调过程达到消除危害的目的。
在做凉拌蔬菜的时候,可以加入蒜泥、柠檬汁、姜、辣椒汁来降低亚硝酸盐的含量。
这些调料中含有有机硫化物、维生素C以及其他还原性物质都能够阻断亚硝酸盐合成致癌物亚硝胺。
·正确保存熟菜炒熟的蔬菜久存之后也会有亚硝酸盐含量增加的问题,这是由微生物活动导致的。
玉竹,黄精凝集素提取纯化

玉竹黄精凝集素的分离纯化凝集素介绍:凝集素是在自然界广泛存在的可以凝集细胞和使糖复合物或多糖复合物沉淀的非免疫来源的蛋白质或糖蛋白,在植物、动物和微生物体中发挥着多种重要的生物学功能。
凝集素已经被应用到细胞间的相互作用,配基和受体的识别,血型的鉴定,淋巴细胞的分布,健康和病理条件下的组织化学研究,肿瘤细胞的识别,细胞的黏附和定位,生物膜信号的传导,增强肌体免疫防御,生物大分子的运输和某种程度上的免疫识别过程。
单子叶甘露糖结合凝集素作为一类研究的比较多的凝集素已在多种植物中被发现,如郁金香、芦荟、风信子等。
而且单子叶甘露糖结合凝集素已经在不同领域引起了越来越多的关注,并且大部分是其抗病毒活性和抗虫特性的生物化学研究和开发。
尤其是近来在免疫缺陷病毒方面的研究,使得单子叶甘露糖结合凝集素的研究意义更加突出。
玉竹凝集素的提取纯化:实验原理:百合科植物玉竹( Polygonat um odorat um ( Mill. ) Druce) 的根状茎经生理盐水浸取、硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose 柱离子交换层析和Sephacryl S-200 凝胶过滤,即可得到玉竹凝集素的纯品。
实验材料:玉竹;丙烯酰胺(acrylamide) ;氯化铯(Caesium chloride);碘化钾;所用溶液均以双蒸水配制.取玉竹根状茎经高速组织捣碎机粉碎,经3 倍体积生理盐水(0. 9 %NaCl) 浸取、过滤、离心(4°C ,4500r/ min ,30min) 后,向上清液中加入30 %~80 %硫酸铵进行蛋白质分级沉淀,离心收集沉淀并用水充分透析除去硫酸铵得玉竹凝集素粗品。
所得凝集素粗品经pH 4. 6 ,0. 02mol/ L NaAc2HAc 缓冲液平衡透析后,用于CM-Sepharose (2. 6 ×28cm) 柱, 经相同缓冲溶液洗涤后,用0~1mol/ L NaCl 的NaAc-HAc 溶液进行离子线性梯度洗脱,经紫外和凝血活性检测后,收集活性部分,冷冻干燥。
一种豆类植物凝集素的提取方法[发明专利]
![一种豆类植物凝集素的提取方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/71bab32089eb172dec63b77d.png)
专利名称:一种豆类植物凝集素的提取方法专利类型:发明专利
发明人:王敏康
申请号:CN200910094233.1
申请日:20090318
公开号:CN101508730A
公开日:
20090819
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:一种豆类植物凝集素的提取方法,属植物有用成分提取技术领域。
为水提法,在40~60℃温度下提取,按以下步骤:豆类种子粉碎到40~100目→加入浸泡液在40~60℃温度下提取60~180分钟并打捞豆皮→粗分去除豆渣→离心分离得含植物凝集素的上清液→对上清液进一步进行分离纯化→浓缩或干燥得植物凝集素。
可于提取的全过程或部分过程中施加超声波或微波,或交替施加超声波和微波进行辅助提取。
本发明完全抛弃了传统的低温浸泡低温处理方法,实践证明是一种简单高效和短时间的提取植物凝集素的方法。
通过有关检测,所得植物凝集素能满足常规的实验及药用需要。
本发明克服了现有技术产品有较多化学试剂成分遗留和提取时间长的缺点。
申请人:王敏康
地址:650092 云南省昆明市一二一大街298号云南师范大学生命科学院
国籍:CN
代理机构:昆明科阳知识产权代理事务所
代理人:李行健
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芸豆提取植物凝集素工艺流程

芸豆提取植物凝集素工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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去除植物凝集素最好的方法
植物凝集素(PHA)是一种天然存在于某些植物中的蛋白质。
它具有多种生物学活性,包括抗肿瘤、免疫调节和凝集作用等。
然而,在一些情况下,植物凝集素可能成为问题,因为它可能导致某些副作用或不良反应。
因此,去除植物凝集素是必要的。
在本文中,将介绍几种去除植物凝集素的方法。
1. 低温处理:植物凝集素对温度敏感,可以通过低温处理来降低其活性。
一般来说,将植物材料置于低温环境中,如冰箱或冷冻室,可以有效地降低植物凝集素的活性。
通过低温处理,可以减少植物凝集素对生物体的影响。
2. 酶处理:酶是一种催化剂,可以降解植物凝集素的结构。
选择适当的酶,如蛋白酶K或胰蛋白酶等,可以将植物凝集素降解为无活性的分子。
酶处理一般需要在适当的温度和pH条件下进行,并在反应一定时间后停止酶活性,否则可能导致过度降解。
3. 离子交换:离子交换是一种常用的分离技术,可用于去除植物凝集素。
通过将植物材料或提取物与具有特定离子交换基团的树脂接触,植物凝集素可以与树脂结合,并从溶液中移除。
这种方法需要控制离子交换的条件,如温度、pH和流速,以确保高效去除植物凝集素。
4. 膜分离:膜分离是一种通过物质分子大小、电荷和亲疏水性等特性分离混合物的方法。
通过使用合适的膜,植物凝集素可以被过滤或逆渗透除去。
这种方法
可以高效去除植物凝集素,并且操作相对简单。
但需要注意选择适当的膜孔径和条件,以防止植物凝集素的回吸或损失。
5. 超声波处理:超声波可以破坏植物凝集素的结构,从而降低其活性。
通过将植物材料或提取物置于超声波浴中,超声波的机械效应可以主导植物凝集素的降解。
超声波处理一般需要适当的功率和处理时间,并注意控制温度,以免超声波造成过热。
6. 过滤和沉淀:通过适当的过滤和沉淀步骤,可以去除大部分的植物凝集素。
通过选择适当的滤纸或孔径的膜过滤器,可以将植物凝集素分离并去除。
此外,通过离心沉淀也可以将植物凝集素从溶液中沉淀出来。
需要注意的是,不同的去除方法适用于不同的情况和要求。
选择合适的去除方法要考虑到植物材料的性质、植物凝集素的活性、处理的规模和要求等因素。
同时,在选择和应用去除方法时,需要进行适当的验证和监测,以确保植物凝集素的完全去除和产品质量的稳定。
总而言之,去除植物凝集素是必要的,可以通过低温处理、酶处理、离子交换、膜分离、超声波处理和过滤沉淀等方法来实现。
选择适当的方法应根据具体情况进行,同时需进行合适的验证和监测,以确保去除效果和产品质量的稳定。