测定种子活力的原理
种子生活力测定原理及方法PPT课件
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• 2、AOSA活力测定方法（《活力测定手册》， • 广泛应用的方法，将种子活力测定分为3种类型： • 逆境测定（加速老化试验、低温试验、冷发芽试验）； • 幼苗生长和评定试验（幼苗活力分级、幼苗生长速率测定）； • 生化测定（四唑法、电导率法）。
• 三、活力、生活力和发芽力的区别与联系 衡量种子生理质量有发芽力、生活力和活力三个指标，三
者有密切的关系，却有完全不同的含义： • 1、种子生活力：是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 • 通常用供检样品中活种子数占样品总数的百分率。
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2、种子发芽力：是指种子在适宜条件下(实验室控制条件下)长成 • 正常植株的能力。通常用供检样品中长成正常幼苗数占样品总
品种进行。如玉米：65232、齐319作母本的较高：DH11、 LD981等。 • ②种子发芽速率受到原始水分的影响，测定前
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗
快速， • 有时可用来替代来不及发芽的发芽率，但最后的结果还是用发
芽率作为正式的依据。2012/03/10来自11第11页/共49页
• 3、种子活力就是指高发芽率种子批间在田间表现的差异。 • 种子活力是比发芽率更敏感的指标，在高发芽率的种子批中， • 仍然表现出活力的差异（高低）。通常发芽率高的种子具有较
4.5、5.5等 N：正常幼苗总数。
种子生活力与活力测定
5．观察鉴定 一般鉴定原则是，凡是胚的主要构造及有关活营养
组织染成有光泽的鲜红色，为有生活力种子。禾本 科：观察盾片、胚芽、胚轴、胚根；双子叶：观察 子叶、胚芽、胚轴、胚根。
凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色， 并且活的营养组织不染色部分超过允许范围，以及 组织软化的，为不正常种子。
2.原理
将离体胚在规定的条件下培养5～14 d。有生 活力的胚仍然保持坚硬新鲜的状态，或者吸 水膨胀、子叶展开转绿，或者胚根和侧根伸 长、长出上胚轴和第一叶；而无生活力的胚， 则呈现腐烂的症状。
（二）离体胚测定方法
1．试验样品 需用400粒种子。设定重复次数（如4×100或 8×50）。
a．胚根顶端不染色，花生为三分之一，蚕豆为三分之二， 其他种为二分之一。 b．子叶顶端不染色，花生为四分之一，蚕豆为三分之一， 其他为二分之一。 c．除蚕豆外，胚芽顶部不染色四分之一 。
瓜类： a．胚根顶端不染色二分之一。 b．子叶顶端不染色二分之一。 棉花： a．胚根顶端三分之一不染色。 b．子叶表面有小范围的坏死或子叶顶端三分之一
DPNH2 + TTC (辅酶IH2) (四唑)
DPN + TTCH + HCl (辅酶I) (甲 ) (氯化氢)
依据四唑染成的颜色和部位，即可区分种子红色的有生活力部分和无 色的死亡部分。
注意：四唑染色是一酶促反应，因此反应不仅受酶活性的影响，还受 底物浓度、反应温度、pH值等因素的影响。
平均生活力百分率（%）
最大容许范 围
1
2
3
99
2
5
98
3
6
97
4
7
96
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植物生理学实验
实验五种子活力的测定（红墨水法）一、实验目的掌握快速测定种子活力的方法二、实验原理种子生命力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的细胞原生质膜丧失这种能力，于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。
活细胞不能吸收红墨水所以不染色。
三、试剂、材料5%红墨水、培养皿、刀片青稞种子四、实验过程1、将随机购买的种子用温水浸泡3-6小时，使其充分吸胀。
2、吸胀后的种子挑选50粒，沿胚中心线纵切为两半。
3、一半至于培养皿中，用红墨水浸泡染色10分钟，染色后倒去红墨水，用清水冲洗至液体无色。
4、另取50粒种子吸胀，沸水煮熟成死种子，重复步骤3，作为空白对照。
五、计算结果未被染色的种子数目种子活力＝*100％总种子数目实验一植物组织水势的测定--小液流法一、实验目的1、掌握植物细胞水势概念及计算公式；2、了解小液流法测定植物组织水势的方法。
二、实验原理1、植物细胞、组织之间以及植物体和环境间的水分间移动方向都由水势差决定；2、当植物细胞或组织放在外界溶液中时：A、ψw＜ψs，则植物组织吸水，C外↑，液滴↓；B、ψw＞ψs，则植物组织失水，C外↓，液滴↑；C、ψw＝ψs，则二者水分保持动态平衡，C外不变，液滴不动。
三、试剂、材料试管、试管架、滴管、打孔器、蔗糖溶液菠菜四、实验过程1、取出8支试管，依次编号1、用1mol/l的蔗糖溶液配制0.10、0.20、0.30、0.40、0.50M、0.60M、0.70M、0.80M一系列不同浓度的蔗糖溶液，取出8支试管用力混匀。
五、实验结果根据公式计算叶片细胞的水势公式：ψw =-RTiC式中：ψw为细胞水势，R为摩尔气体常数，0.083×105（L٠Pa）/（mol٠K）；T为热力学温度，单位K；即273+t ，t为实验温度，单位是℃；i为解离系数，蔗糖为1；C为等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/L。
种子活力的测定
肇庆学院生命科学学院生物科学系植物生理学课实验报告08 年级生本班 B 组28 实验日期10.22姓名杨丹平老师评定＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿实验题目实验五种子活力的测定一、实验目的：掌握种子活力快速测定的几种方法。
二、实验原理：1、活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。
当TTC渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯基甲（TTF）。
2.、活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
3红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
三、实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶3、材料：玉米、绿豆吸胀种子四、实验步骤：1．浸种种子在30—35℃温水中浸种5h2.0.5%TTC显色实验将吸胀的玉米种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜；将吸胀的绿豆种子去皮，随机选30粒置于培养皿中，加入0.3%TTC，置于30C观察培养箱中培养30min。
观察浸种胚是否为红色。
另30半粒玉米和已去皮的30粒绿豆置于沸水中2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30C培养箱中染色处理作为对照观察。
计算活种子的百分率。
3.1%BTB染色将吸胀的玉米种子30半粒和去皮的30粒绿豆种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，平放，间距约1cm。
种子活力的测定
种子活力的测定【实验目的】学习掌握TTC法和红墨水染色法快速测定种子活力的原理和方法【实验原理】TTC法：活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。
当TTC渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯基甲腙（TTF）；如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
红墨水染色法：活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%TTC法：活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒数/实验种子的总粒数)×100%红墨水法：活种子百分率（%）=(不着色或着色很浅的种子粒数占实验种子/实验种子的总粒数) ×100%【实验材料、试剂】玉米、小麦种子0.3%(w/v)TTC5%红墨水（红墨水5ml+95ml自来水)【实验步骤】TTC法1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种子充分吸胀。
2. 随机取种子30粒，沿种胚中央准确切开，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜，置于30 ℃观察培养箱中培养30min ；另30半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30 ℃培养箱中染色处理作为对照观察。
3. 倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗2次，观察种胚被染色的情况。
4.观察：种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的为死种子。
5%红墨水显色1.同样将吸胀的玉米、小麦种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半；2.其中一半置于培养皿中，加入5%红墨水，以覆盖种子为宜，置于30 ℃培养箱中培养10min.染色后倒去红墨水并用水冲洗多次至冲洗液无色为止。
另30半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入5%红墨水置于30℃培养箱中染色处理作为对照观察；3.观察：凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
第五章___种子生活力与活力测定
色情况。
20 ml乳酸＋20 ml苯酚＋40 ml甘油＋20 ml蒸馏水
注意
该药液有毒性，最好戴塑胶薄膜手套配 制，并在通风橱里操作。在使用时谨防 触及皮肤或衣服等。
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（4） H202 ：加快酶活化和吸胀。一般用0.3%H202溶液 （5）杀菌剂和抗生素：延缓衰弱种子的劣变进程。
第一节 种子生活力测定原理及方法
2)种子预措
目的：采用适当的方法使胚的主要构造和(或)活的营
养组织暴露出来。
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第一节 种子生活力测定原理及方法
方法：
刺穿：对经过预湿的种子或硬实种子，可利用解剖针或解
剖刀，刺穿种子的非主要部位，适用于小粒（牧草等）种子。
加速四唑还原成甲臜的速度；
或在两端横切，打开胚腔，并 切去小部分胚乳(配子体组织) 针叶树种子沿胚旁 边纵切
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（3）四唑染色
目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的
健壮、衰弱和死亡部分的差异正确地显现出来。 染色程序： 将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或 烧杯中。 加入适宜浓度的四唑溶液，以淹没种子为度，移置 到一定温度的（黑暗或弱光）恒温箱内进行染色反应。
ISTA Working Sheets on Tetrazolium Testing, Volume I, 1st Edition, 2003 Volume I - Agricultural, Vegetable and Horticultural Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
实验4 种子生活力测定
实验4 种子生活力的测定—红墨水（酸性大红Ｇ）染色法
一、实验原理
有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的酸性大红Ｇ不能进入细胞内，胚部不染色。
而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。
二、仪器与用具
培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH试纸。
三、试剂
红墨水溶液的配制：取市售红墨水稀释20倍（1份红墨水加19份自来水）作为染色剂。
四、实验方法
1.先将待测种子用水浸泡3～4h，待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3～5min，作为死种子。
2.取浸好的新种子、陈种子和死种子各50粒，如为小麦和玉米，则用单面刀片沿胚部中线纵切成两半，其中一半用于测定。
3.将备好的种子分别放在培养皿内，加入红墨水溶液，以浸没种子为度。
4.染色10～20min后倾出溶液，用自来水反复冲洗种子，直到所染颜色不再洗出为止。
5.对比观察冲洗后的新种子、陈种子和死种子胚部着色情况。
凡胚部不着色或略带浅红色者，即具有生活力的种子，若胚部染成与胚乳相同的红色，则为死种子，把测定结果记入表
五、实验操作，实验数据要进行整理，最后要计算结果。
(精品)种子生活力测定的原理
(精品)种子生活力测定的原理种子生活力测定是种子品质检测的重要方法之一。
其原理是利用种子的代谢活动作为生活力的指标，通过测定种子的呼吸率、发芽率、抽胚率等参数来评价种子的生活力。
下面将详细介绍种子生活力测定的原理。
一、种子呼吸率的测定原理呼吸作为种子的代谢过程之一，可反映种子的生物化学活性。
种子呼吸率是指在单位时间内种子的氧气消耗量或二氧化碳产生量，即呼吸强度。
呼吸率的大小直接关系到种子的能量来源和消耗。
种子在用氧进行呼吸作用时，主要的代谢物质是葡萄糖和氨基酸，产生 ATP 等能量分子和二氧化碳、水等代谢产物。
利用呼吸量，可以评价种子存活度和质量。
测定种子呼吸率的方法有很多种，如使用光谱法、显微镜熔点计、低温燃烧法、气体检测法等。
其中，气体检测法是应用最广泛的一种方法。
方法是将种子装在呼吸率仪中，通过不断加入氧气和排出二氧化碳实现测定。
常用的仪器有 WSTE-1、WTmod1-1 等。
种子发芽率是种子生活力测定中最基本的参数之一。
它是指单位时间内种子的发芽数，反映种子生长发育的潜力和种子质量的优劣。
种子发芽过程主要涉及种子萌发、根和胚芽的形成和生长等，需要有充足的水分、适温、氧气和光照等条件。
种子发芽率受多种因素影响，如种子保存条件、处理方式、种子来源、品种特性等。
测定种子发芽率，常用的方法有常规温室法、纸巾培养法、挂网法等。
其中，常规温室法是最常用的一种方法。
其原理是将一定数量的种子放置在经过灭菌处理的仿土或营养物质充足的培养土壤中，在一定的温度和湿度条件下观察种子发芽情况，测定发芽率。
一般情况下，种子发芽率可以在 7-14 天内达到稳定。
种子抽胚率是指在不同水分和温度条件下，种子实现一定程度的萌发至抽胚的百分比。
它是种子品质的重要指标之一，同样受到多种因素影响，如种类、存储条件、处理方式等。
抽胚率的测定，常用的方法是室内拟真鉴别法和高温处理法。
室内拟真鉴别法是将种子放置在一定温度和湿度条件下，观察其抽胚情况；高温处理法是将种子暴露在高温环境中，观察其能否抽胚。
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测定种子活力的原理
测定种子活力的原理通常是通过观察种子的发芽率来判断其活力。
具体流程如下：
1. 种子浸泡：将一定数量的种子浸泡在适当的液体介质中，一般使用蒸馏水或含有营养物质的溶液，例如无机盐溶液。
2. 排水：浸泡一段时间后，将种子从液体中取出，排除多余的水分，使其表面保持适当的湿度。
3. 培养：将处理好的种子均匀放置在适当的培养基上，栽培在恰当的环境条件下，例如适当的光照、温度和湿度等。
4. 观察发芽：在一定的时间内观察种子的发芽情况，记录发芽的数量，并计算发芽率。
5. 计算活力：根据发芽率计算种子的活力，一般活力指数越高，种子的存活能力越强。
这种测定种子活力的方法主要基于种子的萌发过程，种子在合适的环境下，通过吸收水分和养分，释放出生长所需的能量，逐渐发芽生长。
通过观察发芽率，可以评估种子的存活能力和潜在增长能力，从而判断种子的活力。