谷丙转氨酶的测定

合集下载

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶实验报告血清谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,简称ALT)是一种存在于肝脏细胞中的酶类物质,它在肝脏功能评估中起着非常重要的作用。

通过检测血液中的ALT水平,可以帮助医生判断肝脏是否受损或存在疾病。

一、实验目的本次实验的目的是通过测量血清中ALT的含量,了解被检测对象的肝脏功能是否正常。

通过对实验结果的分析,可以初步判断是否存在肝脏疾病,并为进一步的诊断和治疗提供参考依据。

二、实验方法1. 实验前准备:准备好实验所需的血清样本、试剂和仪器设备,确保实验环境清洁卫生。

2. 采集血清样本:选择合适的部位,用无菌针头采集被检测对象的静脉血液。

注意遵守无菌操作规范,避免外界污染。

3. 血清分离:将采集到的血液样本放置于离心管中,以适当的转速离心一段时间,使血液分离成血清和红细胞。

4. ALT检测:将分离得到的血清样本转移至ALT检测仪器中,按照仪器操作说明进行操作。

仪器会自动测量ALT的含量,并显示结果。

三、实验结果根据实验测得的结果,ALT的含量可以分为正常范围和异常范围。

正常范围通常是男性10-40 U/L,女性7-35 U/L。

如果实验结果显示ALT的含量超出正常范围,可能意味着肝脏受损或存在疾病。

四、结果分析1. ALT升高的原因:ALT升高可能是由于肝脏炎症、肝细胞坏死、肝损伤等原因导致。

常见的疾病如肝炎、脂肪肝、肝硬化等都会引起ALT的升高。

2. ALT降低的原因:ALT降低可能是由于肝脏功能减退或肝细胞受损导致。

例如,肝功能衰竭、肝癌等情况下,ALT的含量通常会降低。

五、临床意义ALT作为肝脏功能的指标之一,对于肝脏疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。

通过检测ALT的含量,可以帮助医生判断肝脏是否受损,并及时采取相应的治疗措施。

六、实验注意事项1. 实验操作要规范:在实验过程中,要严格遵守无菌操作规范,避免外界污染。

同时,仪器操作要按照说明书进行,确保结果准确可靠。

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)是一种重要的肝脏酶,其测定可以用于评估肝功能和诊断肝脏疾病。

本实验旨在通过测定血清中ALT的活性,探究其在肝功能评估中的应用。

实验材料与方法。

1. 实验材料,实验所需材料包括ALT检测试剂盒、标准品、血清标本、比色皿、移液管等。

2. 实验方法:a. 样本处理,将采集的血清标本离心,取上清液置于4℃保存。

b. 实验操作,按照ALT检测试剂盒说明书进行操作,制备标准曲线和待测样本的反应体系。

c. 光度测定,使用分光光度计测定各标准品和待测样本的吸光度值。

d. 计算ALT活性,根据标准曲线计算待测样本中ALT的活性。

实验结果与分析。

经过实验测定,得到不同浓度的ALT标准曲线,吸光度与ALT浓度呈线性关系,相关系数达到0.99以上。

待测样本的吸光度值为X,通过标准曲线计算得到其ALT活性为Y。

进一步分析发现,实验组ALT活性显著高于对照组,说明实验组受到了肝脏损伤。

实验结论。

本实验通过测定血清中ALT的活性,成功评估了肝功能并诊断了肝脏疾病。

实验结果表明,ALT活性的升高与肝脏损伤密切相关,可作为肝功能评估和肝脏疾病诊断的重要指标之一。

实验注意事项。

1. 实验操作中需严格按照操作规程进行,避免操作失误导致结果误差。

2. 实验过程中需注意安全,避免接触有害化学品和受伤。

3. 实验结果需结合临床资料进行分析,以获得准确的诊断结论。

实验展望。

未来,可以进一步探究ALT在肝脏疾病诊断中的应用,寻找更为准确、快速的检测方法,为临床诊断提供更可靠的参考。

结语。

通过本实验,我们深入了解了血清谷丙转氨酶的测定方法和应用,为肝功能评估和肝脏疾病诊断提供了重要的实验依据。

希望本实验能对相关领域的研究和临床应用提供一定的参考价值。

血清中谷丙转氨酶活力测定结果

血清中谷丙转氨酶活力测定结果

血清中谷丙转氨酶活力测定结果血清中谷丙转氨酶(ALT)活力测定是一种常见的实验室检测方法,常用于评估肝功能和诊断肝病。

本文将介绍血清中谷丙转氨酶活力测定结果的相关知识。

血清中谷丙转氨酶活力(ALT)是指血液中存在的一种酶的活性,通常用于评估肝脏功能的状况。

正常情况下,谷丙转氨酶的活力是很低的,一般小于40单位/升。

当肝细胞受损或病变时,会释放ALT,使其活力升高。

高浓度的ALT通常与肝脏病变有关,例如肝炎、肝硬化、脂肪肝、药物性肝病等。

此外,高ALT水平还可能与其他疾病有关,例如急性胰腺炎、心肌梗塞、重型结核等。

因此,如果血清中ALT活力超过正常范围,应及时进行检查和诊断。

血清中ALT测定通常是使用血清学方法进行的。

一般情况下,医师会在胳膊上绑上一条缚带,并在手腕或肘部的静脉内取一小样血液。

样本会送到实验室进行分析。

实验室会使用化学试剂和仪器来测量血清中ALT的活力。

结果会以单位/升(U/L)的形式报告。

正常情况下,成人男性的ALT浓度应在10-40 U/L之间,女性的ALT浓度应在7-35U/L之间。

但这些数值还受到年龄、体重、性别和肝脏状态等因素的影响。

因此,在解读ALT浓度时,医生还需要考虑患者的其他情况。

ALT浓度的升高程度也是确定病情的重要指标之一。

一般来说,当ALT浓度超过正常范围的两倍以上时,就可以诊断为肝炎或其他肝病。

此外,还有一种称为谷草酰转移酶(AST)的酶,也与肝脏有关,但其升高程度不如ALT明显。

需要注意的是,虽然ALT浓度升高可能表明肝脏病变,但不能单独确定肝病的类型和严重程度。

医生还需要进行其他检查和评估,例如肝脏超声、CT扫描、肝组织活检等,以帮助确定具体的病情。

总之,血清中ALT活力测定是一种常见的实验室检测方法,通常用于评估肝脏功能和诊断肝病。

需要注意的是,结果需要结合患者的其他情况进行解读,以便更准确地诊断和治疗肝病。

谷丙转氨酶实验报告

谷丙转氨酶实验报告

一、实验目的了解谷丙转氨酶在生物体内的作用及其在临床诊断中的意义,学习谷丙转氨酶活性测定的原理和方法。

二、实验原理谷丙转氨酶(ALT)是一种广泛存在于生物体内的酶,主要存在于肝脏、心脏等组织中。

它催化丙氨酸与α-酮戊二酸在氨基转移过程中相互转化,生成谷氨酸和丙酮酸。

在正常情况下,血清中的ALT含量较低。

当肝细胞受损时,ALT会从细胞内释放到血液中,导致血清ALT活性升高。

因此,血清ALT活性的测定在临床诊断中具有重要意义。

本实验采用比色法测定血清ALT活性,通过观察反应体系中丙酮酸与2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)反应生成的丙酮酸2,4-二硝基苯腙(2,4-DNP-P)的生成量,来计算酶的活力。

三、实验材料与仪器1. 材料:- 血清样本- 2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)- α-酮戊二酸- 丙氨酸- 磷酸氢二钠(Na2HPO4)- 磷酸二氢钠(NaH2PO4)- 0.1mol/L氢氧化钠(NaOH)- 0.1mol/L盐酸(HCl)- 标准曲线样品2. 仪器:- 酶标仪- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管- 试管四、实验步骤1. 标准曲线的制作:- 配制不同浓度的标准曲线样品,分别加入丙氨酸和α-酮戊二酸,混匀。

- 将标准曲线样品置于酶标仪中,在特定波长下测定吸光度。

- 以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

2. 血清ALT活性的测定:- 将血清样本按照一定比例加入反应体系中,加入2,4-DNPH和底物,混匀。

- 将反应体系置于恒温水浴锅中,反应一定时间。

- 反应结束后,加入0.1mol/L氢氧化钠终止反应。

- 将终止后的反应体系置于酶标仪中,在特定波长下测定吸光度。

- 根据标准曲线,计算血清ALT活性。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:标准曲线呈线性关系,相关系数R²=0.998,表明本实验采用的方法具有良好的线性。

2. 血清ALT活性的测定:实验结果显示,本实验测定的血清ALT活性为XX单位/L。

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告

血清谷丙转氨酶实验报告背景介绍血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,简称ALT)是一种存在于肝脏中的酶类物质,主要参与蛋白质的代谢过程。

正常情况下,ALT的活性较低,而当肝脏受到损伤时,ALT会释放到血液中,血液中的ALT水平也会升高。

因此,检测血清中ALT的水平可以作为评估肝脏功能以及肝脏疾病的重要指标之一。

实验目的本实验旨在通过检测血清中ALT的水平,了解被检测个体的肝脏功能状态,提供诊断肝脏疾病的参考依据。

实验材料1.血清样本:被检测个体的血清样本,需通过静脉采血获取。

2.ALT试剂盒:包含必要的试剂和材料,用于检测血清中ALT的水平。

实验步骤1.获取血清样本:用无菌的注射器从被检测个体的静脉中采集足够的血液样本,约5-10毫升即可。

2.处理血清样本:将采集到的血液样本放置在无菌离心管中,离心约10分钟以分离血清和血细胞。

将分离得到的血清转移至干净的试管中。

3.准备实验室试剂:取出ALT试剂盒,按照说明书中的指引,准备所需的试剂和材料。

4.进行实验操作:根据ALT试剂盒的说明,将一定量的血清样本与试剂盒中的试剂混合,进行反应。

反应时间和条件需根据试剂盒的要求进行。

5.反应结果读取:按照ALT试剂盒说明,使用光度计等设备测量反应体系的吸光度。

吸光度的数值与血清中ALT的浓度成正比。

6.数据分析和结果解读:根据测定结果,比较样本中ALT的浓度与正常范围进行对比。

若ALT浓度超过正常范围,可能提示存在肝脏损伤或疾病。

结果与讨论本实验的结果即为测定得到的血清中ALT的浓度。

根据测定结果,我们可以初步判断被检测个体的肝脏功能状态。

若ALT浓度超过正常范围,可能存在肝脏疾病,需要进一步的检查和诊断。

值得注意的是,ALT浓度的升高不一定说明肝脏疾病,还可能受到其他因素的影响,如药物的使用等。

结论通过本实验,我们可以通过检测血清中ALT的水平来评估被检测个体的肝脏功能状态。

ALT浓度的升高可能提示肝脏损伤或疾病,但需要结合其他临床检查和诊断方法来进行综合分析和判断。

谷丙转氨酶的测定原理

谷丙转氨酶的测定原理

谷丙转氨酶的测定原理
谷丙转氨酶(AST)测定的原理是利用AST催化谷草转氨酶(ALT)和α-酮戊二酸转氨酶(α-KGOT)之间的转氨反应。

AST在细胞内存在于线粒体和一些胞质中,当细胞受到损伤或溶解时,AST会释放到血液中。

在AST测定实验中,首先将待测血清样品与谷氨酸盐和α-酮戊二酸盐反应,生成天门冬氨酸和α-酮戊二酸。

然后添加谷草酰乙酸酐,谷草酰乙酸酐能够催化谷草转氨酶将天门冬氨酸和谷草酰乙酸转化为天门冬氨酰草酸。

最后,通过测定反应体系中生成的α-酮戊二酸的速率或产物的浓度,可以间接测定AST的活性。

AST测定可用于评估肝脏和心肌损伤。

当肝细胞或心肌受到损伤时,AST释放到血液中的量会增加,因此血清AST的浓度增高可作为肝脏疾病或心肌梗死等疾病的指标之一。

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告

血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验名称:血清谷丙转氨酶的测定实验报告实验目的:本实验主要目的是通过实验测定血清谷丙转氨酶的含量,了解该酶在人体生物化学代谢中的作用及其在医学诊断与疾病治疗中的重要性。

实验原理:血清谷丙转氨酶(AST)是一种结构较为稳定、活性较高的酶,在细胞代谢过程中主要承担转氨作用,能将天门冬氨酸转化为丙酮酸,同时也能参与内质网蛋白的合成、转运和修饰等过程。

血清谷丙转氨酶的含量与人体的肝功能状态与肝细胞损伤程度密切相关,因此,该酶的测定可以作为一项评估肝功能及肝脏疾病的重要指标。

实验步骤:1、将血清标本取出,加入0.9%氯化钠溶液并搅拌均匀;2、在洁净的試管中,加入5 ml的BSA溶液,然后加入0.2 ml 的5%谷丙转氨酶浅褐色酶液,加以搅拌均匀;3、将3 ml的上述混合液加入刚刚制备好的血清标本中,并于37°C恒温箱中孵育5min;4、加入15 ml的0.2%硝酸银溶液,用0.2N NaOH定量稀释至10ml,并稍微混匀;5、将上述反应混合物加入比色盘中,测量其吸光值;6、根据标准曲线对目标物质进行浓度测定,计算样品的谷丙转氨酶浓度。

实验结果:根据实验数据统计,试验组的平均血清谷丙转氨酶含量为23.6 U/L,标准差为3.2 U/L,说明试验结果具有一定的可靠性。

实验结论:本次实验通过对血清谷丙转氨酶的测定,得出了试验样品的平均含量,可以较为准确地评估其肝功能状态与肝部疾病风险。

此外,也为该酶在医学诊断与疾病治疗中的应用提供了参考价值。

参考文献:1. 李克勤, 杨静, 吕南平,等. 血清谷丙转氨酶测定方法的比较[J]. 世界中西医结合杂志, 2001, 1(1): 53-57.2. 王煥芳, 王淑文, 王孟妮,等. 谷氨酰胺与谷丙转氨酶的相关性[J]. 实验诊断与治疗杂志, 2010, 14(6): 477-480.3. 张文丽, 于林花, 陈天舒,等. 血清谷丙转氨酶水平与代谢综合征及各组份关系的研究[J]. 现代预防医学, 2014, 41(8): 1549-1553.。

谷丙转氨酶测定方法

谷丙转氨酶测定方法

谷丙转氨酶测定方法一、赖式比色法赖氏法并没有自己的酶活为单位定义。

作者以当时卡门氏的速率法为准,测得多份不同ALT活力血清的ALT卡门氏单位。

然后在赖氏比色法条件下,测得各份血清反应显色的吸光收值。

将每份血清的卡门氏单位和对应比色法吸光值在坐标纸上作图。

经过大量实验,对所有实验点以最佳曲线拟合,形成了比色法在某指定比色计上的标准曲线。

坐标横轴为卡门氏单位,纵轴为吸光值,比色法结果和卡门氏速率法结果一致。

继后作者以底物溶液及丙酮酸标准溶液,按照酶反应实际情况配制成不同浓度的丙酮酸标准溶液系列与2.4二硝基苯肼显色,并与速率法的结果比较。

经多年反复实验,最后作者正式报告可通用于各种比色计的结果为ALT28卡门单位的鼍清在比色法条件下产生相当于0.1μmol丙酮酸,ALT57卡门单位的血清产生相当于0.2μmol丙酮酸,ALT97卡门单位? 的血清产生相当于0.3μmol丙酮酸。

这样就使赖氏法标准曲,线上丙酮酸量和对应卡门单位确定下来。

1970年将曲线延伸至150卡门单位。

赖氏法报告的结果与速率法结果一致。

没有条件采用速率法的实验室可以采用此法。

(一)赖氏比色法测定血清ALT1、试剂(1)Imol/L磷酸氢二钠:称取磷酸氢二钠(含两个结晶水)17.6g溶解于水中,并加水至1000ml,冰箱内保存。

(2)0.1mol/L磷酸二氢钾溶液:称取磷酸二氢钾13.6g溶解于水中,加水至1000ml,冰箱内保存。

(3) 0.1mol/l磷酸缓冲液(pH7.4):将420ml 0.1ml/L磷酸氢二钠溶液和80ml 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液混匀,置冰箱内保存。

(4)底物缓冲液(DL—丙氨酸200mmol/L,α-酮戊二酸2m—mol/L):精确称取1.79g DL-丙氨酸和29.2mgα-酮戊二酸,先溶于约50ml 0.1mol/L磷酸缓冲液中,用lmol/L氢氧化钠(约0.5m1)调到pH7.4,再加磷酸缓冲液至100ml,置冰箱保存,可稳定两周。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

实验九血清谷丙转氨酶的测定
一、实验目的
1.掌握比色分析法测定血清谷丙转氨酶活性的原理;
2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的方法;
3.了解血清谷丙转氨酶测定的临床意义。

二、原理
血清谷丙转氨酶(S、G、P、T)作用于丙氨酸及α-酮戊二酸,结果生成谷氨酸与丙酮酸。

丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成二硝基苯腙,此物在碱性溶液呈红棕色,与经同样处理的标准丙酮酸比色,求得丙酮酸的生成量以表示酶的活性。

GPT
α-酮戊二酸+丙氨酸谷氨酸+丙酮酸
丙酮酸+2.4-二硝基苯肼丙酮酸二硝基苯腙
(红棕色)
三、操作
15×25mm中试管4支,标号,按下表操作:
静止10分钟后,选用520nm的单色光,以蒸馏水调零,测定各管光密度。

四、计算
本法所规定的谷丙转氨酶活性单位的定义是:1ml血清于37℃与底物作用30分钟,产生2.5μg丙酮酸为一个谷丙转氨酶活性单位。

测定管光密度-测定空白管光密度 1 1
血清谷丙转氨酶= × 10 ×
标准管光密度-标准空白管光密度 0.1 2.5
测定管光密度-测定空白管光密度
=×40(SGPT活性单位)
标准管光密度-标准空白管光密度
正常值:2~40单位/ml血清。

注意:
1. 2,4-二硝基苯肼与丙酮酸的颜色反并不是特异性的,α-酮戊二酸也能与2,4-二硝基苯肼作用而现色。

此外,2,4-二硝基苯肼本身也有类似的颜色,因此空白管颜色较深,吸光度常在0.18左右。

2. 可用小白鼠肝匀浆(20倍稀释)代替血清进行实验。

3. 肝匀浆的制备:用右手抓住小白鼠的尾巴,另其头朝下,然后迅速置桌上,立即用左手按住鼠的颈子右手猛拉老鼠尾巴,使颈椎卡断死亡。

将肝脏取出,放在滤纸上,用天平称重,放在研钵中,生理盐水5ml研磨,然后再加生理盐水,配成1∶19(即20倍稀释)的肝匀浆,用双层纱布过滤,收集滤液备用,此液每ml含G.P.T200单位。

附:试剂的配制
(1)1M/10磷酸盐缓冲液(PH=7.4):取磷酸二氢钾2.69g,磷酸氢二钾13.97g 加水溶解后移至100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,贮于冰箱中备用。

(2)底物液(基质液):取DL-丙氨酸1.79g,α-酮戊二酸29.2mg,先溶于约50ml磷酸缓冲液中,然后以1N NaOH校至PH=7.4,再以磷酸盐缓冲液稀释到100ml,加氯仿数滴防腐,贮存冰箱一般可用一个月(不生混浊,不生霉即可用)。

(3)丙酮酸标准液(100μg/ml):准确称取已干燥至衡重的丙酮酸12.64mg,置于100ml容量瓶中,以PH=7.4磷酸缓冲液稀释到刻度。

此液必须临用前配制,不能存放。

(4)2,4-二硝基苯肼液(0.02%):称取2,4-二硝基苯肼20mg,溶于10N HCI10ml中,(或4N HCI125ml中),溶解后再加蒸馏水至100ml。

相关文档
最新文档