电镜测试标本送样须知
常规电镜测试须知
常规电镜测试须知1. 明确需要采用的仪器是：透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope ，TEM ） 扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope ，SEM ）；2. 标本送检前，请在中心实验室网页进行所用仪器的送样预约，并在 仪器公告 或附件 里 下载 填写 送样送样申请单申请单申请单，，所列内容均为必填项目内容均为必填项目，，请勿请勿留留白；3. 送样申请单送样申请单以及以及以及标本标记标本标记标本标记使用的使用的 学生姓名 联系方式 必须必须与与 在线申请账号 一致；4. 标本送检前，请按照电镜测试要求取材、固定，做好样品标签（具体要求见下页）；标记用标记用标签纸标签纸标签纸以及扫描电镜标本用以及扫描电镜标本用以及扫描电镜标本用小玻璃瓶小玻璃瓶小玻璃瓶请请自备自备，，标签标签与要求与要求与要求不不符者恕不接收者恕不接收；；5. 电镜室提供按照大于标本20倍体积的25%电镜级戊二醛原液，请送样之前来电镜室领取（自备冰盒和1.5ml Ep 管），4°C 避光保存，使用前用PBS 按1:9稀释成浓度为2.5%的工作液；6. 确保在线注册的导师账号中费用充足，方可进行送样预约，若不足，请充值：（1） 校本部校本部 导师签字后直接在财务转账到中心实验室后，在生科楼1楼 中心实验室 温老师 或 严老师 处提交《记账凭证》入账到导师账号（2） 附属医院 在医院借支票（交学校财务）或转账后，操作同（1）（3） 校外 转账到学校财务处（网址/cwc/），到账后，在财务处开发票（带回单位报销）及《记账凭证》（交生命科学楼1楼 中心实验室 温老师 或 严老师 入账到导师账号）7. 开发票前到电镜室或生科楼1楼填写《缴费凭证》和《检测预收费清单》交给学校财务开发票。
透射电镜透射电镜————用于观察细胞内部结构有髓有髓神经纤维神经纤维神经纤维 肝糖原聚集肝糖原聚集培养培养细胞中的自噬体细胞中的自噬体细胞中的自噬体 海藻海藻海藻常规透射电镜送样须知1. 透射电镜标本置于1.5ml Ep 管；2. 因电镜制样用包埋板尺寸限制，请使用姓名姓名姓名汉字汉字汉字和阿拉伯数字编号和阿拉伯数字编号和阿拉伯数字编号标记标本，参照下图所示的“张三1”；图一 标本标注方法3. 标签不得覆盖Ep 管，用中性笔中性笔中性笔注明姓名姓名姓名及及样品编号样品编号；严禁使用铅笔、记号笔或其他油性笔标记以免被洗脱；请勿使用能被液体浸润的标签纸（虽用封口膜等包裹也无济于事，见下图第4管），以防制样时脱落、模糊标记缺失；如下图显示被液体浸润的标签纸和油性笔标记的后果；参见参见展板展板展板实物实物戊二醛戊二醛固定后换固定后换PBS 加常规透射电镜送样须知——培养细胞样品（重要重要：：超微形态反超微形态反映映的是的是标本接触固定液标本接触固定液标本接触固定液瞬间瞬间瞬间的状态的状态的状态，，故必须必须及时及时及时固定固定固定））1. 细胞数细胞数量量的要求的要求：： 悬浮培养的细胞需要计数106/ml 、贴壁细胞则需选用6孔板长到对数生长期（融合度达70~80%），取其中1孔，使用细胞刮刮下细胞（自噬、凋亡类实验推荐）或胰酶消化细胞收集，数量可达106/ml ；2. 细胞细胞收集收集收集及注意事项及注意事项及注意事项：吸掉含有血清的培养基，加入无血清培养基或PBS 1ml 刮下细胞，移入1.5ml 尖底Ep 管，离心5min （离心速度800-2000rpm 之间，请根据离心机型号自行决定；也可以参考培养细胞时的离心速度），使细胞形成约0.5-1mm高的细胞团块；见照片左侧“标准1”管所示所示；注意注意：：细胞团过大、或呈絮状，如照片“标准2”和“标准3”的细胞团较大，都会影响固定效果；参见参见展板展板展板实物实物3. 细胞细胞固定固定固定：：吸去无血清培养基，轻柔地沿管壁缓慢加入500µl 已提前恢复至室温的2.5% 戊二醛，切勿吹悬，避免震荡；室温1Hr ，再4°C 冰箱静置3Hr 后，吸出戊二醛，加满PBS 于4°C 冰箱静置，或送电镜室。
农生环电镜室新手必读
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一、常规工作安排：
1. TEM生物制样在C101室，每周四（仅限这一天！遇假期则取消制样。
）上午9:00开始，整个程序较长，到次日上午结束！
2. 制样需要提前预约，而且需要提供有导师签字同意的测试申请单（见群文件）。
3. 电镜观察在B128室。
等切片准备好，老师会通知同学前来观察，请关注QQ消息。
二、怎样取样、送样
1. 仅对杭州以外用户开放样品委托制样。
2. 实验材料的取样固定：这一步决定了整个实验的成败，非常重要应选择新鲜样本，放置于1.5ml或2ml EP管中，迅速用固定液（2.5%戊二醛）充分固定，实验前，置4℃冰箱中保存。
（1）细胞、细菌等颗粒类样品：离心收集于管底，至少有小米粒大小，然后加入1-2ml戊二
醛固定液。
最后再悬浮起来，即可。
（2）植物标本：切成1x3x1mm3大小，对于块
体样本，往往都需要抽真空，让标本沉下来。
植物根的样品取样需要引起足够重视，根的不
同部位差异很大，一定要取相近的部位才能进
行比较。
（3）动物标本：特别需要快速操作。
动物被处
死以后，应该以最快的速度取样（此时可能比
较大块），并投入到戊二醛固定液中。
待空闲
时候，可以取出该组织块，切取表面的部分，
并切成1x3x1mm3大小，放进新鲜固定液中，4℃冰箱中保存。
3. 实验材料的携带或者邮寄：准备做电镜的标本，所有的环节都不能结冰标本携带或邮寄之前，检查一下，尽量让每个EP管都装满固定液，从而确保标本块不会跑到液体外面去。
戊二醛充分固定的样本通常可以常温运输，但夏季高温时段，应放置1、2个冰袋。
透射电镜送样须知
送样禁忌
以下样品不可进行测试
具有放射性和腐蚀性的样品。 具有磁性的样品需提前咨询，以便确定是否可以测试。
在真空中会释放大量气体的样品，例如：含有单体的聚合物、含有反应物或产物的
催化剂等，尤其释放的气体具有腐蚀性的样品。 易挥发和易升华的样品（例如：单质Na、K、 S、P、Zn、Se、As、I、Te、Hg和低分 子量的有机物等）。 有剧烈化学毒性和生物毒性的样品。 所有样品的氢、氦元素不能测试。
送样禁忌
（1）磁性样品谢绝测试。 （2）粒径<2nm的样品在JEM-2100透射电镜上图像 质量较差或无法分辨，建议至场发射透射电镜上 测试。 （3）氮含量<10 wt%的氮掺杂样品在JEM-2100透射 电镜的能谱仪上难以测出N元素，建议至场发射透 射电镜及能谱上测试。
X射线光电子能谱送样须知
制样要求
（1）常规样品需自行制备在透射电镜专用铜网上，晾干后 于网上预约测试日前一天或预约当日上午9：00以前送往透 射电镜室待测。 （2）需要包埋/固定/超薄切片的样品无需网上预约，请直 接携带样品至透射电镜室现场咨询、预约。 （3）细菌、病毒类样品需灭活后自行制备在铜网上并染色 后送往透射电镜室。 （4）其他需磷钨酸负染的样品可送至透射电镜室制样。 （5）JEM-2100透射电镜的能谱mapping测试一般要求待测样 品>50 nm，待测元素含量>5 wt%。测试铜元素时需使用钼 网制样，碳元素不适合做能谱。 （6）需要电解双喷/离子减薄前处理的样品可至透射电镜室 借用相关设备自行前处理。
透射电镜送样须知
仪器型号
预约和付费编号
JEM-2100
20114940
JEM-1400
20114941
扫描电子显微镜对样品的要求及样品的制备
扫描电子显微镜对样品的要求及样品的制备扫描电子显微镜是一种大型的分析仪器,主要功能是用于固态物质的形貌显微分析和对常规成分的微区分析,广泛应用于化工、材料、医药、生物、矿产、司法等领域.由于其价格昂贵及特殊的工作原理,它对样品制备有着较高的要求,样品的制备好坏,直接影响着样品分析是否成功,为此,本文着重介绍一下扫描电子显微镜应用中有关样品制备的相关知识和技术.1 扫描电子显微镜对样品的要求(1)样品必须是无毒、无放射性的物质,以保证工作人员的人身安全.(2)样品可以是块状、片状、纤维状;也可以是颗粒或粉末状,无论是什么样的样品都不能是有机挥发物和含有水分.如果将含有水分的样品放在镜筒内能产生三种严重不良后果:一是当真空达不到要求强行通高压时,其产生的水蒸汽遭遇高能电子流产生电离而放电引起束流大幅度波动,使所成的像模糊,或根本不能成像;二是造成镜筒污染;三是损坏灯丝,当高能电压通过灯丝时,温度高达2000Ο,碰到水蒸汽而氧化变质或熔断,因此,应先烘干样品中的水分.(3)无论是块状样品,还是粉末颗粒状样品,其化学、物理性质要稳定,在高真空中的电子束照射下,都要能保持成分稳定和形态不变.(4)表面受到污染的样品,要在不破坏样品表面结构的前提下,进行适当清洗、烘干.(5)无论是样品的表面,还是样品新断开的断口或断面,一般不需要进行处理,以保持其原始的结构状态.(6)对磁性样品要预先去磁,以免观察时电子束受到磁场的影响.(7)粉末样品要适量,不易过多;块状样品大小要适合仪器专用样品底座的尺寸,不能过大.一般小的样品座Φ3～5mm,大的样品座为Φ30～50mm,以分别用来放置不同大小的样品,样品的高度一般限制在5～10mm左右.2 样品的制备技术2.1 块状样品的制备对于块状导电样品,基本上不需要进行什么制备,只要其大小适合电镜样品底座尺寸大小,即可直接用导电胶带把样品黏结在样品底座上,放到扫描电镜中观察,为防止假象的存在,在放试样前应先将试样用丙酮或酒精等进行清洗,必要时用超声波清洗器进行清洗.对于块状的非导电样品或导电性较差的样品,要先进行镀膜处理,否则,样品的表面会在高强度电子束作用下产生电荷堆积,影响入射电子束斑和样品发射的二次电子运动轨迹,使图像质量下降,因此这类样品要在观察前进行喷镀导电层的处理,在材料表面形成一层导电膜,避免样品表面的电荷积累,提高图象质量,并可防止样品的热损伤。
扫描电镜样品取材须知
扫描电镜样品取材须知介绍扫描电镜是用极细的电子束在样品表面扫描，将产生的二次电子用特制的探测器收集，形成电信号运送到显像管，在荧光屏上显示物体（细胞、组织）表面的立体构像，可照相。
以观察组织细胞表面结构为主的样品，应特别要注意保护好观察面，尽量避免取材器械与待观察面的接触，样品可以大一些，但其直径不宜超过5mm，高度控制在3mm内。
以观察细胞内部超微结构的样品，样品大小在直径2mm以内，高度在3mm左右。
同时要做好样品观察面的标记，否则，经过后续处理后会难以辨别观察面的位置。
另外，移动样品可用无齿镊子或用牙签转移，或用镊子借液体的张力移取组织块，注意不可用力夹。
注意事项1、扫描电镜对样品表面的要求非常严格，必须清洗干净，否则，可导致观察困难或错误判断。
2、取材时要做到“动作快、环境冷、部位准”。
固定前清洗的组织离体后应在2~3分钟清洗完毕并投入预冷固定液内；固定后清洗的组织离体后应在1分钟以内投入固定液。
固定液要预冷，取材部位必须准确。
3、实验动物取材部位不宜多，否则会延误取材时间，导致组织自溶等人为假象的发生。
标本清洗：1、固定前清洗法：指表面覆盖有大量黏液和杂质的组织，在3%戊二醛固定之前进行清洗。
清洗之前可用低浓度蛋白水解酶（胰蛋白酶、糜蛋白酶等）或其他具有水解作用的溶液（N-乙酰半胱氨酸）对样品进行黏液处理，之后再选择等渗生理盐水或缓冲液在震荡器中进行清洗或用注射器加压冲洗，冲洗时间可根据样品附着物的情况来定。
2、固定后清洗法：是指表面比较干净的组织，取材后经过戊二醛固定2小时之后，用等渗生理盐水或缓冲液进行冲洗。
3、离心清洗法：指游离细胞、微生物以及其他微小生物样品的清洗。
具体步骤如下：将固定好的样品放入离心管内，注入等渗生理盐水或缓冲液（样品体积20倍的量），轻轻摇匀后，置4℃4000转/分钟离心3~5分钟，弃去上清夜，再注入上述清洗液，同样操作3~4次即可。
由于电镜样本制备过程中会不可避免地损失掉一部分细胞，因此细胞必须达到一定数量，即为离心后细胞量至少为黄豆样大小。
各仪器对送检样品的要求
各仪器对送检样品的要求1. 核磁共振波谱仪：（1）送检样品纯度一般应>95% ，无铁屑、灰尘、滤纸毛等杂质。
一般有机物须提供的样品量：1H谱>5mg，13C谱>15mg ，对聚合物所需的样品量应适当增加。
（2）本仪器配置仅能进行液体样品分析，要求样品在某种氘代溶剂中有良好的溶解性能，送样者应先选好所用溶剂。
本室常备的氘代溶剂有氯仿、重水、甲醇、丙酮、DMSO 、苯、邻二氯苯、乙腈、吡啶、醋酸、三氟乙酸。
（3）请送样者尽量提供样品的可能结构或来源。
如有特殊要求（如检测温度、谱宽等）请于说明。
2. 红外光谱仪：为了保护仪器和保证样品红外谱图的质量，送本仪器分析的样品，必须做到：（1）样品必须预先纯化，以保证有足够的纯度；（2）样品须预先除水干燥，避免损坏仪器，同时避免水峰对样品谱图的干扰；（3）易潮解的样品，请用户自备干燥器放置；（4）对易挥发、升华、对热不稳定的样品，请用带密封盖或塞子的容器盛装并盖紧，同时必须在样品分析任务单上注明；（5）对于有毒性和腐蚀性的样品，用户必须用密封容器装好。
送样时必须分别在样品瓶标签的明显位置和分析任务单上注明。
3.有机质谱仪：适合分析相对分子质量为50 ~ 2000u 的液体、固体有机化合物样品，试样应尽可能为纯净的单一组分。
4. 气相色谱- 质谱联用仪：气相色谱仪均使用毛细管柱（不能使用填充柱）。
进入气相色谱炉的样品，必须是在色谱柱的工作温度范围内能够完全汽化。
5. 液相色谱- 质谱联用仪：（1）易燃、易爆、毒害、腐蚀性样品必须注明。
（2）为确保分析结果准确、可靠，要求样品完全溶解，不得有机械杂质；未配成溶液的样品请注明溶剂，已配成溶液的样品请标明浓度。
（3）请尽可能提供样品的结构式、分子量或所含官能团，以便选择电离方式；如有特殊要求者，请提供具体实验条件。
（4）液相色谱–质谱联用时，所有缓冲体系一律用易挥发性缓冲剂，如乙酸、醋酸铵、氢氧化四丁基铵等配成。
002样品送样流程及注意事项
鑫文编号：
保定市鑫硕地质勘查有限公司
样品送样流程及注意事项
关于我单位样品的送样事宜，应严格遵循以下流程：
1、准备样品、填写送样单
由报告负责人整理好样品，填写制式送样单4份,要求填写完整、清楚、规范。
样品连同送样单一并送交办公室。
2、办公室联系化验室送样
办公室接到送样单，核对信息，签字，做好登记，联系化验室，送样。
送完样后，送样单交回各处（一份交回填表人、一份存办公室、一份交由总工办、一份送实验室）。
3、签收化验报告
办公室签收化验报告，缴纳化验费，做好登记工作。
连同送
样单交回档案室。
4、归档
档案室将化验报告、送样单作为原始资料归档。
总之，要求做到流程通畅，签字完整、资料保管齐全、无遗失。
附：送样单、送样登记表
保定市鑫硕地质勘查有限公司
2011年12月24日
送样登记表
第页。
透射电镜样品取材方法及要求
透射电镜样品取材⽅法及要求透射电镜样品取材⽅法及要求⼀、透射电镜样品取材⽅法（⼀）组织和器官取材⽅法：事先准备好所需的器械和固定液，并把它放4℃冰箱内预冷备⽤。
如为穿刺物（肾组织、肝组织、脾组织等）、剪取物（胃镜剪取物、⽀⽓管镜剪取物、肠镜剪取物等）、⼿术切除物（肿瘤组织以及实验动物脏器等），均应在离体后迅速⽤⽣理盐⽔冲洗后或直接投⼊预冷的2.5%戊⼆醛固定液（保质期为1个⽉）内，并把它放4℃冰箱内保存，⼀般要求在两分钟内完成。
在处理⼿术切除物时，应事先准备好两把锋利的⼑⽚（如剃须⼑或⼿术⼑）和蜡板，把固定液滴在蜡板上，再把切下来的脏器⽤⼿术⼑切成⼩块，放在蜡板上的固定液中，接着⽤双⼑⽚拉锯法在固定液中将组织切成约1⽴⽅毫⽶⼤⼩或横切⾯约1平⽅毫⽶的长条形，然后⽤⽛签或镊⼦（轻轻夹住，禁⽌挤压）把组织移⼊装有固定液的⼩瓶内，瓶⼦建议⽤带螺纹密封的样本瓶（见下图），确保固定液不会溢出，固定液⼀定要加注到瓶⼦的九成满。
如为肺组织，应在固定液中充分震荡，使其完全沉到瓶底为⽌。
（⼆）游离细胞取材法：组织培养和游离细胞（如⾎细胞、脱落细胞以及细菌病毒等），常悬浮分散在介质中，⾸先必须将其凝集成团，然后进⾏固定，具体做法如下：1、⾎浆凝集法：将抗凝全⾎离⼼分层（2000转/每分钟，10—20分钟），⽤⽑细吸管沿着管壁轻轻的将上清夜吸取（不要破坏⽩细胞层），接着⽤吸管吸取固定液，并沿着管壁将2.5%戊⼆醛固定液慢慢地加⼊进⾏固定，然后把它放在4℃冰箱内保存。
2、⾎浆（⾎清）混合法：如为细菌、病毒、脱落细胞、培养细胞则先将它们制成悬液放置于离⼼管内（最好是玻璃的），离⼼成团（1000～3000转/分钟，10分钟，下同），去上清液后加⼊2.5%戊⼆醛固定10分钟左右，离⼼，再弃去多余的固定液，然后和少量抗凝⾎浆或⾎清混合均匀，离⼼成团，去上清液（留少许），⽤吸管吸取2.5%戊⼆醛固定液沿着离⼼管壁缓慢滴⼊，尽量避免团块分散，静置于4℃冰箱内保存备⽤。
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常规电镜测试须知
1.请在实验前一周内到电镜室取样品固定所需固定液
2. 2.5%戊二醛4℃避光保存，2周内有效
3. 2.5%戊二醛固定后标本4℃保存2月内有效
4.*戊二醛请避免超时使用
5.请按照要求取材、固定，做好样品标签
6.送样品时须按照200元人民币/例样品缴齐押金，样品测试结束、交齐测试费后，退回押金；
1)每例透射样品只随机切一张含有若干标本切片的200目铜网，如需要增加切
片数量，按100元/张切片、染色。
2)扫描电镜如仅需要喷镀，则制样费按100元/例收取
3)透射样品如在制样周期外要求制样，可选择自行处理或250元/例加急处理
4)取材不符合要求，电镜室拒收；如因取材、固定问题导致无满意结果，请自
行负责。
5)！！超出预约时间30min未到电镜室，按照100元/小时收取费用。
6)！！固定液：透射电镜工作液500μl/例，超出按10元/ml收费。
7)！！每学期寒暑假前1个月停止制样。
8)有疑问请联系工作人员电话：62789057，内线：89057
收费标准
1指在电镜下观察标本、拍照
2CCD数码照片
3透射电镜制样的全套！指由已固定样品到观察前所有步骤
4指由已固定样品到树脂块
5指a提供树脂块切片，b要求切片数量超出一张范围时
a指在电镜下观察标本、拍照
c扫描电镜制样的全套指由已固定样品到观察前所有步骤
d指由已固定样品到干燥
e指干燥的不需处理样品单纯喷镀
*校外人员开具税务发票，需另加6%的税点。
测试结束后，带电镜室缴款通知到学校办公楼一楼财务室缴费，自带记账凭证或税务发票到电镜室，退回押金。
扫描电镜用于表面观察，结果图示扫描电镜1生物材料表面生长细胞
扫描电镜2肾小球结构
透射电镜用于观察细胞内部结构，结果图示
透射电镜 1肝糖原聚集
透射电镜 2 培养细胞
常规透射电镜送样须知-培养细胞
请按要求取材
1)细胞数：106或25ml培养瓶达到生长面积的80%，贴壁细胞使用细胞刮刮下
细胞或消化液消化细胞；
2)使用4℃的PBS(0.2M pH7.4)或生理盐水对细胞进行离心漂洗2-3次。
离心速
度800rpm 5min/次；
3)使用1500μl EP（Eppendorf）管将漂洗好的细胞在1500~2000 rpm离心10min
成肉眼可见的约0.5-1mm高细胞团块，切勿超出1.5mm，见下图所示；
4)将3）中贴壁加入500μl4℃2.5% 戊二醛，避免震荡；于4℃冰箱静置3
天，送电镜室。
如未送检，自行吸出戊二醛，加PBS继续于4℃冰箱静置。
5)注意：送检样品请使用小标签纸做标签，如例所示标签不得覆盖EP管，用中性
笔注明姓名和样品编号；严禁使用记号笔以免被洗脱
标签位置包括姓名编号
张三1
500μl 2.5%戊二醛
0.5—1mm高细胞沉淀
*本方法包括所有游离细胞，如悬浮培养的细菌，精子，血细胞等
常规透射电镜送样须知-动物组织
请按要求取材
1)取材大小：
心肌、肝、脾、肺、肾、脑组织等：取0.5~1mm3小块2-3块
平滑肌、骨骼肌、神经、血管、皮肤、消化道等定向标本：取1×1×2mm3或0.5×0.5×1mm3的长条形标本2-3条（见图1示）；标本尽量去掉多余成分，例如要皮肤的真皮层，须去掉角质层和脂肪，反之亦然.
2)取材方法：动物麻醉后，先剪下一块尽量小的组织，在预置4℃ 2.5%戊二醛
的塑料板上使用手术刀或双面刀片切成1）中的长条、如果组织厚度≤1mm，直接切成0.5~1×1~2mm的长条（见图2示），投入盛有4℃ 2.5% 戊二醛的EP管中继续4℃固定4~24h后送电镜室。
如未送检，用PBS替换戊二醛，继续于4℃冰箱静置。
3)取材要求：
除去标本的大小及方向要求外，必须注意以下要求
①取内脏组织的动物能灌注固定最好，脑及神经等尽量灌注固定；
②取材速度要快，尽量在3min内完成；
③所用刀剪须锋利，避免对标本拉锯、挤压；
④戊二醛固定剂保持低温；
⑤标本取材位置一定要准确，如做肾小球需要取到皮质以确保标本有小球。
⑥容器：使用1500μl EP管；500μl 4℃戊二醛；标本一定要浸没于固定液
4)注意：送检样品请使用小标签纸做标签，如例所示标签不得覆盖EP管，用中性
笔注明姓名和样品编号；严禁使用记号笔以免被洗脱。
图 2取材方法
图 3取材方法
标签位置包括姓名编号张三1
500μl 2.5%戊二醛
2-3块测试标本
图 4送检样品标注
常规扫描电镜送样须知-培养细胞
1．悬浮细胞：
悬浮培养的细胞、细菌，血细胞，精子，等
细胞使用4℃的PBS 或生理盐水或无血清培养基离心漂洗后，用少量2.5%戊二醛固定液吹悬，滴加在小铝皿中。
小铝皿可预先放置在青霉素小瓶中4℃静止沉降3-5天，在小盘周围加入PBS或生理盐水，防止干燥。
小铝皿由电镜室提供，使用前用100%丙酮或乙醇清洗，晾干
青霉素瓶
2.5%戊二醛细胞
悬液
小铝皿
*青霉素瓶尽量选择平底的，瓶盖需要盖好，液体防止挥发。
2．贴壁培养细胞：
在培养皿中预先加入盖玻片，使细胞贴附于盖玻片上；低温的PBS（最好）或无血清培养基漂洗后，放置在青霉素小瓶中4℃固定3-5天，注意防止干燥。
2.5%戊二醛浸没
盖玻片盖玻片
*青霉素瓶尽量选择平底的，瓶盖需要盖好，液体防止挥发。
注意：送检样品请使用小标签纸做标签，如例所示标签不得覆盖EP管，用中性笔注明姓名和样品编号；严禁使用记号笔以免被洗脱。
常规扫描电镜送样须知-组织
1组织取材
1)样品观察表面可达8~10mm2，高度小于5mm左右；
2)样品表面在固定前必须清洁；使用低温的生理盐水或PBS冲洗掉表面的灰
尘，不应有的蛋白、粘液等。
明确标本的观察面。
消化道、血管等管腔内表面，尤其要注意清洗。
3)2.5%戊二醛4℃固定8小时以上。
2生物材料
如果观察材料上培养细胞等，需要预先测试材料成分对丙酮和乙酸异戊酯的耐受性，并在送样时说明，方便样品制备。
取材方法同（2）
*如不需生物处理及固定，请说明。
*样品使用青霉素小瓶装载。
固定液均使用2.5%戊二醛。
注意：送检样品请使用小标签纸做标签，如例所示标签不得覆盖EP管，用中性笔注明姓名和样品编号；严禁使用记号笔以免被洗脱。
*青霉素瓶尽量选择平底的，瓶盖需要盖好，液体防止挥发。
*固定液需要浸没标本
扫描电镜 Hitach S-3000N
透射电镜型号 Hitach 7500 CCD型号SIS Megaview Ⅲ。