临床细菌室质量控制
临床细菌学检验的质量控制流程
临床细菌学检验的质量控制流程1、质量的概念和质量保证影响检验结果质量的因素不少,实验过程中，仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差 ,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或者特异性和灵敏度。
具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定, 目前临床细菌学检验的工作内容大致有 3 类，衡量起质量的技术指标不彻底相同。
第一类是检出细菌的实验，包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。
现代的细菌感染，混合菌较常见，一份标本中，会有2 种以上细菌存在。
无论标本直接涂片还是分离培养，检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。
这种实验的质量 ,应该用细菌检出率或者细菌分离率来衡量。
第二类是鉴定细菌的实验.通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。
对分离到的病原菌都做出准确的鉴定，是反映细菌事工作质量的一个重要方面。
第三类是药敏实验 .有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验，可以用准确度和精密度来衡量，后者以敏感或者耐药的形式报告，属于定性的实验 ,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。
也应以准确度和精确度衡量。
所以实验室人员必须清晰认识到以上这一点，在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统，实验中一旦浮现误差及时发出警报，查明原因及时纠正。
2、室内质量控制2.1 在职人员2.1。
1 须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业，及时终结并积累工作经验。
2.1。
2 作人员必须具有严谨的工作态度，技术操作须彻底遵守操作规程，并直接参预质量控制工作。
2。
1.3 工作人员应不断加强自身的业务学习，及时了解本领域的新发展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。
2。
1。
4 实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员，积极参加国际、国内学术会议、专业培训班，获取新信息。
因为细菌学检验，投资人员培训远比投资与仪器设备更重要.2.2 操作手册及参考书2。
2.1 细菌室可以根据自己的实际情况制订一本指导日常工作、简明扼要的操作手册，并在工作中不断完善和修改.2。
细菌检验的质量控制
细菌检验的质量控制细菌检验是一种重要的实验室检测方法，用于确定样本中是否存在细菌，并评估其数量和类型。
为了确保细菌检验的准确性和可靠性，质量控制是必不可少的。
本文将详细介绍细菌检验的质量控制标准和步骤。
一、质量控制标准1. 内部质量控制标准：实验室应建立内部质量控制程序，包括使用已知细菌数量的标准品进行日常检验，以确保检测结果的准确性和一致性。
2. 外部质量控制标准：实验室应参加外部质量评估计划，如国家或者地区的质量评估计划，以评估实验室的准确性和能力。
3. 质量控制记录：实验室应建立质量控制记录，记录每次质量控制的结果，并进行定期回顾和分析。
二、质量控制步骤1. 样本准备：根据实验室的标准操作程序，准备待检样本，并确保样本的保存和运输符合要求，以避免样本污染或者变质。
2. 质量控制菌株准备：根据实验室的需要，选择适当的细菌菌株作为质量控制菌株，确保其纯度和活性。
常用的质控菌株包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
3. 质量控制菌株培养：根据菌株的生长要求，在适当的培养基上进行质量控制菌株的培养。
培养条件包括温度、湿度、气氛等。
4. 质量控制菌株检测：使用已知细菌数量的质量控制菌株进行检测，确保检测方法的准确性和可靠性。
检测方法可以包括传统培养方法、份子生物学方法等。
5. 质量控制结果分析：根据质量控制菌株的检测结果，分析实验室的检测准确性和一致性。
如果检测结果与预期结果相符，则说明实验室的质量控制良好；如果检测结果与预期结果不符，则需要进一步分析原因，并采取纠正措施。
6. 质量控制记录和回顾：实验室应建立质量控制记录，记录每次质量控制的结果，并进行定期回顾和分析。
通过回顾和分析质量控制记录，可以及时发现和纠正实验室操作中的问题，提高检测结果的准确性和可靠性。
三、质量控制的意义1. 确保结果准确性：质量控制可以匡助实验室评估检测方法的准确性和可靠性，确保检测结果的准确性。
2. 发现问题和纠正措施：通过质量控制记录和回顾，可以及时发现实验室操作中的问题，并采取纠正措施，提高检测结果的准确性和可靠性。
全国临床细菌学室间质量评价EQA结果报告
全国临床细菌学室间质量评价EQA结果报告全国临床细菌学室间质量评价EQA是指一种旨在评估全国临床细菌学实验室的质量和能力的质量控制方法。
该方法旨在通过对实验室进行周期性、标准化的质量控制评价，以确保实验室的准确性和稳定性，从而保证病人的诊断和治疗效果。
EQA评价多年来已成为临床实验室不可或缺的重要手段。
全国临床细菌学室间质量评价EQA项目中包含了许多细分的项目，其中包括了细菌的培养和鉴定、抗生素敏感性测试等多个方面。
评价的方式通常是使用外部质量评价技术，对实验室提交的标本进行测试。
通过对标本的测试结果进行分析，可以确定实验室是否在准确性和稳定性方面表现良好。
目前，全国临床细菌学室间质量评价EQA评估项目已成为可信、可行和重要的评价手段之一。
通过分析2019年EQA评价结果报告可以看出，前10位得分最高的实验室的平均得分为96.0分（满分100分），表明这些实验室在细菌学领域中非常出色。
同时，评估还揭示了一些实验室在某些特定方面存在问题，这些问题需要实验室进行改进和纠正，以避免再次发生。
评估结果的报告不仅对参与评估的实验室有帮助，对于病人的诊断和治疗也有影响。
通过保证实验室的准确性和稳定性，可以避免因错误结果导致的诊断和治疗错误，从而提高病人的治疗效果。
在全国临床细菌学室间质量评价EQA过程中，存在一些问题需要解决。
首先，评估项尚未覆盖所有实验室所需的测试技术。
其次，评估的迭代时间有点长，需要等待一段时间才能够获得评估结果。
在未来的评估工作中，需要解决这些问题，以使评估结果更加全面和及时。
在总体上看，全国临床细菌学室间质量评价EQA结果报告是一个非常重要的文档，能够帮助实验室改进自身的工作，提升病人的治疗效果，同时也能够推进国家临床实验室水平的提高。
细菌检验的质量控制
细菌检验的质量控制细菌检验是医学实验室中非常重要的一项工作，它能够帮助医生准确诊断和治疗感染疾病。
为了确保细菌检验结果的准确性和可靠性，质量控制是必不可少的环节。
本文将详细介绍细菌检验的质量控制标准和步骤。
一、质量控制标准1. 样本采集：细菌检验的质量控制开始于样本的采集。
确保样本的正确采集和保存对于细菌检验结果的准确性至关重要。
采集样本时，要遵循严格的无菌操作规范，确保样本不受外界污染。
2. 质控菌株：质量控制中使用的质控菌株应具备以下特点：菌株纯度高、稳定性好、代表性强、易于培养和保存。
常用的质控菌株有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
3. 质控品：质控品是用于验证实验室检验方法准确性和稳定性的标准物质。
质控品应具备以下特点：成分稳定、浓度适中、易于保存和使用。
质控品的选择应根据实验室的具体需求和检验项目进行。
4. 质量控制指标：细菌检验的质量控制指标包括阳性率、阴性率、准确性和重复性等。
阳性率和阴性率是评价检验方法的敏感性和特异性的重要指标，准确性和重复性则是评价检验结果的准确性和可重复性的指标。
二、质量控制步骤1. 样本处理：样本收到后，首先进行样本处理。
根据不同的检验项目，样本处理方法也不同。
一般情况下，样本处理包括离心、洗涤、培养等步骤。
在样本处理过程中，要确保操作规范，避免样本污染和交叉感染。
2. 质控菌株接种：将质控菌株接种到含有适当培养基的培养皿中，按照标准操作规范进行接种。
接种后，将培养皿放入恒温培养箱中进行培养。
培养时间和温度应根据质控菌株的生长特性进行调整。
3. 检验方法验证：在进行细菌检验之前，需要对检验方法进行验证。
验证包括方法准确性验证和方法稳定性验证。
准确性验证可以通过与标准方法进行比对来完成，稳定性验证可以通过连续多次检验同一样本来完成。
4. 质控品使用：在每次检验中，都要使用质控品进行质量控制。
质控品的使用应符合实验室的质量控制标准和要求。
使用质控品时，要按照标准操作规范进行，记录质控结果，并及时进行分析和处理。
临床微生物实验室质量控制及质量保证
肠杆菌科 大肠埃希菌ATCC25922 培养基：Mueller-Hinton琼脂
大肠埃希菌ATCC35218 接种液：生长法或直接菌落悬
(用于β-内酰胺类药/β- 液
内酰胺酶抑制剂）
孵育：35℃；空气；16-18h
铜绿假单胞 铜绿假单胞ATCC27853
及不动杆菌 大肠埃希菌ATCC35218 (用
孵育条件 需氧或CO2， 24小时
需氧或CO2， 48小时
已知菌株（ATCC)
化脓链球菌19615 肺炎链球菌6035 大肠埃希菌25922 淋病奈瑟菌43069 流感嗜血杆菌10211
SS琼脂
需氧，24小时
鼠伤寒沙门菌14028 福氏志贺菌12022 粪肠球菌29212 大肠埃希菌25922
预期结果
10.08.2024
8
标本收集和运送的质量控制
向临床提供标本采集说明(sop)
• 不同部位标本的采集方法 • 采集最佳时间、次数 • 标本采集量正确时间、部位、方法等
对收集和运送标本的容器控制 无菌、无防腐剂、足够大、安全严密、不易破碎、 选择合适的运送培养基
10.08.2024
9
标本收集和运送的质量控制
结果报告
3
人员资质
人员
人员能力
人员培训
具备相关教育背景, 每年接受专业技术及知
识培训, 熟悉微生物实验室操作 规程、消毒灭菌及生物
安全知识。
.
10.08.2024
包括其对诸如分 析前、中、后特 定阶段的专业经 验和熟练试验技 术 。并直接参与
质控工作
.包括新员工培训、老员 工的再培训以及员工工作
能力评估
加入后培养基由无色
质控要求: 每批试剂使用前应使用变为相红应色
临床细菌学室内质量控制sop
临床细菌学室内质量控制目的：细菌室内质控是细菌检验工作的核心，是做好室间质评的基础和前提，做好此项工作，才能在室间质评中取得好成绩，也就能更好地为患者的诊疗服务。
一、细菌检验人员及其培养教育：须在实践中继续学习，不断提高理论水平和技术操作能力，编写操作手册。
二、仪器设备的功能监测（一）灭菌器械的效果监测：高压灭菌器每月一次，我室采用嗜热脂肪芽胞杆菌监测。
（二）恒温孵育箱、水浴箱及冰箱，每天记录其温度，开始工作及工作结束时均应记录，并绘制温度控制图，孵育箱温度应为35℃±1℃，水浴箱37℃±0.5，冰箱冷藏为4℃±2℃，冷冻为-20℃±5℃三、培养基的质量控制（一）制备培养基的记录：包括收到日期，制备时培养基名称、配方、日期，制作者签名。
成品培养基记录购入日期及使用日期，并按条件贮存，用已知阳性或阴性菌株进行检测。
（二）培养基的外观检查：对制备或购入成品培养基，要观察其颜色和透明度。
发现异常要停止使用。
（三）培养基的性能监测：对于分离、选择、鉴别培养基，要对其用参考菌株进行监测，性能符合标准方可使用。
一、试剂、染色液及抗血清的质量控制试剂、染液，配制后注明名称，配制日期及配制者，用已知阳性和阴性参考菌株进行监测，合格后方能应用。
（一）根据试剂和染色液本身稳定性和使用频度定期检查核对：较稳定如靛基质每周检测，H2O2每天用时均应检测，氧化酶纸片应避光低温保存，各种生物制品应置4℃冰箱保存等。
（二）抗血清的质量控制：应记录收到日期，观察其外观是否符合标准，使用时前先用已知阴、阳性菌株检查是否合格，期间每三个月用标准菌株检测一次其敏感性及特异性，有效期内使用，置4℃冰箱保存。
二、处理临床标本的质量控制（一）标本采集和运送1、标本采集（1）时间：早期、急性期、症状典型时或用药前。
（2）方法：据不同的菌种而不同。
（3）技术：除痰、粪、肛拭子、咽拭子等，均应无菌操作并盛于无菌容器内。
临床微生物SOP-室内质量控制管理程序1
临床微生物SOP-室内质量控制管理程序1.目的：规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。
2.适用范围：微生物实验室的所有检验项目。
3.职责：实验室检验人员均必须熟知并遵守本程序。
4.程序：4.1 分析前质量管理4.1.1 检验申请单临床医生应按照《微生物检测项目申请程序》申请临床微生物检测。
口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请，并补正式的检验申请单。
4.1.2 生成微生物检验标本标签护士应在核对医嘱、病人信息和检验申请信息后，按照《微生物标本检验标签程序》生成申请单和微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确贴于容器上。
4.1.3 标本的采集手册实验室应制定样本采集手册，指导正确采集和处理样本。
4.1.4 样本采集和运输样本采集人员应按照《采样前病人识别程序》确认病人，按照《标本采集、运输程序》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的运输培养基，安全运送到微生物室。
4.1.5 样本的接收样本接收人员应严格按照《标本接收、识别程序》《标本拒收程序》对标本接收或拒收，并记录。
4.1.6 微生物检验标本信息输入微生物实验室接种实验室岗位检验人员严格按照《微生物标本信息输入程序》录入、核对病人信息和标本信息等质料。
4.1.7 样本储存微生物实验室接种岗位检验人员按照《微生物标本检验前储存程序》正确储存未能及时处理的标本。
已经检验的样本应在保证性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，或做补充检验。
4.2 分析中质量管理4.2.1 试剂的质量控制4.2.1.1 所有试剂用于检测标本前，必须做质控以评估质量并记录质控结果，只有质控合格才可以使用。
下列试剂每进一批新批号或货号要求用阴、阳性标准菌株或质控菌株评估其质量（表2-1）。
触酶、氧化酶、凝固酶、β-内酰胺酶、Optochin、X、V 和XV 纸片；细菌鉴定系统使用的每一种鉴定卡及相关试剂；表2-1 常用实验试剂质量控制试剂阳性对照阴性对照监测频率氧化酶铜绿假单胞菌A TCC27853 大肠埃希菌A TCC25922 每次新配制时及使用中每个工作日触酶金黄色葡萄球菌A TCC25923 A群链球菌A TCC19615 每次新配制时及使用中每个工作日靛基质大肠埃希菌A TCC25922 肺炎克雷伯菌A TCC13883 1%蛋白胨水及靛基质试剂:每次新配制时及使用中每个月1次直接用于检测病人标本有内标准的抗原试验如：金黄色葡萄球菌乳胶凝集试剂（每天或每次做质控）；抗血清（至少每半年用阴、阳性质控菌株做质控）；革兰染液（每周一次用阴、阳性质控片做质控）；抗酸染液（每次使用要求用阴、阳性质控片做质控）；自制试剂（每配制一批新试剂做质控）。
临床微生物实验室质量控制及质量保证胡继红
卫生部临床检验中心 胡继红
质量控制概念的引入
• 历史上，现代风险管理的概念引入实验室 之后，就以质量控制的形式出现。 • 狭义上指的是一项持续的、系统性的评估 工作来确保终产品的一致性——
根据可接受的程度： 事先建立好的允许限度下的精确度和准确度。
临床微生物实验室质量控制环节
质量保证持续监测
评价和持续改进检测病人标本结果的可靠性和有效性
QA监测
目标 质量、数量、体积，可接受的合格标本
标本
检测
报告
根据临床指症、诊断和其他临床资料，采 用适当检测方法
监测报告的正确，清楚、及时
服务对象 积极问询其需要，满意度，对抱怨的处理 理解 情况
临床微生物实验室质量控制范畴
标本分析前的质量控制： 微生物学特殊性——得到正确分析结果的基础
凝固酶: 区别金黄色葡萄球菌/凝固酶阴性葡萄球菌，药敏标准 致病性和用药等都不同
氧化酶： G-菌区别，肠杆菌科/非发酵菌/弧菌科/少见G-菌等 β-内酰胺酶：预测流感嗜血杆菌、卡他布兰汉菌和淋病奈瑟 菌对青霉素类抗生素敏感性；葡萄球菌属对青 霉素敏感性。
每个工作日或每次试验应做质控（阳性对照及阴性对照）
血培养的时机
• 针对血培养的时机缺乏系统的研究。尽管菌血症 经常出现寒战，但是在发热前，而发热时才会把 血培养提上日程。
• 有权威建议血培养应被安排在任意间隔。但在一 项回顾性调查中，Li等认为，在24小时内或固定 间隔获得血样的结果没有差别。 • 临床医生和实验者应根据患者的状态及怀疑的诊 断决定。对于败血症或不稳定的患者，血培养须 迅速，以便制定治疗方案。相反地，若在病情稳 定的患者怀疑是亚急性心内膜炎，应在固定间隔 采集血样。
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细菌检验人员及其培养教育
培养临床细菌室工作人员树立质量控制概念 • 什么是细菌检验中的质量：结果真实显示标本中 存在的病原菌及其生化特征和抗药性 • 什么是细菌检验中的质量控制：制定细菌检验的 质量水平，并采取监测手段，这一过程称为质量 控制。 • 质量保证：为达到应有的质量水平而采纳的措施 • 质量评价：用一个客观的公认的标准来评定一个 实验室或实验室中某项试验是否达到标准的过程
试剂、染色液及抗血清 的质量控制
• 试剂的保存方法（温度、避光） • 染液 • 抗血清的质量控制
常用试剂的质量控制
试剂 凝固酶血浆 杆菌肽纸片 阳性质控菌种 阴性质控菌种 监控频度 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 每天 A群链球菌 B群链球菌 新制者：每 批，以后每 周 金黄色葡萄球菌 A群链球菌 每天 铜绿假单胞菌 大肠埃希氏菌 新制者：每 批
抗生素敏感性试验的质控菌株
细菌名称 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 绿脓假单胞菌 粪肠球菌 淋病奈瑟菌 流感嗜血杆菌 肺炎克雷伯菌 菌号 ATCC 25923 ATCC 29213 ATCC 25922 ATCC 27853 ATCC 29212 ATCC 49226 ATCC 49247 ATCC 700603 用途 纸片扩散质控 MIC测定质控 纸片和MIC 纸片和MIC 胸腺嘧啶含量测定 淋球菌药敏 嗜血杆菌药敏 ESBL阳性菌
实验室方法标准化
细菌鉴定中方法标准化 • 有条件的单位，采用标准化自动或半自动的 自动化系统，如ATB、VITEK等 • 标本量少但有条件的单位可采用进口标准化 试剂：API、Micro Id，乳胶试剂 • 用国产试剂作鉴定单位，用相应标准菌株对 试剂作批批检
仪器设备的功能监测
• 灭菌器械的效果检测 化学指示剂测试法：无色 黑色 • 恒温孵育箱、冰箱 每天记录， 孵育箱35℃ ± 1 ℃ 普通冰箱4 ℃ ± 2 ℃ 冰格-5 ℃ ± 1 ℃ 低温冰箱-20 ℃ ± 5 ℃ 超低温冰箱-80 ℃ ± 10 ℃
室间质量评价的过程
EQA组织者 EQA参加实验室
准备质控样品
检测质控样品
分析结果
上报结果
反馈报告
自我评价与改进
室内质控
室内质控
• • • • • • • 细菌检验人员及其培养教育 仪器设备的功能监测 培养基的质量控制 试剂、染色液及抗血清的质量控制 处理临床标本的质量控制 质量控制用标准菌株 抗生素敏感试验的质量控制
细菌检验人员及其培养教育
操作手册的建立包括以下内容： • 规章制度 • 检验项目 • 细菌鉴定的最低要求及药敏试验 • 培养基及其制备 • 试剂、染色剂的制备 • 生物安全防护 • 参考数据及书籍 • 室内及室间质量控制
细菌检验人员及其培养教育
建立严格的质控制度 • 严格的QC记录制度，点图、表格或文字。 如：孵箱温度、冰箱温度、培养基质量记录 • 室内质控中失控记录 • 全民质控意识，不要把质控作为个别人的活 动 • 质控资料妥善保管，至少保存三年
质量控制用标准菌株
• 用途 试剂的质量控制 培养基的质量控制 抗血清的质量控制 染液的质量控制
质量控制用标准菌株
• 种类
大肠埃希菌ATCC25922 大肠埃希菌ATCC35218 （仅被推荐用于B-内酰胺霉抑制剂复合药，如含克 拉维酸、舒巴坦和三唑巴坦的复合药的试验质控。） 铜绿假单胞菌ATCC27853 金黄色葡萄球菌ATCC25923 粪肠球菌ATCC29212 （可用于监测M-H琼脂中药物抑制剂的水平是否低 得可以接受。也可用于高含量氨基糖苷类纸片的质控） 流感嗜血杆菌ATCC49247（HTM时用） 流感嗜血杆菌49766（HTM时用） 淋病奈瑟菌ATCC49226（GC琼脂时用） 肺炎链球菌ATCC49619（M-H羊血琼脂时用）
处理临床标本的质量控制
• 标本的采集和运送 • 直接涂片 除血标本外的临床标本特别是痰标本应 做直接涂片 • 分离培养和鉴定 培养基的选择、培养方法、鉴定程序
处理临床标本的质量控制
• 标本的采集和运送 采集时间、操作全程无菌、采集样本量、 运送标本及时安全、特殊菌的采集、 • 直接涂片 意义
处理临床标本的质量控制
实验室方法的标准化-----培养基 细菌分离 • 血琼脂：哥伦比亚琼脂或胰大豆胨琼脂、5％绵羊血、 软琼脂或加适量抑制剂有利于肺炎链球菌生长 • 巧克力琼脂：脑心浸液、5％兔血、5mg/100m去甲万 古霉素有利于嗜血杆菌生长 • 卡它莫拉菌识别： * 可在血琼脂或巧克力上生长 * 灰略黄、干燥但可在盐水中乳化 * 35℃培养24－48h
培养基的质量控制
• 培养基的性能监测（1） 外观、灭菌、PH、平板深度、无菌试验、 硬度试验
培养基的质量控制
• 培养基的性能监测（2） 液体及分离用培养基的质量控制
培养基
血琼脂
质控菌株
化脓性链球菌 肺炎链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌
号码
ATCC19615 ATCC6305 ATCC25923 ATCC25922 ATCC43069 ATCC13090
仪器设备的功能监测
• 二氧化碳培养箱 每天记录，5% CO2 • 生物安全柜： 定期年检,滤器3个月校正一次， 合格后使用 • 其它仪器（天平、显微镜、加样器、游标卡尺） 保养、定期维修、正确使用、年检
培养基的质量控制
• 制备培养基的记录 名称、配方、数量、灭菌、日期等 水质、PH ±0.2、 • 培养基的外观检查 颜色、透明度 • 无菌试验
鉴定标准
生长，ß -溶血 生长，α –溶血 生长 生长 生长 生长
巧克力琼脂
淋病奈瑟氏菌 脑膜炎奈瑟氏菌
流感嗜血杆菌
肺炎链球菌
ATCC10211
ATCC6305
生长
生长
培养基的质量控制
液体及分离用培养基的质量控制（续）
培养基 营养琼脂 质控菌株 金黄色葡萄球菌 号码 ATCC25923 鉴定标准 生长
过氧化氢
氧化酶
几项外加试验的标准化
• 触酶试验：3％H2O2每三天更换一次 • 血浆凝固酶试验：混合（5个兔子〕兔血浆或商品乳胶试剂 • 氧化酶试验：1％盐酸四甲基对苯胺水溶液浸泡厚滤纸，室 温吹干压成小纸片，置含干燥剂容器－20℃保存，或买商 品制剂 • －内酰胺酶：头孢硝噻吩(Nitrocefin)为底物，适于测试嗜 血杆菌、淋球菌、卡他莫拉菌、肠球菌。 配制注意： 1、每片含量10－14ug/片 2、低温吹干， －20℃保存 3、易失活，测试时应作阴阳性对照
临床微生物室质量控制
北京医院 艾效曼
内容提要
涉及内容 室内质控 室间质评 • 建立方法及步骤（室内质控） • 纠控方法 • 范例 • 注意事项
质量管理的层次
世界级质量 TQM 质量管理 质量体系协调 效力
效率
质量保证 计划性/系统性活动 质量控制 操作技术
细菌室质控工作目的及重要性
• 确认科学先进的试验方法，使实验试剂规范化、 检测过程标准化、从业人员资格华，以便更好 的控制结果，减少偏差和错误，保证临床细菌 检验技术更好地发挥 • 为临床微生物工作者提供无法律责任的相关依 据，避免承担不必要的风险 • 服务于临床 • 耐药监测
实验室方法标准化之三
药物敏感试验中的方法标准化K－B法 • M－H定量，厚度4mm，9cm平皿23－25ml • 纸片－20 ℃保存，4 ℃保存现用纸片一周 • 菌液浓度0.5麦氏单位浊度 • M－H琼脂，用粪肠球菌ATCC49212测拭甲氧 苄氨嘧啶或磺胺异恶唑的含量，抑菌环>20mm 为合格 • 推荐MIC测定方法：微量稀释法、琼脂稀释法、 Etest方法、自动化仪器
小结：临床细菌室（实验室〕的质量控制和方法标准化 是一对相互制约的矛盾，实验室只有建立标准化方法 学才可能进行质量控制才能获得好的结果。
室间质评
室间质评 External Quality Assessment, EQA
• 也称为能力实验，是指多家实验室分析 同一标本并由外部独立机构收集、反馈 实验室上报结果并评价实验室检测能力 的活动 • 历史 • 必要性 • 内容及方法
质量控制用标准菌株
• 种类
金黄色葡萄球菌ATCC 29213 金黄色葡萄球菌ATCC 43300 粪肠球菌ATCC 51299 链球菌ATCC 49629（CAMHB时用）
抗生素敏感性试验的质量控制
• 方法学简介（纸片扩散法、肉汤和琼脂 稀释法、Etest法、仪器法） • 培养基 厚度4mm，是影响KB法准确性 最重要的因素 • 抗生素 • 培养条件 • 判读
室间质评
卫生部行业标准对临床细菌室室 间质评要求：
• ≥50％质控物为混合样本 • 要求操作者根据人口统计资料确定 需报告的病原菌 • 标本中含有细菌范围广，包括正常 菌群、条件致病菌和致病菌
导致室间质评失败的主要原因
• • • • • • • 检测仪器未经校准或有效维护 室内质控失控 试剂质量不稳定 实验人员的能力不能满足实验要求 上报结果抄写错误 EQA样本处理不当 EQA样本质量存在问题
生长，无色菌落 生长，无色菌落 生长，无色菌落 生长被抑制 部分被抑制 生长 生长，产气 生长 部分或完全抑制
厌氧血琼脂 沙保罗琼脂
脆弱拟杆菌 产气荚膜梭菌 白色念珠菌 大肠埃希氏菌
培养基的质量控制
例： • 血琼脂：哥伦比亚琼脂或胰大豆胨琼脂、5％ 羊血、软琼脂或加适量抑制剂有利于肺炎链球 菌生长 • 巧克力琼脂：脑心浸液、5％兔血、5mg/100ml 去甲万古霉素有利于嗜血杆菌生长
几种特殊细菌的药敏问题
• 肺炎链球菌：耐青霉素的肺炎链球菌或MDR • 呼吸道分离菌：1ug/片苯唑西林代替青霉素 作药敏，同时作红霉素、复“ S”。≤19mm作MIC，测青霉素、头孢噻 肟、头孢曲松的MIC • 无菌部位分离菌（CSF血液〕直接作青、噻 肟、曲松和万古MIC