体细胞杂交与原生质体融合
生物技术概论试题（部分）
⽣物技术概论试题（部分）第⼀部分分类练习⼀、名词解释⽣物技术、细胞⼯程、基因⼯程、酶⼯程、蛋⽩质⼯程、发酵⼯程、⼈类基因组计划、蛋⽩质组学、组织培养、⽣长因⼦、⼈⼯种⼦、连续培育、细胞分化、愈伤组织、分批发酵、肝细胞、TE细胞、酶分⼦修饰、酶反应器、⽣物传感器、⽣物芯⽚、细胞融合、细胞培育、⽆菌操作、组织培养、单倍体、花药培养、花粉培养、胚珠培养、单克隆抗体、体细胞克隆、受体细胞、载体、PCR、限制性内切酶、⽬的基因、转化⼦、花粉管通道法、报告基因、重组⼦、转基因技术、动物反应器、基因治疗、离⼦交换、吸附、超临界流体萃取、固定化细胞、外植体、继代培养、悬浮培养、固定化培养、转基因植物、蛋⽩质功能改性、细胞融合、DNA粘性末端、重组质粒⼆、简答题1、细胞全能性学说的基本内容是什么？2、植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？3、细胞脱分化在细胞结构上有何变化？4、细胞周期的调控在细胞脱分化中有何作⽤？5、细胞分化有什么基本特征？6、蔗糖在组织培养过程中的功能是什么？7、与器官发⽣形成个体相⽐体细胞胚形成个体有哪些特点？8、如何理解体细胞胚的遗传稳定性和变异性？9、离体培养物的遗传变异机理是什么？10、哪些因素会影响培养物的遗传变异？11、从体细胞变异的分⼦基础分析体细胞变异的外遗传变异，实践中如何应⽤这些外遗传变异？12、总体上讲离体培养的条件主要有哪些？13、为什么茎尖分⽣组织培养能够除去植物病毒？14、花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？15、花药培养中再⽣植株的形成途径与再⽣植株倍性有何关系？16、⽤于建⽴悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？17、⼀个好的悬浮细胞系有哪些特征？18、悬浮细胞系在继代培养中其群体⽣长有何规律？19、哪些因素会影响原⽣质体培养？20、原⽣质体融合要经过哪些过程？21、对称融合与⾮对称融合的细胞杂种有何异同？22、胚乳培养有何意义？23、同是薄壁细胞为什么胚乳薄壁细胞培养⽐较困难？24、细胞⼯程对实验室的基本要求有哪些？25、为什么胚乳培养物及其再⽣植株的倍性常发⽣紊乱？26、何为正选择?何为负选择?27、⼈⼯种⼦利⽤有何优点?28、⽤于制备⼈⼯种⼦的繁殖体主要有那些?29、为什么说微型变态器官是最有可能作为⼈⼯种⼦的繁殖体?30、同游离酶相⽐，固定化酶的性质改变主要有哪些？31、固定化操作对酶反应系统的影响主要有哪些？32、固定化酶有何性质？33、固定化酶有哪些指标？34、酶反应器有哪些基本类型？描述其特点？35、酶反应器有何设计原则？36、传感器的有哪些类型？各有何特点？37、蛋⽩质⼯程为什么⼜称为第⼆代基因⼯程？⼆者有何联系与区别？38、简述氨基酸的基本理化性质？39、蛋⽩质的基本组件有哪些？40、什么是蛋⽩质组学？研究细胞内所有蛋⽩质的组成及其动态变化规律的科学，它从更深⼀个层次—蛋⽩质组层次上揭⽰⽣命活动的本质及其规律。
原生质体融合技术简介
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中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology
原生质体研究的发展
1838 1873 1896 1931 1954 1958 1970 1972 1972 1974 1976 1976 1977 1978 1981 1988 2002 Muller Lugmbuthl Unna Wathin Bnders et al Marston Power et al Carlson Ferenczy et al Michayluk Ferenczy et al Fodor et al Hopwood Gleba et al Menczel Kirimalra et al Stemmer et al 动物病理组织中发现多核细胞 天花病脓胞周围发现多核细胞 水痘侵害过的皮肤中发现多核细胞 麻疹病人扁桃腺中发现多核细胞 组织培养中发现麻疹病毒能诱导细胞用和成多核体 用副流感病毒诱发细胞融合 探索用硝酸钠诱导植物原生质体融合 用NaNO3进行了烟草种间原生质体融合 以白地霉营养缺陷型为材料经原生质体融合首次完成异核体形成 发现PEG是一种良好的聚合剂用于原生质体融合 是一种良好的聚合剂用于原生质体融合 发现 以曲霉 青霉营养缺陷型为材料经原生质体融合首次完成异核体形成 巨大芽孢杆菌内株间原生质体融合成功 链霉菌原生质融合并获融合重组子 用PEG+高pH-Ca2+研究原生质体融合 高 用高pH-Ca2++9℅DMSO与少量 与少量PEG获得较高的融合率 用高 与少量 获得较高的融合率 原生质体PEG融合获得黑曲霉二倍体柠檬酸高产菌株 融合获得黑曲霉二倍体柠檬酸高产菌株 原生质体 一种新的体内分子育种方法——全基因组改组技术 全基因组改组技术 一种新的体内分子育种方法
植物育种学复习资料总结知识点
1、品种:经人类培育选择和创造的、经济性状及农业生物学特性符合生产和消费要求的遗传上相似而稳定的植物群体。
2、园艺植物育种学:是研究选育与繁殖园艺植物优良品种的原理和方法的科学。
3、种质；决定生物性状遗传，能把遗传信息从亲代传递给后代的遗传物质。
4、种质资源（遗传资源）；具有种质并能繁殖的生物体的统称5、无性繁殖：生物不是通过有性生殖，而是利用营养器官或体细胞等繁殖后代的繁殖方式。
6、有性繁殖；生物通过有性过程产生的雌雄胚子结合，形成合子发育成新个体繁殖后代，有完整的个体发育周期7、无融合生殖：指一种近似有性繁殖由无融合生殖胚发育成植株的无性繁殖方式。
8、自花授粉；在自然条件下，雄蕊的花粉一般不借助外力即可直接授到本花雌蕊的柱头上，一般自然异交率在5%以内。
9、异花授粉;在天然授粉情况下，雌蕊主要依靠异株或同株异花的花粉完成授粉、受精。
天然异交率50%以上。
10、品质性状；需要改良的性状称为育种的主要目标性状，与品质有关的性状为品质性状。
11、目标性状；各类作物品种都具有一系列性状，其中特别需要改良的性状称为育种的主要目标性状，这些性状又各有其组成因素及生理生化基础。
12、育种目标：对所要育成品种的要求，所要育成的新品种在一定自然、生产及经济条件下的地区栽培时，应具备的一系列优良性状的指标。
13、选择差;当对某一数量性状进行选择时，入选群体与原始群体平均值将有一定差距为选择差14、饰变；由环境条件（土壤、气候、栽培措施）变化引起的变异15、芽变：指发生在芽内分生组织细胞中的突变，属于体细胞突变的一种。
16、选择育种；利用手段从植物群体中选取符合育种目标的类型，经过比较鉴定从而培育出新品种的方法17、芽变选种；利用发生变异的枝、芽进行无性繁殖。
使之性状固定，通过比较鉴定，选出优系，培育成新品种的选择。
18、实生选种；针对实生繁殖的群体为改进其经济性状，提高品质而进行的选种育种19、引种驯化；将一种植物从现有的分布区域或栽培区域人为的迁到其它地区种植的过程，也就是从外地引进本地尚未栽培的新的植物种类、类型与品种。
原生质体融合和体细胞杂交的关系
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植物细胞工程考试重点资料
植物细胞工程一、名词解释1、离体繁殖：是指人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖的技术。
2、外植体:取至生物体用于组织培养的活的生物细胞或组织切段、或用于继代培养的组织培养物均称之为外植体。
3、悬浮培养：是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
4、互不选择：两个具有不同生理或遗传特性的亲本，在形成杂种细胞时能产生互补作用，根据这一特性进行杂种细胞选择的方法称互补选择。
5、极性：是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。
它是植物细胞分化中的一个基本现象。
6、体细胞胚：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物。
7、TE细胞：植物在系统发育中，由根和芽的原形成层或次生形成层细胞分化形成的管状细胞，它在维管系统的形成中具有中心作用。
在离体培养条件下，TE细胞由愈伤组织薄壁细胞分化形成，这也是愈伤组织细胞分化器官的前提。
8、人工种子：又称合成种子或体细胞种子，任何一种在离体培养条件下产生的繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株。
均称之为人工种子。
9、器官发生：植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。
10、脱分化：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态中的过程。
11、生长素感应：生物细胞由生长素受体感受生长素信号与其结合，进而使生长素受体被活化的过程。
12、转分化：在培养条件下，具有一定分化程度的植物细胞在不经过分裂，但经过类似脱分化过程和再分化过程而转变为另一类分化细胞的过程。
13、体细胞无性系：有任何形式的细胞培养所产生的植株。
14、玻璃化冻存：是指在超低温保存生物细胞中，通过一定程序使细胞质液体转变为非晶体（玻璃化）的固化过程。
15、早熟萌发：幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发呈幼苗，通常称之为早熟萌发。
原生质体融合技术
原生质体融合技术的局限性植物原生质体是指用特殊方法去细胞壁的、裸露的、有生活力的原生团。
这种裸露细胞在适当的外界条件下，还可形成细胞壁，进行有丝分裂，形成愈伤组织和诱发再生植株，因而仍然具有细胞的全能性。
植物原生质体融合技术是借鉴于动物细胞融合的研究成果，在原生质体分离培养的基础上建立起来的，以植物的原生质体为材料，通过物理、化学等因素的诱导，使两个原生质体融合在一起以致形成融合细胞的技术。
它不是雌雄孢子之间的结合，而是具有完整遗传物质的体细胞之间的融合，是2种原生质体间的杂交。
通过原生质体融合可以把带有不同的基因组的两个细胞结合在一起，与有性杂交相比，无疑可以使“杂交”亲本组合的范围扩大，不但可以利用细胞核内基因资源，还可以利用包含在细胞质中的诸如叶绿体和线粒体DNA的遗传资源。
原生质体培养是细胞杂交的基础，但是直到目前为止，也只有360多个种的原生质体培养再生了完整的植株，大多数重要的植物尤其是木本植物如葡萄、棕榈、橡胶、茶、香蕉、椰子和芒果等的原生质体再生仍然很困难，或者还未进行深入研究。
在原生质体再生的物种中，茄科占了将近1/4，并且用于育种目的的大多数体细胞杂种和细胞质杂种也比较集中于茄属、烟草属、苜蓿属、柑橘属、芸薹属和番茄属等6个属中。
因此，为了有效地进行植物遗传改良，不但要使杂种细胞再生成完整植物，而且还必须提高植株再生的频率，以便有足够的群体进行有效的选择。
但目前存在的一个普遍的问题使许多原生质体再生的程序似乎较低，重复性较差，并且还具有基因型的依赖性。
为了将体细胞杂交技术应用于更多的植物中，还需要更加深入地研究植物细胞的分化、脱分化和再分化等发育机制。
1.技术局限性植物细胞杂交的本质是将两种不同来源的原生质体，在人为的条件下进行诱导融合。
由于植物细胞的全能性，因此融合之后的杂种细胞，可以再生出具有双亲性状的杂种植株。
因此，细胞融合也叫原生质体融合或细胞杂交。
其包括三个主要环节：诱导融合；选择融合体或杂种细胞；杂种植株的再生和鉴定。
原生质体培养名词解释
原生质体培养名词解释原生质体培养是一种常用的植物组织培养技术，用于繁殖植物和研究植物基因转化等问题。
本文将介绍原生质体培养的定义、原理和应用等方面的名词解释。
下面是本店铺为大家精心编写的4篇《原生质体培养名词解释》，供大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
《原生质体培养名词解释》篇11. 原生质体（Protoplast）原生质体是指从植物细胞中除去细胞壁后剩余的细胞质部分，包括细胞膜、质体、线粒体、质体小体、微管和微丝等细胞器。
原生质体是一个高度液态的细胞质体系，其形态和功能类似于一个微小的细胞。
原生质体可以通过融合实现远缘杂交，从而扩大植物遗传资源的利用范围。
2. 原生质体培养（Protoplast Culture）原生质体培养是指将离体的植物原生质体在适当的培养基上进行培养，以获得再生的植物组织或细胞。
原生质体培养的主要目的是通过原生质体的融合，克服远缘杂交障碍，实现植物遗传资源的利用和改良。
3. 原生质体融合（Protoplast Fusion）原生质体融合是指两个或多个原生质体合并成一个细胞的过程。
原生质体融合可以通过电激、化学处理或生物方法等手段诱导。
融合后的细胞称为杂种细胞，可以用于植物遗传资源的利用和改良。
4. 再生（Regeneration）再生是指通过培养技术，使离体的植物组织或细胞重新分化、再生为新的植株或组织。
再生是原生质体培养的重要应用之一，也是植物组织培养技术的基础。
5. 遗传转化（Genetic Transformation）遗传转化是指将外源基因或基因组导入植物细胞内，并使其表达的过程。
遗传转化是植物基因工程的重要组成部分，也是原生质体培养的应用之一。
通过原生质体培养技术，可以将目的基因导入植物细胞内，并实现植物的遗传转化。
6. 植物组织培养（Plant Tissue Culture）植物组织培养是指将离体的植物组织或细胞在适当的培养基上进行培养，以获得再生的植物组织或细胞。
【生物技术】第六讲(2)植物体细胞杂交技术
3.2 突变互补选择
3.2.1 隐性突变互补选择 3.2.2 显性抗性互补选择 3.2.3 隐性突变与野生型互补选择 3.2.4 显-隐性双突变体选择
植物体细胞杂交技术
周口师范学院生命科学系
植物体细胞杂交的意义
有性杂交是植物遗传改良的一种传统手段. 作用空间:主要限于种内的品种之间. 种及种以上分类单位之间的杂交,例如 种间或属间杂交,则常常遭遇有性不亲和性 障碍.
在无性繁殖植物和性不育植物中,如在 马铃薯,甘薯,木薯,甘蔗和香蕉中,更是 难以通过有性杂交进行遗传改良. 因此,建立在原生质体全能性基础上的 体细胞杂交和胞质杂交技术,对于植物的遗 传改良具有重要的意义.
5 体细胞杂种和胞质杂种的鉴定
5.2 细胞学和分子细胞学鉴定 通过确定杂种染色体数和染色体形态
5 体细胞杂种和胞质杂种的鉴定
5.3 生化鉴定 同工酶谱分析法: 将体细胞杂种的同工酶谱与其双亲的酶谱 比较: 杂种植株的酶谱可能是双亲酶谱带的总和 可能只出现双亲的部分酶带 或缺少双亲的某些酶谱而出现新的谱带.
在双亲亲缘关系比较远的杂种细胞中,两 个来源不同的染色体组常常不能完全结合在 一起. 在动物体细胞杂种细胞系中,已知双亲之 一的染色体会逐渐消除,在植物中也看到这 种现象.
3 杂种细胞的选择系统
3.1 根据物理特性选择 3.2 突变互补选择 3.3 根据生长和再生能力的差别选择
3.1 根据物理特性选择
3.3 根据生长和再生能力的差别选择
高中生物：第二章 第二节 通过体细胞杂交可获得新的植物体 (1)
第二节通过体细胞杂交可获得新的植物体[学习目标]概述植物体细胞杂交的过程。
[素养要求] 1.生命观念：运用结构与物质观理解通过体细胞杂交培育出的新植物体可能会有新的特性。
2.社会责任：认识通过体细胞杂交可获得新的植物体，加深对科学、技术、社会相互关系的认识。
1．原生质体获得的方法在0.5～0.6 mol/L的甘露醇(或一定浓度的蔗糖)溶液环境(较高渗透压)下，用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞，消化除去细胞壁，获得球形原生质体。
在用酶解法降解细胞壁之前，先用较高渗透压溶液处理细胞，目的是使细胞处于微弱的质壁分离状态，防止原生质体被破坏。
2．植物体细胞杂交的过程(1)概念：将两个来自不同种植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并将杂种细胞培育成新的植物体的技术。
(2)过程①获得原生质体的方法：电刺激、离心、振荡、聚乙二醇等诱导。
②原理：原生质体融合利用了细胞膜的流动性，杂种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能性。
③意义：能克服远缘杂交的不亲和性，获得新品种。
判断正误(1)在用酶解法降解细胞壁之前，需要先用较高渗透压溶液处理细胞()(2)原生质体的融合依赖于细胞膜的流动性()(3)原生质体包括细胞膜、液泡膜及这两层膜之间的细胞质()答案(1)√(2)√(3)×探讨点植物体细胞杂交的过程1．下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程，回答下列问题：(1)步骤①需要用到的试剂是什么？提示纤维素酶和果胶酶。
(2)步骤②所用的方法有哪些？提示电刺激、离心、振荡、聚乙二醇等诱导。
2．原生质体A与原生质体B融合后，有哪几种类型(只考虑两两融合)？而我们需要的是哪种类型？所以原生质体融合后，我们要进行怎样的处理？提示有3种类型：AA、BB、AB；我们需要的是AB；因此要对融合后的原生质体进行鉴定和筛选。
核心归纳植物体细胞杂交的过程步骤图解技术原生质体的获取酶解法：纤维素酶和果胶酶去除细胞壁原理：细胞膜的流动性原生质体的融合杂种植株的形成植物组织培养(1)原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁。
名词解释
植物细胞培养是指对从植物器（或小细胞团）进行培养，形官或由愈伤组织上分离的单细胞成单细胞无性系或再生植株的技术。
Haberlandt（1902）首次尝试分离和培养植物叶片单细胞技术。
植物组织培养：指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生完整植株的技术。
简称组培。
也称离体培养或试管培养。
植物细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞，具有全部的遗传信息，在一定条件下均具有分化、发育成一个完整植株的潜在能力。
动植物细胞分化差异。
外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官。
脱分化/去分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞，经过离体培养，产生愈伤组织的过程。
（一个成熟细胞转变为分生状态的再分化：指脱分化的分生细胞重新恢复分化能力沿着正常的发育途径形成具有特定结构和功能的细胞的过程。
（脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。
）植物细胞培养是指对从植物器官或由愈伤组织上分离的单细胞（或小细胞团）进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。
Haberlandt（1902）首次尝试分离和培养植物叶片单细胞技术。
平板培养法：是将悬浮培养的细胞接种到薄层培养基上进行培养的过程，是常用的单细胞培养法。
看护培养法:用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织来培养细胞的一种方法。
微室培养:将单个细胞放到人工制造的一个小室中进行培养的一种方法条件培养基培养法: 在培养基中加入高密度的细胞进行培养，经过一定时间后, 这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化。
使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。
Torres(1989)设计。
悬浮培养:指将游离的植物单细胞或小细胞团,按一定的细胞密度,在受到不断搅动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。
分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
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Application
1: Definition of SH
• SH, i.e. protoplast fusion, a process of PPs from two different parents were induced to fuse and then regenerate into plantlets, also named as SH (A + B)
level unchanged
Possible Fusion Results of Two Genetically Different Protoplasts
Fusion heterokaryon
= chloroplast = mitochondria = nucleus
cybrid
hybrid
hybrid
PEG-mediated fusion Electro-fusion
Polyethylene glycol （PEG，聚乙二醇） Electrofusion, Electrically induced fusion
1. PEG-mediated fusion
Characteristics: 1) Merits include: low input,
Several stock solutions to prepar
Fusion sol: CaCl2 2H2O 8-10 mmol
KH2PO4
0.7 mmol
Mannitol
0.5-1.0 mol
pH 5.6
Inducing sol: Fusion sol + PEG 20-45％
Diluting sol: sol A (g/100 ml) pH 6.0 sol B (g/100 ml) pH
Fusion process
Membrane fusion (膜融合) Cytoplasm fusion (细胞质融合) Nucleus fusion (核融合)
Factors affecting PP fusion
PP quality (intact, viability etc) Fusion method (PEG or electro-fusion) Fusion parameters (电融合参数、溶液浓度等)
Three advantages compared with PEG fusion
No toxicity to protoplasts
Higher fusion frequency
Simpler manipulation
Electro-fusion: A high frequency AC field is applied between 2
electrodes immersed in the suspension of protoplasts- this induces charges on the protoplasts and causes them to arrange themselves in lines between the electrodes to form pearl-chain. They are then subject to a high voltage discharge which causes their membranes to fuse where they are in contact.
high frequency of hetero-karyons, no species limit; 2) Defects include: tedious fusion procedure, toxicity to cells
Working mechanism: PEG分子具有轻微的负极
性，可与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物 等形成H键，从而在原生质体之间形成分子桥，从而使 原生质体发生粘连进而促进原生质体融合；PEG能增 加类脂膜的流动性，也使原生质体的核、细胞器发生 融合成为可能
融合） 亚原生质体-原生质体融合：
Subprotoplast-protoplast fusion
小原生质体：Miniprotoplast 微原生质体：Microprotoplast 胞质体：Cytoplast
胞质体-原生质体融合: Cytoplast-protoplast fusion
Technical developmental history
Chapter 3 Protoplast Culture & Somatic Hybridization
Part 2 Somatic hybridization （体细胞杂交）
Definition
Fusion and culture
Devel. process & hybrid verification
cybrid
Terminology-1
对称杂种 (symmetric hybrid)（双亲给杂种贡献的遗传物 质均为100%）
非对称杂种(asymmetric hybrid)（双亲给杂种贡献的遗 传物质不等（相对值）
– 胞质杂种（cytoplasmic hybrid, Cybrid）：细胞质重组，细胞核未重组
1970s, establish and optimize of PP technique – 1972, tobacco interspecific somatic hybrid – 1975, high Ca-high pH PEG fusion; electro-fusion – Numerous reports, some were not realistic
Add diluting sol
Mix sols A & B
Dilution
Add medium
Wash
Note: Mix solutions A & B (9:1) to make working solution
2．Electrofusion, Electrically induced fusion
对称融合（symmetric fusion） 也称标准融合（Standard fusion）
非对称融合（asymmetric fusion）：融合前对一方进行 处理，使其染色体丢失一部分
Terminology-2
供-受体融合：Donor-recipient fusion 体配融合（gameto-somatic fusion）（性细胞与体细胞
breeding in citrus, rapeseed, wheat etc.
Potato + Tomato = Pomato ?
2: protoplast fusion
Fusion methods Fusion process Factors affecting fusion
Fusion methods
• Several different expressions:
体细胞杂交：Somatic hybridization 细胞融合：Cell fusion 原生质体融合：Protoplast fusion 无性杂交：asexual hybridization 超性杂交：Parasexual hybridization 超性融合：Parasexual fusion 细胞操作：Cell manipulation 细胞工程: Cell engineering
Electro-fusion instrument in NKL, HZAU
The process of electrically induced fusion
Fusion parameters
Alternate current voltage (交流电压) Time duration of AC (交变电场处理时间) Direct current voltage (直流高频电压) Pulse width (脉冲宽度) No. of Pulses (脉冲次数)
10.5
Glucose 7.21
Glycin 0.375
CaCl2 2H2O 0.79
NaOH 0.169
PEG induced fusion procedure
P1
Fusion sol
P2
Mix, keep intact 1 min
P1
P2Add PEG
Screening
Fusion
Culture
Comparison of SH with Sexual crossing
Items
Time
时间
Phylogeny
亲缘关系
Results
结果
Somatic fusion
Sexuacumvent graft/sexual incompatibility
克服嫁接/有性不亲和性
Only bloom season (花期限制，母本花期)
Can not
nuclear, cytoplasmic genomes recombined
Ploidy level increaed
Double fertilization, no recombination and ploidy
Early 1980s, model plants to staple/economic crops, symmetric to asymmetric, more realistic
Late 1980s, many reports on perennial woody plants 1990s to date, a conventional & safe ‘biotech’ for plant