沙门氏菌检验(现用)
沙门氏菌检验
沙门氏菌检验一、培养基和试剂：1、缓冲蛋白胨水（BP）：按GB4789.28中4.12规定2、氯化镁孔雀绿（MM）增菌液：按GB4789.28中4.13规定3、四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液：按GB4789.28中4.14、4.15规定4、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：GB4789.28中4.16规定5、亚硫酸铋琼脂（BS）：按GB4789.28中4. 19规定6、DHL琼脂：按GB4789.28中4. 20规定7、HE琼脂：按GB4789.28中4.21规定8、WS琼脂：按GB4789.28中4.23规定9、SS琼脂：按GB4789.28中4.22规定10、三糖铁琼脂：按GB4789.28中4.26、27规定11、蛋白胨水靛基质试剂：按GB4789.28中3.13规定12、尿素琼脂（Ph7.2）：按GB4789.28中3.15规定13、氰化钾（KCN）培养基：按GB4789.28中3.16规定14、氨基酸脱羧酶试验培养基：按GB4789.28中3.12规定15、糖发酵管：按GB4789.28中3.2规定16、ONPC培养基：按GB4789.28中3.3规定17、半固体脂：按GB4789.28中4.30规定18、丙二酸钠培养基：按GB4789.28中3.7规定19、沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。
二、沙门氏菌检验程序：三、操作步骤：（一）、前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
各称取检样25g，加在装有255ml缓冲蛋白胨水的500ml广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以8000~100000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18~24h）移取10ml，转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18~24h。
同时，另取10ml，转种于100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于36±1℃培养18~24h.。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌，其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。
下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 培养分离沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。
常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。
将待检样品接种于选择性培养基上，并采用适当的温度和培养时间进行培养。
沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落，可以通过形态特征进行初步判断。
2. 生化检测生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。
常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。
气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。
亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。
尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。
3. 血清学检测血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。
常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。
在这些方法中，沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合，形成可见的凝集物或荧光产物，从而判断是否感染沙门氏菌。
4. 分子生物学方法分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。
常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等。
PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏菌基因的特定片段，从而进行检测。
核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合，形成杂交信号来进行检测。
基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列，确定其身份。
总结：沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。
这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在，可以提供准确鉴定和检测结果。
在实际应用中，结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。
沙门氏菌检验程序
沙门氏菌检验程序沙门氏菌是一种常见的致病微生物，能引起人类和动物的感染疾病。
因此，在食品、水源、环境等方面对沙门氏菌的检测尤其重要。
下面我们将介绍一下沙门氏菌检验的步骤和方法。
1. 样品采集对于食品、水源等样品的采集需要遵守严格的规定。
例如，食品样品需要在加工、贮存和分配之前采集，以确保沙门氏菌检验的准确性。
样品应当在采集之后尽快送到实验室进行检测。
2. 样品处理根据不同的样品类型和特性，采用不同的处理方法。
例如，对于牛奶、鸡蛋等液态食品，需要进行破坏性处理，以确保沙门氏菌的释放。
对于土壤、粪便等样品，需要进行外层细菌的去除处理。
3. 培养培养基选择含有适当氧气和营养物质的培养基，如SS（Salmonella-Shigella）培养基、XLD（Xylose-Lysine-Desoxycholate）培养基等。
将样品分别接种到不同的培养基上。
4. 培养将分别接种的培养基放入恒温箱中进行培养。
将温度设定为37°C至42°C，进行18小时至24小时的培养。
在培养过程中观察样品的生长和变化。
5. 分离取出培养好的样品进行观察。
将预处理样品浸泡在缓冲液中，将溶液过滤。
过滤的溶液留下来，转移到盘子上。
用肉眼观察菌落的形态，观察不同菌落的特点。
根据菌落的特点进行分离。
6. 鉴定在鉴定步骤中，需要进行各种化学试剂处理，如氧化氢酶测试、葡萄糖测试等。
同时需要使用专业仪器，如API试剂盒、ELISA试剂盒等。
通过这些鉴定手段，确定检测出的菌落是否为沙门氏菌。
7. 结论最后，根据检测结果得出客观和准确的结论，以便针对食品、水源或环境污染等问题采取相应的措施。
总之，沙门氏菌的检验程序是一个非常复杂和严谨的过程，需要专业的实验室和技术人员进行操作。
我们应当高度重视沙门氏菌检验的重要性，以确保我们的食品质量和健康安全。
沙门氏菌鉴定流程
沙门氏菌的检测方式主要包括血常规检查、便常规检查、ELISA法检查等，能够判断疾病的严重程度。
1、血常规检查：感染沙门氏菌时，多数患者的白细胞、中性粒细胞以及嗜酸性粒细胞计数出现偏低的情况，大儿童的白细胞计数通常出现升高的现象，该项结果可以辅助诊断沙门菌病。
2、便常规检查：感染沙门氏菌以后，部分患者可能会出现黏液样变或血便的情况，通过明确患者急性胃肠炎的症状来辅助诊断沙门菌病。
3、ELISA法检查：检测患者血清中沙门菌抗原、抗体是否出现异常的情况，有助于沙门菌感染的诊断。
除此之外，沙门氏菌的检测方式还包括B超检查、肥达试验等，如果自身的病情比较严重，建议应及时到正规医院的感染病科进行检查并治疗，以免延误病情。
沙门氏菌检验
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
（4）三糖铁琼脂培养基中亦
含有硫代硫酸钠作为产生硫 化氢之基质，且含硫酸亚铁 作为检测此无色产物之指示 剂，经接种培养后，若微生
物有硫化氢产生，会与亚铁
离子作用生成不溶性硫化亚 铁之沉淀，进而使培养基变 黑。 培养基变黑
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
沙门氏菌属在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试 验培养基内的反应结果
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
沙门氏菌属生化反应有尽有初步鉴别表
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
丙二酸盐试验 阳性（兰） 阴性（不变）
ONPG试验 阳性（黄） 空白
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
第一天 前增菌培养
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
（3）斜面碱性（红色-）底部碱性（红色-）或无变化（橘 红色）：表示无糖类发酵。而蛋白质则于有氧或厌氧条件
下进行代谢产生氨，而使培养基呈碱性反应，如有氧与厌
氧均发生蛋白质分解，则斜面与底部均呈碱性反应。 为使结果准确，应于接种培养18-24小时内观察结果，以 确保糖类尚未用尽，且蛋白质分解之碱性终产物尚未产生。
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
• 第二天 增菌培养
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
• 第三天 接种BS和沙门氏显色平板进行分 离培养
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验 第四天 观察分离结果、生化试验
从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂和赖氨素 脱羧酶试验管及对照，并同时在营养琼脂平板上划线分离 培养。
欧盟沙门氏菌检验标准
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌，可以导致食物中毒。
为了确保食品安全，许多国家和地区都有相关的食品和饲料中沙门氏菌的检验标准。
欧盟是全球食品安全监管最为严格的地区之一，其对于沙门氏菌的检验标准非常严格。
以下是欧盟对于食品和饲料中沙门氏菌的一般检验标准：
1. 检测方法:欧盟推荐使用ISO 6579:2002、ISO 6579:2007或ISO 6579:2017等国际标准进行沙门氏菌的检测。
2. 样品数量:每个食品或饲料样品的检测数量至少为25克。
3. 检测频率:对于某些高风险食品，如生肉、家禽、蛋类和蛋制品，欧盟推荐在生产、加工、储存和销售过程中进行定期检测。
4. 阳性判定:如果在一个样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被视为阳性。
5. 报告:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么必须立即报告给相关的监管机构。
6. 处理:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被销毁，并且相关的生产或加工设备必须进行清洁和消毒。
需要注意的是，具体的欧盟沙门氏菌检验标准可能会根据食品的种类、来源、加工方法等因素有所不同。
沙门氏菌血清学鉴定的原理及检验流程
沙门氏菌血清学鉴定的原理及检验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!沙门氏菌血清学鉴定：原理与检验流程详解沙门氏菌是一类常见的食源性病原体，其种类繁多，血清型的多样性使得准确鉴定至关重要。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一类常见的细菌，通常存在于一些动物体内，例如家禽和家畜的肠道内。
它们也有可能通过食物和水传播到人体内，导致沙门氏菌感染。
本文将介绍沙门氏菌检验及分析的相关内容。
1. 沙门氏菌的检验方法（1）血清凝集反应法以沙门氏菌的特异性抗原与沙门氏菌患者血清反应，观察血清凝集是否发生，来判断患者是否感染了沙门氏菌。
这种方法快速简便，但准确度较低。
（2）细菌培养法将患者样本培养在含有沙门氏菌生长所需营养物的培养基上，观察是否出现菌落，来判断是否感染了沙门氏菌。
这种方法耗时较长，但准确度较高。
沙门氏菌的感染对人体健康有很大影响，因此对沙门氏菌的分析也非常重要。
（1）简单的感染症状一般情况下，沙门氏菌感染的症状包括腹泻、呕吐、发热等。
这些症状通常在感染后1-3天内出现，并可持续数日至数周不等。
（2）食品检测沙门氏菌通常通过食物途径传播，因此食品检测是非常重要的。
食品中是否存在沙门氏菌可通过简单的生化方法来鉴定。
（3）抗生素敏感性测试对于沙门氏菌感染的治疗，抗生素是常用的治疗手段之一。
在使用抗生素前，应进行抗生素敏感性测试，以确保所选择的抗生素对沙门氏菌有效。
3. 沙门氏菌感染的预防（1）注意卫生沙门氏菌多数存在于家禽和家畜的肠道内，因此在处理家禽和家畜时应注意卫生，避免沙门氏菌感染。
食品加工时应注意卫生，使用新鲜食材，逐层消毒，避免沙门氏菌感染。
（3）加强个人卫生个人卫生习惯也是预防沙门氏菌感染的重要措施。
包括勤洗手，不用食指挖鼻孔和耳朵等行为，不用手接触眼睛、口鼻、食物等等。
4. 总结以上就是沙门氏菌检验及分析的相关内容。
沙门氏菌属于一类较为常见的细菌，引起的感染对人体健康有很大的危害。
因此，对沙门氏菌进行检验及分析，以及采取预防措施是非常必要的。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
沙门氏菌的检验
1．目的
规沙门氏菌检测方法，使产品检验有据可依。
2．消毒灭菌要求
微生物检测用的玻璃仪器、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。
注：本实验采用湿热灭菌法，吸管、培养皿、培养基等盖好塞子并包好瓶口在高压灭菌锅中按要求的温度和压力灭菌，一般是121℃（1.5MPa）下灭菌20min。
3．原理
沙门氏菌的检验分四个连续阶段：
4．操作步骤
4.1 准备工作
配制实验所需的缓冲蛋白胨水、亚硒酸盐胱氨酸培养基（无需灭菌）、HE培养基、三糖铁培养基等，并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。
4.2 前增菌
在无菌环境下，称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中，
然后放到36±1℃的恒温培养箱进行前增菌4-6h;
4.3 增菌
在无菌环境下，用灭菌好的吸管吸取10ml前增菌液接种与100ml亚硒酸盐胱氨酸培养基中进行二次增菌，恒温培养箱36±1℃，培养18-24h;
4.4 分离培养
将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm的接种环挑取一环，划线于表面无凝结水的BS和SS琼脂平板各一个，于36±1℃培养18-24h。
观察各个平板上有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。
如无典型或可疑菌落，应再继续培养24±2h。
然后观察培养的平板（黄色的菌落是大肠杆菌；蓝绿色或蓝色，产硫化氢，菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌）。
沙门氏菌属各亚属在其他选择性琼脂平板的菌落特征
4.5 生化实验
用灭菌好的接种针在培养平板上挑取可疑的沙门氏菌单菌落，接种到三糖铁培养基上，恒温培养箱36±1℃，培养18-24h; 典型沙门氏菌培养物斜面显红色（碱性），底端显黄色（酸性），有气体产生，形成硫化氢（琼脂变黑）。
三糖铁培养基变化表
肠杆菌科各属在三糖铁琼脂的反应结果
同时将三糖铁培养基上可疑的菌株，做生化实验，将可疑的沙门氏菌落分别接种于尿素、赖氨酸脱羧等发酵管中恒温培养箱36±1℃，培养18-24h（根据上表进行判定）,将可疑的沙门氏菌补做进一步的生化试验，如下表：
三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶培养基筛选
备注：K--产碱；A--产酸；＋--阳性反应，－—阴性反应，（－）少见反应，＋/－—阳性或阴性反应
三糖铁琼脂和尿素酶琼脂筛选
备注：K--产碱；A--产酸；＋--阳性反应，－—阴性反应，（－）少见反应，＋/－—阳性或阴性反应
A、靛基质反应
接种后在恒温培养箱36±1℃，培养18-24h，形成红色表明是阳性反应；B、尿素反应
接种后在恒温培养箱36±1℃，培养2-24h，发现颜色变红表明是阳性反应；
沙门氏菌生化实验鉴定结果
4.6 血清学实验
在干净的培养皿上，用灭菌好的接种环沾取两环AFO多价血清，取适量的菌种制成菌悬液，将玻片轻轻摇动30-60s,观察反应，如菌体彼此相凝集成明显或比较明显小颗粒状物，则认为菌体与AFO多价血清凝结，反之不凝结；
不凝结是认为检验样品中不含沙门氏菌，如果凝结，在洁净的波片上加一滴生理盐水，将待试培养物混合于生理盐水滴，使成为均一性的混浊悬菌液。
将玻片轻轻摇动30～60s。
观察反应，如菌体彼此相凝集成明显或比较明显小颗粒状物，即认为有自凝性，反之无自凝性。
有自凝性的菌株可排除；无自凝性的菌株，做以下实验：
1、O抗原检查：用认为无自凝力的纯菌落，用1滴O型血清（例如O4、O5、O16、O12等）代替生理盐水，对该菌株进行排查，如发生凝集，判为阳性，对照国标的附表判定是什么菌种。
2、H抗原检查：如果O抗原不能确定是何种菌株，按照表用上述同样的方法测试H抗原，如发生凝集，判为阳性，对照国标的附表判定是什么菌种。
3、Vi抗原检查：若以上还不能检定菌种，则取大量菌种和生理盐水制成浓的菌悬液在酒精灯上煮沸，然后按照上述方法做Vi 抗原实验，如发生凝集，判为阳性，对照国标的附表判定是什么菌种。
生化试验鉴定结果
5.结果报告
5.1报告阳性结果：“发现沙门氏菌”或“发现亚桑娜菌”或“发现沙门氏菌和亚利桑那菌”。
5.2报告阴性结果：“未发现沙门氏菌”或“未发现亚桑娜菌”或“未发现沙门
氏菌和亚利桑那菌”。