波长变换高效液相色谱法测定逍遥丸中6种活性成分
高效液相色谱波长切换法同时测定百效丸中6种主成分的含量
高效液相色谱波长切换法同时测定百效丸中6种主成分的含量张铭;马丽颖【摘要】目的建立高效液相色谱波长切换法同时测定百效丸中6种主成分(哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、巴豆苷、和厚朴酚、厚朴酚)含量的方法.方法采用Venusil MP C18(4.6 mm×250 mm,5.0μm)色谱柱;流动相A:乙腈-甲醇(1:4),流动相B:0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长210 nm(哈巴苷)、280 nm(安格洛苷C、哈巴俄苷)、294 nm(巴豆苷、和厚朴酚、厚朴酚).结果哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、巴豆苷、和厚朴酚、厚朴酚分别在3.98~79.60 mg·L-1、2.65~53.00 mg·L-1、2.45~49.00 mg·L-1、6.91~138.20 mg·L-1、5.29~105.80 mg·L-1、9.37~187.40 mg·L-1范围内线性关系良好;平均回收率96.90%~100.05%,RSD 值0.89%~1.59%;精密度和重复性良好;供试品溶液在室温条件下10 h内稳定.结论该方法操作简便,可用于百效丸中6种主成分的同时测定.%Objective To establish an HPLC wavelength switching method for simultaneous determination of six main components (harpagide,angorosideC,harpagoside,2-hydroxyadenosine,honokiol and magnolol ) in Baixiao Wan.Methods The Venusil MP C18 (4.6 mm ×250 mm,5 μm) chromatographic column was used ,the mobile phase was acetonitrile-methanol (1:4) (A) -0.2% phos-phoric acid solution (B) with gradient elution,and the detection wavelengths were 210 nm for harpagide,280 nm for angoroside C and harpagoside,and 294 nm for 2-hydroxyadenosine,honokiol and magnolol .Results The linear relationship of harpagide ,angoroside C, harpagoside,2-hydroxyadenosine,honokioland magnolol was good in the ranges of 3.98-79.60 mg· L-1 ,2.65-53.00 mg· L-1 ,2.45-49.00 mg· L-1 ,6.91-138.20 mg· L-1 ,5.29-105.80 mg· L-1 ,9.37-187.40 mg· L-1 ,respectively.The average recoveries were 96.90% ~100.05%,and the corresponding RSDs were 0.89% ~1.59%.The precision and repeatability were good .Test solution was stable at room temperature within 10 h.Conclusions The method is simple,and can be used for the simultaneous determination of six components in Baixiao Wan.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2018(022)006【总页数】4页(P1023-1026)【关键词】色谱法,高压液相;百效丸;哈巴苷;安格洛苷C;哈巴俄苷;巴豆苷;和厚朴酚;厚朴酚;波长切换法【作者】张铭;马丽颖【作者单位】辽宁中医药大学附属医院制剂中心,辽宁沈阳 110032;辽宁中医药大学附属医院制剂中心,辽宁沈阳 110032【正文语种】中文百效丸由玄参、巴豆霜、厚朴、川贝母、柴胡等12味中药材加工而成，为棕红色的大蜜丸，气香、味凉、微辛，具有消积理滞、镇惊化痰的功效，临床用于寒热凝结、停食宿水、腹疼腹胀、痰喘气促、慢惊风症等。
高效液相色谱法测定逍遥丸中甘草酸的含量
高效液相色谱法测定逍遥丸中甘草酸的含量张晓东;师永清;张新平;彭程【摘要】采用高效液相色谱法对逍遥丸中甘草酸的含量进行测定.色谱柱为Diamonsil TM C<,18>(4.6 mmx250mm),流动相为0.2mol·L<'-1>醋酸铵-冰醋酸-甲醇-乙腈(45:2:23:30),柱温22℃,流速为0.8 mL·min<'-1>,检测波长为254nm,进样量为15μL,外标峰面积法定量.甘草酸进样量在0.584μg～2.920μg范围内线形关系良好,保留时间为10.20 min,线性回归方程为Y=3.5657×10<'6>X+3.2246×10<'6>,r=0.9974,平均回收率100.43%.RSD=1.74%.【期刊名称】《西北民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(031)004【总页数】5页(P24-28)【关键词】高效液相色谱法;逍遥丸;甘草酸;含量测定【作者】张晓东;师永清;张新平;彭程【作者单位】中国石油西北化工销售公司,甘肃,兰州,730070;西北民族大学化工学院,甘肃,兰州,730030;中国石油西北化工销售公司,甘肃,兰州,730070;西北民族大学化工学院,甘肃,兰州,730030【正文语种】中文【中图分类】O652.63逍遥丸是以柴胡、当归、茯苓、薄荷、炙甘草、生姜等8味药为处方而制成,具有疏肝键脾,养血调经等疗效,用于肝气不畅所致月经不调、胸胁胀痛、头晕目眩、食欲减退.药理实验表明:甘草酸及甘草次酸具有肾上腺皮质激素,同时具有抗溃疡、抗炎等作用[1].用甘草酸作为定量指标,用于评价药材、成药的质量,制剂稳定性的优劣,制订药品质量标准等.中国药典2005版中采用HPLC法测定逍遥丸中芍药苷的含量,有关甘草酸含量的测定未作规定.文献报道复方制剂中甘草酸含量的测定方法很多,主要有薄层扫描法,高效毛细管电泳法,反相离子对色谱法,离子抑制色谱法等[2～7].HPLC法测定逍遥丸中甘草酸的含量未见报道.本文采用高效液相色谱法对该制剂中的甘草酸进行含量测定,操作简便,分离度好,相对误差小,为更好地控制本品的内在质量,确保其临床疗效稳定可靠提供了科学依据.1 仪器与药品1.1 仪器色谱仪:美国VARIAN210型高效液相色谱仪.色谱柱:不锈钢DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm),Prost ar 210溶剂传输泵,335二极管阵列检测器,star 6.0型工作站和6737-66N IA彩色显示器,SK8200LH型超声波清洗仪(500 W,40～59 kHz,上海科导超声仪器有限公司),AB204-S分析天平(上海精科天平).1.2 药品甲醇:色谱纯,天津市永大化学试剂开发中心提供.乙腈:色谱纯,天津市光复精细化工研究所提供.冰醋酸:分析纯,天津市红岩化学试剂厂提供.醋酸铵:分析纯,天津市标准科技有限公司提供.甲醇:分析纯,成都市联合化工试剂研究所提供.甘草酸对照品:中国药品生物制品检定所(批号:731-9202,约30 mg).逍遥丸样品:兰州佛慈制药股份有限公司(批号:200712、200718、200727).水为娃哈哈纯净水经蒸馏得.2 方法与结果2.1 色谱条件固定相:DiamonsilTM C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm).流动相:0.2 mol·L-1醋酸铵-冰醋酸-甲醇-乙腈(45∶2∶23∶30).检测波长:254 nm.进样量:15μL.流速:0.8 m L·min-1.柱温:22 ℃(室温).2.2 溶液的配制2.2.1 对照品溶液配制精密称取减压干燥至恒重的甘草酸单铵盐对照品(C42H61O16NH4)7.3 mg(相当于甘草酸C42 H62O16 7.2 mg)[9～10],置于5 mL容量瓶中,加甲醇(色谱纯)超声溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为1 460μg·mL-1储备液;精密吸取储备液1 mL至5 mL容量瓶中,加甲醇至刻度即为对照品溶液(每 m L对照品溶液中含甘草酸292μg).2.2.2 缓冲液的配制称取15.4 g醋酸铵于1 000 mL容量瓶中,加水至刻度使之溶解,取醋酸铵溶液958 m L与42 m L冰醋酸,混合均匀,即得0.2 mol·m L-1的醋酸铵-冰醋酸缓冲液,用孔径为0.45 μm的水系溶剂微孔过滤膜滤过,超声脱气30 min,备用.2.2.3 流动相的配制量取157 mL甲醇(色谱纯)和343 mL2.2.2项下制备的缓冲液混合,用孔径为0.45μm的水系溶剂微孔过滤膜滤过,超声脱气即为A相,B相为乙腈,A相∶B相(70∶30)为流动相.2.2.4 样品溶液的配制取样品约3.6 g精密称定,置研钵中研细,用80 m L甲醇定量转移至100 mL容量瓶中,超声提取30 min,冷却至室温,加甲醇至刻度,摇匀.精密量取上述溶液30 mL定量转移至100 m L容量瓶中,用流动相稀释至刻度,用孔径为0.45μm的微孔过滤膜滤过,超声脱气30 min,即得供试品溶液.2.3 紫外吸收波长的选择查阅相关文献报道甘草酸的检测波长有238、248、280 nm[4][7][10]不等,本文应用紫外分光光度计测定甘草酸对照品溶液的紫外吸收光谱,结果表明:甘草酸在253±2 nm处有最大吸收,故选择254 nm为检测波长.2.4 专属性试验分别精密吸取15μL的对照品溶液和样品溶液,在2.1、2.2.1项下进样分析,记录色谱图如图1,样品色谱图有一保留时间与对照品色谱图中甘草酸保留时间一致的特征峰,保留时间为10.20 min.由于条件限制,未制备阴性对照,为了证实此峰是否为甘草酸吸收峰,试验时在样品中加入适量的对照品,结果样品峰面积显著增大,从峰形上可以推断该特征峰为甘草酸的吸收峰.图1 色谱图2.5 标准曲线的绘制及线性范围考察取2.2.1项下的对照品溶液(浓度为292μg·mL-1),分别精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10μL 注入高效液相色谱仪中,记录色谱图,结果见表1,以峰面积 Y为纵坐标,以进样量(μg)为 X横坐标作图结果见图2,经线性回归得甘草酸回归方程为Y=3.5657×106 X+3.2246×106,r=0.9974,结果表明:甘草酸在0.584μg～2.920μg范围内线性良好.表1 甘草酸标准曲线X(μg) 0.584 1.168 1.752 2.336 2.920 Y 5 425 850 7 399 190 9 390 915 11 211 410 13 931 655图2 苷草酸标准曲线2.6 样品含量测定取逍遥丸样品约3.6 g,精密称定研细,用80 m L甲醇(AR)定量转移至100 m L容量瓶中,超声提取30 min,冷却至室温,用甲醇定容,混匀.精密量取上述溶液30.00 mL转移至100 mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,用孔径为0.45μm的滤微孔过滤膜滤过,超声脱气30 min,即得样品溶液.精密吸取上述溶液15μL,注入高效液相色谱仪中,记录色谱图,结果见表2.外标法计算每1 g逍遥丸样品中所含甘草酸(C42 H62O16)的量.表2 逍遥丸甘草酸的含量测定(n=3)样品批号平均峰面积含量(mg·g-1)RSD(%)200712 6 462 849 5.59 1.17 200718 6 381 751 5.45 0.97 200727 6 323 822 5.35 1.032.7 精密度试验分别精密吸取同一浓度的甘草酸对照溶液15μL,按上述色谱条件重复进样5次,记录色谱图,结果如表3,峰面积RSD=1.21%,结果表明:方法精密度良好.表3 精密度试验结果编号 1 2 3 4 5峰面积 5 563 894 5 602 135 5 596 210 5 740 125 5 615 006 RSD(%)1.212.8 稳定性试验分别精密吸取批号为200712的供试品溶液15μL,每隔2 h进样一次,共进样5次,记录色谱图,结果见表4,峰面积RSD=2.16%.表明供试品在8小时内基本稳定.表4 稳定性试验结果进样时间(h) 0 2 4 6 8峰面积 6 523 648 6 689 541 6 598 154 6 701 245 6 659 241 RSD(%) 2.162.9 重复性试验取同一批号(200712)样品共5份,分别精密称定,按2.2.4项下样品溶液的制备方法制备,按2.1项下色谱条件下分别进样分析,记录色谱图,外标法计算每份样品中甘草酸的含量分别为5.2 466 mg·g-1,5.504 5 mg·g-1,5.336 8 mg·g-1,5.486 9 mg·g-1,5.386 9 mg·g-1,结果见表 5,RSD=2.11%.表5 重复性试验结果进样份数峰面积称样量(g) 含量(mg·g-1) 平均含量(mg·g-1) RSD(%)1 6 267 287 3.613 8 5.246 6 2 6 266 970 3.444 5 5.504 5 3 6 266 938 3.552 7 5.336 8 5.392 3 2.11 4 6 266 928 3.455 5 5.486 9 5 6 266 884 3.519 6 5.386 92.10 回收率试验采用加样回收法[11],分别精密称取已知含量为5.244 mg·g-1的同一批号(200712)样品适量,共6份,分别精密加入一定量的甘草酸对照品,置研钵中研细,用20 mL甲醇(AR)定量转移至25 mL容量瓶中,超声提取30 min,取出冷却至室温,加甲醇至刻度,静置,取上清液,用孔径为0.45μm的微孔过滤膜滤过,取续滤液15μL分别进样分析,记录色谱图,结果见表6,以外标峰面积法计算含量,平均回收率为100.43%,RSD=1.74%.表6 甘草酸回收率测定结果(n=6)序号峰面积取样量(g)样品中甘草酸的量(mg)对照品加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)1 13 667 612 0.283 0 1.48 1.46 2.928 7 99.23 2 13 690 052 0.279 8 1.47 1.46 2.935 0 100.34 3 13 723 456 0.280 4 1.47 1.46 2.944 4 100.98 100.43 1.74 4 13 802 563 0.278 8 1.46 1.46 2.966 5 103.19 5 13 498 254 0.277 4 1.45 1.46 2.881 2 98.03 6 13 715 021 0.281 3 1.47 1.46 2.942 0 100.823 讨论3.1 流动相的选择逍遥丸为中药大复方制剂,药味复杂.实验中考察了多种流动相,如乙腈-水,乙腈-2%的醋酸铵-冰醋酸缓冲液,甲醇-醋酸铵-冰醋酸缓冲液,结果流动相乙腈比例大时保留时间短,峰型紧密;甲醇比例大时分离效果较好,但保留时间长,操作柱压高.结合两者,采用乙腈为有机相.同时因为提高流动相的酸性可以改善样品峰的峰形及分离度,又考虑pH值太低不利于色谱柱的保养,故加入0.2 mol·L-1醋酸铵-冰醋酸缓冲液.结果表明,本文流动相采用0.2 mol·mL-1醋酸铵-冰醋酸-甲醇-乙腈(452∶23∶30)可排除处方中其他成分的干扰,甘草酸峰形对称,与其他杂质峰达基线分离.3.2 分离条件的选择试验条件摸索中使用不同配比的流动相在10～15 min之间甘草酸均出峰,且分离效果都较好,考虑到分离时间短有利于样品的分析测定,故选择保留时间为10.20 min[12],此时流动相为0.2 mol·L-1醋酸铵 -冰醋酸 -甲醇 -乙腈(45∶2∶23∶30),流速为:0.8 mL·min-1.参考文献:[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005.564.[2]祖元刚,李海英,裴毅.高效毛细管电泳法测定甘草中甘草酸的含量[J].植物研究,2001,21(3):424-427.[3]陈建华,崔忠,崔波等.HPLC测定六一散中甘草酸单铵的含量[J].中成药,2000,22(9):621-622.[4]李军,石任兵,刘斌.RP-HPLC法测定四逆散抗抑郁有效部位中甘草酸的含量[J].北京中医药大学学报,2003,26(6):42-44.[5]吴容军,刘如石.薄层扫描法测定术苓口服液中甘草酸的含量[J].湖南中医学院学报,2000,20(4):37-38.[6]陈万里,史葱,任渝江.HPLC测定复方草玉梅含片中甘草酸的含量[J].药学实践杂志,2004,22(2):85-87.[7]丁桂兰,孙鹏远,温立义.HPLC测定生化汤丸中甘草酸的含量[J].药学实践杂志,2003,12(10):27-28.[8]马臻.甘草酸单胺盐定量测定对照品的制备[J].中国医药业,2001,(4):172.[9]陈德昌.中药化学对照品工作手册[M].北京:中国中医药出版,2002,67,203.[10]M.Jakkula,T.A.Boucher,U.Beyendorff,S.M.Conn,J.E.Johnson,C.J.Nolan,C.J. Peine and J.H.Albercht,A rch[J].Int,Med,2004,164:1341.[11]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005.附录:114-116.[12]y,C.C.Chen and S.T.Chiang,J.Food Drug Anal,2004,12:115.。
高效液相色谱法测定红花逍遥片中4种有效成分的含量
基金项目：中医药行业科技专项（No.201307009）。 作者简介：段奕倩，女，硕士，主要从事药物分析研究，Tel：13247704767，E-mail：375683001@ * 通讯作者：饶毅，男，博士， 教授，主要从事中药分析研究，Tel：13807041192，E-mail：raoyi99@
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F （403n m）
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图 1 混合对照品、供试品、阴性样品溶液等色谱图 Fig 1 HPLC chromatogram of mixed reference，samples and negative samples 1. 芍药内酯苷（albiflorin）；2. 芍药苷（paeoniflorin）；3. 甘草酸（glycyrrhizic acid）；4. 羟基红花黄色素（hydroxy safflower yellow A）
2.3 线性范围的考察 配制不同浓度的混合对照品溶液，浓度见表 1， 精密吸取混合对照品溶液 10 μL，在“2.2”项色谱条件 下分别进行测定。以浓度（mg·mL － 1）为横坐标，峰 面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程， 结果见表 2。 2.4 精密度考察 精密吸取供试品溶液（批号：1501003）10 μL，连 续进样 6 次，测得芍药苷、芍药内酯苷、羟基红花黄 色素 A、甘草酸的峰面积 RSD 分别为 0.22%、0.68%、
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Central South Pharmacy. April 2016, Vol. 14 No.4 中南药学 2016 年 4 月 第 14 卷 第 4 期
乙 腈 为 色 谱 纯， 水 为 重 蒸 馏 水， 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯； 芍 药 苷（批 号：110736-201438， 纯 度： 98%）、 羟 基 红 花 黄 色 素 A（批 号：111637-201308， 纯 度：98%）（中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院）； 甘 草 酸 （批 号：20140821， 纯 度：97%）、 芍 药 内 酯 苷（批 号：20140820， 纯 度：97%）（江 西 省 本 草 天 工 有 限 责 任 公 司）； 红 花 逍 遥 片 共 9 批（吉 春 制 药 厂， 批 号：1501003；江西普正药业有限公司，批号分别为： 150103、150110、150113、140204、141209、141005、 150307、141203）。 2 方法与结果 [6-13] 2.1 溶液的制备 2.1.1 对照品储备液 分别精密称取芍药苷、芍药内 酯苷、羟基红花黄色素 A、甘草酸对照品适量，分别 加甲醇制成各单一成分对照品储备液（芍药苷 0.1964 mg·mL － 1，芍药内酯苷 0.1825 mg·mL － 1，羟基红花 黄色素 A 0.1036 mg·mL － 1，甘草酸 0.2595 mg·mL － 1）。 2.1.2 混合对照品溶液 精密吸取“2.1.1”项下的对照 品储备液芍药苷 25 mL，芍药内酯苷 10 mL，羟基红 花黄色素 A 1 mL，甘草酸 10 mL，置同一 50 mL 量瓶
高效液相色谱法测定逍遥丸中甘草酸的含量
酸具 有 肾上腺皮 质激 素， 同时具有 抗 溃疡 、 炎 等 作用 Ｊ 用 甘 草酸 作 为定 量指 标 ，用 于评 价 药材 、 抗 ． 成
药的 质量 ， 制剂稳 定性 的优 劣， 制订 药品质 量标 准等 ． 国药 典 ２ ０ 中 ０ ５版 中采用 ＨＰ Ｃ法 测 定逍 遥丸 中 Ｌ 芍药 苷的含 量， 关甘草 酸含 量的 测定未 作规 定 ． 献报 道复 方制剂 中甘 草酸含 量 的测定 方法很 多， 有 文 主 要有 薄层扫 描法 ， 高效 毛细管 电泳 法， 反相 离子 对色 谱法 ， 离子 抑制色 谱法等 ［ ７ ． Ｌ ２ ］ＨＰ Ｃ法 测 定逍 遥丸 － 中甘 草酸 的含量 未 见报 道 ． 本文采 用高 效液 相色谱 法对 该制 剂 中的甘草 酸进行 含量 测定 ， 操作简 便， 分 离度 好， 对误差 小 ， 更好 地控制 本 品的 内在质量 ， 相 为 确保 其 临床疗效 稳定 可靠 提供 了科学 依据 ． １ 仪 器与 药品
醇： 分析 纯， 成都 市联 合化 工试剂 研 究 所提 供 ． 草酸 对 照 品 ： 甘 中国药 品 生物 制 品检 定 所 （ 号 ： ３ 批 ７ １—
９０ ， ３ ） 逍 遥丸样 品 ： 州佛 慈 制药 股 份 有 限公 司 （ ２ ２ 约 ０ｍｇ ． 兰 批号 ：０ ７２ ２０ １ 、０７７ ． 为 娃 哈 ２０ １ 、０７ ８２ ０２ ） 水
第 ３ 卷 总第 ８ １ ０期
２ ０ｌ０ 年 １２ 月
西 北 民 族 大 学 学 报（ 自然科 学版 ）
Ｖ ｏ ． ． ｏ． １３１ Ｎ ３
Ｊｕｎ ｌ ｆ ｏｔｗ ｓ Ｕ ｉ ｒｉ ｒＮ ｔ ｎｌ ｉ （ ｔ ｒｌ ｃｅ ｃ ） ｏｒ ａ ｏ ｒｈ ｅｔ ｎｖ ｓ ｙｆ ａｉ ａｉｅ Ｎａ ｕ ａ Ｓ ｉｎ ｅ Ｎ ｅ ｔ ｏ ｏ ｔｓ
高效液相色谱法测定丹栀逍遥丸中丹皮酚含量
０ ． １ ｍＬ ） ； 灵敏度 （ ） 均为 ０ ． ２ ５ Ｅ Ｕ ／ ｍ Ｌ ， 且经灵 敏度 复核均符 合 规定。 动态 比浊法 鲎 试剂 （ 湛 江安 度 斯 生物 有 限公 司 ， 批 号 为
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药 品检 验 与标 准 ， （ 电子 信 箱 ） ｄ ｚ ｚ ｇ ｒ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ。
（ Ｎ Ｃ ） 。 以平 均 反 应 时 间 的对 数 （ １ ｇ Ｔ ） 为纵 坐标 、 内毒 素 浓 度 （ Ｃ ） 为 横 坐标绘 制标 准 曲线 ， 回归 方程 为 ｌ ｇ Ｔ：一 ０ ． ２ ７ ６ ４ ３ ｌ ｇ Ｃ＋ ２ ． ８ ５ ５ ２ ４ ， ｒ ＝ 一０ ． ９ ９ ３ ８ （ 绝 对值 应 大 于 ０ ． ９ ８ ０ ） ， 平行管之间的 Ｒ Ｓ Ｄ均 小 于 １ ０ ％， 阴性 对 照 的反 应 时 间 大 于 标 准 曲线 最 低 浓 度 的反 应 时 间 ， 细 菌 内毒 素标 准 曲线 成 立 。 结果见表 ３ 。
法， 分别采用凝胶 法和动态浊度法进行干扰试验 ， 建 立 了 注 射 用 雷 贝拉 唑 钠 细 菌 内毒 素 检 查 法 。 现报道如下 。
１ 试 验 材 料
注 射 用 雷 贝拉 唑 钠 （ 规格为每支 ２ ０ ｍ ｇ ， 批 号为 ２ ０ １ １ １ １ ０ ５ ， 国
HPLC法测定理气逍遥丸中橙皮苷的含量
HPLC法测定理气逍遥丸中橙皮苷的含量
金礼
【期刊名称】《现代中药研究与实践》
【年(卷),期】2008(022)004
【摘要】目的建立HPLC测定理气逍遥丸橙皮苷的含量.方法色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×150mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(20:80),流速为1.0 mL·min-1,检测波长284 nm.结果橙皮苷进样量在0.392～1.176μg之间与积分值呈良好的线性关系,回归方程:Y=1.64×107 X+6.83×103(r=0.999 8),平均回收率为100.12%,RSD为0.87%.结论本法操作简便、准确,重现性好,可作为该制剂的质量控制方法.
【总页数】2页(P36-37)
【作者】金礼
【作者单位】江苏省徐州市药品检验所,江苏,徐州,221006
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.HPLC法测定理气解郁丸中橙皮苷的含量 [J], 施明;王业盈
2.HPLC同时测定通腑理气颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量 [J], 丁毅;弓晓东;谈瑄忠;毛春芹;陆兔林
3.HPLC测定理气健脾颗粒中橙皮苷的含量 [J], 李宝国;李军;张孝为
4.薄层扫描法测定理气护胃口服液中橙皮苷的含量 [J], 薛宝侠;都洪霞;孙四化
5.HPLC法测定法在不同产地药材陈皮中橙皮苷含量测量中的运用 [J], 蓝行因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
药学毕业论文逍遥散的化学成分和抗抑郁的效果研究综述
逍遥散的化学成分和抗抑郁的效果研究综述逍遥散在抗抑郁作用方面显示出良好的功效，对比西药逍遥散具有不良反应少、依从性较好，下面是搜集整理的一篇探究逍遥散的化学成分和抗抑郁效果的论文范文，欢迎阅读查看。
逍遥散来源于宋·《太平惠民和剂局方》，逍遥丸是逍遥散由煮散剂演变为丸剂而成，在逍遥丸的基础上加入丹皮、栀子则组成丹栀逍遥丸，也称之为加味逍遥丸，是疏肝解郁、养血健脾的常用方剂。
随着临床研究的深入，其应用范围不断扩大，广泛应用于精神科、神经科、心血管科及妇科等。
本文综述了近年来关于逍遥散的主要化学成分及其抗抑郁作用的研究进展，为其在临床中治疗抑郁症提供理论上的支持。
1、主要化学成分逍遥散是由柴胡、当归、白芍、白术、甘草、茯苓、煨姜和薄荷等8味药组成的复方，其主要化学成分分别为:柴胡的主要化学成分是柴胡皂苷、柴胡苷元及龙吉苷元，当归的主要化学成分是阿魏酸、中性油和酸性油等许多挥发性成分，白芍的主要化学成分是芍药苷，白术的主要化学成分为苍术醇、术酮等，甘草的主要化学成分是甘草苷和甘草酸，茯苓的化学成分主要是多糖类，煨姜的主要化学成分是姜黄素及生姜油，薄荷的主要化学成分是薄荷酮。
此外，加味逍遥散中丹皮、栀子的主要化学成分分别为丹皮酚和栀子苷。
2、抗抑郁作用及其抗抑郁机制研究抑郁症属于中医学“郁证”范畴，多由七情过极，如郁怒、思虑、悲哀、忧愁、恐惧过度导致脏腑阴阳气血失调、脑神不利而引起。
加味逍遥散中柴胡疏肝理气，当归、白芍养血柔肝，白术、茯苓健脾化湿，炙甘草益气补中、缓肝之急，牡丹皮泻血中伏火，栀子泻三焦之火。
2.1抗抑郁作用小鼠悬尾实验(tailsuspensiontest，TST)和强迫游泳实验(forceswimmingtest，FST)作为行为绝望抑郁模型，是经典的抗抑郁药筛选和评价模型。
张崇燕等研究表明，在FST和TST中，逍遥散能有效缩短小鼠的不动时间，提示有良好的抗抑郁作用。
Dai等采用代谢组学和行为学实验研究逍遥散对慢性应激模型大鼠的影响，结果中剂量的逍遥散与西药阿米替林抗抑郁效果一致，两者有许多相同的代谢产物。
HPLC法同时测定六味能消丸中8种成分的含量
HPLC法同时测定六味能消丸中8种成分的含量康慧;刘亚蓉【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2017(028)024【摘要】目的:建立同时测定六味能消丸中土木香内酯、异土木香内酯、没食子酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、大黄酚含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为DiamonsilC18,流动相为甲醇-乙腈-0.1％冰醋酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm(土木香内酯、异土木香内酯、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、大黄酚)、270 nm(没食子酸),柱温为25℃,进样量为10 μL.结果:土木香内酯、异土木香内酯、没食子酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚检测进样量线性范围分别为0.121～3.63μg(r=0.999 9)、0.122～3.66μg(r=0.999 9)、0.219～6.57 μg(r=0.999 9)、0.016 4～0.492 μg(r=0.999 7)、0.017 3～0.519 μg(r=0.999 9)、0.015 3～0.459 μg(r=0.999 9)、0.007 2～0.216 μg(r=0.999 9)、0.016 2～0.486μg(r=0.999 9);定量限分别为0.41、0.26、0.35、0.13、0.17、0.14、0.15、0.13 ng,检测限分别为0.12、0.08、0.11、0.04、0.05、0.04、0.05、0.04 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2.0％;加样回收率分别为98.05％～102.46％(RSD=1.75％,n=6)、98.55％～102.89％ (RSD=1.91％,n=6)、98.53％～102.34％(RSD=1.66％,n=6)、101.71％～103.41％(RSD=0.57％,n=6)、101.04％～103.01％ (RSD=0.69％,n=6)、101.63％～102.75％ (RSD=0.39％,n=6)、96.94％～101.11％ (RSD=1.61％,n=6)、98.06％～99.10％(RSD=0.40％,n=6).结论:该方法准确、简便,可用于六味能消丸中8种成分含量的同时测定.%OBJECTIVE:To establish the method for simultaneous determination of alantolactone,isoalantolactone,gallic acid,emodin,aloe-emodine,rhein,physcion and chrysophanol in Liuwei nengxiaopills.METHODS:HPLC method was adopted.The determination was performed on Diamonsil C18 with mobile phase consisted of methanol-acetonitrile-0.1％ glacial acetic acid (gradient elution) at the flow rate of1.0 mL/min.The detection wavelengths were set at 254 nm (alantolactone,isoalantolactone,emodin,aloe-emodine,rhein,physcion and chrysophanol),270 nm (gallic acid).The column temperature was 25 ℃,and sample size was 10 μ L.RESULTS:The linear ranges ofalantolactone,isoalantolactone,gallic acid,emodin,aloe-emodine,rhein,physcion,chrysosphanol were 0.121-3.63 μg(r=0.9999),0.122-3.66 μg(r=0.999 9),0.219-6.57 μg(r=0.999 9),0.016 4-0.492μg(r=0.999 7),0.017 3-0.519 μg(r=0.999 9),0.015 3-0.459 μg(r=0.9999),0.007 2-0.216 μg(r=0.999 9),0.016 2-0.486(r=0.999 9).The limits of quantification were 0.41,0.26,0.35,0.13,0.17,0.14,0.15,0.13 ng;limits of detection were 0.12,0.08,0.11,0.04,0.05,0.04,0.05,0.04 ng.RSDs of precision,stability and reproducibility tests were all lower than 2.0％.The recoveries were 98.05％-102.46％ (RSD=1.75 ％,n=6),98.55％-102.89％(RSD=1.91％,n=6),98.53 ％-102.34％ (RSD=1.66％,n=6),101.71％-103.41％(RSD =0.57 ％,n=6),101.04％-103.01％(RSD=0.69％,n=6),101.63％-102.75％(RSD=0.39 ％,n=6),96.94％-101.11％ (RSD=1.61％,n=6),98.06％-99.10％(RSD=0.40％,n=6).CONCLUSIONS:The method is accurate,simple andsuitable for simultaneous determination of 8 components in Liuwei nengxiao pills.【总页数】4页(P3433-3436)【作者】康慧;刘亚蓉【作者单位】青海省人民医院药房,西宁810008;青海省药品检验检测院,西宁810016【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC法同时测定六味地黄丸中4种活性成分的含量 [J], 王晓燕;黄霞;霍甜甜;李振国2.HPLC法测定六味地黄丸(浓缩丸)中丹皮酚的含量 [J], 贾瑞艳;刘影3.HPLC法测定六味地黄丸(浓缩丸)中熊果酸含量实验条件的探讨 [J], 邹宏;熊艺芬;吴铁荣;罗玲英4.HPLC法同时测定六味地黄丸中3种成分含量 [J], 段彬;魏玉辉5.HPLC法测定六味地黄丸及六味地黄胶囊中齐墩果酸、熊果酸的含量 [J], 丁晴;徐德然;王峥涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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波长变换高效液相色谱法测定逍遥丸中6种活性成分赵巍;汪正宇;武志昂【摘要】目的建立同时测定逍遥丸中6种成分(绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯)的高效液相色谱分析方法.方法色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱:0～10 min,5％A;10～25 min,5％A→15％A;20～70 min,15％A→60％A;波长:0～27.0 min为326 nm(绿原酸),27.0～30.5 min为230 nm(芍药苷),30.5～36.0 min为280 nm(甘草苷、阿魏酸),36.0～52.0 min为276 nm(甘草酸),52.0～70.0 min为350 nm(Z-藁本内酯);体积流量1.0 mL?min-1;柱温35℃;进样量10μL.结果绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯分离度良好,质量浓度分别在27.09～270.90,30.22～302.23,12.45～124.48,9.79～97.92,6.89～68.92,7.46～74.56μg?mL-1线性关系良好,均r>0.9990,平均加样回收率为97.9％～100.8％(RSD在0.55％～1.83％).6批样品中绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯分别在12.25～12.30,10.38～10.45,5.58～5.64,5.07～5.14,2.01～2.08,2.67～2.74 mg?g-1.结论本方法专属性好、灵敏度高、准确度高,为逍遥丸的质量控制提供依据.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2018(037)008【总页数】4页(P1000-1003)【关键词】逍遥丸;绿原酸;芍药苷;甘草苷;阿魏酸;甘草酸;Z-藁本内酯;色谱法,高效液相;含量测定【作者】赵巍;汪正宇;武志昂【作者单位】沈阳药科大学工商管理学院,沈阳 110016;北京市药品检验所北京市保健食品化妆品检验中心,北京100035;安徽省宿州市食品药品检验所,宿州234000;沈阳药科大学工商管理学院,沈阳 110016【正文语种】中文【中图分类】R286;R927.2逍遥丸(浓缩丸)来源于宋代汉医方剂学著作—《太平惠民和剂局方》，现收载在《中华人民共和国药典》2015年版一部[1]，临床用于治疗肝郁脾虚所致的脘闷不舒、胸胁胀痛、头晕目眩、食欲减退和月经不调等疾病，研究表明，该药还对抑郁征[2]、围绝经期综合征[3]、乳腺增生症[4]、免疫性不孕[5]、Ⅲ型慢性前列腺炎[6] 和慢性疲劳综合征[7]等疾病。
逍遥丸是由柴胡、当归、白芍、炒白术、茯苓、炙甘草和薄荷等七味药材制成的成方制剂，涉及药材种类多，所含成分复杂，比如药材当归中含有阿魏酸及Z-藁本内酯成分，白芍含有芍药苷及阿魏酸，白术含阿魏酸以及甘草含有甘草酸和甘草苷成分，当归、白术和茯苓均含有绿原酸；《中华人民共和国药典》2010年版仅对芍药苷做了定量质控要求，而成英等[8]采用高效液相色谱(HPLC)法测定逍遥丸中甘草苷、异甘草素和甘草酸的含量。
易润青等[9]采用毛细管电泳法测定逍遥丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量，苏兰宜等[10]对逍遥丸中芍药苷、阿魏酸和槲皮素的含量做了研究，白雁等[11]采用近红外光谱法快速测定逍遥丸中芍药苷的含量。
张庆等[12] 采用HPLC法测定加味逍遥丸中芍药苷的含量。
李珂等[13]利用高效液相色谱法测定加味逍遥丸中丹皮酚的含量。
上述研究虽对逍遥丸中一部分成分做了深入研究，然而同时测定6种成分方面的研究笔者还未见报道。
笔者在本研究中建立HPLC波长转换法同时测定逍遥丸中绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸、Z-藁本内酯等6种活性成分的方法，方法简单、快捷，重复性好，能为系统地评价和控制逍遥丸的质量提供参考依据。
1 仪器与试药1.1 仪器 Waters 2695-2996型高效液相色谱仪(美国沃特世公司)；BS124S型电子天平(德国赛多利斯公司，感量：0.01 mg)；DL-360A型超声波清洗器(上海之信仪器有限公司，功率：240 W)，BGZ-700型鼓风干燥箱(上海博迅医疗生物仪器股份有限公司)，Arium611UV型实验室超纯水系统(德国赛多利斯公司)。
1.2 试药芍药苷对照品(批号：110736-201640，纯度：95.2%)、阿魏酸对照品(批号：110773-201313，纯度：99.6%)、甘草苷对照品(批号：111610-201607，纯度：93.1%)、绿原酸对照品(批号：110753- 201415，纯度：96.2%)、甘草酸对照品(批号：110731-201619，纯度：93.0%)均购于中国食品药品检定研究院，Z-藁本内酯对照品(批号：110825，纯度：>98%)购自上海融禾医药科技有限公司。
逍遥丸，芜湖张恒春药业有限公司，批号分别为1510261，1603251，1603261，1604221，1605221，1606121。
甲醇、乙腈为色谱纯(美国默克公司)，水为超纯水，其他试剂为分析纯。
2 方法与结果2.1 溶液的制备2.1.1 混合对照品溶液的制备精密称取绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸、Z-藁本内酯对照品各适量，置50 mL量瓶中，加甲醇20 mL，超声处理30 min使溶解完全，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。
精密量取对照品贮备液5 mL置100 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制成浓度分别为绿原酸270.90 μg·mL-1、芍药苷302.23 μg·mL-1、甘草苷124.48 μg·mL-1、阿魏酸97.92μg·mL-1、甘草酸68.92 μg·mL-1和Z-藁本内酯74.56 μg·mL-1的混合对照品溶液，摇匀，滤过，即得。
2.1.2 供试品溶液的制备取本品若干，研细，精密称取细粉1.0 g，置200 mL干燥具塞锥形瓶中，精密量入甲醇100 mL，密塞，精密称定，超声处理(功率240 W)30 min，放冷，再精密称定，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.1.3 阴性样品溶液的制备按“2.1.2”项工艺方法制备缺少当归、白芍、炙甘草、白术和茯苓的阴性样品，按“2.1.2”项方法制备阴性样品溶液。
2.2 色谱条件色谱柱为Kromasil C18 柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)系统，梯度洗脱：0～10 min，5%A；10～25 min，5%A→15% A；10～70 min，15%A→60%A；测定波长：0～27.0 min为326 nm(绿原酸)，27.0～30.5 min 为230 nm(芍药苷)，30.5～36.0 min为280nm(甘草苷、阿魏酸)，36.0～52.0 min为276 nm(甘草酸)，52.0～70.0 min为350 nm(Z-藁本内酯)；流速为1.0 mL·min-1；柱温：35 ℃，进样量为：10 μL。
2.3 系统适用性实验分别取阴性样品溶液、混合对照品溶液和供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件测定，记录色谱图，考察方法系统适用性。
结果各峰分离均大于1.5，对称性好，且阴性样品对各目标峰无干扰，各峰理论板数均大于4 500，该方法适用性好。
见图1。
2.4 方法学考察2.4.1 线性关系考察分别取混合对照品溶液1，3，5，7，8，10 mL，置同一个10 mL量瓶中，加甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，得一系列混合对照品溶液，按“2.2”项色谱条件进行分析，记录色谱图。
以各成分的浓度(μg·mL-1)为横坐标(X)，以峰面积为纵坐标(Y)，绘制各成分标准曲线，并进行线性回归。
结果6种成分的回归方程分别为绿原酸：Y=122.84X+3.45，r=0.999 0，线性范围27.09～270.90 μg·mL-1；芍药苷：Y=67.89X-16.81，r=0.999 5，线性范围30.22～302.23 μg·mL-1；甘草苷：Y=264.65X-1.40，r=0.999 5，线性范围12.45～124.48 μg·mL-1；阿魏酸：Y=324.88X+32.09，r=0.999 2，线性范围9.79～97.92 μg·mL-1；甘草酸：Y=208.45X+34.43，r=0.999 4，线性范围6.89～68.92 μg·mL-1；Z-藁本内酯：Y=120.08X+50.06，r=0.999 2，线性范围7.46～74.56 μg·mL-1。
结果表明在线性范围内各组分进样量与响应值间呈良好的线性关系。
A.阴性样品；B.混合对照品；C.供试品；1.绿原酸；2.芍药苷；3.甘草苷；4.阿魏酸；5.甘草酸；6.Z-藁本内酯图1 3种溶液的HPLC图A.negative sample；B.mixed reference substances；C.sample；1.chlorogenic acid；2.paeoniflori；3.liquiritin；4.ferulic acid；5.glycyrrhizic acid；6.ligustilideFig.1 HPLC of three kinds of solution2.4.2 精密度实验取同一批(批号：1606121)供试品溶液，在“2.2”项色谱条件下连续进样6次，记录色谱图，计算各组分峰面积RSD值。
结果绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯峰面积的RSD 值分别为0.15%，0.47%，0.44%，0.48%，0.13%和0.75%，表明仪器精密度良好。
2.4.3 重复性实验取同一批(批号：1606121)供试品，按“2.1.2”项下制备方法，平行制备6 份，在“2.2”项色谱条件下检测，记录色谱图，按标准曲线法计算各组分含量。
结果绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯的平均含量分别为：12.33，10.32，5.43，5.10，2.04和2.72 mg·g-1，RSD分别为0.78%，0.84%，1.38%，0.78%，1.14%和1.29%，表明方法重复性良好。
2.4.4 稳定性实验取同一批(批号：1606121)供试品溶液，在“2.2”项色谱条件下，于0，3，6，9，12 h测定，记录色谱图，计算各组分峰面积RSD。
结果绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯峰面积的RSD 值分别为1.45%，1.00%，0.23%，0.99%，0.56%和1.27%，表明供试品溶液在12 h内稳定。