Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护课件
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Waters_2695_型高效液相色谱仪操作方法
Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法1 仪器组成及开机1.1 仪器组成本仪器由Waters 2695 分离单元、2996型二极管阵列检测器、2420蒸发光散射检测器、色谱管理工作站和打印机组成。
2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机（或氦气脱气机），可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。
1.2 开机依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约1min 后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“Idle ”时，仪器进入待命状态。
2 溶剂管理系统的准备2.1 流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂，按【Menu/Status 】，进入“Status （1 ）”屏幕，光标选“Degasser ”，按【Enter 】，显示选项屏幕，光标下移选“Continuous ”，按【Enter 】。
2.2 启动溶剂管理系统2.2.1 干启动，当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status （1 ）”屏幕下，按【Direct Function 】，光标选“Dry Prime ”，按【Enter 】，显示“Dry Prime ”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如【OpenA 】，光标选“Duration ”，按数字键输入5min ，按【Continue 】，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2 湿启动在“Status （1 ）”屏幕下，光标选“Compomtion ”中欲使用的流动相，输入10 0％，按【Direct Function 】，光标选“Wet Prime ”，按【Enter 】，显示“Wet Prime ”屏幕，输入7.5Ml/min 和6min ，按【OK 】，待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。
waters日常维护及操作
避免用含卤素离子的缓冲液（如：碘化锂、氯化 钾等） 选用适宜的容器 —玻璃容器必须使用超纯水清洗
保存于聚乙烯瓶中的超纯水
测试条件 水样: 40ml trace enrichment @ 2.0 ml/min 色谱柱: C18 反相柱 (Waters) 梯度: 线性 100% 水－ 100% 乙腈 波长: 254 nm
色谱柱安装及连接的机械因素
连接适当
连接不妥，造成漏液
连接不妥
谱带展宽
色谱泵
色谱泵运行
注意∶
排气后，先设流速为 0 恢复排气时断开的部分，如∶进样器、色谱柱 根据色谱柱的不同，逐渐提高流速到设定值
色谱泵在停用时,应先用水洗去缓冲盐,然后用纯 甲醇充满泵头及管路,并保存在纯甲醇中
色谱泵
— 用纯甲醇过渡，浸润泵头及管路，备用
紫外检测器
保持清洁，每天用后与色谱柱一起清洗；
使用脱过气的流动相，防止气泡滞留池内； 检测器灯有一定寿命，超过4小时不用时可以不开灯； 尽量避免使用pH>9.5的流动相，以防腐蚀流通池石英 窗，避免使用可能析晶的流动相，防止流通池堵塞。
HPLC常见故障分析
干灌注和湿灌注
按主机上的“Menu/Status” 键，进入Status界面。检查真 空脱气机degasser的模式mode 是否为on。（一般为on）
当溶剂的管子是空的时候，或 不小心走干溶剂的时候执行干 灌注 (Dry Prime) 当需要排除气泡时，或平时更 换流动相时执行湿灌注 (Wet Prime) 。
供电电源的影响
泵不良 – 检修泵
HPLC流路基线噪音问题分析
基线有无规律的尖峰
气泡 - 溶剂脱气 电路接触不良 - 保证清洁, 接线牢固, 接点无氧化 光源灯不良- 检查处理 电噪声 - 去除噪声源
保存于聚乙烯瓶中的超纯水
测试条件 水样: 40ml trace enrichment @ 2.0 ml/min 色谱柱: C18 反相柱 (Waters) 梯度: 线性 100% 水－ 100% 乙腈 波长: 254 nm
色谱柱安装及连接的机械因素
连接适当
连接不妥，造成漏液
连接不妥
谱带展宽
色谱泵
色谱泵运行
注意∶
排气后，先设流速为 0 恢复排气时断开的部分，如∶进样器、色谱柱 根据色谱柱的不同，逐渐提高流速到设定值
色谱泵在停用时,应先用水洗去缓冲盐,然后用纯 甲醇充满泵头及管路,并保存在纯甲醇中
色谱泵
— 用纯甲醇过渡，浸润泵头及管路，备用
紫外检测器
保持清洁，每天用后与色谱柱一起清洗；
使用脱过气的流动相，防止气泡滞留池内； 检测器灯有一定寿命，超过4小时不用时可以不开灯； 尽量避免使用pH>9.5的流动相，以防腐蚀流通池石英 窗，避免使用可能析晶的流动相，防止流通池堵塞。
HPLC常见故障分析
干灌注和湿灌注
按主机上的“Menu/Status” 键，进入Status界面。检查真 空脱气机degasser的模式mode 是否为on。（一般为on）
当溶剂的管子是空的时候，或 不小心走干溶剂的时候执行干 灌注 (Dry Prime) 当需要排除气泡时，或平时更 换流动相时执行湿灌注 (Wet Prime) 。
供电电源的影响
泵不良 – 检修泵
HPLC流路基线噪音问题分析
基线有无规律的尖峰
气泡 - 溶剂脱气 电路接触不良 - 保证清洁, 接线牢固, 接点无氧化 光源灯不良- 检查处理 电噪声 - 去除噪声源
Waters 2695 PPT
– 每周清洗各个溶剂瓶，要用刷子刷洗瓶壁和瓶底，再用甲醇：水=1:1超声 30min。可有效避免溶剂滤头和在线过滤器堵塞，以及某些基线问题。
©2012 Waters Corporation
20
2695日常维护与保养每周用纯有机相灌注四个管路10in。可有效避免管路长菌污染。
每当使用缓冲盐溶液后，必须用纯水0.5至1.0mL/min冲洗系统和柱子四 小时以上或过夜。
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23
问题
1.00 1 mL/ min
0.80 0.60
AU
0.40
Vo
0.20 0.00
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Minutes
©2012 Waters Corporation
24
2695常见问题与报错（1）
Lost prime
高亮度紫外灯----是普通紫外灯的两倍。 高亮度紫外灯----是普通紫外灯的两倍。
更低噪音，更高灵敏度。
更低噪音，更高灵敏度。
基本噪音----小于等于5uAU
基本噪音----小于等于10uAU
更高采样速率---1,2,5,10,20,40,80Hz
更高采样速率---1,2,5,10,20,40,80Hz
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19
2695日常维护与保养
3. 每日检查洗针溶液
– 洗针溶液是否够用，及时添加。入口管是否脱离液面。 – 洗针溶液是否正常出液，及时灌注。必要时用洗耳球吸。
4. 每日检查进样针筒
– 是否有气泡。导致重现性降低。及时purge injector。
5. 其它注意事项
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2695日常维护与保养每周用纯有机相灌注四个管路10in。可有效避免管路长菌污染。
每当使用缓冲盐溶液后，必须用纯水0.5至1.0mL/min冲洗系统和柱子四 小时以上或过夜。
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问题
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2695常见问题与报错（1）
Lost prime
高亮度紫外灯----是普通紫外灯的两倍。 高亮度紫外灯----是普通紫外灯的两倍。
更低噪音，更高灵敏度。
更低噪音，更高灵敏度。
基本噪音----小于等于5uAU
基本噪音----小于等于10uAU
更高采样速率---1,2,5,10,20,40,80Hz
更高采样速率---1,2,5,10,20,40,80Hz
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2695日常维护与保养
3. 每日检查洗针溶液
– 洗针溶液是否够用，及时添加。入口管是否脱离液面。 – 洗针溶液是否正常出液，及时灌注。必要时用洗耳球吸。
4. 每日检查进样针筒
– 是否有气泡。导致重现性降低。及时purge injector。
5. 其它注意事项
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Waters高效液相色谱仪使用及维护
• 待系统平衡后，单击“中断” 监视基线。
，终止
单进样
• 待系统平衡好，在此页面输入进样信息，
点击
进样
序列进样
确认样品组名称正确，其他选项保持默认值，点击运行
• 跳出该窗口，点击确定，进行修改序列。
• 修改完毕点击
继续运行样品组。
•
图谱处理
•
图谱打印
图谱处理
• 选择所要处理的项目名称，点击确定
• 30%磷酸溶液，超声30分钟
一、每周一次，仪器面板操作。
• Purge Injector：面板操作: 打开状态 (Statas)画面→ →按右下角Direct Function功能键→ →选Purge Injector命令 → →选OK即可进行注射器的排气。
• Seal Wash：面板操作: 打开状态(Statas) 画面→ 按下面板上Menu/ Statas 键→按右 下角Diiag功能键→ →选Prime Seal Wash 命令→ →选Start即可，默认运行10分钟。
出现如下窗口
• （2.）编辑仪器方法 • （3.）保存方法：
• （4.）关闭“仪器方法编辑器”窗口
• 6.创建方法组：①选中所要的仪器方法，单 击“下一步” ②出现如下窗口选择处理方法、
报告方法以及导出方法，单击“下一步”
• ③命名
方法调用及平衡基线
•在
选择仪器方法，并点击
“监视器”，平衡系统监视基线
创建项目
• 在此对话框下需要确定项目根目录下还是项目层次结构的 一部分（作为父项目的一个子项目）。这种层次结构允许 将多个项目组织在一个公用项目结构中。
• 注：要将项目创建为新的顶级项目（父项目），单击“项 目”文件夹；要将项目创建为现有项目的子项目，单击现 有父项目的文件夹。
2024版waters2695操作规程
contents •仪器概述与基本结构•安装与调试•操作界面与软件功能•样品前处理与进样技巧•色谱柱选择与使用注意事项•仪器维护与故障排除•实验操作规范与安全注意事项目录Waters 2695仪器简介Waters 2695是一款高效液相色谱仪（HPLC），广泛应用于化学、生物、医药等领域的分离和分析。
该仪器具有高度的自动化和智能化特点，可实现样品的自动进样、分离和检测。
Waters 2695采用了先进的液相色谱技术，具有高分辨率、高灵敏度和高通量等优点。
数据处理系统对检测信号进行采集、处理和分析，输出色谱图和结果报告。
检测分离后的样品组分，常用的检测器有紫外可见检测器（色谱柱实现样品的分离，根据分析需求选择不同的色谱柱。
输液泵提供稳定的流动相流速，确保进样器实现自动进样，提高分析效率。
主要部件及功能进样器进样量范围输液泵流速范围色谱柱规格数据处理系统分辨率检测器波长范围技术参数与性能指标安装前准备工作仪器安装步骤按照安装手册要求，组装仪器各部件。
连接电源线和信号线，确保接线正确、牢固。
安装配套软件和驱动程序，配置仪器参数。
系统调试与初始化010203操作界面介绍01020304主界面方法设置界面数据处理界面系统控制界面方法开发与管理数据采集与处理报告生成与导出系统控制与诊断软件功能概述数据处理与分析方法峰检测与识别峰积分与定量数据校正与标准化多组分分析样品清洁度适当的溶剂样品浓度030201样品前处理要求进样针使用注意事项选择合适的进样针01清洗进样针02正确的进样方式03定期对waters2695进行校准，确保仪器的准确性和稳定性。
定期校准仪器使用标准品进行验证注意环境温度和湿度规范操作在分析过程中，使用标准品进行验证，以检查分析方法的准确性和可靠性。
保持实验室内的温度和湿度稳定，避免环境因素对分析结果的影响。
严格遵守waters2695的操作规程，避免人为因素导致的误差。
提高进样准确性和重复性色谱柱类型及特点反相色谱柱适用于非极性至中等极性的化合物分离，常用C18、C8等填料。
Waters2695使用维护
• 检查设备电源、电路、信号连接是否完好。 • 连接好需要的色谱柱。 • 流动相：根据待检样品的检测方法配制相应的流动相，必须用 0.45um微孔滤膜抽真空过滤。使用色谱纯的溶剂。水和缓冲液都 需要用超纯水；盛放溶剂和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水 清洗。
基本操作
• 开机 单机版：先打开电脑，依次接通2695分离单元，检测器和打印机电源 企业版：先打开服务器，服务器开启成功后打开LACE，LACE开启后依 次打开客户端，接通2695分离单元/Waters600型泵，检测器和打印机 电源。 注：待机后系统进行自检，在此期间，不应进行任何操作，否则易造 成仪器自检失败
系统前处理
• 脱气（Degassger）:按面板右下 方“Menu/Status”键进入“Status （1）”界面，移动光标至 “Degassger→Mode”,按Enter选 择“On”,打开在线脱气。 • 灌注柱塞密封清洗泵（Prime Seal Wash）:在主屏幕下，按： “Diag ”，显示“Diagnosties”屏幕， 按“Prime Seal Wash”屏幕，按 “Start ”直接清洗溶剂流出泵杆 密封圈冲洗废液管，依次按 “Halt→Close”。
建立项目、编辑仪器方法和方法组
• 新建方法组：在“New Method Set”界面内选择所需的方法名称， 点击“Next”，在“Method Name”中输入方法组名称（与方法名称 一致），点击“Finish”完成方法组建立
进样及数据采集
• 在运行界面对样品序列行进编辑，信息包括样品瓶位置、名称、 进样量、进样次数、运行时间、运行方法等。 • 在Empower界面中打开需要运行的项目，点击“OK”进入，点击 “Run Sample”后，选择需要系统点击“OK”进入到运行界面，点击 “Monitor”平衡系统，观察基线，贷系统平衡后，点击“Abort”开关， 终止观察基线。 • 点击绿色“Run”开关运行样品。 注意：运行样品前核对好序列中样品信息。
基本操作
• 开机 单机版：先打开电脑，依次接通2695分离单元，检测器和打印机电源 企业版：先打开服务器，服务器开启成功后打开LACE，LACE开启后依 次打开客户端，接通2695分离单元/Waters600型泵，检测器和打印机 电源。 注：待机后系统进行自检，在此期间，不应进行任何操作，否则易造 成仪器自检失败
系统前处理
• 脱气（Degassger）:按面板右下 方“Menu/Status”键进入“Status （1）”界面，移动光标至 “Degassger→Mode”,按Enter选 择“On”,打开在线脱气。 • 灌注柱塞密封清洗泵（Prime Seal Wash）:在主屏幕下，按： “Diag ”，显示“Diagnosties”屏幕， 按“Prime Seal Wash”屏幕，按 “Start ”直接清洗溶剂流出泵杆 密封圈冲洗废液管，依次按 “Halt→Close”。
建立项目、编辑仪器方法和方法组
• 新建方法组：在“New Method Set”界面内选择所需的方法名称， 点击“Next”，在“Method Name”中输入方法组名称（与方法名称 一致），点击“Finish”完成方法组建立
进样及数据采集
• 在运行界面对样品序列行进编辑，信息包括样品瓶位置、名称、 进样量、进样次数、运行时间、运行方法等。 • 在Empower界面中打开需要运行的项目，点击“OK”进入，点击 “Run Sample”后，选择需要系统点击“OK”进入到运行界面，点击 “Monitor”平衡系统，观察基线，贷系统平衡后，点击“Abort”开关， 终止观察基线。 • 点击绿色“Run”开关运行样品。 注意：运行样品前核对好序列中样品信息。
Waters 2695 PPT
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问题
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2695常见问题与报错（1）
Lost prime
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2695常见问题与报错
检测器能量低 - 更换光源灯，反光镜，透镜；
温湿度的影响。尤其是五月至九月份。尽量控制实验室温度和湿度。若实 在难以控制，建议用氮气吹扫检测器光学台。注意不要把仪器置于空调风 口下；
电源问题，注意良好的接地；
定期清除仪器内部积灰，尤其是仪器的进风口和出风口。
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2695 样品管理器主要部件
进样针筒驱动马达
进样盘驱动马达
压力传感器
进样器
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洗针泵 柱温箱PCB V2 V3 V4 V1
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2695日常维护与保养
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2695日常维护与保养
1. 每日检查溶剂滤头。
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溶剂管理系统 – 示意图
二级泵
单向阀
初级泵
排空阀
柱塞杆清洗泵
单向阀
压力传感器
下上
= =
二初级级泵泵
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Alliance 脱气系统
©2012 WBiblioteka ters Corporation注意：标配脱气包不能使用在正相流动相中， GPC脱气包：PN 700005508
Waters e2695高效液相色谱仪维护操作培训
奥锐特 QC
实验室
正确的实验步骤
• 选择适当的洗针溶剂（绿管溶剂）和Seal Wash溶剂 • 清洗进样针（Needle Wash） • 清洗柱塞杆密封（Seal Wash） • 平衡系统 • Purge 进样器 • 实验操作 • 清洗系统 • Purge 进样器 • 清洗进样针（Needle Wash） • 清洗柱塞杆密封（Seal Wash）
shift—1—shift—1
检 查 检 测 器 灯 的 能 量 ( 检查检测器灯的使用时 手动关检测器灯
灯的亮度)
间
单/双波长， 自动调零
方法调用， A/B通道切换
设置及诊断
运行/停止 键 选项移动键
分屏显示键
监视色谱图 第二功能键
屏幕对比度 回车键
溶剂过
滤头堵
不锈钢滤头应先用纯化水超声 清洗。若不行，则可用100%的 异丙醇超声波清洗20分钟，之 后再用纯化水超声清洗。
注射器中出现的气 泡会导致系统抽取 的样品量不准确， 进而影响峰面积的 重现性。
进样前检查注射器 内流动相是否存在 气泡。
Inject Samples
样品进样
➢操作步骤： 选择Inject Samples（样品进样）选项，Enter，出现 Inject Samples （样品进样）对话框，如上图： Vial Range： 样品瓶位置 Injects per vial： 进样次数（5~10次） Run time： 运行时间（一般0.5min） Inject volume： 进样量（设置要比检测时的进样量 大，一般为40μl或80μl）
安装在线过滤器滤 芯时需注意滤芯方 向，且需放平后再 上紧。
灌注流动相时压力变高
Inline filter（在线过滤器） Parts No. WAT088084
实验室
正确的实验步骤
• 选择适当的洗针溶剂（绿管溶剂）和Seal Wash溶剂 • 清洗进样针（Needle Wash） • 清洗柱塞杆密封（Seal Wash） • 平衡系统 • Purge 进样器 • 实验操作 • 清洗系统 • Purge 进样器 • 清洗进样针（Needle Wash） • 清洗柱塞杆密封（Seal Wash）
shift—1—shift—1
检 查 检 测 器 灯 的 能 量 ( 检查检测器灯的使用时 手动关检测器灯
灯的亮度)
间
单/双波长， 自动调零
方法调用， A/B通道切换
设置及诊断
运行/停止 键 选项移动键
分屏显示键
监视色谱图 第二功能键
屏幕对比度 回车键
溶剂过
滤头堵
不锈钢滤头应先用纯化水超声 清洗。若不行，则可用100%的 异丙醇超声波清洗20分钟，之 后再用纯化水超声清洗。
注射器中出现的气 泡会导致系统抽取 的样品量不准确， 进而影响峰面积的 重现性。
进样前检查注射器 内流动相是否存在 气泡。
Inject Samples
样品进样
➢操作步骤： 选择Inject Samples（样品进样）选项，Enter，出现 Inject Samples （样品进样）对话框，如上图： Vial Range： 样品瓶位置 Injects per vial： 进样次数（5~10次） Run time： 运行时间（一般0.5min） Inject volume： 进样量（设置要比检测时的进样量 大，一般为40μl或80μl）
安装在线过滤器滤 芯时需注意滤芯方 向，且需放平后再 上紧。
灌注流动相时压力变高
Inline filter（在线过滤器） Parts No. WAT088084
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Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
干灌注（Dry prime）：系统第一次运行或系统中无溶液 时进行。
1 将溶剂管路插入到相应的容器。 2 轻轻摇动滤头，以除去可能存在的气泡。 3 将注射器连到灌注/排放阀。如图所示。 4 逆时针旋转阀1/2圈，将其打开。 5 按Status屏幕中的Direct Function键，选择
仪器日常操作
灌注柱塞密封清洗泵(Prime Seal Wash)
当首次使用或整个管路都已干燥时
1.回到Menu 画面，选择Diag。 2. 将注射器适配器连接到注射器。 3. 移除密封清洗入口管路上的滤头。 4. 将注射器装满清洗液，然后将注射器适配器连到密封清洗管路末端。 5. 按Prime Seal Wash ，再按Start 。 6. 推进注射器使清洗液进入系统。 7. 当有溶剂从密封清洗废液管中流出时，按Halt。 8. 重新安装滤头。 9. 按Close返回。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作 开机
依次打开LAC/E采集服务器、2695分离单元、所需检测器以 及计算机的电源。仪器进行5分钟自检后，出现以下画面。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
• 溶剂输送系统(串联泵) • 进样系统 • 柱温箱 • 检测器
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
基本构造
溶剂瓶
控制面板
样品盘 串联泵
WWaatteerrs sAlliaen2ce6296595示HP意LC图操作及维护
进样器 在线脱气机
基本构造
溶剂输送系统
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作 打开真空脱气机（Degasser）
1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面。 2. 利用方向键 将光标移至“Degasser”位置，按Enter。 3. 利用上下键选择模式为ON，如下图所示。
注意事项：在开启真空脱气机时，要确认所有溶剂管路都充满溶 剂；若没有溶剂时请执行溶剂的Dry Prime 操作。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
Rev. 08112005
2011年9月
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
主要内容
基本构造 仪器日常操作 仪器常见故障及维护保养
Waters Alliance 2695 Hห้องสมุดไป่ตู้LC 操作及维护
基本构造
基本构造
注意事项：当更换溶液时，只需执行步骤1，5，7和9。 Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作 灌注针头清洗泵 (Prime Needle Wash)
注意事项：1 溶剂的选择：根据样品及流动相的化学特性来作选择。 2 若为浓度较高的样品需要较强的溶剂来清洗。 3 若样品对pH较敏感，应考虑洗针液的pH。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作 冲洗自动进样器（Purge Injector）
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
执行湿灌注 1 在“status”屏幕的
“Composition”字段中，为要用 于湿灌注的溶剂输入“100%”。 2 按“Direct Function”键，选择 “Wet Prime”，出现湿灌注对话 框。 3 按“OK”，执行湿灌注。 4 可根据实际情况重复灌注。
Dry Prime，然后按Enter。 6 在上述对话框中，选择要灌注的溶剂管路
对应的屏幕键。如图所示。 7 抽回注射器活塞以将溶剂抽出管路。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
湿灌注（Wet prime）：更换流动相；排除气泡；仪器闲置了一段时间。
注意事项： 为避免损坏柱塞密封，仅在流路中存在溶剂时执行湿灌注。 若更换流动相与之前流动相不互溶，采用中间溶液过渡。 以最低粘度的溶液开始湿灌注，以帮助清除管路中的空气。
基本构造
样品管理系统中的流路
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
基本构造
柱温箱
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
基本构造
检测器
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
日常操作
• 开机 • 操作前准备 • 灌注柱塞密封泵(Prime Seal Wash) • 灌注针头清洗泵 (Prime Needle Wash) • 打开真空脱气机 • 干灌注(Dry Prime) • 湿灌注(Wet Prime) • 冲洗进样器 (Purge Injector)
基本构造
样品管理系统
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
基本构造
• 样品管理系统可存放和定位样品 瓶并将样品注入溶剂流。样品管 理系统有 5 个样品转盘。
• 每个样品转盘中最多可容纳 24 个样品瓶，共计可容纳 120 个样 品瓶。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
基本构造
2695溶剂输送系统（串联泵）示意图
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
基本构造
Prime/Vent Valve
Inlet Checkvalve
Inlet Checkvalve
D
A
Front
C
B
溶剂管理系统中的流路
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
操作前准备
• 用色谱纯有机溶剂配制流动相，所有溶液应经0.45μm滤膜 过滤，脱气应充分。
• 必须确保6根管子全部插到溶剂瓶的底部。 • 准备合适的灌注柱塞密封清洗泵（Seal Wash）液体。 • 准备合适的灌注针头清洗泵（Needle Wash）液体。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作
干灌注（Dry prime）：系统第一次运行或系统中无溶液 时进行。
1 将溶剂管路插入到相应的容器。 2 轻轻摇动滤头，以除去可能存在的气泡。 3 将注射器连到灌注/排放阀。如图所示。 4 逆时针旋转阀1/2圈，将其打开。 5 按Status屏幕中的Direct Function键，选择
仪器日常操作
灌注柱塞密封清洗泵(Prime Seal Wash)
当首次使用或整个管路都已干燥时
1.回到Menu 画面，选择Diag。 2. 将注射器适配器连接到注射器。 3. 移除密封清洗入口管路上的滤头。 4. 将注射器装满清洗液，然后将注射器适配器连到密封清洗管路末端。 5. 按Prime Seal Wash ，再按Start 。 6. 推进注射器使清洗液进入系统。 7. 当有溶剂从密封清洗废液管中流出时，按Halt。 8. 重新安装滤头。 9. 按Close返回。
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作 开机
依次打开LAC/E采集服务器、2695分离单元、所需检测器以 及计算机的电源。仪器进行5分钟自检后，出现以下画面。
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仪器日常操作
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• 溶剂输送系统(串联泵) • 进样系统 • 柱温箱 • 检测器
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基本构造
溶剂瓶
控制面板
样品盘 串联泵
WWaatteerrs sAlliaen2ce6296595示HP意LC图操作及维护
进样器 在线脱气机
基本构造
溶剂输送系统
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仪器日常操作 打开真空脱气机（Degasser）
1. 按“Menu/Status” 键，进入Status (1)画面。 2. 利用方向键 将光标移至“Degasser”位置，按Enter。 3. 利用上下键选择模式为ON，如下图所示。
注意事项：在开启真空脱气机时，要确认所有溶剂管路都充满溶 剂；若没有溶剂时请执行溶剂的Dry Prime 操作。
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Rev. 08112005
2011年9月
Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
主要内容
基本构造 仪器日常操作 仪器常见故障及维护保养
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基本构造
基本构造
注意事项：当更换溶液时，只需执行步骤1，5，7和9。 Waters Alliance 2695 HPLC 操作及维护
仪器日常操作 灌注针头清洗泵 (Prime Needle Wash)
注意事项：1 溶剂的选择：根据样品及流动相的化学特性来作选择。 2 若为浓度较高的样品需要较强的溶剂来清洗。 3 若样品对pH较敏感，应考虑洗针液的pH。
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仪器日常操作 冲洗自动进样器（Purge Injector）
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仪器日常操作
执行湿灌注 1 在“status”屏幕的
“Composition”字段中，为要用 于湿灌注的溶剂输入“100%”。 2 按“Direct Function”键，选择 “Wet Prime”，出现湿灌注对话 框。 3 按“OK”，执行湿灌注。 4 可根据实际情况重复灌注。
Dry Prime，然后按Enter。 6 在上述对话框中，选择要灌注的溶剂管路
对应的屏幕键。如图所示。 7 抽回注射器活塞以将溶剂抽出管路。
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仪器日常操作
湿灌注（Wet prime）：更换流动相；排除气泡；仪器闲置了一段时间。
注意事项： 为避免损坏柱塞密封，仅在流路中存在溶剂时执行湿灌注。 若更换流动相与之前流动相不互溶，采用中间溶液过渡。 以最低粘度的溶液开始湿灌注，以帮助清除管路中的空气。
基本构造
样品管理系统中的流路
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基本构造
柱温箱
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基本构造
检测器
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仪器日常操作
日常操作
• 开机 • 操作前准备 • 灌注柱塞密封泵(Prime Seal Wash) • 灌注针头清洗泵 (Prime Needle Wash) • 打开真空脱气机 • 干灌注(Dry Prime) • 湿灌注(Wet Prime) • 冲洗进样器 (Purge Injector)
基本构造
样品管理系统
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基本构造
• 样品管理系统可存放和定位样品 瓶并将样品注入溶剂流。样品管 理系统有 5 个样品转盘。
• 每个样品转盘中最多可容纳 24 个样品瓶，共计可容纳 120 个样 品瓶。
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基本构造
2695溶剂输送系统（串联泵）示意图
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基本构造
Prime/Vent Valve
Inlet Checkvalve
Inlet Checkvalve
D
A
Front
C
B
溶剂管理系统中的流路
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仪器日常操作
操作前准备
• 用色谱纯有机溶剂配制流动相，所有溶液应经0.45μm滤膜 过滤，脱气应充分。
• 必须确保6根管子全部插到溶剂瓶的底部。 • 准备合适的灌注柱塞密封清洗泵（Seal Wash）液体。 • 准备合适的灌注针头清洗泵（Needle Wash）液体。
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