血清总蛋白白蛋白测定SerumtotalproteinAlbumintest讲解材料
血清总蛋白测定
血清总蛋白测定血清总蛋白测定方法及临床意义1、测定方法：血清总蛋白测定一般采用双缩脲比色法，是目前首先推荐的蛋白质定量方法。
2、临床意义：(1)血清总蛋白生理性波动：直立体位由于体液分布原因，血液相对浓缩，而长久卧床者血液较直立体位稀。
因而久卧床者血清总蛋白比直立活动时约低3-5g/L。
新生儿血清总蛋白可比成人低5-8g/L。
60岁以上的老人约比成人低2g/L。
(2)血清总蛋白增高：①血液浓缩导致总蛋白浓度相对增高：严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水，血清总蛋白浓度可明显升高。
休克时，由于毛细血管通透性增加，血液中水分渗出血管，血液发生浓缩。
慢性肾上腺皮质功能减退的患者，丢失钠的同时伴随水的丢失，血浆也可以出现浓缩现象。
②血浆蛋白质合成增加：主要见于球蛋白合成增加，如多发性骨髓瘤患者。
(3)血清总蛋白降低：①血液稀释导致总蛋白浓度相对降低：如静脉注射过多低渗溶液获各种原因引起的钠、水潴留。
②摄入不足和消耗增加：食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃肠道疾病引起的消化吸收不良，均可造成血清蛋白浓度降低。
③蛋白质丢失：严重烧伤时大量血浆渗出，大量失血，肾病综合症大量蛋白尿等，均可使血清总蛋白浓度降低。
【注意事项】大家在用药的时候，药物说明书里面有三种标识，一般要注意一下：1.第一种就是禁用，就是绝对禁止使用。
2.第二种就是慎用，就是药物可以使用，但是要密切关注患者口服药以后的情况，一旦有不良反应发生，需要马上停止使用。
3.第三种就是忌用，就是说明药物在此类人群中有明确的不良反应，应该是由医生根据病情给出用药建议。
如果一定需要这种药物，就可以联合其他的能减轻不良反应的药物一起服用。
大家以后在服用药物的时候，多留意说明书，留意注意事项，避免不良反应的发生。
本文到此结束，谢谢大家!。
蛋白质代谢功能检查血清总蛋白和白蛋白球蛋白测定
蛋白降低。 （3）原发性巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤等，γ蛋白明显升高，
白蛋白降低，β球蛋白亦可升高。
二．胆红素代谢功能
正常人血清中胆红素主要来源于衰老的红细胞，最终大 部分经肝脏作用后通过胆道系统排入肠道。血清中的总 胆红素（STB）包括结合胆红素（CB）和非结合胆红素 （UCB）。通过各项胆红素代谢产物的检查，可诊断有 无溶血及判断肝、胆系统在胆色素代谢中的功能状态。
阳性
显著增加Βιβλιοθήκη 不定减少或消失粪便颜色
棕黄色
加深
变浅
变浅或陶土色
三、血清酶检查
（一）氨基转移酶
常用的转氨酶主要是丙氨酸转移酶（ALT）和天门冬氨 酸氨基转移酶（AST）。ALT主要分布在肝脏，其次在骨 骼肌、肾脏、心肌等；AST主要分布在心肌，其次在肝 脏、骨骼肌和肾脏。ALT主要分布在胞质中，而AST可以 来自胞质或线粒体。ALT反应肝细胞受损的灵敏度较AST 为高，但严重肝细胞损伤时，血清中AST／ALT比值升高。
故事点睛
故事点睛 旁白：李先生，49岁，近一月来，乏力、食欲减退、厌油，
护理体检:神志清,消瘦,轻度黄疸,腹部移动性浊音(+)。 人物：由两名学生分别担任故事人物，进行即兴表演。 请问： 1.为了明确诊断，可以做哪些实验室检查？ 2 .常用的肝功能检查有哪些？
一、蛋白质代谢功能检查
（一）血清总蛋白和白蛋白、球蛋白测定
肝细胞合成90%的血清总蛋白（serum total protein,STP） 总蛋白主要由清蛋白（albumin,A）和球蛋白（globulin,G） 组成。
血清蛋白电泳各项指标含义
血清蛋白电泳各项指标含义血清蛋白电泳（SPEP）是一种主要用于检测急性炎症和慢性疾病发生和进展的临床实验室检查，也是基本的血清生化检查之一。
血清蛋白电泳的指标主要包括以下几项：一、各项指标的含义1.总蛋白（Total Protein）：检测总合计的血清蛋白水平，反映体内蛋白分解和合成的状态。
正常范围为65—85 g/L。
2.球蛋白（Albumin）：检测血清中最多的蛋白种类，其主要功能是通过排泄机制维持血液中的渗透压平衡，正常范围为35—50 g/L。
3.α-2-球蛋白（α-2 globulin）：参与滞留血液中风湿因子，同时也是供体细胞中α-2蛋白的来源，正常范围为8–13 g/L。
4.α-1-球蛋白（α-1 globulin）：是血清蛋白质分类中最复杂的一类，主要是一些血清抗原；也有与炎症有关的一些蛋白也可以归入其中，正常范围为2–4 g/L。
5.β-球蛋白（beta-globulin）：主要的蛋白质成分有一些血清载脂蛋白、胆素蛋白、血清白蛋白和轮状病毒蛋白，正常范围为7–14 g/L。
6.γ-球蛋白（gamma-globulin）：主要检测抗体（血清抗IgM），一般在正常范围（7-15 g/L）变动不会太大，但如果有一些状态如感染、肝炎等导致的慢性炎症，它的水平可能会有显著改变。
7.A/G比（Albumin/Globulin）：A/G比是血清中球蛋白和游离蛋白的比值，正常范围为1.2—2.3。
二、各项指标的检查意义1.总蛋白（Total Protein）：用于评价肝脏、肾脏和骨髓功能的变化，如贫血、急性肝炎、肾炎、炎性肠病、感染，以及判断急性病变和慢性病变状态。
2.球蛋白（Albumin）：用于反映肾脏损害，肝脏功能障碍以及营养不良等情况，特别是用于估测腹腔内肿瘤渗出的尿液蛋白质携带量。
3.α-2-球蛋白（α-2 globulin）：用于诊断慢性病和有关炎性疾病，可检测出因吸收受损症、内分泌病及脂肪毒性等疾病引起的升高和减低的变化。
总蛋白及白蛋白测定的医学决定水平
总蛋白及白蛋白测定的医学决定水平
一、总蛋白（total protein ，TP）（参考值60 ～80g／L）
决定水平：低于45g／L 时往往与水肿有关，应考虑给以相应治疗，同时可作更全面的检查，如尿蛋白、肾及肝功能检查等；等于或低于60g／L 时，多种可引起总蛋白偏低的原因均应考虑，可选择一些试验项目作进一步检查。
高于80g／L 时，能引起总蛋白升高的各种原因均应加以考虑，还可通过血清蛋白电泳等项目作进一步检查。
二、白蛋白（allbumin ，Alb）（参考值35 ～55g／L）
决定水平：低于20g／L 时，在肝病病人提示严重预后不良，还应测定尿蛋白，以查明有无过多的蛋白丢失。
低于35g／L 时，各种引起白蛋白降低的因素均应列入考虑范围。
高于57g／L 时，应考虑脱水的可能性，并进行红细胞比积测定，以检查其是否增高。
蛋白质代谢功能检查血清总蛋白和白蛋白球蛋白测定
蛋白质代谢功能检查血清总蛋白和白蛋白球蛋白测定蛋白质是构成我们身体组织和细胞的重要组分，参与许多生理过程，如维持正常免疫功能、携带氧气、运输营养物质、参与代谢反应等。
蛋白质代谢功能检查可以通过测定血清总蛋白和白蛋白球蛋白的水平来评估。
以下是对这两项检查的详细解释。
1.血清总蛋白测定血清总蛋白是指血清中所有蛋白质的总量，包括白蛋白和球蛋白。
测定血清总蛋白的水平可以提供关于全身蛋白质代谢的信息。
正常成年人的血清总蛋白水平通常在6.0-8.3g/dL之间。
高蛋白血症可能与一些情况有关，如饮食蛋白质过多摄入、脱水、肾功能不全、慢性炎症、恶性肿瘤、骨髓增生异常等。
低蛋白血症则可能与饮食蛋白质摄取不足、肝病（肝脏合成蛋白质减少）、肾病（尿蛋白丢失）、营养不良等因素有关。
2.白蛋白测定白蛋白是血清中最丰富的蛋白质，占总蛋白的绝大部分。
它在体内扮演着多种重要角色，如维持胶体渗透压、运输药物和激素、抗体生成等。
正常成年人的血清白蛋白水平通常在3.4-5.4g/dL之间。
低白蛋白血症可能与肝脏合成白蛋白减少（如肝病、肝功能失常）、肾重金属中毒（如自身免疫性肾炎、肾小球肾炎）、消化道吸收障碍（如吸收不良综合征）等因素有关。
高白蛋白血症可能与因为脱水或其他原因而导致的体液浓缩有关。
球蛋白是除白蛋白外的其他成分，主要包括免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、补体、凝血因子等。
测定球蛋白的水平可以提供关于机体免疫功能和炎症反应的信息。
球蛋白水平的正常范围因年龄和性别而异。
常用的方法是将总蛋白和白蛋白测定结果相减，计算球蛋白的浓度。
高球蛋白血症可能与多发性骨髓瘤、慢性炎症、肝病等疾病相关。
低球蛋白血症可能与免疫缺陷病、肾病、胃肠道蛋白质大量丢失等因素有关。
总结：血清总蛋白和白蛋白球蛋白是检查蛋白质代谢功能的重要指标。
通过测定其水平，可以评估全身蛋白质代谢的状态，并发现一些与蛋白质代谢异常相关的疾病。
然而，需要注意的是，蛋白质代谢异常并不一定与蛋白质摄入量的变化相关，常常需要结合其他检查结果和临床病史来综合判断。
血清总蛋白和蛋白检测方法综述
血清总蛋白和蛋白检测方法综述[摘要](1)阐明了双缩脲法是目前国内外检测血清总蛋白和白蛋白最常用的方法；(2)明确检测血清总蛋白和白蛋白的分析性能要求；(3)强调血清总蛋白和白蛋白检测时的标本采集和保存要求。
[关键词]血清总蛋白白蛋白检测方法综述蛋白质在所有生命活动过程中起着极其重要的作用，据估计，迄今为止，人体内大约有50000多种蛋白质，而一个人体细胞内的蛋白质就达3000～5000种。
目前能识别的蛋白质已超过1400种，就连单细胞的细菌蛋白也多达3000多种。
在诸多蛋白中，被用于样品检测和临床辅助诊断率最高的是血清总蛋白和白蛋白，其主要检测标本有：血液、尿液、脑脊髓液、羊水、唾液、胸腔积液、腹腔积液以及粪便等。
1.血清总蛋白(total protein)检测1.1检测总蛋白的主要方法1.1.1双缩脲法(biuret method)利用蛋白质分子中的肽键(一CONH一)能与双缩脲试剂(biuret teagent)中的CU2+结合产生紫色复合物，在波长540nm处检测吸收峰。
双缩脲法是检测血清蛋白的经典方法，经Doumas改良后的双缩脲试剂被美国临床化学协会标准化委员会和美国标准局(National Bureau of standards，即现在的美国标准计量研究所，NST)选用，作为血清蛋白检测标准化实验试剂，试剂在室内保存一年内不影响检测结果。
1.1.2直接光度检测法(direct photometric method)本法利用血清蛋白在一定紫外光波内有特异吸收峰(uv280nm)这一特点检测样品蛋白，此法常用于脑脊髓液蛋白的测定。
1.1.3染料结合法(dye-binding method)检测样品蛋白本法根据某些特殊染料(氨基黑10B和考马斯蓝Coomassic Br illiant blue CBB)能与多肽链中氨基酸残基的质子化基团结合，在460～595nm处有一光吸收峰的特点检测样品蛋白。
简述血清总蛋白测定的临床意义
简述血清总蛋白测定的临床意义1. 血清总蛋白简介大家好，今天我们聊聊一个医学检查，它不常见却很重要——血清总蛋白测定。
你可以把它想象成体检里的“隐形卫士”，虽然它不显山不露水，但却能给医生提供不少重要信息。
简单来说，血清总蛋白就是血液里所有蛋白质的总和，包括白蛋白和球蛋白。
咱们身体里有个“蛋白质大军”，它们不仅帮助维持血液的正常浓稠度，还参与很多生物化学反应。
比如，白蛋白像个好助手，帮忙维持血液的“水位”，而球蛋白则是我们的免疫小战士，保护咱们免受病菌侵袭。
2. 这项检查的意义在哪里？2.1 了解身体的总体健康状况首先，血清总蛋白检测可以告诉医生你身体的总体健康状况。
就像是你去健身房，教练会先量一下体重、看一下身体脂肪率，才能制定出合适的锻炼计划。
血清总蛋白测试也是如此，它给医生提供一个关于你身体健康的初步印象。
如果总蛋白水平偏低，可能意味着你身体里有些问题需要关注，比如营养不良、肝脏疾病或者肾脏问题。
而如果总蛋白水平过高，则有可能是脱水或者其他问题在捣鬼。
2.2 诊断和监测疾病其次，血清总蛋白测定还在疾病的诊断和监测中扮演了重要角色。
例如，肝脏是制造大部分血浆蛋白的地方，如果肝脏有问题，血清总蛋白水平就可能会降低。
这就像是你家水管有点漏水，水位自然就下降了。
另一个例子是肾脏病，肾脏如果损坏了，蛋白质可能会从尿液里漏出来，导致血液中的总蛋白水平下降。
这项测试帮助医生了解病情的严重程度，并根据结果调整治疗方案。
3. 实际应用中的妙用3.1 检测营养不良血清总蛋白检测还有一个实际应用就是判断营养状态。
如果你突然发现自己瘦得厉害，或者感到没精打采，这时候可能就需要检查一下总蛋白了。
因为，身体里的蛋白质不仅来自于食物，也反映了你是否有吸收不良的问题。
就像汽车需要油才能跑，如果油箱里没油了，车自然也跑不动。
我们身体的“油”就是那些从食物中获取的蛋白质，所以总蛋白水平低，可能说明你的营养摄入有问题。
3.2 监控治疗效果最后，血清总蛋白也是监控疾病治疗效果的“探照灯”。
最新临床生物化检验实验(一 实验三 血清总蛋白、白蛋白及白 球比值的测定精品课件
操作步骤
• 取3支试管，按下表操作
工作试剂(ml) 血清(μl)
白蛋.00 100 — —
标准管 (S) 2.00 — 100 —
空白管 (B) 2.00 — — 100
混匀，以空白管调零，在630nm波长立即比色，分 别读取各管的吸光度。
第二十一页，编辑于星期六：一点 三十四分。
室） 7．比色皿架拉杆
第二十六页，编辑于星期六：一点 三十四分。
样品测试
1．将参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中
– 拿放比色皿时应持其“毛面”不要接触“光面”
– 比色皿内的溶液面高度不应低于1.5cm – 被测试的样品中不能有气泡和漂浮物 – 比色皿外的液体用滤纸吸干
2．打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别垂直插入比色皿槽中，盖上
• 2．BCG本身是一种pH指示剂，变色域为pH3.8(黄色)～ 5.4 (蓝绿色)，因此控制反应液的pH是本法测定的关键。
第二十三页，编辑于星期六：一点 三十四分。
实验安排
• 每个大组分2个小组
– 1个小组测总蛋白（用1cm比色杯）
– 1个小组测白蛋白（用0.5cm比色杯） – 实验结果包括：总蛋白、白蛋白、白/球比值
此反应并非蛋白质所特有凡分子内含有质所特有凡分子内含有两个或两个以上甲酰基氨两个或两个以上甲酰基氨conhconh不论是不论是直接相连还是通过一个氮直接相连还是通过一个氮或碳原子间接连接均可或碳原子间接连接均可呈双缩脲反应
最新临床生物化检验实验 （一） 实验三 血清总蛋 白、白蛋白及白 球比值
的测定精品课件
注意事项
1．双缩脲试剂中酒石酸钾钠的作用是络合铜离 子，以维持铜离子在碱性溶液中的溶解性；碘 化钾为稳定剂，能防止碱性酒石酸铜自动还原 。
血清总蛋白和白蛋白测定实验方案
血清总蛋白和白蛋白测定实验方案实验方案：血清总蛋白和白蛋白测定实验引言：材料和试剂：1.血清样本2.0.9%生理盐水3.高纯度白蛋白标准品4.生物碱性溶液5.生物酸性溶液仪器设备：1.比色皿2.分光光度计3.吸光度计实验步骤：1.样本制备：a.收集血液样本，并离心10分钟以去除血细胞。
b.将离心后的血清转移到一个新的离心管中。
c.确保血清无凝块或颗粒，如有则进行过滤处理。
d.将血清储存在-20°C的冰箱中，以防止蛋白质降解。
2.样本稀释：a.取一定数量的血清样本（200µL），加入一个10倍稀释液（1800µL 的0.9%生理盐水），得到被稀释的样本。
b.将稀释液标记为“200μL：1800μL”，并将其储存在试管中。
3.标准曲线制备：a.准备一系列浓度递增的白蛋白标准品：0g/L、2g/L、4g/L、6g/L、8g/L。
b.取一定体积的每个标准品（200µL），分别加入一个10倍稀释液（1800µL的0.9%生理盐水），得到一系列被稀释的标准溶液。
c.根据标准曲线所需白蛋白的浓度，将其标记在曲线上。
4.吸光度测定：a.取一定体积的对照组、血清样本和标准溶液，并分别转移到比色皿中。
b. 使用分光光度计，将比色皿置于光路中并调整至指定波长，通常为546 nm。
c.对每个样本和标准溶液的吸光度进行测量，并记录下读数。
5.计算白蛋白含量：a.根据标准曲线上的吸光度读数，计算每个标准品的白蛋白浓度。
b.根据被稀释的样本的吸光度读数和标准曲线上的浓度，计算样本中的白蛋白含量。
6.计算总蛋白含量：a.根据白蛋白含量和总蛋白与白蛋白的比例，计算总蛋白的含量。
实验注意事项：1.在操作过程中，尽量避免血清样本接触空气，以免影响蛋白质含量。
2.实验中使用的试剂和仪器，应根据实验室的标准操作程序进行操作。
3.保持实验环境的清洁和无菌，以防止外源性污染。
4.对比色皿进行校准，以确保吸光度测量的准确性。
实验二血清总蛋白测定_图文
血清TP常用双缩脲法测定，凯氏定氮法 可作为血清总蛋白二级标准品的定值方法。 其他方法可用于尿液、脑脊液、胸腹腔积液、 组织提取液、纯化蛋白等样品中TP的测定。
本实验采用双缩脲法测定血清中总蛋白含量。
实验原理
试剂与器材
试剂与标本 1、6 mol/L NaOH 溶液 2、双缩脲试剂（硫酸铜结晶、酒石酸钠钾、碘化钾） 3、双缩脲空白试剂 4、60~70 g/L 蛋白质标准液 5、血清
参考区间
测定管 吸光度
标准管 吸光度
× 标准液浓度
正常成人血清总蛋白浓度： 立位行走：64~83 g/L
静 卧： 60~78 g/L 新生儿总蛋白浓度较低，随后逐月上升，1年后达成人水平。
临床意义
血清TP浓度下降：
常见于血清白蛋白含量下 降，少数由免疫球蛋白含 量的明显下降引起；其他 血清蛋白质减少，一般不 能在TP浓度中得到反映。
主要器材 分光光度计
操作步骤
加入物 空白管 标准管×2
蒸馏水 0.05
－
标准液
－
0.05
血清
－
－
双缩脲试剂 4.0
4.0
测定管×2 － － 0.05 4.0
混匀后于37℃水浴15 min，以蒸馏水调零， 540 nm处测定各管吸光度。
标准液浓度：70.0g/L。
结果计算
血清总蛋 白浓度（g/L） =
特点
操作简便、灵敏度高，可用于尿液和脑脊液 蛋白质浓度低的样品测定。 但各种蛋白质形成的浊度有较大的差别，影 响浊度形成的干扰因素多。
方法
双缩脲法
原理
蛋白质中的连续肽键在碱性溶液中可与铜离 子作用产生紫色的络合物，再进行比色测定。
特点
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
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此反应和2个尿素分子缩合后生成的 双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2）在碱性 环境中与铜离子作用产生紫红色络合 物的反应相似，故称为双缩脲反应。
颜色的深浅在一定浓度范围内与 蛋白质含量成正比，经与同样处理的 蛋白标准液比较，即可求得蛋白质含 量
（2）蛋白质丢失增加：严重烧伤、大 出血、肾病综合征、溃疡性结肠炎
（3）营养不良或消耗增加：营养失调、 低蛋白饮食；患消耗性疾病
（4）血浆稀释：如静脉注射过多低渗 溶液或各种原因引起的水钠潴留。
七、注意事项 1、 黄疸血清、严重溶血、某些试
剂（如葡萄糖、酚酞、溴磺酞 钠）对本法有明显干扰，可用 标本空白管来消除。 2、 高脂血症混浊血清也会干扰比 色，先用丙酮抽脂后再做。
球蛋白分子量较白蛋白大，相 等重量的表面积要小，电荷和水化 膜也少，故先被沉淀下来，而白蛋 白仍留在溶液中，可用测定总蛋白 的方法测定之。
常用的中性盐有半饱和硫酸 铵、23%硫酸钠、双硫酸（20.8% 硫酸钠和7.0% 亚硫酸钠溶液）
准确性差、操作烦琐，且不 宜用自动生化分析，基本不用。
（二）电泳法 醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝
用乙酸调pH 至5.20
白蛋白标准：40g/L
三、操作步骤
加入物（ml） B
血清
/
标准液
/
BCP试剂
3.0
S×2 /
0.02 3.0
U×2 0.02 / 3.0
混匀，1min后在603nm处比色，B管 调零
四、结果 Au
血清白蛋白（g/L）= —— ×40 As
五、正常参考范围 成人36-46g/L
六、临床意义 1、 增高：见于严重脱水所致的血浆浓缩 2、 降低： (1) 急性降低：见于大出血和严重烧伤； (2) 慢性降低：见于肾病蛋白尿、肝功能
受损、恶性肿瘤、结核病伴慢性出 血、营养不良等。 （血清白蛋白低于20g/L，临床上出现 水肿）
七、注意事项 1、 严重脂肪浑浊血清对测定有干
扰，应做自身对照。 2、 严格控制pH5.2±0.03
临床生物化学： 是研究机体健康和疾病的生物
化学过程。测定体液或组织中的成 份以提供对疾病的诊断、治疗和预 防。
所用样品： 血液（血清/血浆）、尿液、
脑脊液及体液
测定方法： 凯氏定氮法、双缩脲法、酚
试剂法、紫外分光光度法、染料 结合法、比浊法等。
（二）、 双缩脲法 蛋白质中的肽键在碱性环境中能与铜
三、操作步骤
加入物（ml） B
血清
/
标准液
/
双缩脲试剂 3Байду номын сангаас0
S×2 /
0.05 3.0
U×2 0.05
/ 3.0
混匀，37℃，10分钟，540nm处 比色，1cm光径比色杯，B管调零
注： 1.非严重黄疸、脂血及高脂血 症血清不用做血清自身对照管。
2.可以用蒸馏水调零，目的是检 验各个试剂的好坏
胶电泳。 特异性高，准确性不够，操作
烦琐费时，且不宜用自动生化分析
（三）染料结合法 根据白蛋白结合外源性染料的能
力比球蛋白大，故在不分离白、球蛋 白的条件下用染料直接测定白蛋白。
有干扰，但灵敏度高、操作简便、 重复性好，自动生化分析仪常用的方 法。
（四）免疫学法 免疫扩散法、免疫比浊法（透射
比浊法和散射比浊法）、放射免疫法。 特异性好、灵敏度高，但成本较
八、方法学评价 准确性高 重复性好
优点 干扰少 试剂稳定 操作简便、快速
缺点 灵敏度较低 手工和自动化都可，已被推荐
为测定血清总蛋白的参考方法。
白蛋白测定
白蛋白是血浆中含量最多的蛋 白质。其测定方法主要有盐析法、 电泳法、染料结合法、免疫法等。
（一）、盐析法 蛋白质分子表面因有水化膜的
保护而稳定，如果加入大量中性盐 则电荷被中和、水化膜被破坏，蛋 白质分子因相互聚积而沉淀析出， 此种现象称为盐析。
（球蛋白和球蛋白的等电点 接近5.20）
3、不可用动物血清作质控血清
八、 方法学评价 特异性高、反应简便、快速、
完全，干扰少（相对于BCG法）
小结： 凯氏定氮法是蛋白质测定的参考
方法，用来标化血清和检验其他测定 蛋白质的方法；双缩脲法也是测定血 清蛋白质的参考方法，同时，也是临 床上最常用的常规方法。
离子作用产生紫红色络合物。此反应和2 个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性环 境中与铜离子作用产生紫红色络合物的反 应相似，故称为双缩脲反应。
简单、精密、准确，为临床首 选的常规方法，但灵敏度稍差。
（三）、 酚试剂法 运用蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸
残基能还原磷钨酸-磷钼酸试剂生成钼蓝 来测定蛋白质的浓度。
郎伯-比耳定律：
——溶液的吸光度与溶液浓度成正比 A1 = lgI0 / I = K1C1L1， A2 = lgI0 / I = K2C2L2
由于 分析物质相同，处理一样， 比色皿也相同，
故 A1 / A2 = C1 / C2， 则 C1 = A1 × C2
A2
二、主要试剂： 双缩脲试剂（ NaOH 、硫酸铜、 酒石酸钾钠、碘化钾） 蛋白标准（60 g/L）
BCP法测血清白蛋白特异性高、 反应简便、快速、完全，但不可用动 物血清作质控血清；BCG法测血清白 蛋白简便、快速、干扰少，是目前国 内测血清白蛋白的最常用方法，但特 异性不高（30S内对白蛋白特异）。
高，费时，一般用于尿液和脑脊液中 微量白蛋白的测定。
溴甲酚紫测定血清白蛋白
一、原理：在pH5.2的缓冲液及表面活 性剂存在下，溴甲酚紫（BCP）可与白 蛋白结合形成绿色复合物，在603nm波 长处有一吸收峰，与同样处理的白蛋 白标准比较，便可计算血清中的白蛋 白浓度。
二、 主要试剂：
BCP 乙酸钠 乙醇 Brij-35
（五） 染料结合法 在酸性环境下，蛋白质分子带正
电，可与带负电的染料结合产生颜色 而测定之。
重复性好、灵敏度高，BCG 法 特异性不高。
（六） 比浊法 某些酸（如三氯醋酸、磺基水
杨酸）能与蛋白质结合产生微细沉 淀，测定悬浮液的浊度即可求得蛋 白质的含量。
简单、试剂易得，但影响因素 太多。
血清总蛋白双缩脲测定法
改良法：在酚试剂中加入碱性铜离 子。集中了双缩脲法和酚试剂法的优点
灵敏度高，但受许多还原物质的 干扰，限制了它在临床上的应用。
（四）、 紫外分光光度法 蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸
残基在280nm处有一吸收峰，可用于 蛋白质含量的测定。
准确性差，但因未加任何试剂和 处理，可保留其生物活性且可回收全 部蛋白质，故可用于较纯的酶和免疫 球蛋白测定。
四、结果 Au
血清总蛋白（g/L） = —— X 60 As
五、正常参考范围 60-80g/L
六、临床意义 1、 总蛋白浓度升高 （1）蛋白质合成增加：大多见于多发性
骨髓瘤患者 （2）血浆浓缩，如急性失水、外伤性休
克、慢性肾上腺皮质功能减退。
2、 总蛋白浓度降低
（1）蛋白质合成障碍：肝功能严重受 损→蛋白质合成减少