风疹病毒IgG抗体检测操作规程
风疹病毒IgG抗体检测操作规程
风疹病毒IgG抗体检测操作规程一、检测目的规范风疹病毒IgG抗体的检测实验，以保证检测结果的准确性和重复性。
二、检测方法采用酶联免疫吸附法（ELISA)检测IgG抗体。
三、检测原理采用基因工程表达的重组RV抗原包被反应板，酶标记的鼠抗人IgG为示踪物，四甲基联苯胺显色系统，ELISA间接法检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体。
四、实验条件（1）实验室应具有空调、离心机、加样器、水浴锅，酶标仪等设备。
（2）检验人员应经过操作前培训。
（3）用酶标仪测定。
五、操作程序（1）样本采集。
无抗凝静脉血2ml，当日不做的标本4℃保存，必要时，-20℃冻存。
（2）操作步骤。
○1平衡：将试剂盒从冷藏环境中取出，置室温平衡30分钟后使用。
○2配液：将浓缩洗液用蒸馏水或去离子水20倍稀释，摇匀备用。
○3稀释待测血清：将待测血清分别用标本稀释液稀释作1：101稀释（1ul 血清加入100ul标本稀释液或者5ul血清加500ul标本稀释液），混匀。
○4加样：预留一个空白孔，不加任何液体（每次实验设1孔阴性对照、1孔阳性对照及2孔Cut-off值对照）将阴、阳性对照及Cut-off值对照各取100ul/孔加入反应孔内，稀释好的待测血清各取100ul加入反应孔内。
○5温育：在反应板上加盖封板膜，置37℃温箱或水浴锅中，反应60分钟。
○6洗板：甩去孔内液体，用洗液加满各孔，静止30秒，甩去板内液体，如此反复洗板5次，最后在吸水纸上拍干。
○7加酶：每孔加入酶结合物100ul。
○8温育：加盖封板膜，置于37℃反应30分钟。
○9洗板：同操作步骤○6。
○10显色：每孔依次加入底物液A、B各50ul，振荡混匀，37℃避光反应15分钟。
○11终止：每孔加入终止液50ul，振荡混匀。
六、参考值：○1采用酶联仪（波长450/630nm或450nm)测定各孔OD值。
（结果须在终止反应后30分钟内测定完毕）。
○2临界值（Cut-off）=两孔Cut-off对照OD 值的均值。
人风疹病毒IgG抗体时间分辨免疫荧光法的建立
风 疹病 毒 （ ｂ ｌｖｒ ｓ简 称 Ｒ 是 风 疹 的病 原 体 ， 引起 先 Ｒｕ ｅｌ ｉ ， ａ ｕ Ｖ） 是
加 入 封 闭 液 （ ０ 小 牛 血 清 ） 每 孔 １ ０ ｌ 闭过 夜 或 ３ ℃ ２ ， ２％ ， ５ ｕ， 封 ７ ｈ
天性 感 染 的病 原 体 之 一 。 孕妇 在妊 娠 头 三个 月感 染 Ｒ 病 毒 可 倾 去封 闭液 ， 涤后 真 空 抽 干 ， ２ ℃ 保 存 。 Ｖ， 洗 一Ｏ 经血 液 侵 犯 胎 儿 ， 致 自发 流 产 、 产 或 胎 儿 感 染 ， 而 引 起 严 导 死 从 １ ． 被 抗 原和 浓度 的选 择 ３包
维普资讯
学界 Ｉ 研究园 地
人风疹病毒 ＩＧ抗体 时间分辨免疫荧光法的建立 ｇ
口 彭建 柳 刘 惠 群
摘
要： 目的 ： 立 人风 疹 病 毒 （ ｕ ｅｌｖｒｓＲ ＩＧ 抗 体 时 间分 辨 免 疫 荧光 分 析 （ Ｒ Ｉ 的方 法 。 方法 ： 建 Ｒ ｂ ｌ ｉ ；Ｖ） ａ ｕ ｇ ＴＦ Ａ）
１４１Ｅ ３标 记 抗 体 的 制 备 ． ｕ＋
标 记 试 剂 盒 购 自 Ｐ ｒｉ Ｅｍｅ 公 司 ： 对 照 实 验 采 用 Ｔｉｉ ｅｋ ｌ ｒ ｎ ｒｔ ｎｙ
将 ０５ ｇ待 标 抗 体 加 入 Ｍｌ ｏｅ公 ｌ ｉ
８０ｒ ｍｉ ｍｉ， ５ ｍｍｏ Ｌ ｌ， ／ Ｒ ＩＧ ｋ ｓ 荧 光测 量 仪 为 Ａ ｔ — Ｌ Ｉ ２ ５全 自动 时 间 分辨 管 中 ，０ ０／ ｎ离 心 ５ ｎ 再 加 入 标 记 缓 冲 液 【 ０ Ｖｇ ｉ ： ｔ ｕ ｏ ＤＥ Ｆ １ ３ Ａ 免疫 荧 光 检 测 仪 ；３ １ Ｏ份 血 清 标 本 来 自南 方 医 院。 １２固相 包 被 抗 原 的 制 备 ．
风疹病毒igg
风疹病毒igg风疹病毒igg是什么育龄妇女孕期特别是早孕期间，若感染风疹病毒会引起胎儿宫内感染导致先天性风疹综合症。
所以，很多女性在怀孕前都会去医院检测风疹病毒，因此时常会听到风疹病毒igg这个词，那风疹病毒igg到底是什么意思呢？如果一个人的检测结果写着风疹病毒igg阳性，那就表示该人曾经感染过风疹病毒，已经有了免疫力，胎宝宝感染的可能性很小；如果一个人的检测结果写着风疹病毒igg阴性，那就表示该人没有感染过风疹病毒。
那么，是不是只要看风疹病毒igg就可以了呢？答案是否定。
如果风疹病毒igg为阳性，还需看风疹病毒igm，若风疹病毒igm是阳性，那就要打风疹减毒活疫苗，而且在接种疫苗后三个月内要避孕；若风疹病毒igm是阴性，那就可以放心怀孕。
而风疹病毒的正常范围为抗风疹病毒抗体igm阴性，抗风疹病毒抗体igg阴性；抗风疹病毒抗体igm主要用于诊断风疹病毒的急性感染，一般在感染后2周血清出现抗风疹病毒抗体。
另外，要注意的是，在孕早期，孕妈咪尽量少去公共场所，避免与风疹病人接触。
风疹病毒igg阳性风疹是一种病毒传染性疾病，由于患者常常伴有全身皮疹，所以对于患者的皮肤是有一定的危害的，而认识风疹病毒抗体阳性是什么，对于防治风疹有着很重要的意义，下面让我们一起来了解一下吧！RV—Ab，这项化验是判断是否感染风疹病毒的一项参考指标，阴性或lgGAb<1：512。
风疹病毒的实验室检测是通过抽取静脉血检测体内抗风疹病毒的igg和igm抗体。
风疹病毒发病高峰为春季至初夏，而风疹病毒抗体的阳性率随年龄增大而上升，新生儿可以通过早年感染了风疹病毒的母亲而获得风疹病毒的igg抗体。
igm抗体于发疹4天左右产生，约10天达高峰，持续6~12周，偶尔也可持续达一年；igg抗体较igm抗体出现稍晚，逐渐上升，1~2个月达高峰，以后下降，多维持终生，人群中80％以上的人此抗体阳性。
风疹病毒igg阳性是什么意思呢？风疹病毒igg抗体定量为阳性，只能证明感染过风疹病毒，而且一旦被感染igg就终生阳性，但对身体没有影响。
赛润ELISAclassic风疹病毒IgGIgM
`赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM目录1.用途2.诊断意义3.赛润 ELISA classic- 检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质，试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润 ELISA classic的检验步骤7.1注意事项7.2样品准备和储存7.3试剂盒反应试剂的准备工作7.4检测程序概要7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2检验有效性标准8.3计算赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM（定量）8.4检测结果分析9. 性能特性9.1重复性9.2 敏感性和特异性10. 风疹病毒IgG抗体的亲和力评估11. 警告11.1警告和安全措施11.2废料处理12.参考文献V9.03/07-1赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM酶联免疫测定法体外诊断人体抗体（IgG/IgM）- 只限用于体外诊断-IgG试剂盒（定量）编号 ESR129GIgM试剂盒（定量）编号ESR129M检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操作1.用途赛润 ELISA classic风疹病毒 IgG/IgM用于定性和/或定量检测人体内血清、脑脊液或血浆中抗风疹病毒的抗体。
检测抗风疹病毒IgG和IgM对于风疹病毒的血清学研究具有特殊的价值，如判断机体免疫状态及初次感染。
2.诊断依据风疹病毒是一种人类病原体，属于RNA病毒的披膜病毒科，可通过飞沫和直接接触等方式传播，潜伏期一般为10-21天。
大约50%的感染病例初期伴有弥散性斑疹，随后这些微小的斑疹可能融合。
出生后感染通常并无大碍，有25-30%的患者尽管出现心肌炎，神经炎，耳炎，支气管炎，脑炎等并发症，也属于亚临床感染。
风疹病毒感染的临床诊断都应有血清学证据的支持，因为皮疹和关节炎这些临床症状也可以由其它病毒引起。
（见1.，2.）妊娠期风疹感染可能导致胎儿受到严重损伤及多系统疾病。
风疹G说明书
风疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书【产品名称】通用名称：风疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）英文名称：Diagnostic Kit for IgG Antibody to Rubella Virus (ELISA)【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】风疹是由风疹病毒（rubella virus，RV）引起的急性呼吸道传染病，孕期急性感染风疹病毒，可引起胎儿多种畸形，导致先天性风疹综合症。
一般认为风疹病毒IgM、IgG抗体的联合检测可有效提高孕妇风疹急性感染的判断率。
本试剂盒用于检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体，适用于辅助诊断风疹病毒感染和风疹病毒感染者的流行病学调查。
【检验原理】本试剂盒采用基因工程表达的重组RV抗原包被反应板，酶标记的鼠抗人IgG为示踪物，四甲基联苯胺显色系统，ELISA间接法检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体。
【主要组成成份】半成品名称主要组分规格半成品名称主要组分规格1 RV-IgG反应板重组RV抗原4×12孔/ 8×12孔8 底物液A 过氧化氢溶液1瓶(4ml / 8.5ml)2 RV-IgG酶结合物HRP标记鼠抗人IgG 1瓶(6.5ml/13ml) 9 底物液B TMB 1瓶(4ml / 8.5ml)3 阴性对照山羊血清1瓶(1ml) 10 终止液硫酸1瓶(4ml / 8.5ml)4 RV-IgG阳性对照RV-IgG阳性血清1瓶(1ml) 11 塑封袋1个5 Cut-off对照 RV-IgG阳性血清1瓶(1ml)12 封板膜3贴6浓缩洗涤液（20×）磷酸盐1瓶(25ml /50ml) 13 说明书1份7 标本稀释液NaCl1瓶(6.5ml/13ml)【储存条件及有效期】试剂盒置2－8℃可存放12个月。
【样本要求】血浆标本可采用肝素、柠檬酸钠或EDTA进行抗凝处理。
血清标本按常规方法由静脉采集。
标本置于2~8℃可保存7天，-20℃可保存6个月。
TORCH-IgG 风疹病毒 抗体酶免测定(SOP)2
TORCH-IgG 风疹病毒抗体酶免测定标准操作程序编写者：宿金涛日期：2012年5月26日一. 实验原理: 采用间接法原理检测人血清样品中风疹病毒IgG抗体（HCMV-IgG),以纯化风疹病毒抗原包被酶联板。
待检血清中的风疹病毒抗体与包被抗原反应，再与酶标记鼠抗人IgG 抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物。
加底物TMB显色，在酶标认仪上比色后根据OD值判定有无风疹病毒IgG抗体的存在。
二. 试剂：北京贝尔。
规格为1*48Test。
试剂文号：国食药监械（准）字2010第3400534号三. 仪器：ST-36W洗板机;reader HT2 酶标仪。
四.操作步骤：1、取出试剂盒室温平衡30分钟。
将20×洗涤液用蒸馏水做20倍稀释。
2、加样品：将待检血清做1：10稀释（取100ul标本稀释液加入反应板孔内，再加10ul待检血清）混匀，同时预留阴、阳性及空白对照共5孔。
3、加入阴性对照3孔，阳性对照1孔，各100ul对照血清。
空白对照1孔空置。
将反应板轻轻震荡使样品混匀。
4、温育：用封板膜封板后，置37℃温箱或水浴中反应30分钟。
5、洗板：温育后，将封板膜揭掉，吸干孔内液体，用洗涤液洗板5次，第次浸泡30-60秒钟。
6、加酶标工作液：每孔加入100ul酶标工作液，空白孔除外。
7、温育；用封板膜封板后，置37℃温箱或水浴中反应30分钟。
8、洗板：温育后，将封板腊揭掉，吸干孔内液体，用洗涤液洗板5次，第次浸泡30-60秒钟。
9、显色：每孔加入底物A、B液各50ul，轻轻震荡混匀，用封板膜封板后，置37℃温箱或水浴中反应10分钟。
10、终止：每孔加入终止液50ul，轻轻震荡混匀。
11、测定：设定酶标仪波长于450nm(双波长450 /630nm检测），测定各孔A450值。
注意：在终止反应30分钟内计数。
12、当使用单波长时，校准空白孔，设定酶标仪波长于450nm，测定各孔A450值，当使用双波和450/630nm检测时，可以不设空白孔，直接测定各孔A值。
欧蒙抗核抗体谱(IgG)检测标准操作规程
抗核抗体谱(IgG)检测标准操作规程1.目的规范抗核抗体谱(IgG)检测，保证结果的准确性。
2.适用范围检验科免疫组工作人员。
3.试剂规格名称与组成型号名称：ANA 谱 1靶抗原：nRNP/Sm，Sm，SS-A，Ro-52，SS-B，Scl-70，Jo-1，CENP B，dsDNA，核小体，组蛋白，核糖体 P 蛋白类型：IgG基质：抗原包被的检测膜条规格：16×01(16)4.预期用途：用于体外定性检测人血清或血浆中的抗 nRNP、Sm、SS-A（天然 SS-A 和 Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P 蛋白和 AMA M2 共 14 种不同抗原 IgG 类抗体。
5.适应症：夏普综合征（MCTD），系统性红斑狼疮（SLE），干燥综合征，进行性系统性硬化症，多肌炎皮肌炎、重叠综合征、局限型进行性系统性硬化症（CREST 综合征），原发性胆汁性肝硬化。
6.临床意义：抗核抗体识别是各种细胞核组分（细胞核的生化成份）[1,2]，包含核酸、细胞核蛋白及核糖蛋白。
可特征性地出现于许多疾病中，尤其是风湿性疾病[3,4,5]。
在炎症性风湿性疾病中，这些抗核抗体的阳性率在 20%到 100%之间，以风湿性关节炎的阳性率最低，在 20%至40%之间。
因此，ANA 鉴别诊断在对个别风湿疾病的确认十分必要，而且对自身免疫性疾病的进一步诊断也很有价值。
[3,6,7,8,9,10,11]风湿疾病—夏普综合征（混合结缔组织病＝MCTD)[8]—系统性红斑狼疮（SLE)[8, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22]—干燥综合征（原发性干燥综合征）[5],—系统性硬化症（系统性硬皮病,SSc)[1, 23],—局限型系统性硬化症（CREST 综合征） [28]—多肌炎/皮肌炎[12,15]—类风湿性关节炎[5]7.主要组成成分：8.储存条件及有效期： 2-8°C 保存，不要冷冻。
风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)
风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）【产品名称】风疹病毒IgM抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）。
【用途】利用酶联免疫吸附法（ELISA）定性检测人血清或血浆中的风疹病毒（RV）IgM抗体，适用于人类风疹病毒感染的辅助诊断。
【试验原理】本试剂盒采用捕获法原理检测人血清或血浆样品中风疹病毒IgM抗体（RV-IgM），微孔中预包被鼠抗人-IgM（U-链），首先加入待测标本的血清或血浆样品后，样品中的IgM抗体都可被捕获，为结合的其他成分（包括特异的IgG 抗体）请被洗涤除去，第二步，加入RV抗原酶标记物，被捕获的IgM中的RV-IgM 会与来更过氧化物酶标记的RV重组抗原特异性的结合，洗去其它未结合物，做好用TMB底物显色。
通过酶标仪检测吸光度（A值）从而判定样品中的RV-IgM 抗体的存在与否。
【主要组成成分】1抗人-IgM（U-链）包被板1块（48孔/96孔），4×12/8×12孔板，微孔条可以拆开使用。
包被板由板条和板架组成，与含有干燥剂的铝箔袋密封。
未使用完的微孔条与干燥剂一起放在塑料袋中放置于2-8℃保存，包被板放置与自封袋保存后，减少开封次数，不良的保存条件将缩短稳定期。
2 RV-IgM阳性对照 1支（0.5ml），主要成分为蛋白缓冲稀释液稀释的RV-IgM抗体，含稳定剂、防腐剂。
3 RV-IgM阳性对照 1支（0.5ml），主要成分为蛋白缓冲稀释液稀释的正常人血清，检测无RV-IgM抗体反应，含稳定剂、防腐剂。
4酶标工作液1瓶（3ml/6ml），主要成分为辣根过氧化物酶标记的RV重组抗原，含稳定剂。
5 浓缩洗涤液（20×）1瓶（20ml/50ml），为无色液体，成分为磷酸缓冲液和吐温20。
用前用蒸馏水或去离子水按照1:20的比例稀释。
6 底物液A 1瓶（3ml/6ml），为无色液体，主要成分为过氧化物。
7 底物液B 1瓶（3ml/6ml），为无色液体，主要成分为TMB。
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风疹病毒IgG抗体检测操作规程
一、检测目的
规范风疹病毒IgG抗体的检测实验，以保证检测结果的准确性和重复性。
二、检测方法
采用酶联免疫吸附法（ELISA)检测IgG抗体。
三、检测原理
采用基因工程表达的重组RV抗原包被反应板，酶标记的鼠抗人IgG为示踪物，四甲基联苯胺显色系统，ELISA间接法检测人血清或血浆中的风疹病毒IgG抗体。
四、实验条件
（1）实验室应具有空调、离心机、加样器、水浴锅，酶标仪等设备。
（2）检验人员应经过操作前培训。
（3）用酶标仪测定。
五、操作程序
（1）样本采集。
无抗凝静脉血2ml，当日不做的标本4℃保存，必要时，-20℃冻存。
（2）操作步骤。
○1平衡：将试剂盒从冷藏环境中取出，置室温平衡30分钟后使用。
○2配液：将浓缩洗液用蒸馏水或去离子水20倍稀释，摇匀备用。
○3稀释待测血清：将待测血清分别用标本稀释液稀释作1：101稀释（1ul 血清加入100ul标本稀释液或者5ul血清加500ul标本稀释液），混匀。
○4加样：预留一个空白孔，不加任何液体（每次实验设1孔阴性对照、1孔阳性对照及2孔Cut-off值对照）将阴、阳性对照及Cut-off值对照各取100ul/孔加入反应孔内，稀释好的待测血清各取100ul加入反应孔内。
○5温育：在反应板上加盖封板膜，置37℃温箱或水浴锅中，反应60分钟。
○6洗板：甩去孔内液体，用洗液加满各孔，静止30秒，甩去板内液体，如此反复洗板5次，最后在吸水纸上拍干。
○7加酶：每孔加入酶结合物100ul。
○8温育：加盖封板膜，置于37℃反应30分钟。
○9洗板：同操作步骤○6。
○10显色：每孔依次加入底物液A、B各50ul，振荡混匀，37℃避光反应15分钟。
○11终止：每孔加入终止液50ul，振荡混匀。
六、参考值：○1采用酶联仪（波长450/630nm或450nm)测定各孔OD值。
（结果须在终止反应后30分钟内测定完毕）。
○2临界值（Cut-off）=两孔Cut-off对照OD 值的均值。
检验结果的解释：
○1测定标本OD值<临界值时为RV-IgG抗体阴性；
○2测定标本OD值≥临界值时为RV-IgG抗体阳性。
七、质量控制
阳性对照OD值应≥1.00，阴性对照OD值≤0.05，Cut-off对照OD值≥0.16，否则实验结果无效，应重新试验。
八、临床意义
风疹病毒可由感染者的分泌物经呼吸道传播给易感人群。
抗风疹病毒IgM抗体在发病2--5天即可测出，6--25天检出率可达高峰，常用于风疹急性期或新近感染的诊断。
抗风疹病毒IgG抗体用既往感染，一般在感染后2--3周血清中出现抗风疹病毒IgG抗体，6个月达高峰，并且阳性结果可持续数年。
孕妇在妊娠开始4个月内感染风疹病毒，易引起流产、死胎、早产、胎儿宫内发育迟缓、神经发育畸形。
同时，病毒可通过胎盘感染胎儿，引起先天性风疹综合征（CRS），导致胎儿器官缺陷或畸形，如新生儿先天性白内障、先天性心脏病、先天性耳聋等。
RuV-IgG、RuV-IgM 用于对早孕妇女产前筛查和监测十分必要。
鉴于技术上的原因和生物学上的交叉反应，对阳性结果的意义应结合临床综合判断，孕妇不能仅以此抗体阳性作为终止妊娠的依据。