最新专题三核酸电泳技术
核酸电泳技术

拍照,分析
优点与应用
优点: (1)便于分离; (2)便于检测; (3)便于回收 应用: 分离、鉴定和纯化DNA或RNA片段, 分子克隆技术核心技术
迁移速度影响因素
样品的物理性质:分子大小、电荷、空间 构型 支持物介质 琼脂糖,0.2-50kb 聚丙烯酰胺,1-1000bp 脉冲场凝胶电泳:大片段107 电场强度 缓冲液离子强度:TAE, TBE, TPE
1
2
DNA分子的大小
琼脂糖浓度:与浓度成反比
Hale Waihona Puke 3DNA的构象:超螺旋环状>线状>切口环状。
4 5
所用的电压:与所用的电压成正比。 电泳缓冲液: TAE、TPE及TBE
凝胶载样缓冲液
临上样到凝胶加样孔之前与待电泳样品相 混合的一种缓冲液(溴酚蓝,二甲苯氰) 作用:
1)增加样品密度保证DNA沉入加样孔内;
聚丙烯酰胺凝胶的本质
在TEMED (四甲基乙二胺) 催化过硫酸铵 还原产生的自由基的存在下,丙烯酰胺单 体乙烯基聚合形成聚丙烯酰胺线状长链
在双功能交联剂如N,N`-亚甲双丙烯酰胺 的参与下的共聚合反应中,聚丙烯胺的交 联形成三维带状网格结构。 网格孔径的平均直径决定于丙烯酰胺和双 功能交联剂的浓度。
脉冲场凝胶电泳
原理:两个不同方向的电场周期性交替进行, DNA分子在交替变换方向的电场中作出反 应所需的时间取决于它的大小。
该法可分离长至5Mb的DNA分子。严格说 来,应叫交替电场凝胶电泳。
影响分辨率的因素
1 脉冲时间:
2 电压:
3
4
电场夹角:
温度:
细菌转化(p163)
核酸电泳方法

核酸电泳是一种分离核酸的方法,主要包括琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
以下是两种核酸电泳方法的介绍:
1.琼脂糖凝胶电泳:
(1)将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶,然后倒入胶模中,凝固后将形成一种固体基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。
(2)将凝胶置电场中,在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移,迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳缓冲液、嵌入染料的量等因素影响。
(3)在不同条件下电泳适当时间后,大小、构象不同的核酸片段将处在凝胶不同位置上,从而达到分离的目的。
(4)凝胶的制备和电泳操作方法包括以下步骤:选择琼脂糖、配制缓冲液、加热熔化琼脂糖、灌制凝胶、电泳、染色和观察。
2.聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE):
(1)聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和交联剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP)在催化剂作用下形成的三维网状结构。
该凝胶具有孔径大小适合核酸分离,且与样品间无反应的特点。
可通过改变基质的百分比来调整孔径大小,从而有效分离不同大小的核酸。
(2)凝胶电泳常用于分离蛋白质,例如SDS-PAGE技术是常用的蛋白表达分析技术之一。
它根据检体中蛋白质分子量大小的不同,使其在电泳胶中分离。
在大肠杆菌表达纯化外源蛋白的实验中,SDS-PAGE 是必不可少的操作步骤。
(3)聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离同工酶及其亚型、大分子核酸等。
核酸凝胶电泳的原理

核酸凝胶电泳的原理
核酸凝胶电泳是一种常用的分子生物学技术,用于分离和检测核酸分子,如DNA 和RNA。
其原理如下:
1. 凝胶制备:通常使用琼脂糖或者聚丙烯酰胺作为凝胶基质。
将这些基质溶解在缓冲液中并聚合形成固体凝胶,在凝胶中形成一系列微小孔隙。
2. 样品加载:将待测样品中的核酸分子混合物经过处理后,加入到凝胶的孔隙中。
3. 电泳:在凝胶两端连接正负电极,通以电流。
由于DNA和RNA带有负电荷,它们会随电场的作用从负极向正极移动。
4. 分离:由于不同的核酸分子在凝胶中的孔隙中移动的速度不同,较小的分子移动速度较快,在一段时间内就可以移动到凝胶中较远的位置,而较大的分子则移动速度较慢,停留在较接近起点位置。
5. 可视化:在核酸凝胶电泳结束后,可以使用DNA染料或核酸探针等方法对凝胶进行染色,从而可视化核酸分子位置。
常用的染色剂包括乙溴化乙锭(EtBr)、SYBR Green等。
通过比较待测核酸与已知大小的分子量标准的迁移距离,可以确定待测核酸的大
小。
核酸凝胶电泳在DNA测序、基因突变分析、DNA指纹图谱等领域都有广泛的应用。
核酸电泳原理

核酸电泳原理
核酸电泳原理是一种常用的分离和检测核酸分子的方法。
核酸电泳是通过在电场中施加电压,利用核酸分子的电荷和长度差异来实现分离的。
在电泳过程中,我们首先将待分离的核酸样品加入到一种称为琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶的载体中,然后将载体放置在一条准备好的电泳板上。
准备好核酸样品后,我们将一个阳极连接到电泳板的一端,将一个阴极连接到另一端,形成一个电场。
当电场通电后,核酸分子会在电场力的作用下朝着离子云移动。
核酸分子的移动速度取决于其大小、形状和电荷。
较短的核酸分子会比较长的核酸分子移动得更快,较小的核酸分子会比较大的核酸分子移动得更快,而带有正电荷的核酸分子会比带有负电荷的核酸分子移动得更快。
根据这些原理,我们可以通过核酸电泳将待分离的核酸样品分成几个带状带,每个带状带代表着不同大小、不同形状和不同电荷的核酸分子。
分离完成后,我们可以用染料或放射性同位素标记的核酸探针来检测这些带状带。
总而言之,核酸电泳利用核酸分子在电场中的电荷和长度差异,通过在载体上分离核酸分子的移动速度,达到分离核酸样品的目的。
这种分离方法广泛应用于生物医学研究、基因组学和遗传学等领域。
核酸凝胶电泳技术

核酸凝胶电泳技术哎呀,核酸凝胶电泳技术,这玩意儿听起来挺高大上的,其实呢,就是把DNA或者RNA这些小分子给分开的小技巧。
你可能会想,这跟我有啥关系?别急,听我慢慢道来。
我还记得第一次做这个实验的时候,那叫一个手忙脚乱。
实验室里,那些试管、烧杯、各种颜色的液体,还有那个看起来像是外星人科技的电泳仪,都让我有点头晕。
不过,我得说,这玩意儿真的挺神奇的。
首先,你得准备你的样本,也就是那些DNA或者RNA。
我那时候用的是一种叫做琼脂糖的凝胶,它看起来就像是果冻,但是比果冻硬多了。
你把样本和一些染料混合在一起,然后小心翼翼地滴到凝胶上。
这时候,你可得小心,别手抖,不然你的样本就可能跑偏了。
接下来,就是把凝胶放到电泳仪里。
这个电泳仪,说白了,就是个通电的大盒子。
你一通电,那些DNA或者RNA就会因为带电而开始移动。
它们就像是在跑步比赛,但是速度不一样,因为分子大小不同。
小的分子跑得快,大的分子跑得慢。
我记得我那时候,眼睛都贴在那个显示器上了,就等着看那些DNA条带慢慢出现。
你别说,看到那些条带一点点清晰起来,心里那个激动啊,就像是在看一场精彩的比赛。
最搞笑的是,有一次,我不小心把染料弄多了,结果整个凝胶都变成了紫色,看起来就像是外星人的血液。
我导师看了,差点没笑翻过去。
不过,那次实验结果倒是出奇的好,条带清晰得不得了。
说到这儿,你可能会觉得,这玩意儿离我们的生活挺远的。
但其实不是。
比如说,医生用这个技术来检测遗传病,或者研究人员用它来研究病毒。
这就像是给了我们一把钥匙,去打开生命奥秘的大门。
所以,核酸凝胶电泳技术,虽然听起来有点枯燥,但它其实就像是生活中的小插曲,有时候还能带来意想不到的乐趣。
就像那次紫色凝胶的意外,虽然看起来有点滑稽,但它让我对实验充满了好奇和热情。
总之,核酸凝胶电泳技术,就是那种看似普通,实则充满魔力的小技术。
它让我们能够更细致地观察生命的微观世界,也让我们的实验生活多了几分色彩。
下次你再听到这个词,不妨想想我今天给你讲的这个故事,说不定你会对它有新的认识呢。
核酸电泳原理

核酸电泳原理
核酸电泳是一种常用的生物分子分析方法,它通过电场作用下,将带负电荷的核酸分子在凝胶中进行分离和测定。
核酸电泳原理涉及到凝胶电泳、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶等多个方面,下面将对核酸电泳的原理进行详细介绍。
首先,核酸电泳的原理基于核酸分子在电场中的迁移速度与其分子大小和电荷量成正比的规律。
在电场作用下,核酸分子会向电极迁移,迁移速度与核酸分子的大小成反比。
这一原理是核酸电泳能够实现核酸分子的分离和检测的基础。
其次,核酸电泳原理还涉及到凝胶电泳的原理。
凝胶电泳是利用凝胶作为分离介质,通过电场作用下,使得核酸分子在凝胶中进行迁移和分离的方法。
凝胶可以是琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶,其作用是限制核酸分子的自由扩散,使得核酸分子在电场作用下沿着凝胶孔隙进行迁移,从而实现核酸分子的分离。
此外,核酸电泳原理还包括核酸分子的检测和测定。
在电泳过程中,为了观察核酸分子的迁移情况,通常会使用荧光染料或核酸特异性染色剂对核酸分子进行标记,然后通过紫外光或荧光成像系统对核酸分子进行检测和测定。
这样就可以实现对核酸分子的定量和定性分析。
总的来说,核酸电泳原理是基于核酸分子在电场作用下的迁移速度与其分子大小和电荷量成正比的规律,利用凝胶作为分离介质,通过电场作用实现核酸分子的分离和检测。
这一原理为核酸电泳在生物学、医学和生物化学等领域的应用提供了重要的技术支持,对于核酸分子的分离、纯化和分析具有重要意义。
专题三核酸电泳技术
双链DNA的定量分析
一种快捷和灵敏的方法是应用溴化乙锭分子的插入 可通过紫外线照射产生荧光。由于荧光的亮度与 DNA的含量成相关,DNA的含量可通过样品在 590 nm处的光量度与一系列标准品的对照来估算。
凝胶SYBRGold染色法
SYBRGold 是由 MolecularProbes 公司开发的一种新型的极敏感的染料的商 品名称。其与 DNA 结合的亲和力高,并且结合后,能够极大的增强荧光信 号。SYBRGold-DNA复合物产生光子的量比EB-DNA复合物要大的多,同时 其激发的荧光信号强度是 EB-DNA复合物的1000多倍。因此用 SYBRGold染 色可以检测出琼脂糖凝胶中小于 20pg 的双链 DNA( 是 EB 染色最低检测量的 1/25) 。此外,利用 SYBRGold 染色可以检测出广个条带少至 100pg 的单链 DNA 或 300pg 的 RNA 。 SYBRGold 染料的最大激发波长为 495nm 。同时在 300nm有第二个激发峰。其发射的荧光波长为537nm。
DNA大小标准品
通常使用已知分子质量的DNA样品,它们是经限制 性酶消化已知序列的质粒或噬菌体DNA获得的。琼 脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳用的分子质量标准可以 从市场购得,或者实验室自己制备。一般最好有两 套分子质量范围的标准,一个是 1kb 到大于 20kb 的 高分子质量标准,一个是100-1000bp的低分子质量 标准。分子质量标准贮备液用凝胶载样缓冲液稀释 后用于每次电泳实验。
电泳缓冲液
DNA的泳动受电泳缓冲液的组成和离 子强度的影响。缺乏离子 (如用水替代电泳槽及凝胶中 的缓冲液)则电导率降至很低,DNA不是全然不动,就 是迁移极慢。高离子强度时,如错用了 10×电泳缓冲 液,电导率升高,即使应用适中的电压也会产生大量 的热能。最严重时凝胶会熔化,DNA会变性。
核酸电泳转膜
核酸电泳转膜引言:核酸电泳转膜是一种常用的实验技术,用于将电泳分离后的核酸样品转移到膜上进行进一步的分析和检测。
本文将介绍核酸电泳转膜的原理、步骤和应用。
一、核酸电泳转膜的原理核酸电泳转膜是利用电泳原理将核酸样品从凝胶中转移到膜上的过程。
在电泳过程中,核酸在电场的作用下,根据大小和电荷的差异在凝胶中运动,使不同长度的核酸片段分离。
而核酸电泳转膜则是将这些分离好的核酸片段从凝胶上转移到膜上,以便进行后续的检测和分析。
二、核酸电泳转膜的步骤1. 准备工作:首先要准备好电泳仪和电泳槽,并将凝胶装入电泳槽中,然后将核酸样品与染料混合,进行电泳。
2. 电泳:将样品注入凝胶槽中,通电使核酸样品在凝胶中进行电泳分离。
根据核酸片段的大小,电泳时间会有所不同。
3. 转膜:电泳结束后,需将核酸样品从凝胶上转移到膜上。
首先,取出凝胶,然后将膜放置在核酸样品上方,用特定的装置将核酸样品转移到膜上,使核酸与膜接触。
4. 固定:转膜完成后,需进行核酸与膜的固定。
一般采用紫外线照射或化学交联固定方法,以确保核酸牢固地附着在膜上。
5. 后续处理:转膜后的膜可用于进一步的分析和检测。
可以进行杂交、免疫检测、荧光标记等方法来研究核酸片段的性质和功能。
三、核酸电泳转膜的应用核酸电泳转膜广泛应用于分子生物学、遗传学、基因工程等领域。
下面介绍几个常见的应用场景:1. DNA测序:核酸电泳转膜可用于DNA测序结果的分析。
通过将DNA片段转移到膜上,可以进行特定的探针杂交反应,从而确定DNA序列。
2. 基因突变检测:核酸电泳转膜可用于检测基因突变。
将突变基因与野生型基因进行电泳分离后,转移到膜上,并进行杂交或荧光探针检测,可以快速准确地检测出基因突变情况。
3. 基因表达分析:核酸电泳转膜可以用于研究基因的表达情况。
将不同组织或条件下的核酸样品进行电泳分离后,转移到膜上,再进行特定的杂交或探针检测,可以了解基因在不同条件下的表达水平。
4. 分子标记检测:核酸电泳转膜可用于分子标记的检测。
核酸电泳的实验步骤及注意事项
核酸电泳是一种常用的实验方法,用于检测 DNA 或 RNA 的大小、纯度和浓度等信息。
以下是核酸电泳的实验步骤和注意事项:
实验步骤:
1. 准备样品:将待检测的 DNA 或 RNA 样品加入 DNA 或 RNA Load Buffer 中,并彻底混合
2. 加载样品:取一个空的凝胶孔,用微量移液器等工具将混合好的 DNA 或 RNA 样品加载到凝胶孔中。
注意不要将样品液体超过凝胶孔的容积。
3. 运行凝胶:将凝胶盒放入电泳槽中,并加入足够的 TBE 或 TAE 缓冲液,直到凝胶完全浸泡。
连接电源,设置适当的电压和时间,运行电泳。
4. 取出凝胶:电泳结束后,断开电源,小心地取出凝胶,放入凝胶成像仪或紫外线透射仪中进行可视化。
注意事项:
1. 操作过程中要戴手套,避免接触到有害物质,如致癌物质乙酰胺。
2. 加载样品时要注意不要将液体超过凝胶孔的容积,否则会影响电泳效果。
3. 在电泳前要检查电泳槽和电极是否清洁,避免样品受到杂质污染。
4. 运行电泳时要根据样品的大小和预期分离效果来选择适当的电压和运行时间。
5. 在运行电泳时要注意缓冲液的 pH 值和浓度,以及电泳槽内的温度,这些因素会影响电泳效果。
6. 取出凝胶时要小心,避免损坏凝胶。
7. 在凝胶成像时,应注意避免暴露在紫外线下,以保护自己的健康。
核酸电泳操作规范
核酸电泳步骤
1. 制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml): 称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成
1.0%琼脂糖凝胶液.
2. 胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子.将内槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层.室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中。
添加1×TAE 电泳缓冲液至没过胶板1-2毫米为止.
3. 加样:在点样板上混合DNA样品和上样缓冲液,上样缓冲液的最终稀释倍数应不小于1X.用10 ul微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内,每加完一个样品,应更换一个加样头,以防污染,加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面。
4. 电泳:加样后的凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,样品由负极(黑色)向正极(红色)方向移动.电压升高,琼脂糖凝胶的有效分离范围降低.当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳.
5. 电泳完毕后,取出凝胶,用含有0.5 ug/ml的溴化乙锭1×TAE溶液染色约20 min,再用清水漂洗10 min.
6. 观察照相:在紫外灯下观察,DNA存在则显示出红色荧光条带,采用凝胶成像系统拍照保存.。
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➢ 溴化乙锭平面基团的固定位置以及它与碱基的高度临近 使被结合的染料所产生的荧光与在自由溶液状态的染料 相比增强20~25倍。254 nm的紫外线首先被DNA吸收, 然后被传送到染料;而302nm以及366 nm的射线直接被 染料自行吸收。这些被吸收的能量将在590nm的橙红色 可见光谱区以0.3的量子产额被重新释放出来。
双链DNA的定量分析
一种快捷和灵敏的方法是应用溴化乙锭分子的插入 可通过紫外线照射产生荧光。由于荧光的亮度与 DNA的含量成相关,DNA的含量可通过样品在590 nm处的光量度与一系列标准品的对照来估算。
电泳缓冲液
凝胶载样缓冲液
载样缓冲液有三个作用:
➢ 增加样品密度以保证DNA沉入加样孔内; ➢ 使样品带有颜色便于简化上样过程; ➢ 其中的染料在电场中以可以预测的泳动速率向阳极迁移。 ➢ 溴酚蓝在琼脂糖凝胶中迁移速率是二甲苯氰FF的2.2倍,这
一特性与琼脂糖浓度无关。在0.5×TBE琼脂糖凝胶电泳中 溴酚蓝迁移速率约与长300bp的线状双链DNA相同,而二甲 苯氰FF约与长4000bp的DNA相同。上述关系在浓度范围0.5 %~1.4%的琼脂糖凝胶中基本不受浓度变化的影响。用哪 种载样缓冲液是个人的习惯。
溴化乙锭
溴化乙锭首先于20世纪50年代合成成功,主要是作 为一种有效的杀锥虫制剂而发展起来的菲啶化合物。 溴化乙锭在筛选过程中脱颖而出。它的杀锥虫效能 是其母化合物的10~50倍,并对小鼠无毒,且与早 期的菲啶化合物不同,对牛不具有光致敏作用。直 到最近,溴化乙锭在热带及亚热带国家仍被广泛应 用于牛锥虫病的治疗和预防。
溴化乙锭与核酸结合
➢ 溴化乙锭包含一个平面的三环菲啶环,它能插入到双链DNA 堆叠的碱基对之间。当它插入到螺旋结构中,将保持与螺旋 结构纵轴垂直的位置,并在其上下方与碱基对形成范德华接 触。尽管其平面三环结构被包埋,其外围苯基及乙基基团却 伸出插入到DNA双螺旋结构的大沟中。在高离子强度的溶液 中,大约每2.5个碱基对中插入一个分子的溴化乙锭,且与 DNA的碱基组成无关。除沿螺旋纵轴方向发生3.4A的位置偏 移外,碱基对的几何结构和位置相对于螺旋结构并未发生改 变。这使得与溴化乙锭结合达到饱和的双链DNA的长度增加 了27%。
专题三核酸电泳技术
琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是分子克隆的核心 技术之一,它用于分离、鉴定和纯化DNA片段。
该技术操作简单而迅速,并且能分离用其他方法 如密度梯度离心等不能满意分离的DNA片段。 此外,凝胶中DNA的位置可以用低浓度荧光插 入染料如溴化乙锭或SYBRGold染色直接观察到, 甚至含量少至20pg的双链DNA在紫外线激发下 也能直接检测到。需要的话,这些分离的DNA 条带可以从凝胶中回收,用于各种各样的目的。
DNA大小标准品
通常使用已知分子质量的DNA样品,它们是经限制 性酶消化已知序列的质粒或噬菌体DNA获得的。琼 脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳用的分子质量标准可以 从市场购得,或者实验室自己制备。一般最好有两 套分子质量范围的标准,一个是1kb到大于20kb的 高分子质量标准,一个是100-1000bp的低分子质量 标准。分子质量标准贮备液用凝胶载样缓冲液稀释 后用于每次电泳实验。
➢ 大部分商品化的紫外线光源产生302 nm的紫外线。溴化 乙锭-DNA复合物在受到紫外线照射激发所产生的荧光, 在302nm的紫外线下明显要比366nm的要强,但要比短 波紫外线(254nm)的稍弱。然而,302 nm紫外线所造成 染料的光褪色效应以及造成DNA的断裂和缺口明显要 较254nm紫外线少得多。
低熔点/凝点琼脂糖 通过羟乙基化修饰的琼脂糖在较低的温度熔化,
羟乙基化替代的程度决定准确的熔化和凝结温度。低熔点/凝点琼脂糖 主要用于DNA的快速回收,因为大多数该类型琼脂糖在65℃熔化,这个 温度远低于双链DNA的解链温度。这种特性使它还可以用于DNA的简单 纯化和酶处理;在熔化的凝胶中用核酸直接进行细菌转化。化学修饰的 琼脂糖比等浓度的标准琼脂糖有更高的筛分能力。该发现使琼脂糖的分 辨 力接近聚丙 烯酰胺凝胶 ,因此可用 于 PCR产物 、小片段DNA和 小 RNA(<lkb)的分离。现在它能分辨少至4bp的DNA和分离200-800bp范围 内相差2%的DNA片段。
➢ 当需要知道DNA片段的准确大小(如DNA限制酶酶切图谱的鉴定),凝 胶应该在无EB情况下电泳,电泳结束后用EB染色。染色时,将凝胶 浸入含有EB(0.5μg/ml)的电泳缓冲液中,室温下染色30~45 min。染 色完毕后,通常不需要脱色。但是在检测小量DNA(<10 ng)片段时, 通 常要将 染0min更易观察到。
琼脂糖
标 准 ( 高 熔 点 ) 琼 脂 糖 制 造 它 的 原 料 是 两 种 海 藻 , Gelidium 和
Gracilaria。这两种琼脂糖的凝点和熔点有所不同,但是在实际应用中每 种来源的琼脂糖都可以用于分析或分离1-25kb范围的DNA片段。新类型 的标准琼脂糖具有高凝胶强度和低电内渗(EEO),可以灌制浓度低至0.3 %的凝胶。这种凝胶用于电泳能方便地分离高分子质量DNA(直到60kb)。 它在任何浓度下DNA迁移速度均比通用的标准琼脂糖快10%-20%。这一 增加在百万碱基大小DNA的PFGE中将明显地节省时间。
凝胶中DNA的染色
➢ 溴化乙锭被广泛地用于琼脂糖凝胶中DNA片段的定位,通常将它以 0.5μg/ml的浓度被加入到胶中以及电泳缓冲液中。尽管加入溴化乙锭 会导致线性双链DNA的电泳迁移率减慢~15%,但却可在紫外灯下直 接检查凝胶。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光强度要比未结合的染 料强很多,少量的DNA(~10 ng/条带)也能从存在游离状态溴化乙锭 的凝胶中被检测出来。