抗菌防霉试验中标准霉菌的讨论与部分条件因素的比较
建筑材料的抗霉菌与抗菌性能分析
建筑材料的抗霉菌与抗菌性能分析随着人们对健康环境的重视，建筑材料的抗霉菌与抗菌性能变得越来越重要。
本文将就建筑材料的抗霉菌与抗菌性能进行分析，并介绍一些提高这些性能的方法。
一、建筑材料的抗霉菌性能分析霉菌是一种在湿度较高的环境下生长的微生物，不仅对建筑材料的外观造成影响，还可能释放出挥发性有机物，对人体健康产生有害影响。
因此，建筑材料需要具备一定的抗霉菌性能。
1. 抗霉菌性能的测试方法评价建筑材料的抗霉菌性能常采用实验室培养方法。
这种方法通过将建筑材料置于含有霉菌样本的培养基中，观察一定时间后建筑材料是否出现霉菌生长的情况，从而评价抗霉菌性能的好坏。
2. 影响建筑材料抗霉菌性能的因素（1）材料本身的特性：不同材料的抗霉菌性能有所差异。
一些材料具有良好的抗霉菌性能，例如某些防霉涂料、抗菌纤维等。
（2）材料表面的处理：表面处理可以提高建筑材料的抗霉菌性能。
例如，使用抗霉菌剂进行表面涂层处理，形成一层抗霉菌的保护膜。
（3）环境条件：建筑材料在不同的环境条件下抗霉菌性能可能有所差异。
高湿度、低通风的环境更容易导致霉菌生长，因此建筑材料在这种环境下需要更强的抗霉菌性能。
二、建筑材料的抗菌性能分析除了抗霉菌性能外，建筑材料的抗菌性能也很重要。
抗菌材料能够抑制细菌的生长，从而减少疾病传播的风险。
1. 抗菌性能的测试方法评价建筑材料的抗菌性能常采用抑菌试验。
这种试验方法主要通过将细菌接种于建筑材料表面，一定时间后检测细菌的存活率来评价抗菌性能的好坏。
2. 影响建筑材料抗菌性能的因素（1）抗菌剂的添加：在一些材料中添加抗菌剂可以提高抗菌性能。
这些抗菌剂可以抑制细菌的生长，从而达到抗菌的效果。
（2）材料表面的处理：与抗霉菌性能类似，对建筑材料表面的处理也能够提高抗菌性能。
例如，在表面涂层中添加抗菌剂，形成一层抗菌保护膜。
（3）环境条件：建筑材料的抗菌性能在不同的环境条件下可能有所差异。
温度、湿度等环境因素对建筑材料的抗菌性能有一定的影响。
如何检测材料的抗菌防霉性能
如何检测材料的抗菌防霉性能？
抗菌防霉检测是检验抗菌防霉类产品质量是否过关的重要手段。
抗菌防霉检测分为定量检测和定性检测两种。
电器、医用材料、食品、化妆品包装等新材料都有新的抗菌防霉的功能需求，嘉峪检测网已经成功帮助一批生产企业完成了抗菌防霉的实验方案和测试。
下面我们来了解一下测试原理。
1、抗菌产品定量检测
定量检测的原理是将标准菌株定量接种于抗菌产品后，经过一定时间的培养，抗菌产品抑制或杀死标准菌株；而没有经过抗菌处理的对照样品接种标准菌株后，接种菌不会受到抑制或杀死，因此，根据测试菌数量的减少率可以定量评价抗菌效果。
根据检测方法和计算方法的不同，计算结果又可以分为抑菌率和杀菌率（对应杀灭对数值）。
在定量检测法中，根据测试菌液接种到试样上的方式不同，可分为振荡法、吸收法、悬液定量法、载体法等。
定量测试方法包括试样（包含对照样）制备、消毒、接种标准菌株、培养、一定时间后对接种菌进行回收并计数。
定量测试方法的优点是定量、准确、客观，缺点是时间长、费用高。
2、抗菌产品定性检测
定性检测原理是通过将抗菌样品与标准菌株以及琼脂相接触，经过一段时间培养，观察琼脂接触面有无微生物生长，以此来判断样品是否具有抗菌性能。
定性检测的优点是测试时间短、测试费用较低；但该试验不能定量测试抗菌产品抗菌活性的强弱，只能判定产品有无抗菌性能，而且测试重复性及稳定性相对较差。
3、防霉产品定性检测
按标准类型分类。
两种霉菌试验标准的剖析和试验结果的比较
两种霉菌试验标准的剖析和试验结果的比较两种霉菌试验标准的剖析和试验结果的比较武器装备在寿命期内会遇到霉菌的侵扰，霉菌生长造成的故障是各种武器装备重要故障模式之一。
为了确保设计和制造的武器装备符合防霉要求，霉菌试验已成为检验武器装备是否符合防霉要求的最有效手段，霉菌试验的结果也能为产品改进耐霉菌设计和制造工艺提供依据。
本文将能通过对霉菌试验的机理进行剖析及对GJB4.10-83《舰船电子设备环境试验霉菌试验》和GJB150.10-86《军用设备环境试验方法霉菌试验》两个试验标准的异同进行分析比对，探讨两个标准的相互可替代性。
霉菌对武器装备的危害和影响机理：霉菌是在自然界分布很广的一种微生物，它广泛存在于土壤、空气中。
在湿度大和温度高的南方湿热地带，霉菌极易生长繁殖，使军用装备内外表面大量长霉，不仅影响装备的工作，降低装备的战斗能力和出勤率。
二战期间，美军大量的电子设备在热带丛要林中长霉失效，就是一个严重的教训。
据有关资料统计，美国空军每年用于与腐蚀有关的检查和修理费用约占总维修费的四分之一，其中霉菌是腐蚀的重要因素之一。
霉菌对武器装备的影响机理包括破坏效应、物理效应和健康美学效应三个方面。
如下所见：霉菌对武器装备的影响效应种类：破坏影响破坏方式：直接、间接效应说明：直接-——不抗霉材料容易被霉菌分解并作为食物而直接受到破坏。
这种影响会导致材料物理性能的破坏。
间接——生长在积秀灰尘、油脂汗渍等污染物的表面的霉菌，能够损坏底材，甚至可能通过底材直接侵蚀抗霉材料；霉菌分泌代谢的产物腐蚀金属、刻蚀玻璃、引起塑料或其他材料的发暗或降解；与易长霉材料相邻的霉菌生成物会直接侵蚀抗霉材料。
主要影响对象：直接——不抗霉材料；天然材料(植物纤维材料；动物基和植物基粘合剂；油脂、油和许多炭氢化合物；皮革等)；合成材料(含聚氯乙稀的组分；某些聚氨酯类；作为层压材料有机填料的塑料；含有易长霉组份的颜料和油漆等)间接——各种抗霉材料效应种类：物理影响破坏方式：直接或间接、间接效应说明：直接或间接——霉菌生长的菌丝构成生物电桥。
环境条件对霉菌生长的影响
9.化学药剂
2．卤化物 ❖ 杀菌力高低顺序是：F>C1>Br>I，最常用的是碘和氯。 ❖ 碘 碘不可逆地与菌体蛋白质(或酶)的酪氨酸结合，
生成二碘酪氨酸，使菌体失活。常用于皮肤消毒。 ❖ 氯 氯与水结合成次氯酸，后者易分解产生新生态
氧，为强氧化剂，常用于饮水和游泳池水消毒。 Cl2+H20——→ HCl+ HCl0
霉菌的碳源谱
类
元素水平
型
C·H·O·N·X
有机 碳
C·H·O·N C·H·O
无机 C·O·X 碳
化合物水平
培养基原料水平
复杂蛋白质
多数氨基酸，简单蛋 白质 糖、有机酸、醇、脂 类等 NaHCO3、CaCO3等
牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉 等 一般氨基酸、明胶等
葡萄糖、蔗糖、各种淀粉、 糖蜜等 NaHCO3、CaCO3、白晋等
6.超声波
❖ 可闻声波的频率范围是20Hz-20000Hz．低于 20Hz的声波为次声波，高于20000Hz的声波为 超声波。超声波对菌体有极强烈的致死作用， 使细胞裂解而死亡。
❖ 超声波杀菌机制尚未完全明了，杀菌作用与 菌体细胞大小、形状、菌数及悬浮液体积、 作用时间等有关，一定频率超声波对菌体有 刺激生长，促进某些生理过程的作用。
Na NaCl
ห้องสมุดไป่ตู้
维持渗透压
Ca Ca(NO3)2、CaCl2 某些胞外酶的稳定剂、蛋白酶的辅因子；某些真菌形成孢子 所需
Mg MgSO4 Fe FeSO4
某些酶的活性成分，维持细胞膜、核糖体结构的稳定性
细胞色素和细胞色素氧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶的成 分
Mn MnSO4
超氧化物歧化酶、蛋白激酶、RNA聚合酶、腺苷酸环化酶等的 辅因子
霉菌试验标准和条件
二、霉菌试验方法:
1、霉菌试验得分类:
♦天然暴露试验:直接暴露在选定得湿热环境中。有室内、室外得暴露试验与埋土试验得方法、
低温与霉菌
低温影响霉菌得生长。在零度以下,霉菌保持在假死状态
霉菌试验得定义
♦霉菌试验就是气候环境试验得一个项目。用于考核产品或材料抵抗霉菌侵袭得能力。它于一般环境试验一样,考虑产品在实际运输、储存或使用中,最易遭受霉菌危害得环境条件,在试验室中用人工模拟创造霉菌生长最适宜环境进行试验、
霉菌试验得目得
8、试验周期
耐霉性很差或生霉迅速得试验7—14天
耐霉或生霉缓慢得试品3—4个星期
对样品外观检查时2８天
对性能检查时84天
9、霉菌试验中得灭菌问题
霉菌试验中得灭菌问题,就是霉菌试验当中得一个关键问题,灭菌得彻底与否,将直接影响试验结果得准确程度,也就就是能否确切反映霉菌试验得真实情况,关系到试验结果得可靠性、目前霉菌试验所用得灭菌方法大致可以分为热力灭菌、化学灭菌及物理方法等三类。
♦试验室人工加速试验:常用有湿室悬挂法与无机盐琼脂平皿法、
2、菌种得选择
♦黑曲霉
♦黄曲霉
♦杂色曲霉
♦绳状青霉
♦球毛壳霉
3、试验样品得准备
♦霉菌试验不得采用经过盐雾、沙尘等试验得试品。
♦试验样品一般不进行清洁处理。
♦试验样品在受试前需要进行外观检查,特别注意污染表面,缺陷及存在得其她任何于霉菌生长得状况,并作详细记录。
♦风速
温度控制
♦对于恒定得霉菌试验,温度控制在29±1°C;
家具抗菌防霉性能的检测探究
家具抗菌防霉性能的检测探究摘要：家具作为现代社会居民日常生活中经常接触的物品，若其表面含有大量的细菌，则会导致现代社会居民的身体健康受到影响，同时，若家具防霉性能较差，则很容易导致家具长霉，进而会导致家具材料受损，且会导致霉菌中的有害物体损伤使用者的身体健康，因此，做好家具的抗菌防霉性能检测是十分有必要的。
基于此，本文主要研究家具抗菌防霉性能的检测，希望对相关人员有所启示。
关键词：家具；抗菌性能；防霉性能；检测技术引言：家具产品的安全质量直接影响着现代社会居民的身体健康，同时对现代社会居民的使用舒适度也会产生直接的影响，因此，在家具上市之前，均会进行抗菌防霉检测。
本文开展了对家具抗菌防霉性能检测的研究，分别从致病菌检测、螨虫检测、抗菌性能检测及防霉性能检测的角度来分析，以期进一步提升我国家具抗菌防霉性能检测技术水平。
一、家具中潜在的细菌危害家具是保证现代社会居民日常生活基本需求的重要工具，就目前情况而言，每一个家庭都有不同种类、功能的家具，但实际上，家具中存在一些细菌物质，这些空气物质会伴随着居民接触家具而传播到居民体内，同时，这些细菌物质也能够通过空气传播，当空气中细菌物质达到一定浓度时，将会危害人体，由此可见，家具中潜在的细菌物质危害性较大。
据笔者调查研究显示，家具中潜在的细菌物质主要包括大肠杆菌、霉菌、黄金色葡萄球菌等，若身体摄入过多的细菌则会出现流感、结核等疾病。
通常情况下，家具中潜在的细菌常出现在软体家具中，如软木地板、纺织品等，且家具中存在的细菌与家具的清洁度有着直接的关系。
为了保证现代社会居民的身体健康，在家具材料进入市场销售之前，均需要进行抗菌防霉性能的检测，但就目前情况而言，在家具抗菌防霉性能检测技术中还存在一些问题，其中最主要的便是检测范围不够全面。
实际上，家具材料中不仅只有微生物能够对人体产生危害，会影响家具的抗菌防霉性能，臭虫、白蚁、螨虫等也会对家具的抗菌防霉性能产生影响。
抗菌防霉测试实验报告
一、实验目的本实验旨在通过对不同材料的抗菌防霉性能进行测试，评估其对于细菌、真菌等微生物的抑制效果，为电子电气产品、家居用品等领域的材料选择提供科学依据。
二、实验材料与设备1. 实验材料：- 涂料：塑料、木材、不锈钢等- 细菌：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）- 真菌：白色念珠菌（Candida albicans）、黑曲霉（Aspergillus Niger）2. 实验设备：- 培养箱- 高压蒸汽灭菌器- 电子天平- 显微镜- 试管- 移液器三、实验方法1. 细菌和真菌的培养：- 将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃培养24小时。
- 将白色念珠菌和黑曲霉接种于沙堡培养基中，25℃培养48小时。
2. 抗菌防霉测试：- 将待测材料切成相同大小的片状，用无菌生理盐水清洗表面，干燥后备用。
- 将细菌和真菌的菌液用移液器分别接种于待测材料表面，37℃和25℃分别培养24小时和48小时。
- 观察材料表面是否有细菌和真菌的生长，并用显微镜进行定量分析。
3. 数据处理：- 计算待测材料对细菌和真菌的抑制率，抑制率=（对照组菌落数-实验组菌落数）/对照组菌落数×100%。
四、实验结果1. 细菌抑制率：- 塑料材料对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制率分别为95%和90%。
- 木材对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制率分别为80%和70%。
- 不锈钢对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制率分别为100%和95%。
2. 真菌抑制率：- 塑料材料对白色念珠菌和黑曲霉的抑制率分别为85%和80%。
- 木材对白色念珠菌和黑曲霉的抑制率分别为75%和70%。
- 不锈钢对白色念珠菌和黑曲霉的抑制率分别为100%和95%。
五、实验讨论1. 本实验结果表明，不锈钢的抗菌防霉性能最好，其次是塑料，木材的抗菌防霉性能较差。
2. 在实际应用中，应选择具有良好抗菌防霉性能的材料，以降低细菌和真菌对产品性能和人体健康的危害。
霉菌试验标准和条件
霉菌试验
一、概述
二、霉菌的试验方法
三、防霉措施
四、有关标准
概述
霉菌的危害
霉菌试验的定义
霉菌试验的目的
霉菌对材料和产品的影响
直接危害是霉菌生长食取材料中的有机成分，直接导致结构破坏、强度降低、物理性质变化等。间接危害是霉菌分泌的新陈代谢排泄物有机酸和其他离子化合物，造成电解或老化效应，某些触媒剂，还促成氧化或分解作用的发生，间接导致材料及部件的损坏。长霉造成的故障模式：
风速控制
风速控制试验设备工作空间的风速，控制在s—2m/s之间。试验箱(室)的风速应保证试验箱内温、湿度的均匀。如果风速过小，箱内会产生温度梯度影响霉菌的生长；风速过大，会将孢子吹落使悬挂的试品晃动抖掉孢子，尤其在孢子萌发的初期更严重。
5、试验过程中的检查
前七天，是霉菌孢子生长发育的关键时期.七天后检查对照样品长霉情况，长霉覆盖面积达90％以上时，说明试验条件适宜，否则说明试验条件不适宜，试验应重新进行。
（7）有外壳的产品，应定期进行清理，除去可供霉菌生长的营养物质如灰尘和污垢，以防止产品长霉和损坏。
（8）．自然通风容易积聚灰尘，所以产品内部易于积聚灰尘的部位应有足够适度的空气流，以阻止霉菌的生长。
（9）为了防止产品在运输和贮存过程中长霉可以采用防潮包防霉包装。
（10）如材料和产品允许时，也可用紫外线或臭氧法灭菌。
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抗菌防霉试验中标准霉菌的讨论与部分条件因素的比较张继忠;王薇【摘要】Six molds (Aspergillus niger,Aspergillus flavus,Trichoderma viride,Penicillium citrinum,Aureobasidium pullulans,Chaetomium globasum) were chosen for making spore suspensions and then divided into two parts.One part was centrifuged and the other was not centrifuged.Under above two conditions,the antimicrobial tests with the tested substrates including wood,rubber,paint and plastic were conducted in the incubator for 28 days in simulated environment (constant temperature and constant humidity),and were observed during 7 d,l0 d,20 d and 28 d.The results indicated that there were no obvious differences of fungus growth between un-centrifuged spore suspension and centrifuged spore suspension.%选取黑曲霉、黄曲霉、桔青霉、出芽短梗霉、球毛壳霉和绿色木霉这六个霉菌的孢子悬浮液,在未离心和已离心两个条件下,对木板、橡胶、涂料和塑料四种受试底物在模拟环境(恒温恒湿环境)下分别培养28 d,并观察7d、10 d、20 d和28 d的结果.结果表明,未离心的孢子悬浮液和已离心的孢子悬浮液对受试底物的长霉等级没有明显的影响.【期刊名称】《工业微生物》【年(卷),期】2018(048)001【总页数】5页(P49-53)【关键词】霉菌;孢子悬浮液;离心;血球计数板【作者】张继忠;王薇【作者单位】上海市医药学校,上海200135;上海工微所科技有限公司,上海200233【正文语种】中文抗菌防霉作为一种重要的检测手段正起着越来越重要的作用，尤其对于轻工材料、纺织、电子和日化等产业及其制品的开发、改进都可以提供数据、建议，为改善人们的生活做出贡献。
在抗菌防霉的检测工作中，会碰到很多问题，其中以下三个问题尤其关键：培养基的pH控制、培养箱的温湿度控制和孢子悬浮液的浓度掌控。
1 影响防霉抗菌检测的三个因素：1.1 培养基的pH值控制每种微生物都有各自要求的最适宜pH 和能适应的pH 范围，在这些范围里，微生物能最大限度的生长繁殖[1]。
细菌、放线菌等最适pH为6.5～7.5，生存限度的pH 在4～10之间；酵母菌、霉菌的最适pH为3～6，而生存限度的pH 在1.5～10之间[2]。
因此在配制培养基时一定要根据所培养的微生物调节pH，达到微生物所需的最适范围，不影响其生长繁殖从而不影响检测结果。
1.2 培养箱的温湿度控制温度对微生物的生长繁殖影响很大。
其影响表现在随着温度升高，细胞中的生物化学反应加快；组成细胞的蛋白质、核酸等都对温度很敏感，随着温度升高，这些物质的立体结构受到破坏从而抑制微生物生长，甚至死亡[3]。
因此只有在一定的温度范围内，微生物的代谢活动和生长繁殖才会随着温度的升高而增加，超出此范围则不利于微生物的生长繁殖。
一般在本实验室，细菌的培养温度为30 ℃～37 ℃，酵母菌、霉菌的培养温度为24 ℃～28 ℃[4]。
水分是微生物最基本的营养要素[5]。
微生物的细胞中含有大量水分，例如细菌的含水量平均为80%(73.35%～87.7%)，酵母菌的含水量平均为75%(54.0%～83.0%)，霉菌的含水量为85.79%～88.32%，霉菌的孢子含水量为38.87%，需水量的多少随微生物的种类而不同，一般来说对于水分的需要量是细菌>酵母菌>霉菌[6]。
在本实验室，做防霉检测时我们的湿度控制一般在95%～98%，我们会每日做好监控，以达到实验要求，一旦发现异常立刻调整。
1.3 孢子悬浮液在抗菌防霉实验中，菌悬液的制备是重中之重。
以霉菌为例：霉菌通常用孢子试验，孢子悬浮液的制备方法是用一定量的三角烧瓶，注入一定量的缓冲液，同时放入少许玻璃珠，塞上棉塞，用绒布或纱布包住瓶口于高压灭菌锅灭菌，冷却，待用。
在生物安全柜内用接种环轻轻刮取霉菌斜面上的孢子，放入上述三角瓶内，振荡数分钟，使孢子充分分散，悬浮于水中，即成孢子悬浮液。
但是，在实验过程中发现每个标准对于孢子悬浮液是否需要离心、离心的转速、离心的时间的规定都不一样，因此拟通过以下实验来检验未经过离心的孢子悬浮液和经过离心的孢子悬浮液进行防霉实验，验证这两种孢子悬浮液对于防霉实验中的长霉等级有何影响。
2 材料与方法：2.1 对于实验霉菌的选择查阅了大量的防霉性能试验标准，发现使用的最多的就是黑曲霉、黄曲霉、桔青霉、绿色木霉、出芽短梗霉和球毛壳霉。
而菌种编号每个标准不一样，因此选取的是最常用的那些菌种编号。
以下为本实验使用的菌种和菌种编号：黑曲霉 Aspergillus niger AS3.3928黄曲霉 Aspergillus flavus AS3.3950绿色木霉 Trichoderma viride AS3.2942桔青霉 Penicillium citrinum M42出芽短梗霉 Aureobasidium pullulans AS3.3984球毛壳霉 Chaetomium globasum AS3.42542.2 对于受试底物的选择根据GJB150.10A-2009(《军用装备实验室环境试验方法：第10部分：霉菌试验》、GB/T 11606-2007(《分析仪器环境试验方法》)、GB/T 2423.16-2008(《电工电子产品环境试验第2部分：试验方法实验J及导则：长霉》)中霉菌对受试物的影响，可归纳总结为以下表格1：表1 霉菌菌种对于受试物的影响菌种名称受影响的材料黑曲霉织物，乙烯树脂，敷形凃覆，绝缘材料等许多材料；对铜盐有抵抗性黄曲霉皮革，织物桔青霉木材绿色木霉塑料，织物，木材出芽短梗霉塑料，橡胶，涂料，蜡克漆球毛壳霉纤维素塑料、橡胶、涂料、木板是最常见的受试底物，而且结合表1可以归纳总结，这四种受试底物是合适的，而滤纸作为阴性对照是必不可少的[7]。
2.3 孢子悬浮液的制备孢子悬浮液的制备方法参考GB/T 1741-2007(《漆膜耐霉菌性测定法》)、LY/T1926-2010(《抗菌木(竹)质地板抗菌性能的检测方法与抗菌》)中孢子悬浮液的制备方法制备。
6种菌种分别用6个装有缓冲液与玻璃珠的三角烧瓶得到6个菌种的孢子悬浮液，经过滤得到澄清的孢子悬浮液分别静置5 min、10 min和15 min，用血球计数板时先混匀再在显微镜下观察算出这6个孢子悬浮液的浓度，达到GB/T 18261-2013中对孢子悬浮液的要求，然后混合在一起，得到了混合的孢子悬浮液A。
再次用同样的6种菌得到6个孢子悬浮液，经过滤得到澄清的孢子悬浮液，再用离心机分离沉淀孢子，去上清液，再加入40 mL的无菌洗液，重复操作离心3次，离心速度为3 000 r/min、4 000 r/min和5 000 r/min，离心时间为5 min、10min和15 min。
离心后的孢子悬浮液混匀后用血球计数板在显微镜下观察算出这6个孢子悬浮液的浓度，达到GB/T 18261-2013中对孢子悬浮液的要求，然后混合在一起，得到了混合的孢子悬浮液B。
2.4 血球计数板法血球计数板法是将孢子悬浮液放在血球计数板与盖片之间的计数室中，在显微镜下进行计数，由于计数室的容积是一定的，所以可以根据在显微镜下观察到的孢子数目来计算单位体积的孢子总数。
取洁净干燥的血球计数板盖上盖玻片，将未离心和已离心的6种孢子悬浮液分别用无菌滴管曲孢子悬浮液1小滴滴于盖玻片的边缘处(不宜过多)，让滴液自行渗入计数室中，注意不可有气泡产生。
若有多余液滴，可用吸水纸吸干，静置5 min，待孢子沉降。
用低倍镜头和高倍镜头观察，由于孢子悬浮液的孢子在血球计数板上处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而计数时必须逐格调动微调螺旋，才能不使之遗漏，如孢子位于格的线上，数上线不数下线，数左线不数右线。
使用25×16规格的计数板计数，需要计四个角上的4个中格外，还需要计中央1个中格的数目，每个样品重复观察计数不少于2次，然后取其平均值。
计算公式如下：孢子悬浮液浓度稀释倍数由以上公式通过血球计数板可以得到：表2 不同霉菌在3 000 r/min时孢子悬浮液浓度关系(CFU/mL)离心速度与时间菌种3000r/min0r/min5min10min15min静置5min后混匀静置10min后混匀静置15min后混匀黑曲霉3．1×1064．4×1066．7×1066．5×1062．4×1062．6×106黄曲霉2．0×1066．3×1066．1×1063．0×1062．1×1061．3×106绿色木霉1．6×1067．0×1067．5×1062．3×1062．6×1063．2×106桔青霉8．9×1063．0×1066．1×1067．8×1062．9×1063．9×106出芽短梗霉3．3×1062．8×1065．1×1062．5×1061．2×1061．9×106球毛壳霉6．5×1051．3×1054．3×1051．1×1051．4×1051．9×105表3 不同霉菌在4 000 r/min时孢子悬浮液浓度关系(CFU/mL)离心速度与时间菌种4000r/min0r/min5min10min15min静置5min后混匀静置10min后混匀静置15min后混匀黑曲霉5．8×1065．3×1068．1×1064．9×1067．2×1062．2×106黄曲霉2．9×1061．5×1069．4×1063．9×1063．5×1062．3×106绿色木霉7．1×1062．7×1066．3×1068．5×1061．1×1066．5×106桔青霉4．0×1065．5×1061．2×1061．2×1061．7×1065．0×106出芽短梗霉2．8×1061．8×1061．4×1062．0×1063．4×1061．9×106球毛壳霉3．8×1053．0×1056．5×1054．8×1054．4×1052．0×105表4 不同霉菌在5 000 r/min时孢子悬浮液浓度关系(CFU/mL)离心速度与时间菌种5000r/min0r/min5min10min15min静置5min后混匀静置10min后混匀静置15min后混匀黑曲霉2．9×1064．9×1065．0×1066．0×1065．4×1066．9×106黄曲霉3．2×1062．2×1064．9×1064．0×1065．5×1062．2×106绿色木霉2．7×1062．4×1064．2×1065．0×1061．5×1061．5×106桔青霉6．2×1066．8×1068．0×1064．0×1065．5×1062．2×106出芽短梗霉1．0×1064．8×1061．5×1069．0×1061．5×1061．2×106球毛壳霉7．3×1054．5×1055．0×1054．0×1053．5×1052．1×105从表2、表3和表4可以看出，已离心的孢子悬浮液和未离心的孢子悬浮液在数量级上没有变化，说明已离心的孢子悬浮液和未离心的包子悬浮液没有差别，可以说对于防霉测试中的长霉等级也没有影响，因为长霉等级只是判定物体上是否长霉而不是计算物体上有多少霉菌。