尿素检验标准操作规程
尿素检测步骤
y-吸光度x-尿素浓度（g/L）
尿素浓度为：
x= ×稀释倍数（g/L）
3.操作步骤
（1）取5mlDMBA溶液加入到25ml比色管中，用水稀释到刻度，做为空白样。
（2）尿素含量大于2%的时候，稀释500倍
用1ml移液管吸取1ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。然后吸取稀释后溶液5ml，加入25ml比色管中，加入5mlDMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min。以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。
（3）尿素含量小于2%的时候，稀释100倍
用5ml移液管吸取5ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。然后吸取稀释后溶液5ml，加入25ml比色管中，加入5mlDMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min。以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。
4.计算
标准曲线为：
尿素检测步骤
1.原理：
DMBA与尿素反应生成黄色的对二甲胺基甲醛脲，此物质的颜色深度与溶液中尿素含量成正比，因此可以通过测定在一定波长下反应溶液的吸光值来定量溶液中的尿素浓度（该反应需要在酸性条件下进行）。
2.试剂：
对二甲胺基苯甲醛(ＤＭＡＢ)溶液(浓度0.0975ｍｏｌ/Ｌ):溶解8.0ｇＤＭＡＢ于500ｍＬ无水乙醇中,加50ｍＬ盐酸。
血清尿素的测定标准操作规程
血清尿素的测定标准操作规程【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法，了解其意义。
【原理】血清尿素（Urea）是蛋白质的正常代谢产物。
它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。
肾性血清尿素含量增加，提示肾小球损伤。
是研究药物肾毒性的重要指标之一。
【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水【动物】家兔2只【方法】取家兔2只，1只注射氯化高汞5ml/kg（0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg)，另1只注射等量的生理盐水。
48小时后，从家兔耳静脉取血1ml，制取血清，按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。
【结果】记录2只家兔血清尿素含量，比较并分析其差别。
附血清尿素(Urea)测定方法【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热，缩合生成色素原二嗪化合物。
因二乙酰不稳定，不宜直接加入，可由化学反应生成。
通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用，产生乙二酰。
二乙酰和尿素反应，缩合生成红色的二嗪。
根据颜色深浅确定尿素含量的多少。
【试剂】(1)酸性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。
冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。
溶解后用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中冰箱保存，可稳定6个月。
(2)二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml，溶解后，再用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中，贮放冰箱内可保存半年。
(3)尿素标准贮存液（100mmol/L）:称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g，溶解于蒸馏水中，并稀释至100ml，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内可稳定半年。
(4)尿素标准液应用液(5mmol/L)：取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml.【操作】按表T4-1进行混匀后，置沸水中加热12分钟，置冷水中冷却5分钟后，用分光光度计在波长540nm，以空白管调至零点。
比色读取标准管及测定管的吸光度。
尿素分析规程
一、尿素及其测定方法1、总氮含量的测定1.1蒸馏后滴定法1.1.1原理有硫酸铜存在下，在浓硫酸中加热使试料中酰胺态氮转化为氨态氮，蒸馏并吸收在过量的硫酸溶液中，在指示液存在下，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定剩余的酸。
1.1.2试剂和溶液1.1.2.1五水硫酸铜1.1.2.2氢氧化钠溶液：450g/L1.1.2.3甲基红——亚甲基蓝混合指示液1.1.2.4硫酸溶液：C（1/2H2SO4）＝0.5或1.0mol/L1.1.2.5氢氧化钠标准滴定溶液：C（NaOH）＝0.5mol/L1.1.2.6硅脂1.1.3仪器带标准磨口的成套仪器，包括1.1.3.1蒸馏烧瓶：1L1.1.3.2单球防溅球管和顶端开口、容积约50ml与防溅球进出口平行的圆筒形滴液漏斗1.1.3.3直形冷凝管：有效长度约400mm1.1.3.4接受器：容积500ml的锥形瓶，瓶侧连接双连球。
1.1.3.5梨形玻璃漏斗1.1.3.6防溅棒1.1.4分析步骤1.1.4.1试液制备称量约5g实验室样品（精确至0.001g），移入500ml锥形瓶中，加入25ml水、50ml硫酸、0.5g硫酸铜，插上梨形玻璃漏斗，在通风橱内缓慢加热，使二氧化碳逸尽，然后逐步提高加热温度，直至冒白烟，再继续加热20min后停止加热，待锥形瓶中试液充分冷却后，小心加入300ml水，冷却。
把锥形瓶中的试液，定量移入500ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
1.1.4.2蒸馏从量瓶中移取50.0ml试液于蒸馏烧瓶中，加入约300ml水，4～5滴混合指示液，放入一根防溅棒，聚乙烯管端向下。
用滴定管、移液管或自动加液器加40.0ml【C（1/2H2SO4）＝0.5mol/L】或20.0ml【C（1/2H2SO4）＝1.0mol/L】硫酸溶液于接受器中，加水使溶液量能淹没接受器的双连球瓶颈，加4～5滴混合指示液。
用硅脂涂抹仪器接口，按图装好蒸馏仪器，并保证仪器所有连接部分密封。
通过分液漏斗向蒸馏烧瓶中加入足够量的氢氧化钠溶液，以中和溶液并过量25ml，应当注意，滴液漏斗内至少存留几毫升溶液。
2023年尿素分析室安全操作规程
2023年尿素分析室安全操作规程第一章总则第一条为了确保尿素分析实验室的安全，保护实验人员的生命财产安全，防止实验室事故的发生，制定本规程。
第二条尿素分析实验室的安全操作规程适用于所有在实验室从事尿素分析工作的人员。
第三条尿素分析实验室应设立安全管理员，负责制定和管理实验室的安全操作规程，监督和指导实验人员的安全工作。
第四条实验人员应参加必要的安全培训，掌握安全操作知识和技能，遵守实验室的安全规章制度，提高安全意识，做到安全第一。
第二章实验室安全管理第五条尿素分析实验室应设置完善的实验室安全管理制度，并将其制定成文件，供实验人员参阅。
第六条实验室应保持干燥、清洁、整齐，保证通风良好，严禁在实验室内吸烟、闲聊等行为。
第七条实验人员应熟悉实验室的布局和位置，掌握实验室安全出口的位置。
第八条实验人员进入实验室前应佩戴防护服、护目镜、手套等个人防护装备，确保人身安全。
第九条实验室内不得存放易燃、易爆、毒害性强的化学品，严禁将热源等危险物品带入实验室。
第十条实验室内的化学品应按照分类进行储存，同时使用容器上应明确标识化学品的名称和性质。
第三章实验操作安全第十一条实验人员在进行尿素分析实验前需准备好所需的试剂和仪器设备，并检查其状态是否正常。
第十二条实验人员进行尿素分析实验时，应注意实验室内的温度和湿度，确保实验条件的稳定。
第十三条实验人员操作仪器设备时，应按照操作规程进行，严禁违规操作，如私自拆卸、改装等。
第十四条在实验过程中，实验人员应集中注意力，不得与他人交流、玩手机等分散注意力的行为。
第十五条接近实验物质和试剂时，实验人员应佩戴防护手套、护目镜等个人防护装备，避免直接接触。
第十六条对于发生泄露、破损或事故的试剂和设备，实验人员应及时报告安全管理员，并采取相应的措施进行处理。
第四章实验室事故应急处理第十七条在实验室发生火灾、泄漏、爆炸等紧急情况时，实验人员应立即按照应急预案采取相应的防护措施，确保自身安全。
尿素检验操作规程
1.目的：规范尿素检验操作，保证尿素的质量。
2.范围：适用于本公司车间用尿素的检验。
3.责任：质量管理科、中心化验室主任、检验员对本规程的实施负责。
4.检验依据：GB2441.1-20015.取样依据：按《原辅料取样标准操作规程》取样。
6.内容:6.1 外观：无色结晶或白色结晶性粉未。
6.2 鉴别◆溶剂：硝酸为分析纯；水为纯化水；◆测定方法：取本品0.1g, 加水1ml溶解后，加硝酸1ml，即生成白色结晶性沉淀。
6.3 含量◆试剂与溶液3%硫酸铜溶液、硫酸、20%NaOH溶液、4%硼酸溶液、甲基红指示液、0.2mol/L 盐酸标准液、锌粒◆仪器与设备电子天平、凯氏烧瓶、蒸馏瓶、冷却器、电炉、锥形瓶、滴定管◆操作方法取本品约0.15g，精密称定，置凯氏烧瓶中，加水25ml、3%硫酸铜溶液2ml与硫酸8ml；缓缓加热至溶液呈澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷，加水100 ml，摇匀。
沿瓶壁缓缓加20%氢氧化钠溶液75ml，自成一液层，加锌粒0.2g，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，并将冷凝管的末端伸入盛有4%硼酸溶液50ml的500ml锥形瓶的液面下；轻轻摆动凯氏烧瓶使溶液混合均匀，加热蒸馏，俟氨馏尽，停止蒸馏；馏出液中加甲基红指示液数滴，用盐酸标准液(0.2mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。
每1ml的盐酸液(0.2mol/L)相当于6.006mg的CH4N2O。
◆计算公式含量%= (V样－V空)·C×0.03003×F ×100%G式中：C——盐酸标准液之摩尔浓度(mol/L)V空——空白所耗标准液之体积(ml)V样——样品所耗标准液之体积(ml)G——样品重(g)F——力价◆结果判定若测得的结果不低于95.0%,则判定为符合规定;否则,判定为不符合规定。
7.文件变更历史:。
尿素检测标准操作规程SOP
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
α-酮戊二酸
13.0mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
340nm
辅助波长
405nm
反应方法
速率法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
200ulቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样本
2.5ul
4.1生理性：高蛋白饮食可引起血尿素浓度和尿液排出量显著增高。成人血清尿素浓度男性比女性平均高出0.3-0.8mmol/l，并随着年龄增加有增高倾向。妊娠妇女由于血容量增加，尿素浓度比非孕妇低。
4.2病理性：分为肾前性、肾性、肾后性。①肾前性:主要是严重失水引起的血液浓缩，肾血流量減少及肾小球滤过率降低，从而使尿素潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻;②肾性:为最常见的因素，可见于急性肾小球肾炎、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全的代偿期可见尿素轻度升高(＞8.0mmol/L)，肾功能衰竭失代偿期，尿素可中度升高(17.9～21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.0umol/L);尿毒症时尿素＞21.4mmol/L，肌酐也可达1800umol/L，为尿毒症的诊断标准之一;③肾后性:如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素升高。血液尿素减少较为少见，除了妊娠、蛋白质营养不良等情況外。常表示有严重的肝病、肝坏死。
12.2尿素氮测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（0.3-35.7）mmol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（0.3-10.0）mmol/L范围内，线性偏差应≦2.0mmol/L;（10.0-35.7）mmol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
血清尿素尿素氮(UreaBUN)测定标准操作程序SOP文件
CALIBRATION METHOD [ LINEAR ]
POINT(3) [ 0 ]
CALIBRATION POINT [ 2 ]
POINT(4) [ 0 ]
SPAN POINT [ 2 ]
WAVELENGTH(PRIMARY) [ 340 ]
DUPLICATE LIMIT(%) [ 6 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ -22 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
SE(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 20000 ]
R.VOLUME(R3) [ 110 ]
来源：Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-19
血清尿素/尿素氮（Urea/BUN）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
9.2在测定过程中，各种器材和蒸馏水应无氨离子污染，否则结果偏高。GLDH的测定会在反应杯中残留氨，会干扰到UREA/BUN的检测。因此不能将此两个项目安装在一起。
9.3血氨升高可使尿素结果升高。尿液中，内生得氨也会干扰UREA/BUN的检测。在酸性条件下，检测结果也会偏高。
9.4仅应用于体外诊断。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-19
血清尿素/尿素氮（Urea/BUN）测定
尿素氮测定的标准操作规程
尿素氮测定（速率法）1：概述尿素是人体内蛋白氮代谢的终产物，它构成了血液中绝大部分的非蛋白氮.尿素产生于肝脏，经过肾脏排泄至尿中，因此尿素的含量取决于蛋白质的摄入量，蛋白质分解代谢和肾功能。
2：标本的手收集新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血.血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。
样本在4摄氏度可稳定7天.采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30—60分钟凝血析出血清.3000r/min离心5-10分钟,分离出血清备用.不建议采用血浆标本。
3方法原理样品中的尿素在试剂中脲酶的催化下与水反应生成氨和二氧化碳，生成的氨与试剂中的酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化下产生谷氨酸，同时NADH被氧化为NAD+，从而使340nm处的光吸收值下降.通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可计算出样品中尿素的浓度。
4剂来源，配置及储存试剂来源：试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。
启用后在2—8度可稳定30天.若试剂混浊,或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器CS—600B全自动生化分析仪6计算方法ALT（U/L)=（A/min*Tv*1000）(6.3*Sv＊P）式中Tv=总反应体积Sv=样本体积6.3=NADH在340nm处的毫摩尔消光系数P=比色杯光径(cm）7 线性范围：本实验的线性范围：0—---35mmol/L8 参考范围:2。
82—-—8。
2 mmol/L9 失控控理1：立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。
2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。
检查仪器状态,查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护.另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。
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3．[检查]
3.1 仪器与用具
分析天平 烧杯 垂熔玻璃坩埚
3.2 试药与试液
乙醇
3.3检查项目与操作方法
3.3.1 氯化物
取本品1.0g，照氯化物检查法（见《中国药典》2005版二部附录Ⅷ A）检查，与标准氯化钠溶液7.0ml制成的对照液比较，不得更浓为符合规定（0.007%）。
4．[含量测定]
4.1仪器与用具
分析天平 凯氏烧瓶 冷凝管 500ml锥形瓶
4.2 试药与试液
3%硫酸铜溶液 20%氢氧化钠溶液 4%硼酸溶液 硫酸 锌粒
甲基红指示液
盐酸滴定液（0.2mol/L）
4.3 操作方法
取本品约0.15g，精密称定，置凯氏烧瓶中，加水25ml、3%硫酸铜溶液2ml与硫酸8ml，缓缓加热至溶液呈澄明的绿色后，继续加热30分钟，放冷，加水100ml，摇匀，沿瓶壁缓缓加20%氢氧化钠溶液75ml，自成一液层，加锌粒0.2g，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接，并将冷凝管的末端伸入盛有4%硼酸溶液50ml的500ml锥形瓶的液面下；轻轻摆动凯氏烧瓶，使溶液混合均匀，加热蒸馏，俟氨馏尽，停止蒸馏；馏出液中加甲基红指示液数滴，用盐酸滴定液（0.2mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml盐酸滴定液（0.2mol/L）相当于6.006mg的CH4N2O。
3.3.4炽灼残渣
取本品，按炽灼残渣检查法（见《中国药典》2005版二部附录Ⅷ N）检查，不得过0.1%为符合规定。
3.3.5重金属
取本品1.0g，加水20ml溶解后，加0.1mol/L盐酸溶液5ml，按重金属检查法（第一法）(见《中国药典》2005版二部附录Ⅷ H第一法)检查，含重金属不得过百万分之二十为符合规定。
2．[鉴别]
2.1 仪器与用具
分析天平 电炉 烧杯 试管 红外分光光度计
2.2 试药与试液
氢氧化钠试液
硫酸铜试液
硝酸
2.3 操作方法
2.3.1 取本品0.5g，置试管中加热，液化并放出氨气；继续加热至液体显浑浊，冷却，加水10ml与氢氧化钠试液2ml溶解后，加硫酸铜试液1滴，即显紫红色。
2.3.2 取本品0.1g，加水1ml溶解后，加硝酸1ml，即生成白色结晶性沉淀。
题目：尿素检验标准操作规程
文件编号：
起草：
日期：
审核：
日期：
批准：
日期：
生效日期：
颁发部门：质控部
分发部门：检验室
变更记载 修改号
批准日期 执行日期
变更原因及目的
标准依据：《中国药典》2005年版二部
目的：建立尿素检验操作规程。
范围：本规程适用于尿素的检验。
职责：检验员、质控部经理对本规程的实施负责。
4.4 计算结果
式中：V1为供试品消耗盐酸滴定液的ml数
V2为空白消耗盐酸滴定液的ml数C为盐酸滴定液的浓度（mol源自L）W为称取供试品的重量（g）
本品含CH4N20不得少于99.5%。
5．[贮藏] 密封保存
3.3.6微生物限度
取本品10g，加入45℃pH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，搅拌混匀，作为1：10的供试液，取适量供试液，照微生物限度检查平皿法（《中国药典》2005版二部附录Ⅺ J）检查，，细菌数、霉菌和酵母菌数分别不得过100个/g，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出为符合规定。
规程：
1．[性状]
取本品适量，置表面皿中，在自然光下检视，为无色棱柱状结晶或白色结晶性粉末；几乎无臭，味咸凉；放置较久后，渐渐发生微弱的氨臭；水溶液显中性反应。
本品在水中或乙醇中易溶，在乙醚或三氯甲烷中不溶。
熔点
取本品，按熔点测定法（见《中国药典》2005版附录VI C）测定，熔点应为132～135℃。
3.3.2 硫酸盐
取本品4.0g，按硫酸盐检查法（见《中国药典》2005版二部附录Ⅷ B）检查，与标准硫酸钾溶液4.0ml制成的对照液比较，不得更浓为符合规定（0.010%）。
3.3.3乙醇中不溶物
取本品5.0g，加入热乙醇50ml,如有不溶物, 用105℃恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，滤渣用热乙醇20ml洗涤，并在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得过2mg为符合规定。