健脾活血中药对胃溃疡大鼠H ,K -ATP酶及壁细胞胃泌素受体作用的影响

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健脾益气中药对脾气虚证大鼠血管紧张素_及一氧化氮的影响_常亮

健脾益气中药对脾气虚证大鼠血管紧张素_及一氧化氮的影响_常亮

健脾益气中药对脾气虚证大鼠血管紧张素Ⅱ及一氧化氮的影响常亮,张立德(辽宁中医药大学基础医学院,辽宁沈阳110032)摘要:目的:研究脾气虚证大鼠血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、内皮素1、一氧化氮(NO )的变化及健脾益气中药对其的影响。

方法:实验动物分成空白组、模型组、四君子汤组、六君子汤组、归脾汤组。

分别采用ELISA 法、硝酸还原酶法检测各组大鼠血浆中Ang Ⅱ、ET -1,血清中的NO 含量。

结果:与空白组比较,其他各组的Ang Ⅱ、ET -1含量升高,NO 含量降低;与模型组比较,中药治疗组的Ang Ⅱ、ET -1含量降低明显,NO 含量升高明显。

结论:脾气虚证大鼠血浆中Ang Ⅱ、ET -1含量升高,NO 含量降低,而健脾益气中药能改善这一情况,为健脾益气中药可防治心脑血管疾病提供实验室依据。

关键词:脾气虚证;Ang Ⅱ;内皮素1;NO 中图分类号:R285.5文献标识码:A 文章编号:1000-1719(2011)05-1000-02收稿日期:2010-09-14基金项目:辽宁省自然基金课题(编号20102150)作者简介:常亮(1978-)女,辽宁沈阳人,讲师,博士研究生,研究方向:中西医结合基础研究。

通讯作者:张立德,男,辽宁朝阳人,教授,博士研究生导师。

中医理论认为,脾为气血生化之源,为后天之本,中医将脾的功能概括为“主运化、主统血、主肌肉四肢”。

近年来,现代医家对“脾虚证”及“脾主肌肉”进行了大量研究。

现代医学将肌肉分为骨骼肌、心肌和平滑肌,但目前对脾主肌肉的研究多集中在骨骼肌和心肌,对平滑肌涉猎较少,尤其是脾虚证对血管平滑肌细胞的影响,至今未见报道。

本实验重点观察脾虚证对大鼠血管平滑肌细胞的影响,通过对脾气虚证大鼠血管平滑肌细胞超微结构的观察并检测Ang Ⅱ、NO 、ET -1等指标,探讨脾气虚情况下血管平滑肌的变化,并通过与四君子汤等健脾益气中药组的对照,探讨健脾益气中药对脾气虚证大鼠血管平滑肌细胞的影响。

益胃汤对胃溃疡大鼠EGFR及bFGF的影响

益胃汤对胃溃疡大鼠EGFR及bFGF的影响
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111 动 物 清 洁级 s .. D大 鼠 6 o只 , 雄各 半 , 雌 体
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于临床 并取得 了较好 的疗 效 。为 探讨疏 肝健脾 法对
消化性 溃疡愈 合 的影 响 , 本文 采 用 乙 酸烧 灼 法 复制
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江 西 中 医学 院 学报 2 O O 1 8年 第 2 O月 0卷 第 5期
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益 胃汤 对 胃溃 疡 大 鼠 E G

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开郁健脾益胃汤对胃溃疡大鼠细胞凋亡的影响

开郁健脾益胃汤对胃溃疡大鼠细胞凋亡的影响
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健脾中药对脾虚大鼠胃黏膜损伤的保护作用

健脾中药对脾虚大鼠胃黏膜损伤的保护作用
学 杂 志 ,20 , ( ) 4 - 4 . 00 6 3 : 4 6
( 文 校对 : 学 玲 本 王 收 稿 ห้องสมุดไป่ตู้期 :0 8—0 20 4—2 ) 2
[3] 陈重 义 , 新 猷 , 梅 , .阿 霉 素 肾病 大 鼠生 物膜 电荷 的 变 化与 姜 郭 等 蛋 白 尿的 关 系 [] J .中华 医 学 杂 志 ,907 :1 19 ,0 9 . [ 张尤 红 , 仁 寿 , 重 义 , .绞 股 蓝 总 甙对 阿霉 素 肾病 大 鼠影 响 4] 郭 陈 等 的 实验 研 究 [] J .中 华 肾 脏病 杂 志 ,97 3 :0 . 19 ,5 12
( .N n a A l td Maent ad C i rn SHoptl fG a gh uUnv ri fT 1 a hi f i e tri n hl e ’ s i u n zo ies yo CM,2 20, oh n G ag o g hn i a y d ao t 5 8 0 F sa , u n d n ,C ia
[ 5] 唐 锦 辉 , 钦 儒 , 桐 林 . 杏 叶 防 治大 鼠 肾小 球 硬 化 及 肾 小 管 . 徐 刘 银 间质 损 害 的 实 验 研 究 [] J .中华 肾脏 病 杂 志 ,9 8 1 14. 19 , 7 4:
健 脾 中药 对 脾 虚 大 鼠 胃黏 膜 损 伤 的保 护 作 用
周俊亮 刘友 章 潘 奔前 欧志穗 1 广 州 中 医药大 学附属 南海 妇产 儿童 医院(2 2 0 2 广 州 中医药 大学 第一 附属 医院 ( 14 5 . 5 80 ) . 5 00 )
摘要: 目的: 观察健脾 中药四君子汤对脾虚大鼠胃黏膜损伤的保护作用及机理。方法: 实验用 8 0只大鼠禁食 1h 随机分为4 2, 组, 观察健脾中药对胃黏膜损伤的影响, 并测定血浆 N 、T1 O E - 水平, 胃黏膜 S D M A的含量。结果: 测定 O 、D 健脾中药治疗后的脾虚大

健脾活血方对肝硬化大鼠内分泌紊乱影响的实验研究

健脾活血方对肝硬化大鼠内分泌紊乱影响的实验研究


要 目的 : 讨 健 脾 活 血 方对 肝 硬 化 大 鼠 内分 泌 激 素 的影 响 。 方 法 : 鼠 随机 分 成 健 脾 活血 方 治 疗 探 大
组、 造模组 、 正常对照组 ; 除正 常组外 , 均以 2% 乙醇及猪 油颗 粒饲料喂 养并皮下 注射 四氯化碳花 生油造 0
模, 同时喂服 药物 , 疗程结束后检 测各组 大鼠催 乳素 、 高血糖 素、 胰 肾素 一血管 紧张素 一醛 固酮及 内皮素
均数加减标准差表 示 , 并进行方差分析 。
2 结 果
测定盒 : 北京福瑞生 物工 程公 司。催乳 素放射 免疫检 测盒 :
天津德普公司。 12 动 物 s . D大 鼠 5 0只 , 洁 级 , 雄 各半 , 清 雌 体重 (5 4 2 0- - 2 ), 0 g 中科院上海实验动物 中心提供 , 动物质量合 格证 : 中科 动第 03号。饲养于浙江 中医药大学实验动物中心。 0 13 动物分组 、 . 造模及 给药处理
5 0只 S D大 鼠随机分成 3
各组大鼠内分泌激 素的测定结果 ( ±s )
与 E常组 比较 *P<O0 , .5 **P< .1 与模型组△P<O 0 , O0; .5 △△ P<00 .l
3 讨 论 肝硬化 腹水 属 中医“ 鼓胀 ” 畴 , 范 其病 因主要 为肝 失疏 泄 , 气机不畅 , 横逆 脾 胃, 响脾 胃运化 , 影 水湿潴 留, 阻滞

46・ l
中国中医药科技 20 年 l 月第 l 卷第 6期 N v20 o.5 N . 08 1 5 o .08 V 11 o6
健 脾 活 血 方对 肝 硬 化 大 鼠 内分 泌 紊 乱 影 响 的 实 验 研 究
潘锋 张永 华 徐建军 马 铮

消化性溃疡的愈合质量

消化性溃疡的愈合质量

消化性溃疡的愈合质量姚金锋【摘要】消化性溃疡治疗的核心目标是提高溃疡愈合质量,溃疡愈合质量采用内镜、组织学及功能成熟度对再生黏膜进行综合评价.根除幽门螺杆菌、抑酸药物联用黏膜保护剂及中医中药等有助于提高溃疡愈合质量【期刊名称】《现代消化及介入诊疗》【年(卷),期】2011(016)004【总页数】4页(P255-258)【关键词】消化性溃疡;愈合质量;治疗【作者】姚金锋【作者单位】050000,河北医科大学第二医院【正文语种】中文消化性溃疡的愈合率高,但复发率仍高,是目前临床必须解决的难题,消化性溃疡复发率与消化性溃疡愈合质量(quality of ulcer healing,QOUH)有关。

Tarnawski等首先提出QOUH的概念,指出了溃疡愈合不仅需要黏膜的修复,更需要黏膜下组织结构的修复及重建,再生黏膜的组织成熟程度越高,抗再损伤的能力越强,溃疡复发率越低。

溃疡的愈合不仅需要大体上愈合,还要恢复其正常的组织学结构和功能。

溃疡的修复及愈合由多种组织细胞相互作用而完成,细胞因子、生长因子、微血管重建等共同参与。

一、影响QOUH的因素影响QOUH的主要因素有黏膜受损因素未被去除尤其是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)未被根除,服用糖皮质激素、NSIAD药物[1];停药后胃酸反跳;受损的黏膜防御因素未得到有效恢复。

消化性溃疡愈合过程中肉芽组织覆盖溃疡面,重建腺体并形成微血管网和结缔组织重塑,整个过程中受生长因子及其受体的调控。

包括转化生长因子(TGF-α)、表皮生长因子(EGF)、成纤维生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)等对损伤后黏膜均起再生作用。

老龄、不同部位溃疡及吸烟等对QOUH的影响亦受到重视。

Tsukimi等[2]报道年龄对QOUH的影响,给青年和老年大鼠腔内应用乙酸诱导慢性胃溃疡发生,结果发现老龄鼠的基础和组胺剌激酸分泌量都明显低于青年鼠,胃黏膜血流和黏膜细胞增生也以老龄鼠为低。

健脾康复丸对大鼠大肠癌端粒酶活性影响的实验研究

健脾康复丸对大鼠大肠癌端粒酶活性影响的实验研究
大 肠癌 大 鼠体 重 的 下 降 。 主题词 肠 肿 瘤/ 医 药疗 法 中 大 肠 @健 脾 康 复 丸/ 治疗 应 用 端 粒 酶/ 代谢 大 鼠
大肠癌是 临床常见的消化系统恶性肿瘤 , 中医药疗法在
每 1% 体重 O5 和 1 0 .g g的剂量灌服健脾康复丸水溶液 , 1 每3 2次。c组各 鼠按 照每 10 体 重 2 m 剂量 灌服希 罗达 , 0g 0 s 每 3 1 2次 , 连续 2 , 周 休息 1 , 4 重复。A、 周 第 周 B组各 鼠每 1 3 2次灌 服等体积 生理 盐水 , 至实验结 束。实验过程 中 , 直 每 周称量体重 1 , 次 根据体重 调整药物 用量。第 8 1、6周末 、2 1 每组分别取部分动物( ~2只) 1 解剖 观察及病理组织学检查 了解诱癌情况 , 2 第 0周末 处死 全部剩余动物 , 取肛 门以上大
1 材 料 与 方法
11 材料 .
实验动物 : 清洁级 (P ) sF 健康成年 雄性 Wia 大 sr t
肠肠段 , 沿肠系膜纵向剖开 ,B 缓 冲液 漂洗 清洁, PS 留取肿瘤
组织标本 , 一8 ℃冰箱保存 , 置 o 备用 。
13 端粒酶的提取 与检 测 . 称取组织标本 05 用 P S缓冲 . g B
(广 州复大肿瘤 医院・ 广州复大肺癌研 究所・ 广州 500 南方 医科大学・ 州 5 01 ) 130 广 155
摘 要 目的: 观察健脾康复丸对大鼠大肠 癌端粒酶 活性的影响。方法: 用 12一二 甲基 肼( , 采 , 12一d . i m
e y yrz eD H 腹腔注射 法建立大鼠大肠癌模 型。动物分为 5组 , t l dai , M ) hh n 正常组 , 型组 , 罗迭组 , 模 希 健脾 康

补肾健脾养血活血法改善血管性认知障碍大鼠行为学障碍的研究

补肾健脾养血活血法改善血管性认知障碍大鼠行为学障碍的研究

S u y o v g r t g k d e n te g h n n p e n o rs i g b o d a d t d f i i o a i i n y a d sr n t e i g s le ,n u ih n l o n n n p o t g b o d m eh d i mp o i g t e b h v o fr t t a c l r c g r mo i l o t o i r vn h e a i r o a swi v s u a o - n n h
P ol'Hoptl f uinPo ic , uh u 5 0 3 C ia e pes s i j rvn e F zo 3 0 0 , hn aoF a 【 sr c]0b et e T bev h m ato vg rt gkd e n t n te igsle , o r hn l d a dpo Ab ta t jci : oo sretei p c f n i ai in ya ds e g nn pen n u sigbo n r— v i o n r h i o
3福建 省第 二人 民医院 康复 科 , 建补 肾健脾 养 血活 血 法对 血管 性认 知 障碍 ( I大 鼠行 为 学 的影响 。方 法 : 模前 随机选 取 1 VC ) 造 O只 大
鼠为假 手术 组 . 余大 鼠采用 反 复夹 闭双 侧颈 总 动脉 结合 腹腔 注 射硝 普钠 降低 血压 改 良法建 立 V I 鼠模 型 , 模 其 C大 造
s o e e biul (45  ̄ . )(69  ̄ .4, 1 .  ̄ 。5 s a dtet s f rsigpaf m w r icesdo vo s h r n do vo s 1 .7 39 ,1 .3 2 )(84 73 ) ] n h me os lt r ee nrae b iul t y[ 9 5 2 i oc n o y [ .0 18 )(.  ̄ . )(.0 24 ) i s tedf rn e eesg ic n (< .5. n ls n K n xncpuem d ( 9  ̄ . ,72 1 5,61  ̄ .6 t ] h iee csw r inf atP O0 )Co cu i : a gi a sl a e 6 6 0 7 me , i o
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健脾活血中药对胃溃疡大鼠H+,K+-ATP酶及壁细胞胃泌素受体作用的影响(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)【摘要】目的观察健脾活血中药对胃溃疡大鼠H+,K+-ATP 酶及壁细胞胃泌素受体作用的影响。

方法采用放射配基受体结合测定技术分别检测各组壁细胞胃泌素受体结合位点数,同时分别检测各组大鼠H+,K+-ATP酶活性及胃液总酸度。

结果健脾活血组壁细胞胃泌素受体结合位点数低于正常大鼠(P0.05),胃液总酸度及H+, K+-ATP酶活性升高(P0.05);奥美拉唑组壁细胞胃泌素受体结合位点数明显高于正常大鼠(P0.05),胃液总酸度及H+, K+-ATP酶活性明显降低(P0.05);中西药组壁细胞胃泌素受体结合位点数、胃液总酸度及H+, K+-ATP酶活性与正常大鼠比较无显著性差异(P0.05)。

结论健脾活血中药平缓地抑制胃壁细胞的H+, K+-ATP酶活性,降低胃酸的分泌;同时,不影响胃泌素受体结合位点数,防止停药后反跳性过多泌酸。

【关键词】胃溃疡;壁细胞胃泌素受体;H+,K+-ATP酶;健脾活血中药Abstract:ObjectiveTo observe the effects of Jianpi Huoxue Recipe on the activities of H+,K+-ATPase and gastrin receptor in gastric parietal cells of gastric ulcer in rats.MethodsThe ligand-binding number of gastrin receptors on parietal cells was analysed in radioligand binding assay.Total acidity of gastric ulcer,and H+,K+-ATPase activities were measured.ResultsThe gastrin receptor binding sites of parietal cells in Jianpi Huoxue group were obviously lower than that in the normal group,the total acidity of gastric juice and the activities of H+,K+-ATPase were obviously higher than that in the normal group. The gastrin receptor binding sites of parietal cells in Omeprazole group were obviously higher than that in the normal group. The total acidity of gastric juice and the activities of H+,K+-ATPase in Omeprazole group were obviously lower than that in the normal group. The gastrin receptor binding sites of parietal cells, the total acidities of gastric juice and H+,K+-ATPase activity of parietal cells in combined group and in the normal group had no significance.ConclusionJianpi Huoxue Recipe can inhibit the activities of H+,K+-ATPase and the secretion of gastric acid gently.At the same time, the binding capacity of gastrin receptor in gastric parietal cells has no effect, soit can prevent excessive secretion of acid after drug withdrawal .Key words:Gastric ulcer; Gastrin receptor on parietal cells; H+,K+ ATPase; Jianpi Huoxue Recipe中医药与中西医结合对消化性溃疡防治复发与保证其远期疗效取得了较好的成效。

健脾活血法针对消化性溃疡的脾虚血瘀的特点,具有较好的临床远期效应的优势。

为探讨其作用机制,特设计本实验。

现报道如下。

1 材料1.1 动物及主要试剂SD♂大鼠,体质量(200±20)g,由广东省卫生厅实验动物中心提供。

125I-胃泌素购自中国原子能科学研究院,比活度为1 700 ci/mmol,放化纯度大于95%。

胃泌素标准品及链霉蛋白酶由北京鼎国试剂公司提供(Sigma生产)。

H+,K+-ATP酶活性测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 主要仪器及设备5500型γ计数器(Beckman),HYS-4多头细胞收集器(上海跃进医疗器械厂),HZS-H恒温水浴振荡器(哈尔滨东联电子有限公司),XDS-1倒置显微镜(重庆光电仪器厂),TDZ5-WS 自动平衡离心机(长沙湘仪离心机仪器公司),多头磁力搅拌器(常州国华电器厂);LDZ5-2低速离心机(北京医用离心机厂)。

2 方法2.1 药物、模型的制备及动物分组健脾活血方以四君子汤为主方,配合活血药物而成:党参20 g,白术15 g,茯苓30 g,三七10 g,赤芍20 g,丹参15 g,黄芪30 g,白及30 g等。

药材经生药学鉴定,常规水煎2次,浓缩至100%,使每毫升含生药1 g。

大鼠胃溃疡模型制备采用乙酸大鼠胃溃疡模型[1]。

大鼠造模苏醒后,按完全随机设计法将大鼠分为5组。

①正常对照组:10只,系非造模大鼠,喂生理盐水0.09 g/(kg·d);②模型组:10只,造模3 d开始喂生理盐水0.09 g/(kg·d);③奥美拉唑组:10只,造模3 d开始喂奥美拉唑2 mg/(kg·d);④健脾活血组:10只,造模3 d开始喂健脾活血药物1.0 g/(kg·d);⑤中西治疗组:10只,造模3 d开始喂健脾活血药物1.0 g/(kg·d)+ 奥美拉唑2 mg/(kg·d)。

于第22天断头处死。

2.2 大鼠胃壁细胞的分离与纯化参照文献建立方法[2]。

大鼠脱颈椎处死,剖腹取胃,结扎贲门和幽门。

在胃底部做一小切口,用玻璃棒将胃袋翻转,用玻璃片刮下部分胃黏膜作H+,K+-ATP酶活性测定。

然后在胃底与胃体之间结扎,弃去胃底,用生理盐水将胃袋冲洗干净。

把预先配制好的链酶蛋白酶(Pronase)液约2.5 ml(1 g/L)注入胃袋。

然后将胃袋放入预先通氧的A液(NaH2PO4,Na2HPO4,NaHCO3,NaCl,KCl,HEPES,Glucose,BSA,EDTAMA)中,在37 ℃水浴消化30 min后转入B 液(NaH2PO4,Na2HPO4,NaHCO3,NaCl,KCl,HEPES,Glucose,BSA,CaCl2,MgCl2)中,用磁力搅拌器搅拌两次,各10 min,收集每次B液中打下的细胞悬液。

此过程重复3次。

所有收集到的细胞悬液均用200目尼龙网过滤,过滤液4 ℃,1 000 r/min,离心5 min,倾出上清液,沉淀用C液(B液+DTT) 混悬以供纯化。

孵育过程皆充以950 ml/L 的O2 +50 ml/L 的CO2。

取10 ml专用离心管,用吸管在管底分别铺2 ml 预先配制好的60%和40% Percoll液制成不连续密度梯度分离液,将细胞悬液1 ml左右铺在最上层,然后4 ℃,2 000 r /min,离心20 min进行纯化,收集40%与60% Percoll交界面处的壁细胞,C液洗两次,再用C液混悬备用。

2.3 胃泌素受体测定根据预试(多点饱和实验)确定125I-胃泌素放射配基的近饱和终浓度为100 pmol/L,并以此为基础做单点结合实验,加样顺序如下(表1)。

表1 胃泌素受体放射配基结合实验的加样顺序(略)加样后37 ℃孵育30 min,加冰冷的C液720 ml终止反应,迅速用多头细胞收集器收集至玻璃纤维滤膜3次。

烘干滤膜后,置于γ计数器测量放射性。

特异性结合(SB)=总结合(TB)-非特异性结合(NSB)。

以上均各做3个复管。

特异结合位点数由以下公式求出: 位点数(单个细胞)=(特异结合×6.022×1023)/(计数效率×2.2×106×放射比活度×放化纯度×109×细胞总数)。

2.4 H+,K+-ATP酶活性及胃液总酸度测定用玻璃片刮下胃黏膜放入冻存管内,于-70℃保存待测,用于测定H+,K+-ATP酶活性。

将已制备的胃黏膜准确称重后加49倍生理盐水,用组织匀浆机制成2%组织匀浆。

按照H+,K+-ATP酶活性测定试剂盒说明进行操作。

取胃时将全部胃液抽出置于离心管中离心,3 000 r/min,20 min取上清液,用0.1 mol/L NaOH溶液滴定测量胃液的总酸度。

2.5 统计学处理采用统计软件SPSS11.0分析,实验数据均以±s表示,用t检验处理,P0.05为有统计学差异。

3 结果3.1 健脾活血药物对胃溃疡大鼠壁细胞胃泌素受体结合容量的影响溃疡大鼠壁细胞胃泌素受体结合容量明显低于正常大鼠(P0.01),奥美拉唑组、健脾活血组及中西治疗组结合位点数明显回升,与溃疡组比较有非常显著性差异(P0.01),奥美拉唑组结合位点数与正常组比较升高,有显著性差异(P0.05)。

见表2。

表2 大鼠离体壁细胞胃泌素受体结合位点数(略)3.2 健脾活血药物对胃溃疡大鼠胃液总酸度及壁细胞H+,K+-ATP酶活性的影响溃疡模型组大鼠胃液总酸度较正常对照组明显升高(P 0.01),壁细胞H+,K+-ATP酶活性亦明显升高(P0.01);奥美拉唑组大鼠胃液总酸度较正常对照组降低(P0.05),壁细胞H+,K+-ATP酶活性亦下降(P0.05);健脾活血组大鼠胃液总酸度较正常对照组升高(P0.05),壁细胞H+,K+-ATP酶活性亦升高(P0.05);中西治疗组与正常组比较,其总酸度及H+,K+-ATP酶活性无明显差异(P0.05)。

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