缺血对心肌中连结蛋白43和乙酰胆碱M受体亚型M3 (M3-mAChR)结合的影响
缺血修饰白蛋白教学大纲-
参考文献
32767.Morrow DA,de Lemos JA,Sabatine MS,et al.The search for a biomarker of cardiac ischemia.Clin Chem 2003;49(4):537-539
ROC曲线下的面积为0.95(95%CI，0.92～0.99)，可见IMA可以极好的区分缺血和非缺
血。而利用同样的方法试图区分心肌缺血和心肌梗死则效果较差，ROC曲线下的面积
仅为0.66，提示IMA不能很好的区分心肌缺血和心肌梗死。说明IMA是心肌缺血的特
异标志物，而不是心肌梗死的特异标志物。
12
三.IMA的测定
肌损伤少于10克时明显受限；特异
性易受假性室壁变薄影响而受限。
肌钙蛋白（cTn）是心肌梗死的特
异性指标，但须在心肌损伤后4-6
小时才能释放入血而在外周血中检
出，而且在心肌损伤可逆期cTn未
必升高。
4
背景
•
为能尽早诊断ACS，需要一种能早期检测且灵敏度和
特异性较高的心肌缺血标志物。Morrow[1]等指出：理想
管所致)，而在术后6小时和24小时回复基线无明显升高。这种动力学特征表
明在可疑的缺血发作后进行ACB 试验检测缺血是极好的，而且因为6小时后
该试验结果即可回复基线故可以重复用来检测缺血的反复发作。 Juan
Quiles[7]和Iris Paula Garrido[8]等人继续以PTCA术中球囊扩张压迫引起的
础水平，以便检测复发性缺血，使劳累缺血的稳定性冠脉
病的混淆减到最小；（5）试验方法简单，TAT（来回时
间）应为30～60min或更短；（6）应有可靠的分析特性、
M3受体激动剂胆碱对大鼠心肌细胞内钙离子的影响
M3受体激动剂胆碱对大鼠心肌细胞内钙离子的影响栾海蓉;李海林;何志鹏;吴红【摘要】Objective To investigate effects of M3 receptor agonist choline on intracellular calcium ([ Ca2+ ]i )in rat ventricular myocytes. Methods The cardiomyocytes were loaded with Fluo-3/AM, a calcium sensitive fluorescent dye,the[ Ca2 + ]i was determined by the use of laser scanning confocal microscope ( LSCM ). Results Choline had no effects of on [ Ca2 + ]i in the resting state, and had no effects on intracellular calcium release induced by caffeine and inositol-1,4,5-trisphosphate. KC1 induced [ Ca2+ ]i increasing could be depressed by choline( 5. 0 mmo]/L )and the effect of choline could be blocked by 4-DAMP( 2. 0 nmol/L ). Conclusion M3 receptor agonist choline reduces[ Ca2 + ]i via inhibition of voltage dependent calcium channel,which is possibly involved in the mechanism of its protective effects on myocardial injury.%目的研究M3受体激动剂胆碱对大鼠心肌细胞内钙离子的影响.方法采用钙荧光染料 Fluo-3/AM负载心肌细胞,在激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)上测定细胞[Ca2+]i的变化.结果胆碱不影响静息状态下的细胞[Ca2+]i,对咖啡因和三磷酸肌醇(IP3)介导的细胞内钙的释放均无作用.5.0 mmol/L 胆碱可以抑制KCl除极诱导的心肌[Ca2+]i的升高幅度,2.0nmol/L 4-DAMP可以阻断这一作用.结论 M3受体激动剂胆碱通过阻断心肌细胞膜电压依赖性钙通道降低心肌细胞[Ca2+]i,从而发挥心肌保护作用.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)015【总页数】4页(P2496-2498,2502)【关键词】M3受体;胆碱;4-DAMP;钙;激光扫描共聚焦【作者】栾海蓉;李海林;何志鹏;吴红【作者单位】牡丹江医学院机能学教研室,黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院机能学教研室,黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院机能学教研室,黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院机能学教研室,黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011【正文语种】中文【中图分类】R-331.31心脏M3受体具有重要的生理功能和病理意义，在充血性心力衰竭、缺血性心律失常等疾病的发生、发展中发挥重要作用［1］。
心肌缺血／再灌注损伤与心肌细胞凋亡
心肌缺血／再灌注损伤与心肌细胞凋亡【摘要】心肌缺血/再灌注损伤的机制十分复杂。
触发和效应阶段是多种成分参与的综合作用结果,各条信号转导途径并非孤立的,而是交叉联系、立体的、错综复杂的调节网络系统。
多种不同的通路会聚于线粒体信号通路并被其整合。
【关键词】心肌缺血/再灌注损伤；心肌细胞凋亡冠脉供血不能满足心肌对能量的需要时就会发生心肌缺血。
一旦缺血存在，心肌组织不仅缺氧和代谢障碍，同时毒性代谢产物蓄积，引起缺血性损伤，如继续发展，则导致心肌死亡。
长期来人们认为细胞坏死是这种心肌死亡的唯一方式。
近年来，随着检测方法的改进，凋亡研究不断向心血管领域的拓展，目前累积的资料充分表明，心肌细胞同样存在凋亡，细胞凋亡也是缺血性心肌细胞死亡的重要方式之一[1，2]。
当前，细胞凋亡是缺血性心脏病研究的崭新的课题，具有重要的理论和潜在的临床应用价值。
1 心肌缺血/再灌注损伤与心肌细胞凋亡的发生机制1．1 氧自由基氧自由基(oxygen free radical,OFR )，是氧在还原时接受电子不足所产生的一类具有高度化学反应活性的含氧基团，是机体内氧分子的不完全代谢产物。
心肌缺血/再灌注可产生大量的氧自由基。
在生理状态下，机体需要不断地产生自由基参与正常代谢过程，多余的自由基可及时地被清除，其产生与清除处于动态平衡；活性氧有很强的氧化活性，可破坏机体氧化/还原动态平衡，造成生物大分子(核酸、蛋白质、脂质)的氧化损伤；凋亡是机体氧化损伤的后果之一[3~5]。
1．2 线粒体损伤与能量代谢障碍目前研究表明，细胞凋亡的发生与线粒体有关。
凋亡过程中线粒体的早期改变是膜通透性变化和转膜电位降低。
线粒体是细胞有氧呼吸的基地和供能场所，细胞内氧化磷酸化、能量代谢和抗活性氧化，均有赖于线粒体的功能。
细胞发生凋亡时，其线粒体的亚微结构虽基本正常，但其功能已有显著变化，从而造成ATP明显下降。
实验证明ATP明显下降可进一步引起一系列代谢异常和紊乱：①心肌缺血时，随着ATP含量的下降，细胞膜、肌浆网Ca2+-ATP酶活力，以及肌浆网钙摄取能力下降，并且不同阶段心脏依赖能量的Ca2+隔室化机制活性降低使Ca2+内流增加，并激活膜磷酶，使膜磷脂降解为溶血瞵脂，导致缺血性肌挛缩，并在此过程中产生OFR，进一步产生损害作用[6] ；②依赖ATP的细胞膜泵活性降低，膜电位改变，以及心电图ST段改变；③缺血涉及的心肌纤维收缩性降低，部分是由于酸中毒和肌钙蛋白C亲和力降低的缘故，此外，酸中毒又可直接损害细胞的超微结构；④缺血区同非缺血区形成代谢梯度，成为引发恶性心律失常的主要因素之一。
缺血修饰白蛋白在急性心肌缺血中的应用
缺血修饰白蛋白在急性心肌缺血中的应用张欣;曹久妹;顾志冬;何汝敏;沈卫峰【期刊名称】《国际心血管病杂志》【年(卷),期】2008(035)006【摘要】目的:探讨缺血修饰白蛋白(IMA)在急性心肌缺血早期诊断、缺血严重程度、心肌坏死程度等方面的应用. 方法:通过白蛋白钴结合试验,检测80例急性心肌缺血病人[包括稳定型心绞痛(SA)20例、不稳定型心绞痛(UA)21例、急性心肌梗死(AMI)早期经皮冠状动脉介入治疗组(PCI)21例、AMI择期PCI组18例]心肌缺血6 h内及20例正常对照者的血清IMA水平,结合患者临床资料进行分析. 结果:(1)与正常对照组相比,SA、UA、AMI早期PCI、AMI择期PCI组血清IMA均升高,为(65.59±32.08)、(93.55±24.23)、(122.78±60.47)、(146.46±40.39)、(145.44±51.87)U/ml,P均＜0.05;(2)根据心电图ST段抬高或压低是否≥0.1mV将SA、UA组病人分为两组,血清IMA水平分别为:(84.49±17.05)、(147.54±41.51)U/ml,P=0.023;(3)UA组与AMI早期PCI、AMI择期PCI组分别比较,IAM水平无统计学差异. 结论:IMA对于急性心肌缺血具有早期诊断意义,并可评估心绞痛病人的缺血严重程度,但IMA不是诊断AMI良好指标.【总页数】3页(P402-404)【作者】张欣;曹久妹;顾志冬;何汝敏;沈卫峰【作者单位】200025,上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科;200025,上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科;200025,上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科;200025,上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科;200025,上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科【正文语种】中文【中图分类】R542.2【相关文献】1.缺血修饰白蛋白、NT-proBNP和高敏肌钙蛋白Ⅰ联合检测在急性心肌缺血早期诊断中的临床应用价值 [J], 李笃军;车永恒;鞠建伟;唐菁2.缺血修饰白蛋白在急性心肌缺血早期诊断中的临床价值 [J], 丁爱华;王尚武3.缺血修饰白蛋白在急性心肌缺血再灌注早期变化中的意义 [J], 何文飞;唐良秋;万槐斌4.缺血修饰白蛋白在老年急性心肌缺血诊断中的应用价值 [J], 李志远;路清华;刘锦;贾意国;李秀春;杨曙光5.缺血修饰白蛋白测定对急性心肌缺血早期诊断的应用与评价 [J], 沈晓丽;林立芳;林粼;韩莉莉;浦晓东;邓玉莲;胡锡衷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
慢阻肺的气道管理
气道管理综合用药
基于2019GOLD指南推荐
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迷走神经在夜间会增加自身的紧张性，在有气 道炎症性疾病时，这种胆碱能性支气管收缩作 用会明显加强。
因此，慢阻肺患者其副交感神经张力增高，患 者夜间气道阻力会明显增加，常出现凌晨症状 加重或发作。
基于不同受体的用药
β受体 属于去甲肾上腺素能受体，按其药理学特性，分 为3个亚型，分别为β1、β2以及β3。每种受体在 各器官、组织、细胞中的具体分布情况有所差异。 β1受体主要分布于心肌细胞中；β2受体主要分布 于支气管平滑肌、血管平滑肌等，其效应是抑制 性的，激动后可介导支气管平滑肌、血管的舒张； β3受体主要分布于脂肪组织中，调节能量代谢。
茶碱除有支气管扩张作用外，还有改善心搏血 量，扩张全身和肺血管，兴奋中枢神经系统， 改善呼吸肌功能等多方面作用，这对合并肺心 病患者有益。
Ｍ受体
毒蕈碱样胆碱能受体（mAchR，简称Ｍ受体）是 气道中主要的副交感神经递质，通过胆碱能神经 释放的乙酰胆碱（Ach）调节气道平滑肌张力和黏 液的分泌。
目前确定的Ｍ受体有５种亚型，即Ｍ１ ～Ｍ５， 其中Ｍ１、Ｍ２和Ｍ３受体存在于人类肺脏。
Ｍ１受体
占Ｍ受体总量的５０％～６０％，主要存在于副 交感神经节，气道交感神经末端。在人体肺脏主 要表达于支气管成纤维细胞和上皮细胞，M1受体 通过易化神经传导，增强胆碱能反射性支气管收 缩。
Ｍ２受体
是自身受体 主要存在于Ａｃｈ节后神经，其次为 呼吸道平滑肌和交感神经。在人体肺脏主要表达 于支气管成纤维细胞、上皮细胞和平滑肌细胞， 其作用是间接的，表现为阻止β-肾上腺素引起的 支气管舒张，使支气管平滑肌收缩。
慢阻肺患者的气道炎症导致氧化负荷加重，促使其病理生 理变化。应用抗氧化剂大剂量N-乙酰半胱氨酸（0.6g，2 次/d）或羧甲司坦等可降低疾病反复加重的频率。
M 3受体激动剂对急性缺血性心肌的保护作用
M 3受体激动剂对急性缺血性心肌的保护作用栾海蓉;孙健;王得利;李丽;吴红【摘要】Objective To study the protective effects of choline on myocardial ischemia rat heart and its potential mecha -nisms .Methods Ischemia hypoxia environment was simulated with low value of pH (pH 6 .8) and lack of oxygen .Calcium currents were recorded by whole cell patch under the voltage clamp configuration .The alternations in[Ca2 + ]induced by KCl was detected by laser scanning confocal microscope in ventricular myocytes ,then disccuss the effects of choline on calcium and calcium store in cells . Results The normalized peak currents of ICa-L in ventricular myocytes were larger in pH 6 .8 group than those in pH 7 .4 group , which can be attenuated by choline .The(Ca2 + )i induced by KCl in ventricular myocytes were significantly increased in pH 6 .8 Ty-rode solution and its increasing can be suppressed by choline .4-DAMP can inhibit the suppressing effect of choline .Conclusion The possible mechanism of M 3 receptor involved in the protection of ischemic myocardium by inhibiting myocardial cells in ICa-L ,in-hibiting intracellular calcium overload .%目的：研究 M 3受体激动剂胆碱对大鼠急性缺血性心肌的保护作用其可能的机制。
缺血—再灌注损伤与缺血预处理及缺血后处理的保护作用机制(一)
缺血—再灌注损伤与缺血预处理及缺血后处理的保护作用机制(一)作者：马建伟杜会博温晓竞【关键词】缺血；再灌注损伤；缺血预处理缺血是临床上最常见的症状之一，尤其是心脏缺血损伤一直是众多学者研究和关注的问题。
既往认为短暂的心肌缺血造成的心肌可逆性损伤会使之更难以耐受再次缺血损伤。
因此认为多次短暂缺血必然发生累加而导致心肌坏死。
80年代Murry1]首次在狗的实验中发现短暂的冠脉缺血可以使心脏在经历后续长期缺血时的心梗面积较单纯长期缺血时的面积明显缩小，于是提出缺血预处理的概念。
而在2003年，Zhao等2]在犬心肌缺血后再灌注前进行了3次30s的再灌注，发现冠状动脉的内皮功能较单纯长时间再灌注得到明显改善，而且心肌梗死范围也明显缩小，其保护程度与缺血预处理相似。
因而提出了缺血后处理的概念。
这两方面的发现为缺血心肌的保护开辟了新的研究领域。
1心肌的缺血-再灌注损伤1.1心肌的缺血—再灌注损伤的概念及损伤表现缺血-再灌注(ischemiareperfusion，IR)是指心肌缺血时，心肌的代谢出现障碍，从而出现一系列功能异常；缺血一定时间的心肌再重新恢复血液供应后，心肌不一定都会恢复其正常功能和结构，反而出现心肌细胞损伤加重的表现，即所谓缺血—再灌注损伤，IRI)。
这一损伤是心脏外科、冠脉搭桥术等手术期间心肌损伤的主要因素。
其损伤表现为心肌细胞的坏死、凋亡、线粒体功能障碍、脂质过氧化物增多、自由基大量生成，并导致恶性心率失常发生，左心室收缩力减弱、室内压下降等心肌功能的抑制。
1.2心肌的缺血再灌注损伤的机制尽管几十年来人们一直在进行研究，但至今其详细的机制未被阐明，根据近年来的研究其可能的机制有：1.2.1G蛋白、腺苷酸环化酶的功能异常心肌缺血时，对于G蛋白、腺苷酸环化酶活性的变化各家报道不一，有研究表明在体大鼠缺血区G蛋白含量明显降低3]，有结果表明，离体大鼠缺血区G蛋白含量无明显变化4]，也有结果表明，在体狗心肌缺血时，心肌G蛋白含量出现明显增加5]。
缺血修饰白蛋白对心肌缺血的早期诊断价值
缺血修饰白蛋白对心肌缺血的早期诊断价值罗伟民;王晓丽;李志远【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2009(49)37【摘要】目的探讨缺血修饰白蛋白(IMA)对心肌缺血的早期诊断价值.方法分别采用白蛋白钴结合(ACB)试验、免疫组化法检测急性冠脉综合征(ACS组)、稳定型心绞痛(SAP组)患者的血清IMA及肌钙蛋白I(cTnI),并与健康对照组进行比较.经工作特征曲线分析获得健康者与冠心病患者的最适截断值;根据IMA、cTnI及ECG结果评价其诊断ACS的敏感性.结果与对照组比较,ACS组、SAP组ACB值明显降低(P均＜0.01),三组血清cTnI比较无统计学差异(P均＞0. 05);血清IMA、cTnI、ECG诊断心肌缺血的敏感性分别为81.67%、66.67%、16.67%.结论 IMA可明显提高心肌缺血早期诊断的敏感性.【总页数】2页(P65-66)【作者】罗伟民;王晓丽;李志远【作者单位】山东省泰山慢性病医院,山东泰安,271000;山东省泰山慢性病医院,山东泰安,271000;山东省泰山慢性病医院,山东泰安,271000【正文语种】中文【中图分类】R541.4【相关文献】1.血清缺血修饰白蛋白测定对急性心肌缺血的早期诊断价值 [J], 陈振祥;焦付丰;王鸿君;刘杰远;陈晓媛2.缺血修饰白蛋白对急性心肌缺血早期诊断价值的探讨 [J], 邱可文;彭赟;龙振洪;李建梅3.缺血修饰白蛋白对心肌缺血早期诊断价值的探讨 [J], 陈国平;易凯4.缺血修饰白蛋白对急性冠脉综合征心肌缺血早期诊断价值的荟萃分析 [J], 黄谦亦; 管仲莹; 韩华静; 杨方渝; 施婷; 刁奇志5.缺血修饰白蛋白和肌红蛋白对急性冠状动脉综合征的早期诊断价值 [J], 冯永生;李瑞民;常科因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
心肌缺血再灌注时Gs_和Gi_蛋白含量mRNA水平变化及意义
・研究原著・文章编号:100022790(2005)2021851204心肌缺血再灌注时Gsα和Gi α蛋白含量mRNA 水平变化及意义钟前进1,汪曾炜2,肖颖彬1(1第三军医大学新桥医院心血管外科,重庆400037,2沈阳军区总医院心血管外科,辽宁沈阳110016)收稿日期:2005201218; 修回日期:2005203228基金项目:重庆市应用基础研究项目(2002104)通讯作者:肖颖彬.Tel .(023)68774607 Email .xiaoyb@vi p.sina .com 作者简介:钟前进(19672),男(汉族),湖南省永州市人.博士,副主任医师,副教授.Tel .(023)68774607 Email .zhongqj@online .cq .cnChanges and si gn i f i cance of levels of Gs αand G i αand the i r m RNA i n m yo 2card i u m undergo i n g ischem i c reperfu 2si onZHON G Q ian 2J in 1,WAN G Zeng 2W ei 1,X I AO Y ing 2B in11Depart m ent of Cardi ovascular Surgery,Xinqiao Hos p ital,ThirdM ilitary Medical University,Chongqing400037,China,2Depart m ent of Cardi ovascular Surgery,General Hos p ital of Shen 2yangM ilitary Regi on,Shenyang 110016,China【Abstract 】A I M :To study the cha nge s o f the l eve ls o f αsubun its o f s ti m u l a t o ry (G s α)a nd i nh i b it o ry (G i α)guan i nenuc l eo ti de 2b i nd i ng p r o te i n and the ir m RNA i n new bo rn gu i ne a 2p i g m yo ca rd i um unde rgo i ng g l o ba l ischem i c rep e rfu 2s i o n a nd t o exp l o re the re l a ti o n be t w e e n the se change s and ca rd i ac func ti o n s .M ETHOD S:Th irty new bo rn gu i ne a 2p i g s w e re ra ndom l y a s s i gne d t o th re e g r o up s (n =10i n e ach g r o up )a nd iso l a te d p e rfu sed wo rki ng he a rt m o de ls w e re e stab lished.The new bo rn he a rts suffe re d g l o ba l ischem i a a l o ne f o r 90m i n i n g r o up Ⅰ,a rre sted by S t .Thom a s Ho sp i 2ta l ca rd i o p l e g i c so l u ti o n Ⅱs i m u lta neo u sl y i n g r o up Ⅱand a rre s te d by co l d b l o o d ca rd i o p l e g i a si m u lta neo u s l y i n g r o upⅢ.A ll the he a rts w e re rep e rfu se d fo r 60m i n.C a rd i a c func 2ti o n s and the l eve ls o f G s αa nd G i αa nd the ir m RNA w e rei nve s ti ga te d.RESU L TS:Theca rd i acfunc ti o n s w e rem a rke d l y de te ri o ra te d i n g r o up Ⅰa nd g r o up Ⅱdu ri ng rep e r 2fu s i o n (P <0.01),w he re a s no p r o no unced cha nge s o f ca r 2d i a c func ti o n s w e re fo und a t the end o f rep e rfu si o n i n g r o upⅢ(P >0.05).S i gn i fi can t de c re a se s o f the l e ve ls o f G sαa nd its m RNA (P <0.01)and no ta b l e i nc re a se s o f l eve ls o f G i αa nd its m RNA (P <0.01)w e re f o und i n g r o up Ⅰand g r o up Ⅱa fte r ischem i a and afte r rep e rfu s i o n w hen com 2p a re d w ith tho se befo re ischem i a and i n g r o up Ⅲ,bu t re 2co ve ry t o the l e ve ls o f G s αand G i αa nd the ir m RNA be f o reischem i a w a s ach i eve di n g r o upⅢa fte r rep e rfu s i o n(P >0.05vs befo re ischem i a ).CO NCL US I O N:I schem i c rep e rfu s i o n i n j u ry o f i m m a tu re gu i ne a p i g m yo ca rd i um m ayre su lt fr om the unba l ance be t w e e n G s αa nd G i α.【Keywords 】m yo ca rd i a l ischem i a;m yo ca rd i a l rep e rfu si o ni n j u ry;GTP 2b i nd i ng p r o te i n s;ca rd i o p l e g i c so 2l u ti o n s;gu i ne a 2p i g s【摘 要】目的:研究新生豚鼠心肌缺血再灌注时Gs α和Gi α蛋白含量及其mRNA 水平的变化以及与心功能变化的关系.方法:30只新生豚鼠随机分为3组(每组n =10),建立离体心脏左心做功模型.组Ⅰ:离体心脏缺血90m in;组Ⅱ:缺血时予Thomas Ⅱ号液;组Ⅲ:缺血时予冷血心停搏液.各组均再灌注60m in .检测心功能指标,Gsα和Gi α蛋白含量及其mRNA 水平的变化.结果:组Ⅰ和组Ⅱ在再灌注时的心功能明显受损(P <0.01),组Ⅲ在再灌注结束时无明显变化(P >0.05).组Ⅰ和组Ⅱ在缺血后和再灌注后Gs α蛋白含量分别为缺血前的37.5%,40.3%,36.6%和39.5%,GsαmRNA 水平分别为缺血前的38.6%,41.4%,35.7%和40.1%,明显降低(P <0.01);Giα蛋白含量分别为缺血前的198.1%,175.4%,201.3%,181.4%,Gi2αmRNA 水平分别为缺血前的215.4%,180.2%,210.3%和176.2%,显著升高(P <0.01).组Ⅲ在再灌注后Gs α和Gi α蛋白含量及其mRNA 恢复至缺血前的水平(P >0.05).结论:Gsα和Gi α蛋白的平衡遭受破坏可能是未成熟心肌缺血再灌注损伤发生的机制之一.【关键词】心肌缺血;心肌再灌注损伤;GTP 结合蛋白质类;心麻痹液;豚鼠【中图号】R654.1;R654.2 【文献标识码】A0 引言鸟嘌呤核苷酸偶联蛋白(G 蛋白)在细胞信号转导过程中起着“电话交换机(s witchboard )样”作用[1],与心脏病理生理过程密切相关[2].对心肌缺血再灌注过程中G 蛋白变化的研究有益于增强对心肌缺血再灌注损伤的认识,是一值得探讨的课题.有关未成熟心肌缺血再灌注时兴奋性鸟核苷藕联蛋白α亚基(Gsα)和抑制性蛋白α亚基(Gi α)蛋白含量的变化及其mRNA 水平的变化鲜见研究报道[3],我们拟以新生豚鼠为研究对象,利用离体工作心脏模型,运用W estern 印迹分析和Northern 印迹分析等方法对此进行研究.1 材料和方法1.1 材料 ①实验分组和模型:0～2d龄新生豚鼠,雌雄不拘,体质量50～80g.实验随机分为3组(每组n=10).建立离体心脏顺灌左心做功模型[4]:取豚鼠心脏,将主动脉断端套于主动脉插管上,行Langendorff逆灌,灌注液为K2H液,心脏复跳.行左房插管,停止逆灌,经左房顺行灌注.停止顺灌,Ⅰ组(低温组)于20℃全心缺血90m in,Ⅱ组(Tho mas组)和Ⅲ组(冷血组)在缺血开始、第30m in和第60m in 时经主动脉分别逆灌10℃ThomasⅡ号液和冷血心停搏液.之后,三组均给予37℃氧合K2H液逆灌,使心脏复跳,尔后再灌60m in.②抗体和cDNA探针RM/1Gs蛋白多克隆抗体和AS/7Gi蛋白多克隆抗体(美国NEN公司);大鼠Gsα和Gi2αc DNA探针(美国NE N公司),长度分别为1737bp和1748bp. 1.2 方法 1.2.1 心功能指标测定 在缺血前和再灌注15, 30,45和60m in时,将左心室测压管连接于MP A2I V 型多导生物信号分析系统(第二军医大学生理学教研室研制),测定各组左室收缩峰压(LVPSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压正负相最大变化速率(±d p/d tm ax)、心输出量(CO).1.2.2 W estern印迹分析 将冷冻心肌组织置于4℃预冷的含1mol/L MgCl2,25mol/L三(羟甲基)氨甲烷/盐酸(Tris/HCl),0.4mol/L甲苯磺酰氟(P MASF,Sig ma公司)和1mol/L二硫苏糖醇(DTT)的心肌匀浆液中,匀浆制备膜蛋白,-70℃贮存备用. 120g/L十二烷基硫酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳(S DS2 P AGE),每一样品上样75μg,以电转移的方式转移至硝酸纤维素膜上.将膜封闭后,与抗Gs(按滴度1∶1000)和抗Gi(按滴度1∶1000)反应1h,洗去抗体后将膜置于1∶500的碱性磷酸酶标记的I gG中反应1 h,Tris缓冲盐溶液(T BS)充分洗涤,以NBT(氮蓝四唑) +BC I P(52溴242氯232吲哚磷酸)显色,最后摄片记录.1.2.3 Northern印迹分析 以Triz ol液提取心肌总RNA,用紫外分光光度法测定并计算其浓度和纯度(A260nm/A280nm>1.80),将RNA样品上样至10g/L 变性琼脂糖胶上电泳,毛吸法转移至硝酸纤维素膜上,80℃真空烘干.硝酸纤维素膜50℃杂交过夜后,在预杂交液中加入50mg/L鲑鱼精DNA和32P标记的c DNA探针(2×108cpm/μg),50℃杂交过夜. -70℃放射自显影,最后对X胶片进行扫描分析.β2actin c DNA作为内参照.1.2.4 mRNA和蛋白质含量的确定 W estern印迹分析的结果用测得的目标带的吸光度×面积表示,尔后按占缺血前的百分比进行统计.Northern印迹分析则将所测值用内参照β2actin校正后再按占缺血前的百分比进行统计分析.统计学处理:各组以缺血前值为100%,并计算缺血后和再灌注后实测值分别与缺血前值的百分率.数值以x±s表示,用重复测量方差分析进行统计处理,P<0.05为有统计学意义.2 结果2.1 心脏功能的变化 再灌注时,Ⅰ组和Ⅱ组的LVPSP,+d p/d t m ax,-d p/d t m ax和CO在各时相点均显著降低,而LVEDP显著升高(P<0.01);Ⅲ组在再灌注60m in时各心功能指标均恢复至与缺血前相当的水平(P>0.05);Ⅰ组和Ⅱ组的LVPSP, +d p/d t m ax,-d p/d t m ax和CO在各时相点均显著低于,而LVE DP显著高于Ⅲ组(P<0.01,Tab1).2.2 心肌Gsα蛋白和G iα蛋白含量的变化 三组缺血前的Gsα和Giα蛋白水平无明显差异(P> 0.05).缺血后,Ⅰ组和Ⅱ组Gsα蛋白水平显著低于缺血前(P<0.01),Giα蛋白水平显著高于缺血前和Ⅲ组(P<0.01),两组之间尚无明显差异(P> 0.05);再灌注后,Ⅲ组的Gsα和Giα蛋白水平与缺血前无明显差异(P>0.05),且分别明显高于和低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.01,Tab2).Gsα蛋白呈现出Mr 45×103和52×103两条蛋白带,Giα蛋白呈现出一M r41×103蛋白带(Fig1).2.3 心肌Gsαm RNA和G i2αm RNA水平的变化 三组缺血前的GsαmRNA和Gi2αmRNA水平无明显差异(P>0.05).缺血后,Ⅰ组和Ⅱ组的GsαmRNA和Gi2αmRNA水平明显低于和高于缺血前和Ⅲ组(P<0.01).再灌注后,Ⅲ组GsαmRNA和Gi2αmRNA水平与缺血前无明显差异(P>0.05),且分别明显高于和低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.01,Fig2,Tab3).3 讨论心肌缺血再灌注损伤及其保护一直受到重视[5,6].G蛋白作为细胞信号转导过程中的“电话交换机(s witchboard)”[4],在许多心肌病理过程中发挥作用[5].未成熟心肌缺血再灌注时G蛋白的变化鲜见研究报道[6].本组研究结果显示,Ⅰ组心肌缺血后的Gsα蛋白水平明显降低,再灌注后Gsα蛋白量虽有所恢复,仍明显低于缺血前.GsαmRNA的表达与Gsα蛋白含量的变化平行.缺血后Gi2αmRNA水平升高,再灌注后虽有所下降,仍明显高于缺血前,并由此引起Giα蛋白量在缺血后和再灌注后的升高.由此推测,Gs 和Gi 的平衡遭受破坏是未成熟心肌缺血再灌注损伤发生的机制之一.表1 新生豚鼠心脏功能缺血前和再灌注时的变化Tab 1 Changes of cardiac functi ons bef ore ischem ia and during reperfusi on in hypoxic newborn guinea 2p ig(n =10,x ±s )I ndex Gr oupBef ore ische m ia During reperfusi on (%)15m in 30m in 45m in 60m in LVPSP Ⅰ 5.2±0.536.2±3.0bd 40.3±4.5bd 43.0±4.1bd 48.3±4.3bd (kPa )Ⅱ 5.1±0.434.4±2.8bd 41.9±3.9bd 44.6±3.3bd 47.3±4.1bd Ⅲ5.4±0.364.3±5.2a 74.2±4.9a 81.9±6.391.5±6.3LVEDP Ⅰ0.17±0.06198.3±7.8bc 195.5±7.5bd 194.3±7.4bd 193.2±7.3bd (kPa )Ⅱ0.15±0.03203.8±8.0bc 197.6±7.5bd 194.4±7.5bd 192.9±7.3bd Ⅲ0.14±0.04164.3±4.8a 134.9±4.3111.7±3.9106.4±3.3+d p /d t max Ⅰ108.6±8.536.3±2.9bd 40.0±3.2bd 45.3±3.5bd 48.8±3.7bd (kPa /s )Ⅱ105.8±8.535.2±2.6bd 38.8±2.5bd 45.7±3.2bd 49.3±3.3bd Ⅲ106.4±8.465.4±4.1a 73.8±4.6a 80.5±5.090.2±5.52d p /d t maxⅠ70.2±5.030.2±2.3bd 32.4±2.4bd 38.7±3.1bd 42.8±3.2bd (kPa /s )Ⅱ71.3±5.031.9±2.2bd 34.3±2.9bd 37.5±3.0bd 41.7±3.0bd Ⅲ70.8±4.862.6±4.7a 75.4±5.0a 85.2±5.791.4±5.9CO Ⅰ9.5±1.031.2±0.7bd 34.8±0.9bd 42.9±1.2bd 46.2±1.5bd (mL /m in )Ⅱ8.9±0.930.5±0.7bd 32.5±1.1bd 39.9±1.0bd 44.2±1.6bd Ⅲ9.4±0.975.1±1.4a80.9±1.785.4±1.891.2±2.1aP <0.05,bP <0.01vs before ische m ia;cP <0.05,dP <0.01vs gr oup Ⅲ.Gr oup Ⅰ:Gl obal ische m ia al one f or 90m in;Gr oupⅡ:A rrested by St .Thomas Hos p ital cardi op legic s oluti on Ⅱ;Gr oup Ⅲ:A rrested by cold bl ood cardi op legia.表2 新生豚鼠心肌Gsα蛋白和Gi α蛋白的变化Tab 2 Changes of ne wborn guinea2p ig myocardial level of Gsαand Gi α(n =10,x ±s )Gr oupGsαBef ore ische m ia After ischem ia /%After reperfusi on /%GiαBef ore ische m ia After ische m ia /%After reperfusi on /%Ⅰ0.58±0.0337.46±3.11bd 40.27±3.35bd 1.52±0.05198.14±7.53bd 175.38±6.98bd Ⅱ0.57±0.0236.62±3.08bd 39.47±3.52bd 1.50±0.03201.32±7.85bd 181.44±7.15bd Ⅲ0.61±0.0184.35±4.48a105.16±5.621.53±0.06127.37±4.80a105.26±3.71aP <0.05,bP <0.01vs before ische m ia;cP <0.05,dP <0.01vs gr oup Ⅲ.Gr oup Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ:Sa me as in Tab 1.Gr oup Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ:Sa me as in Tab 1.Fig 1 W estern bl otting analysis of Gsαand Gi αin ne wborn guinea 2p ig heart图1 新生豚鼠心肌Gsα和Gi α的W estern 印迹杂交Gr oup Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ:Sa me as in Tab 1.Fig 2 Northern bl otting analysis of Gsαand Gi2αin newborn guinea 2p ig heart图2 新生豚鼠心肌Gsα和Gi2α的Northern 印迹杂交表3 新生豚鼠心肌GsαmRNA 和Gi2αmRNA 的变化Tab 3 Changes of ne wborn guinea 2p ig myocardial levels of GsαmRNA and Gi2αmRNA (n =10,x ±s )Gr oupGsαmRNA Bef ore ische m ia After ische m ia /%After reperfusi on /%Gi2αmRNA Before ischem ia After ische m ia /%After reperfusi on /%Ⅰ0.71±0.0138.64±3.24bd 41.38±3.46bd 0.39±0.02215.36±8.17bd 180.22±6.85bd Ⅱ0.69±0.0135.72±3.28bd 40.13±3.81bd 0.41±0.03210.29±7.74bd 176.15±7.30bd Ⅲ0.72±0.0286.53±4.72a106.27±6.380.38±0.01124.15±3.83a102.19±3.24aP <0.05,bP <0.01vs before ische m ia;cP <0.05,dP <0.01vs gr oup Ⅲ.Gr oup Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ:Sa me as in Tab 1. Thomas Ⅱ号液对未成熟心肌缺血再灌注损伤的作用尚有争议[7],冷血心停搏液对成熟和未成熟心肌均具良好保护作用[8].本结果提示,Ⅱ组缺血再灌注后的GsαmRNA 水平和Gs α蛋白含量明显降低,而Gi2αmRNA 水平和Gi α蛋白含量显著增加.Ⅲ组缺血后GsαmRNA 和Gs α以及Gi2αmRNA 和Gi α蛋白水平虽有变化,但在再灌注后恢复至与缺血前相当的水平.可见,Thomas Ⅱ液对未成熟心肌缺血再灌注无有效保护可能是由于该液失于对未成熟豚鼠心肌细胞G 蛋白的保护,冷血心停搏液对未成熟豚鼠心肌的保护作用与其对G 蛋白的保护有着密切的关系.这从另一个角度说明了Thomas Ⅱ液和冷血心停搏液的不同心肌保护作用的可能机制.【参考文献】[1]Neer EJ.Heter otri m eric G p r otein:O rganizers of trans me mbrane sig 2nals [J ].Cell ,1995;80(2):249-257.[2]Booz G W ,Day JN,Baker K M.I nter p lay bet w een the cardiac reninangi otensin system and JAK 2ST AT signaling:Role in cardiachypertr o 2phy,ische m ia /reperfusi on dysfuncti on,and heart failure [J ].J M ol Cell Cardiol ,2002;34(11):1443-1453.[3]Boras o A,Ceconi C,Cargnoni A,et al .Beta 2adrenergic recep t orsand intracellular signalling pathway in stunned and non 2ische m ic re 2gi ons of p ig myocardium [J ].B asic Res Cadiol ,2001(4);96:388-394.[4]钟前进,刘欲团,曹新来,等.新生豚鼠离体心脏顺灌左心做功模型的建立[J ].中国病理生理杂志,1999;15(2):191-192.Zhong QJ,L iu YT,Cao XL,et al .Establishment of model of is ola 2ted perfused left 2side working heart fr om ne wborn guinea 2p ig [J ].Chin J Pathophysiol ,1999;15(2):191-192.[5]马兰香,贾国良,张 清,等.高、低剂量极化液对缺血/再灌注心肌保护作用的对比研究[J ].第四军医大学学报,2003;24(22):2087-2090.Ma LX,J ia G L,Zhang Q,et al .Comparative study on myocardial p r otecti on by high dose GI K and l ow dose GI K during myocardial is 2chem ia and reperfusi on [J ].J Fourth M ilM ed U niv ,2003;24(22):2087-2090.[6]赵建洪,程彦斌,张正义,等.吗啡对大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其对心肌细胞凋亡的影响[J ].第四军医大学学报,2004;25(16):1460-1463.Zhao JH,Chen Y B,Zhang ZY,et al .Pr otective effects of mor phine on acute myocardial ische m ia 2reperfusi on injury in rat and its influ 2ence on apop t osis of cardi omyocytes [J ].J Fourth M il M ed U niv ,2004;25(16):1460-1463.[7]W ang J,Zhou X,Zhao Y,et al .Myocardial p r otecti on of i m maturerabbits:polarizing versus depolarizing [J ].J Surg Res ,2003;111(1):1-7.[8]Louagie Y A,Ja mart J,Gonzalez M,et al .Continuous cold bl oodcardi op legia i m p r oves myocardial p r otecti on:A p r os pective random 2ized study [J ].Ann Thorac Surg ,2004;77(2):664-671.编辑 何扬举・经验交流・ 文章编号:100022790(2005)2021854201培菲康加必奇治疗婴幼儿轮状病毒性肠炎80例孟凡威1,雷晓天2,张旭亚1 (1河南大学第一附属医院儿科,河南开封475000,2开封市中心血站,河南开封475000)收稿日期:2005204220; 修回日期:2005205222作者简介:孟凡威(19762),男(汉族),河南省开封市人.学士,住院医师.Tel .(0378)5661814【关键词】轮状病毒性肠炎;婴幼儿;治疗;培菲康【中图号】R72 【文献标识码】B1 临床资料 2004209/12确诊婴幼儿轮状病毒性肠炎患儿80例,急性起病,伴发热、呕吐、腹泻,大便呈黄白色水样或蛋花汤样,常规检查可见脂肪滴及少量白细胞,细菌培养呈阴性,病毒检测轮状病毒呈阳性.48h 内分为2组.培菲康加必奇治疗组(治疗组)48(男26,女22)例,年龄<1～2(平均1.4)岁.常规治疗组(对照组)32(男20,女12)例,年龄<1～2(平均1.3)岁.对照组给予利巴韦林(病毒唑)10～15mg/(kg ・d )静滴,轻度脱水患儿给予口服补液盐,中、重度脱水者根据患儿适当禁食4～6h,予以补液纠正水、电解质紊乱.治疗组在对照组治疗的基础上加培菲康210mg 和必奇1.5～3g 倒入20～50mL 温水中混匀口服,每天2次.两组均治疗5d .治疗组显效(治疗48h 内大便次数及性状恢复正常,全身症状消失)38例(79.2%),有效(治疗48h 内大便次数及性状明显好转,全身症状明显改善)9例(18.7%),无效(治疗48h 内大便次数及性状无好转甚至恶化)1例(2.1%),总有效率97.9%.对照组显效12例(37.5%),有效14例(43.8%),无效6例(18.7%),总有效率81.3%.两组显效率卡方检验P <0.01(χ2=15.1),差异有高度显著性.治疗组显效率高于对照组.2 讨论 小儿腹泻时肠道内微生态系统的菌群严重紊乱,厌氧菌数量显著减少,破坏肠粘膜屏障,培菲康可直接补充人体正常菌群,配合必奇保护肠道粘膜,使其在整个肠道黏膜表面形成生物学屏障达到治疗腹泻的目的[1].【参考文献】[1]狄军波,黄爱芬,石海矾.培菲康胶囊治疗小儿腹泻病疗效观察[J ].浙江省临床医学,2004;6(1):47-47.编辑 潘伯荣。
治疗功能性胃肠道疾病药物的分类综述
治疗功能性胃肠道疾病的药物分类综述胃肠道的不适症状，多数是所谓“功能性胃肠病”。
胃肠道常见的不适症状，如嗳气、反酸、上腹部烧灼感、隐痛、腹胀等等，如果经过常规检查不能发现能够解释临床表现异常的原因，就被称为“功能性胃肠病”。
这类疾病的核心发病机制是胃肠运动紊乱和胃肠道对不良刺激的感受反应过度敏感。
因此，也被称为胃肠动力紊乱性疾病。
针对这些发病机制，通常采用调节胃肠运动的药物以及减少胃肠道刺激因素的药物。
目前，用于调节胃肠运动的药物主要有促胃肠运动药物和胃肠道解痉药。
胃肠解痉药胃肠解痉药物（抑制胃肠动力药物）是一类能松弛胃肠道平滑肌、降低蠕动幅度和频率、缓解阵发性腹痛或绞痛的药物，通过减弱胃肠道的蠕动功能，松弛食管及胃肠道括约肌，而减慢胃的排空和小肠转运，减弱胆囊收缩和降低胆囊压力，减弱结肠的蠕动，减慢结肠内容物的转运等。
胃肠解痉药物的分类胃肠解痉药物包括抗胆碱能药物（阿托品、东良菪碱、山莨菪碱、贝那替秦、哌吡氮平等）、选择性肠道平滑肌钙离子拮抗剂（匹维溴铵、奥替溴铵、西托溴铵、阿尔维林等）、离子通道调节剂（曲美布汀）、磷酸二酯酶抑制剂（罂粟碱、屈他维林等）等。
胃肠动力药胃肠动力药是一类调节胃肠道平滑肌动力的药物，促进胃肠道运动药物/促胃肠道动力药根据药理作用和作用靶点的不同，可分为多巴胺受体拮抗剂、5-羟色胺（5-HT4）受体激动剂、阿片受体激动剂、阿片受体拮抗剂、胃动素受体激动剂、胆囊收缩素（CCK）受体拮抗剂。
神经递质和受体神经受体：指突触后膜上的跨膜蛋白，膜外段朝向突触间隙，与特异性的递质结合后，发生空间构象改变，行使功能，使信息从突触前神经元传递到突触后细胞。
神经递质：神经末梢所释放的特殊化学物质，该物质能跨过突触间隙作用于神经元或效应细胞上的特异性受体，从而完成信息传递功能的信使物质。
神经递质可分为经典神经递质、神经肽类和其他类。
经典神经递质包括氨基酸类和乙酰胆碱单胺类。
氨基酸类又包括谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸及甘氨酸类。
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6. Effects of choline on ischemic arrhythmias and the potential role of M3-mAChRs.
7. Effect of choline on infarct size and the potential role of M3-mAChRs.
A confocal image showing the expression of connexin 43 (red) and M3-mAChR in a isolated myocyte.
2. Connexin 43 is coimmunoprecipitated with M2/M3-R
3. The effects of ischemia on the expression of M-R and connexin 43.
❖ Choline improves cardiac function and reduces ischemic myocardial injuries via stimulating the cardiac M3-mAChRs.
1996;84(3):381-8.)
4. Vagal nerve stimulation exerts antiarrhythmogenic effects accompanied by prevention of the loss of Cx43 during acute MI.(Circulation. 2005 ;112(2):164-70.)
4. The effect of choline pretreatment on the association between M3/M2 mAChR and connexin 43.
5. Effects of Choline on Hemodynamic Parameters during Coronary Artery Occlusion.
Introduction
➢ The association between Connexin43 and M3-mAChR in ventricular myocytes.
➢ The role of M3-mAChR in cytoprotection of myocardial infarction.
8. Effect of choline on cardiomyocytes apoptosis and the potential role of M3-mAChRs.
Conclusions
❖ Connexin 43 interacts with M2/M3-mAChR
❖ Ischemia specificalleen M3-mAChR and connexin 43.
2. The M3 Receptor-mediated K+ Current (IKM3), a Gq Protein-coupled K+ Channel. (J Biol Chem.2004, 279,
21774-8)
3. Connexin 43(Cx43)-gap junction channels. (Cell
Results
1.Expression of M3-R and Connexin 43 in the heart.
A confocal image showing the expression of connexin 43 in myocardium under control conditions and after ischemia.
The effect of ischemia on the expression of connexin 43 in the plasma membrane.
The effect of ischemia on the association between M2 or M3mAChR and connexin 43.
缺血对心肌中连结蛋白43和乙酰胆碱M受体亚型M3 (M3-mAChR)结合的影 响
Introduction
1. Multiple subtypes of muscarinic acetylcholine receptors expressed in myocardium, including M1,M2,M3,M5-R. (Mol Pharmacol. 2001 ;59:1029-36.)