气相色谱定量分析原理

气相色谱定量分析原理

气相色谱法是一种分离分析方法。操作时使用气相色谱仪，被分析样品（气体或液体汽化后的蒸汽）在流速保持一定的惰性气体（成为载气或流动相）的带动下进入填充有固定相的色谱柱，在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分，并以一定的先后次序从色谱柱流出，进入检测器，转变成电信号，再经放大后，由记录器记录下来，在记录纸上得到一组曲线图（称为色谱图），根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量。

气相色谱的定量检测方法一般有归一化法、内标法和外标三种方法，其各有优缺点。归一化法是将有机样品中所有组分的含量之和定位100%，计算出其中某一组分含量的百分数，其方便简单，样品进样量和流动相载气流速等对计算结果影响不大，但要求每个组分色谱峰面积能准确地计算，因此仅适合组分少的有机样品。内标法是向有机样品中加入标准已知含量的纯有机物（可以和样品中组分相同，也可以不同）进行气相色谱测定，然后利用欲测组分和内标物的色谱峰面积和定量校正因子进行定量分析，其避免了归一化方法的缺点，但需要标准标准称取有机样品和内标物的重量，而且选用的内标物的选取要求较高。

外标法是在进样量、色谱仪器及操作等分析条件严格固定不变的前提下，先使用不同含量的组分纯物质等量进样进行色谱分析，求出纯物质含量和色谱峰面积的关系，并绘出相应的定量校正曲线或给出线性方程式。然后将有机样品在相同条件下进行色谱分析，并根据定量校正曲线或线性方程式，计算出所需组分的定量分析结果。外标法比较简便，尤其适合相同样品的大批量测试，这对工业化生产或环境中某种有机物的检测或控制非常有效。但这一方法对液体或挥发性不好的有机物组分定量分析时，往往误差较大。

高效液相色谱定量分析原理

从分析原理上讲，高效液相色谱法和经典液相色谱（层析）没有本质的差别，但由于它采用了新型高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，因而在操作和条件等方面已完全不同。高效液相色谱法特点：⑴由于新型高效微粒固定相填料的使用，分离能力高；⑵由于液相色谱柱具有高效，并且流动相可以控制和改善分离过程的选择性，选择性高；⑶检测灵敏度高；⑷由于高压输液泵的使用，相对经典液相色谱，

分析速度快。另外，高效液相色谱适用于分析高沸点不易挥发、受热不稳定、分子量大和不同极性的有机物，尤其是生物活性物质的天然产物和高分子化合物等。其缺点有：⑴使用多种溶剂作为流动相，分析成本高于气相色谱法，且易引起环境污染，程序升温操作复杂；⑵缺少如气相色谱法中使用的通用性检测器；⑶不适用于在高压下易分解和变性的具有生物活性的生化样品。

高效液相色谱的定性和定量分析原理和方法与气相色谱基本相同。