附睾小体及其相关蛋白研究进展

合集下载

细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸及附睾的表达

细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸及附睾的表达

华中科技大学硕士学位论文细胞龄相关分子在不同月龄大鼠睾丸和附睾的表达硕士研究生段永刚导师刘子龙副教授华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉,湖北430030前 言无论是人还是动物,体细胞和生殖细胞的衰老组织/细胞特征性改变和时间虽存在有差异,但作为衰老本身确有其类似规律可循。

就现在研究而言,睾丸和附睾衰老的研究远不及脑衰老研究进展迅速。

前期工作显示,老龄大鼠睾丸间质细胞tau蛋白表达上调,而微管相关蛋白(microtubule associated proteins ,MAPs)表达下调[ 1]。

证明睾丸的老化表现为tau蛋白这种老化物质在微管中发生堆积,由于微管相关蛋白的减少,而影响睾丸间质细胞的生理效应的发挥。

老人前列腺癌去势睾丸组织中雄激素受体(androgen receptor, AR)和热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, HSP90α)表达的不一致性[2],虽然一方面可以部分地解释由于HSP90α表达下降而导致AR表达发生遍在化,进而影响雄激素的生物学功能的发挥。

然而,在衰老睾丸,动脉硬化、组织缺血和间质细胞变性等老龄化征象,何以会引起HSP90α表达上调?附睾在衰老过程中,各段均显示出特异性的形态结构改变[3];同时,衰老的大鼠附睾组织细胞核中老化相关基因表达上调[4]。

tau蛋白在大鼠丘脑和海马的表达呈明显地增龄性规律,且Gas7的表达水平与tau蛋白表达呈正相关(未发表资料)。

由此看来,机体的衰老机制远不是那么清晰。

故此,有必要藉助能明确反映细胞龄分子在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中特异性表达进行深入研究,力图能部分地解释这两个器官从成熟到衰老某些机制问题,进而欲求为男性衰老的发生机制提供理论依据。

本工作选取c-Kit、HIWI、波形蛋白和生长停滞特异性蛋白7(growth arrest-specific protein 7, Gas7)等细胞龄相关分子,检查它们在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中表达的差异性。

附睾特异蛋白与精子功能的研究进展

附睾特异蛋白与精子功能的研究进展

哺 乳 动 物 睾 丸 中 产 生 的精 子 在 离 开 睾 丸 时 尚 不具备 运动 和使 卵 子受 精 的能力 。其 在 附睾运行 过 程 中经一 系列 的修饰 , 附睾 精 子 成 熟 , 具 备 完 即 才
的相互 作用 而 不断 成熟 , 表现 为获 得 运 动和 受精 能
力, 而精 子 质 膜 的变 化 是精 子 获得 这 些新 功 能 的直
光 分析 显 示 ,大量 的 R ae N s9蛋 白还 集 中表达 于精
泌, 并参与附睾管腔液态微环境修 饰过程 密切 相关 。
参 与精子成 熟 的附睾 特异蛋 白
精 子在 附睾 运行 过 程 中 , 过 与 附 睾液 微 环境 通
作者单位 :0 0 1北京, 10 8 国家人 口计生委科学技术研究所[ 韩丽 嫒( 北京协和 医学院研究生 院在读 )于和鸣】 ,
【 yw rs S e a za E ii mi; p r a rtn E ii ma sce r r e s Ke o d 】 p r t o ; pdd s Sem m t ai ; pdd lert ypo i m o y u o y o tn
( n Re rdHel / a Pa 2 1 3 5 — 7) Jlt p o at F m ln,01 , 0:4 5 h
t v l g tru h te e iiy s tb s o rtis ae rmo e wa ,s me ae bn ig o ,a d s me r ei h o g h pdd mi u e ,s me p oen r e v d a y o r idn n n o a n
系列 不 同 的生 物 功能 , R A 的降 解 、 抗 病 原 物 如 N 抵 质 入侵 和参 与 炎 症反 应 等 。大量 的研 究 表 明 , 睾 附 内 的 R ae N s9与 R ae N sA超 家 族 中其 他 成 员 的 特 性 并 不 相 同 , 要 表 现 在 : 在 去 势 大 鼠的 实 验 中发 主 ① 现 , 睾 的 R s9表 现为 雄 激 素依 赖 性 , 雄 激 素 附 Nae 受

附睾小体功能蛋白及sRNA研究进展

附睾小体功能蛋白及sRNA研究进展

Hereditas (Beijing) 2018年3月, 40(3): 197―206 收稿日期: 2017-09-15; 修回日期: 2018-01-29基金项目:四川省科技厅应用基础计划(编号:2016JY0167),四川省教育厅重点项目(编号:15ZA0008),四川省青年科技创新研究团队项目(编号:2015TD0012)和农业部现代农业产业技术体系建设专项项目(编号:NYCYTX-009)资助[Supported by the Application Basic Research Plan Project of Sichuan Province (No.2016JY0167), the Key Project of Sichuan Education Department (No.15ZA0008), the Program for Innovative Re-search Team of Sichuan Province (No.2015TD0012) and the Specialized Research Fund of Ministry of Agriculture of China(No.NYCYTX-009)]作者简介: 肖娟,硕士研究生,专业方向:动物遗传育种与繁殖。

E-mail: 751190178@通讯作者:王讯,副教授,硕士生导师,研究方向:动物遗传育种与繁殖。

E-mail: wangxun99@DOI: 10.16288/j.yczz.17-148 网络出版时间: 2018/2/1 13:25:27URI: /kcms/detail/11.1913.R.20180201.1325.003.html综 述附睾小体功能蛋白及sRNA 研究进展肖娟,王讯,罗毅,李晓开,李学伟四川农业大学动物科技学院,动物遗传育种研究所,成都 611130摘要: 精液质量是反映男性生殖健康最基本和最重要的指标。

miR-29a在附睾中的功能与调控机制研究的开题报告

miR-29a在附睾中的功能与调控机制研究的开题报告

miR-29a在附睾中的功能与调控机制研究的开题报告一、研究背景:附睾是雄性生殖系统中的一部分,它具有维持睾丸健康、调节睾丸对精子的生产和质量控制等重要生理和生化功能。

miRNAs是一类短小的非编码RNA分子,它们通过与靶基因的3' UTR区结合,从而在转录调控、细胞增殖、程序性死亡等生命过程中发挥重要作用。

最近,越来越多的证据表明,miRNAs在生殖系统中起着重要的调节作用,为附睾细胞的正常生理和生化功能提供了一个全新的角度。

二、研究目的:针对miR-29a在附睾中的调节作用及其对细胞功能的影响,本研究旨在探究miR-29a的表达模式及调控机制,并分析其在精子生成和生产质量控制中的作用及潜在机制。

三、研究方法:1. 观察miR-29a在附睾中的表达模式。

收集正常小鼠的附睾组织并分离附睾细胞,采用荧光原位杂交和实时荧光定量PCR技术检测miR-29a的表达模式,探究其在附睾中的表达模式。

2. 构建miR-29a过表达和靶向消减模型。

通过合成miR-29a-mimic和及其靶向消减剂(anti-miR-29a),转染到小鼠附睾细胞中,分别观察miR-29a的过表达和靶向消减对细胞增殖、凋亡等机制的影响。

3. 结合生物信息学分析鉴定靶基因。

通过公开数据库和分析软件,筛选出miR-29a的靶基因,并结合实时荧光定量PCR技术验证。

分析miR-29a与靶基因的相互作用,阐明miR-29a的调控机制和作用模式。

四、预期结果:1. miR-29a在小鼠附睾中的表达模式和其与精子生成的关联。

2. miR-29a靶向消减和过表达对附睾细胞生长、凋亡等机制的影响。

3. 发现miR-29a的靶向基因及其与miR-29a的调控关系。

以上三个方面的结果将为我们深入理解miRNAs在生殖系统中的作用提供新的思路和实验依据。

附睾小体及其相关蛋白研究进展

附睾小体及其相关蛋白研究进展
trine
secretion),这与通过局部分泌方式进入附睾腔
的可溶性附睾分泌蛋白不同。附睾小体的形成主要 包括以下几个过程Ⅲ1:①在附睾上皮主细胞顶部形 成细胞质突起;②突起以出芽方式生长,从微绒毛之 间穿出形成小泡,小泡中含有少量内质网,游离核糖 体及附睾小体。核糖体的存在表明新合成的没有信 号肽的蛋白通过这些顶体小泡分泌到管腔;③顶体小 泡与细胞脱离并进入附睾腔,之后破裂,释放出能与 精子结合的附睾小体。 二维凝胶电泳发现,附睾不同区域的附睾小体相 关蛋白具有很大的不同11引。从附睾尾获得的附睾小 体与从射出精子中纯化得到的类似囊泡也有很大的 不同¨“。这表明,附睾小体对存在于射出精子上的 囊泡的种类并未起到重要作用。用0.1%的Triton处 理这些附睾小体并不能分离这些蛋白,表明它们与附 睾小体的结合是非常强的,这可能与膜质囊泡胆固 醇/磷脂比例高有关¨引。目前,研究人员已鉴定了一 些附睾小体相关蛋白,并预测了其在精子成熟中的功
作者单位:264000 ・118・ 山东省烟台市毓璜顶医院中心实验室
一、附睾小体 由附睾上皮细胞局浆分泌的附睾蛋白被认为是 管腔液中的可溶蛋白。这些蛋白的编码序列中含有 信号肽,能指导它们运输到内质网上。但是附睾内腔 液中的一些蛋白如果高速离心的话会发生沉淀。这 些蛋白与直径50—500nm的膜状小囊泡相关‘1…。 Yanagimachi。13]首次在电镜下发现了存在于附睾管腔 液并与仓鼠精子表面相互作用膜状小囊泡。众所周 知,精子在经过附睾管腔时质膜经历了一系列的修 饰,研究人员推测这些囊泡可能参与了精子质膜胆固 醇的运输。这些小囊泡被称为附睾小体(epididymo- somes)。目前附睾小体已在很多物种如仓鼠、牛、小 鼠、大鼠的附睾中发现¨n161。 附睾小体含磷脂(主要为鞘磷脂)非常丰富,并 且胆固醇/磷脂比例很高,Saez。n 3等研究发现比值可 高达2.0¨“。由于附睾小体相关蛋白缺乏信号肽,它 们不能被运输到内质网并由内质网上的核糖体合成, 因此这些蛋白通过附睾小体以顶浆方式分泌(apo-

小鼠生后不同发育阶段附睾组织中Crb3的表达

小鼠生后不同发育阶段附睾组织中Crb3的表达
tc n l2 1 , t l I 6 2 7 9p g s d i 1 . 1 5 2 1 / e h o , 0 1 Ari e D 8 8 1 , a e , o :0 1 6 / 0 1 c
8 21 . 68 7
[0 Ro H , F n S,Li J, ta. Th u s 一 l1 o — 13 h M a u C e 1 eCr mb 3 Pas c r n

用 _ ” 。在 对 斑 马 鱼 O l 及 相 关 C b基 因 和 M D 】 ] ie T r —
C 细胞 培养 L。 K l 研 究 下 发 现 敲 除 C b r3将 导 致 多 核表型、 纺锤 体 、 纤毛 及 中心体 异常 , 明 C b 说 r 3对 细
胞 游离 面 的纤毛形 成也 起着 重要 作用 。 目前 , 关 哺乳 动 物 附睾 的形 态 学 研 究 已有 资 有
种 C b基 因 , 在 人 和 小 鼠 中 已确 定 存 在 C b 、 r 而 r l
Cb r 2和 C b r 33个基 因L 。C b 7 ] r l主要 在人 和 小 鼠 的 视 网膜 及大 脑 的部分 区域 表 达 ; r 2在 肾 和视 网膜 Cb
分别选 取 4周龄 、 8周龄 、2周龄 、6周龄小 鼠用 于试 1 1 验 。每周 龄 4只 , 3周 至 5周 小 鼠的 体 重 在 1 ~ 5g 2 , 周至 1 周 小 鼠体重 在 2 ~3 。 0g 8 6 5g 5g
( 北 农 林 科 技 大 学动 物 医 学 院 , 西 杨 凌 7 2 0 ) 西 陕 1 10
摘 要 : 用 HE染 色法和免 疫 荧光组 织化 学技 术分 别对 小鼠 生后 不 同发 育 阶段 附睾 组 织结 构及 C b 应 r3

睾丸sertoli细胞免疫抑制及营养作用的研究进展

睾丸sertoli细胞免疫抑制及营养作用的研究进展

多 年 以来 ,s c作为 生 精 细胞 的支 架 , 生 精 细胞 提 为
供 免疫屏 障及 营养 支持 的作用 已经 得到人 们 的认 可 ,
随 着免疫 学及 分子 生物 学的 不断深入 研究 , 种免 疫 各 特殊 组织 , 睾丸 、 如 眼前 房 、 、 脑 胎盘 滋养层 等 , 受到 人 们 的广泛 关 注 , 特别 是 近代人 们通过 对 凋亡机 制 和各 种 信号 传导 通路 的研 究 , 深 了对 s 加 c细胞 特殊 免 疫
严 重 的脊髓 后 , 能够 明显 的减 轻 炎 症 反 应 , 移 植 3 在 天后 能 大 大 提 高 h T一 N 3的水 平 , 理 证 实 s 病 C在 植
物产 生免 疫 耐受 , 长 胰 岛 细 胞 的存 活 时 间 , 时 发 延 同
现 s c在 1×1 ml 为 协 同 移 植 物 时有 最 佳 的效 0/ 作
结果 一致 。但 是 s c应 用 于临 床 治疗 脑 部 疾 病 , 然 仍
有许 多 问题有 待深 入研 究 , 比如 细胞 的用 量及 细胞 在 何处 注入 , 细胞 治疗 的辅助 处理 等 。 及
二 、 C 的 营 养 作 用 及 其 临 床 应 用 S
1S . C的营养 支持 作用 : c在 与 细 胞共 同移 植 培 s 养 时 , 了具有 免 疫 豁 免作 用 , 可 以在 细 胞 培 养 中 除 还
述。

疫抑 制 物质有关 , 可能生精 细胞 本身 在凋亡 的过 程 中 就会 生 成某种促 进其 凋亡 进程 的某种 物质 , 以维 持 睾 丸的特 殊 免 疫 抑 制 状 态 , 然 这 还 有 待 进 一 步 研 当
究 。( ) 3 转化 生长 因子 一B( G T F—p 和 F s ) aL的协 同作用 途 径 : h n等 通 过 实 验 提 出 了 S Ce C分 泌 的 T F—B具 有 抑制 p 8 P 丝裂 原活 化蛋 白激酶 ) G 3 MA K( 活化 的功 能 , F s 而 aL诱 导 的 炎 症 反 应 的 发 生 具 有 p8 P 3 MA K依赖 性 , 因此 , 当细胞 同时 表 达 T F—B和 G

睾丸sertoli细胞免疫抑制及营养作用的研究进展

睾丸sertoli细胞免疫抑制及营养作用的研究进展

・综述与发展・睾丸sertoli细胞免疫抑制及营养作用的研究进展辛民志宋纯段秀庆睾丸支持细胞(sertolicell,sc)的结构首先由意大利组织学家Enricolsertoli在1865年进行了描述,多年以来,sc作为生精细胞的支架,为生精细胞提供免疫屏障及营养支持的作用已经得到人们的认可,随着免疫学及分子生物学的不断深入研究,各种免疫特殊组织,如睾丸、眼前房、脑、胎盘滋养层等,受到人们的广泛关注,特别是近代人们通过对凋亡机制和各种信号传导通路的研究,加深了对sc细胞特殊免疫状态及营养作用在分子水平的认识,最近研究发现sc免疫豁免的功能和营养作用可应用与某些细胞的培养与移植,sC可以延长某些移植物的存活时间及功能状态,同时Sc还可以和某些细胞在体外共培养,改善细胞的生存状态和功能。

因此,充分认识睾丸SC免疫机制及营养支持作用,对未来的细胞培养、免疫性疾病的诊断和治疗及器官组织移植方面有重要的指导作用,本文对睾丸sc的特殊免疫及营养支持作用在细胞培养及移植领域的应用进展做一综述。

一、SC免疫作用及临床应用1.SC免疫作用:(1)通过Fas/Fasl途径杀伤淋巴细胞:SC表达FasL,T、B淋巴细胞表达Fas,通过SC的Fasl与淋巴细胞的Fas结合,杀死淋巴细胞,从而使特异性免疫反应不能发生。

Northerblotting法证实成年鼠的睾丸可以表达FasL,免疫组化证实FasL主要由支持细胞表达,RT—PcR和westemblotting证明在人体中的睾丸中表达相似…。

孙晓青等在研究表达FasL的睾丸支持细胞对肾细胞移植中的保护作用时发现单纯的肾细胞移植均无存活,而和sC共同移植物存活率为87.5%,以FasL抗体处理过的sc与肾细胞共同移植,存活率仅有30%,这说明在同种异体移植中,sc通过Fas/Fasl途径杀伤淋巴细胞,保护移植的肾细胞,其他的一些实验也证实sc对淋巴作者单位:15000l哈尔滨医科大学附属第一医院甲状腺乳腺外科(辛民志、段秀庆);哈尔滨医科大学附属第一医院卫生部细胞移植重点实验室(宋纯)通讯作者:段秀庆,电子信箱:dc_95@yahoo.com.cn・196・细胞有杀伤作用¨“1。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
管腔 液 中的可溶 蛋 白。这 些 蛋 白 的编码 序 分泌/ 顶浆分 泌 的方 式
由附睾 上皮细胞 分 泌 出来 。 对 附睾小 体 相 关蛋 白及 与精子相 互作用 的研究 , 不但有助 于人 们进一 步 了解
信号肽 , 能指导 它们 运输到 内质 网上 。但 是 附睾 内腔
高达 2 O 。由于附睾小 体相关 蛋 白缺 乏信号肽 , . 它 们不能 被运输 到 内质 网并 由内质 网上 的核糖 体合 成 , 因此这 些 蛋 白通 过 附 睾 小 体 以顶 浆 方 式 分 泌 ( p — ao c n ert n , 与通 过 局 部分 泌 方 式进 入 附 睾 腔 r esc i ) 这 i eo 的可溶 性附睾 分 泌蛋 白不 同。附 睾小 体 的形 成 主要 包 括 以下 几个 过 程 ¨ : 在 附睾 上 皮 主细 胞 顶 部形 1 ① 成细胞 质 突起 ; 突起 以 出芽方 式 生 长 , 微绒 毛之 ② 从 间穿 出形成小 泡 , 泡 中含 有少 量 内质 网 , 小 游离 核 糖
附 睾蛋 白能 够 结 合 到 精 子 细 胞 的胞 内亚 区 。这 些结 果 显示 , 睾分 泌 蛋 白通 过 特殊 的机 制 转 移 到 附 精子 上 …] 。
作 者 单 位 :6 0 0 山 东省 烟 台市 毓 璜顶 医 院 中心 实验 室 24 0

理这 些 附睾小体并 不能分 离这些 蛋 白, 明它们 与 附 表
液 中的一些蛋 白如 果 高 速离 心 的话会 发 生 沉 淀。这 些 蛋 白与 直 径 5 0~5 0 m 的膜 状 小 囊 泡 相 关 。 0n Y n g c i 首 次在 电镜下发现 了存 在于 附睾管 腔 aai h ma
附睾 内精 子成熟 及调 节 附睾 小 体 与精 子 相互 作 用 的
饰, 研究 人员 推测这 些囊泡 可能参 与了精子质 膜胆 固
睾小体 , 睾小体相关 蛋 白及 其与精 子的 相互作用 的 附
研究进 展做一 综述 。
附睾是哺乳 动物重 要 的生殖 器官 , 主要 负责精 子 的转输 、 浓缩 、 贮存 以及成 熟 。研 究显示 , 精子 离开 睾 丸后并 不具有运 动和受 精 的能 力 , 还需要 经历 一系 列 生化改 变以获得 成熟 。这些 改 变主 要 包括 精 子膜
表面磷脂组成 的改 变 , 固醇/ 胆 磷脂 比例 的改变 , 二硫
键及表 面负 电荷 的增 加 , 面抗 原 的重 定 位 , 面蛋 表 表 白的修 饰 、 失 以及 增 加 。精 子 通 过 与 附 睾 上 皮 消 区域性 分泌 的蛋 白质 间相 互 作用 而 成 为功 能完 全 的 配子 , 因此精子 成熟过 程 中黏 附在精子 表 面的蛋 白的 功能 引起广泛 的关 注 。这些 蛋 白通常 被认 为 是 外
精 子结合 的附 睾小体 。 二维凝 胶 电泳 发现 , 附睾不 同 区域 的附睾小体 相
关蛋 白具有 很大 的不 同 。从 附皋尾 获得 的附 睾小 体与从 射 出精 子 中纯 化得 到 的类 似 囊 泡也 有很 大 的 不 同 。这表 明 , 附睾 小 体 对存 在 于 射 出精 子 上 的 囊泡 的种类并 未起到 重要作用 。用 0 1 的 Tin处 .% ro t
分子机制 , 同时又将 为临床 上 因附睾问题 造成 的男性
不 育 的诊 断 与 治 疗 开 辟 新 的 途 径 。 本 文 就 近 年 来 附
液并 与仓 鼠精子 表 面 相互 作用 膜 状小 囊 泡 。众所 周 知 , 子在 经 过 附 睾 管腔 时质 膜 经 历 了一 系 列 的 修 精
衣蛋 白 , 它们通 过静 电力 结 合 在精 子 表 面 , 以通过 可
高离子强度 的溶 液从 精 子 表 面洗 涤 下来 。但 有趣 的 是, 当精子经 历不 同的生 化 处理 的时 候 , 多 附 睾蛋 许
白更 像 是 精 子 膜 蛋 白 。 研 究 表 明 , 些 与 精 子 表 一
体及 附睾小 体 。核 糖 体 的存 在 表 明新 合成 的没 有 信 号肽 的蛋 白通 过这些顶 体小泡 分泌 到管腔 ; 顶体 小 ③
泡与细胞脱 离并 进 入 附睾 腔 , 之后 破 裂 , 释放 出能 与
面相 关 的蛋 白都为 G I P ~锚定蛋 白, 比如 H 5 C 5 , E / D 2 小 鼠 S A f6; 鼠 P 6 P M1s j仓 , 2 h及 牛 P 5 ’ 2 b 。G I P 锚
定蛋 白通 常都 是 通 过 旁 分 泌途 径 分 泌 并 锚定 到 细
胞膜 上 的 。根 据 基本 的分 泌 途 径 , 胞 外 来 蛋 白不 细 可能 成为 细胞 表 面 的 G I 定 蛋 白。 因 此 , 睾 起 P锚 附 源的通 过 G I 定 到精 子 膜 表 面 的蛋 白可 能通 过 P 锚 特 殊 的方式 分 泌 。此 外 , 最新 的研 究 显 示 分 泌 的

综 述 与近 展 ・
附睾 小 体及 其相 关 蛋 白研 究进展
李 宁 李 建 远
附睾小体及 相 关蛋 白与 通过 附 睾 管 的精 子相 互 作用 , 使精子 发生 一 系列 生化 改 变 , 而获 得 运动 和 从


附 皋 小 体
由附 睾 上皮 细胞 局浆 分 泌 的附睾 蛋 白被认 为是
醇 的运输 。这 些小 囊 泡 被称 为 附 睾小 体 ( pd y o e ii m — d
sm s 。 目前 附睾 小体 已在 很 多物 种 如仓 鼠、 、 o e) 牛 小 鼠 、 鼠的 附睾 中发 现 大 。
附睾 小体含 磷 脂 ( 要 为鞘 磷 脂 ) 常丰 富 , 主 非 并 且 胆 固醇/磷脂 比例很 高 ,az 等研 究发 现 比值 可 S e¨
相关文档
最新文档